新品發(fā)布完整N糖肽全方位高準確的解析糖鏈和修飾位點

1、新品發(fā)布 | 完整N-糖肽：全方位、高準確的解析糖鏈和修飾位點糖基化修飾是生物體內(nèi)普遍發(fā)生的一種翻譯后修飾，生物體內(nèi)約50%的蛋白均可發(fā)生糖基化，在很多生命過程和疾病中發(fā)揮著非常重要的作用。目前許多疾病診斷的標志物及治療的靶標也都是糖蛋白。糖蛋白中的蛋白質(zhì)是生理功能的主要承擔(dān)者，而糖鏈則影響著蛋白質(zhì)的整體構(gòu)象，如蛋白的折疊、胞內(nèi)定位、細胞間的相互識別等，即糖鏈影響了由構(gòu)象決定的蛋白的所有功能。因此研究糖蛋白的功能，不僅要分析蛋白質(zhì)，也要分析糖鏈的組成。近年來以質(zhì)譜為核心的糖蛋白質(zhì)組學(xué)正成為解析糖鏈、修飾位點和蛋白的主要技術(shù)，但糖鏈的多樣性增加了糖肽鑒定的復(fù)雜性，而且糖鏈本身也容易被串聯(lián)質(zhì)譜碎裂

2、，且糖鏈的碎裂能量與肽段不相同，因此亟需一種更完善、準確可靠的方法流程解析糖鏈、肽段和蛋白?，F(xiàn)中科新生命推出完整N-糖肽蛋白質(zhì)組學(xué)分析服務(wù)，通過HILIC 富集方法，并結(jié)合最新一代超高分辨質(zhì)譜，實現(xiàn)N-糖基化位點和糖型組成的完整解析和糖基化的大規(guī)模定性定量分析，讓糖組學(xué)研究唾手可得。自此中科新生命建立了O-GlcNAc糖基化組學(xué)、完整N糖肽組學(xué)和N糖基化修飾組學(xué)全面的糖基化組學(xué)服務(wù)。完整N-糖肽實驗流程圖三大產(chǎn)品特色1. 完整N-糖肽蛋白質(zhì)一站式多維分析，提供修飾組學(xué)研究更創(chuàng)新研究方案完整N-糖肽蛋白組學(xué)僅通過一次實驗，可同時分析糖鏈+修飾位點+修飾肽段+修飾蛋白， 實現(xiàn)糖基化研究多維度分析結(jié)

3、果，一站式解析糖型、糖基化位點、糖基化肽段和蛋白。并且樣本類型兼容性廣泛，血漿、細胞、組織樣本等均可友好適用。完整N-糖肽為血液樣本的創(chuàng)新研究提供了新的選擇。圖1 完整N-糖肽解析結(jié)果示例2. 采用pGlyco 3.0高準確度 糖型分析軟件近年來，國內(nèi)外都開發(fā)了不少解析完整N-糖肽的相關(guān)軟件，但目前解析方法仍有明顯的局限性：大部分工具無法對糖鏈的鑒定進行質(zhì)控，尤其涉及到復(fù)雜的糖型時；檢索速度慢；無法對多個糖基化位點精準定位；無法鑒定含有修飾糖單元的完整糖肽等問題。中科新生命推出的完整N-糖肽組的分析軟件為pGlyco 3.0，該軟件是目前首個提出聚糖優(yōu)先的糖肽搜索引擎，該方法的特色是先搜索糖鏈

4、部分，通過糖鏈鑒定的質(zhì)控，縮小搜索空間從而提高檢索速度，并且過濾掉不可靠的糖型從而提高鑒定精度。此外對于含有多個糖基化修飾位點的糖肽，pGlyco3采用動態(tài)規(guī)劃算法對糖基化位點進行精準定位。至此，pGlyco 3.0實現(xiàn)了從糖鏈、多肽和糖肽三個層面的質(zhì)控保證了結(jié)果的準確性和可靠性。圖2 多種完整N-糖肽軟件的比較分析（pGlyco 3.0 vs Byonic vs MSFragger vs MetaMorpheux）（pGlyco 3.0在準確度和搜索速度上均有明顯的優(yōu)勢）3.高特異性、高通量、無偏向的N糖基化富集方法完整N-糖肽組采用親水相互作用色譜法-ZIC-HILIC對糖蛋白進行富集分析，該方法可以實現(xiàn)對完整N-糖肽五偏向、高特異性、高通量的富集。圖3 多種糖蛋白富集方法的比較分析（ZIC-HILIC vs HILIC vs 酰肼化學(xué)法 vs TiO2）(HILIC和ZIC-HILIC得到的N -糖肽數(shù)量相當(分別為1118和1138);但ZIC-HILIC的富集特異性 (46%)高于HILIC(34%)在四種富集技術(shù)中，酰肼化學(xué)富集特異性最高(93%)，但鑒定出的N-糖肽數(shù)量相對較少(667)，在TiO2色譜中，特異性