西南林大現(xiàn)代生化儀器分析課件06高效液相色譜分析法第5節(jié) 超臨界流體色譜

1、*第六章 液相色譜分析法一、超臨界流體色譜的特點(diǎn)與原理feature and principle of SFC二、超臨界流體色譜儀的結(jié)構(gòu)流程structure and general process of SFC 三、超臨界流體色譜的應(yīng)用application of SFC第五節(jié) 超臨界色譜high performance liquid chromatographsupercritical fluid chromatograph, SFC*一、超臨界流體色譜的特點(diǎn)與原理principle and character of supercritical fluid chromatography1.

2、概述 超臨界流體：在高于臨界壓力與臨界溫度時(shí)，物質(zhì)的一種狀態(tài)。性質(zhì)介于液體和氣體之間。 超臨界流體色譜(SFC)，80年代快速發(fā)展，具有液相、氣相色譜不具有的優(yōu)點(diǎn):（1）可處理高沸點(diǎn)、不揮發(fā)試樣；（2）比LC有更高的柱效和分離效率。*2. 超臨界流體性質(zhì)（1）性質(zhì)介于液體和氣體之間; 具有氣體的低黏度、液體的高密度，擴(kuò)散系數(shù)位于兩者之間。（2）可通過(guò)改變超臨界流體的密度（程序改變）調(diào)節(jié)組分分離（類似于氣相色譜的程序升溫，液相色譜中的梯度淋洗）。 超臨界流體的密度與壓力有關(guān)。*3.原理 SFC的流動(dòng)相：超臨界流體；CO2、N2O、NH3 SFC的固定相：固體吸附劑（硅膠）或鍵合到載體（或毛細(xì)管壁

3、）上的高聚物；可使用液相色譜的柱填料。填充柱SFC和毛細(xì)管柱SFC； 分離機(jī)理：吸附與脫附。組分在兩相間的分配系數(shù)不同而被分離； 通過(guò)調(diào)節(jié)流動(dòng)相的壓力（調(diào)節(jié)流動(dòng)相的密度），調(diào)整組分保留值；*壓力效應(yīng)： SFC的柱壓降大（比毛細(xì)管色譜大30倍），對(duì)分離有影響（柱前端與柱尾端分配系數(shù)相差很大，產(chǎn)生壓力效應(yīng)）； 超臨界流體的密度受壓力在臨界壓力處最大，超過(guò)該點(diǎn)，影響小，超過(guò)臨界壓力20%，柱壓降對(duì)分離的影響?。?壓力效應(yīng)：在SFC中，壓力變化對(duì)容量因子產(chǎn)生顯著影響，超流體的密度隨壓力增加而增加，密度增加提高溶劑效率，淋洗時(shí)間縮短。 CO2流動(dòng)相，當(dāng)壓力改變：7.09.0106 Pa，則： C16H3

4、4的保留時(shí)間 25min 5min。*程序升壓*HPLC與SFC比較*二、超臨界流體色譜的結(jié)構(gòu)與流程1.結(jié)構(gòu)流程 *2.主要部件（1）SFC的高壓泵 無(wú)脈沖的注射泵；通過(guò)電子壓力傳感器和流量檢測(cè)器，計(jì)算機(jī)控制流動(dòng)相的密度和流量； （2）SFC的色譜柱和固定相 可以采用液相色譜柱和交聯(lián)毛細(xì)管柱； SFC的固定相：固體吸附劑（硅膠）或鍵合到載體（或毛細(xì)管壁）上的高聚物；專用的毛細(xì)管柱SFC；*主要部件（3）流動(dòng)相 SFC的流動(dòng)相：超臨界流體；CO2、N2O、NH3 CO2應(yīng)用最廣泛；無(wú)色、無(wú)味、無(wú)毒、易得、對(duì)各類有機(jī)物溶解性好，在紫外光區(qū)無(wú)吸收；缺點(diǎn)：極性太弱；加少量甲醇等改性；（4）檢測(cè)器 可采用液相色譜檢測(cè)器，也可采用氣相色譜的FID檢測(cè)器*三、超臨界流體色譜的應(yīng)用1.聚苯醚低聚物的分析色譜柱：10m 63m i.d. 毛細(xì)管柱。固定相：鍵合二甲基聚硅氧烷；流動(dòng)相：CO2 ；柱溫：120 C；程序升壓；*2.甘油三酸酯的分析 四種組分僅雙鍵數(shù)目和位置不同，難分離； 色譜柱：DB-225 SFC毛細(xì)管柱； 流動(dòng)相： CO2 ；從15MPa程序升壓到27MPa；2.5hr完全分離。* 表 液相色譜分離類型選擇參考表 溶于水排阻色譜，水為流動(dòng)相 相對(duì)分子質(zhì)量 2000 不溶于水排阻色譜，非水流動(dòng)相 同系物分配色譜 不溶于水 異構(gòu)體吸附色譜樣品 分子大小差異排阻色譜 反相液一液