單向免疫瓊脂擴(kuò)散

1、單向免疫瓊脂擴(kuò)散第1頁(yè)，共15頁(yè)，2022年，5月20日，2點(diǎn)16分，星期二第2頁(yè)，共15頁(yè)，2022年，5月20日，2點(diǎn)16分，星期二第3頁(yè)，共15頁(yè)，2022年，5月20日，2點(diǎn)16分，星期二2%離子瓊脂； PBS （pH7.2，0.01M） ；標(biāo)準(zhǔn)已知陽(yáng)性血清；稀釋的待測(cè)血清標(biāo)本（濃度分別為1/30、51/40、1/50） ；免疫瓊擴(kuò)陽(yáng)性血清；已知標(biāo)準(zhǔn)瓊擴(kuò)抗原，診斷抗原；濕盒（容器內(nèi)加濕紗布或泡沫塑料） ；打孔器（孔徑3mm） ；打孔模板 ；微量加樣器；第4頁(yè)，共15頁(yè)，2022年，5月20日，2點(diǎn)16分，星期二第5頁(yè)，共15頁(yè)，2022年，5月20日，2點(diǎn)16分，星期二10mm10mm

2、3mm第6頁(yè)，共15頁(yè)，2022年，5月20日，2點(diǎn)16分，星期二第7頁(yè)，共15頁(yè)，2022年，5月20日，2點(diǎn)16分，星期二第8頁(yè)，共15頁(yè)，2022年，5月20日，2點(diǎn)16分，星期二血漿 的主要作用是運(yùn)載血細(xì)胞，運(yùn)輸維持人體生命活動(dòng)所需的物質(zhì)和體內(nèi)產(chǎn)生的廢物等。血漿相當(dāng)于結(jié)締組織的細(xì)胞間質(zhì)。是血液的重要組成分，呈淡黃色液體（因含有膽紅素）。血漿的化學(xué)成分中，水分占9092，溶質(zhì)以血漿蛋白為主。血漿蛋白是多種蛋白質(zhì)的總稱，用鹽析法可將其分為白蛋白、球蛋白和纖維蛋白原三類。血漿蛋白質(zhì)的功能有：維持血漿膠體滲透壓；組成血液緩沖體系，參與維持血液酸堿平衡；運(yùn)輸營(yíng)養(yǎng)和代謝物質(zhì)，血漿蛋白質(zhì)為親水膠體，

3、許多難溶于水的物質(zhì)與其結(jié)合變?yōu)橐兹苡谒奈镔|(zhì)；營(yíng)養(yǎng)功能，血漿蛋白分解產(chǎn)生的氨基酸，可用于合成組織蛋白質(zhì)或氧化分解供應(yīng)能量；參與凝血和免疫作用。血漿的無(wú)機(jī)鹽主要以離子狀態(tài)存在，正負(fù)離子總量相等，保持電中性。這些離子在維持血漿晶體滲透壓、酸堿平衡、以及神經(jīng)-肌肉的正常興奮性等方面起著重要作用。血漿的各種化學(xué)成分常在一定范圍內(nèi)不斷地變動(dòng)，其中以葡萄糖、蛋白質(zhì)、脂肪和激素等的濃度最易受營(yíng)養(yǎng)狀況和機(jī)體活動(dòng)情況的影響，而無(wú)機(jī)鹽濃度的變動(dòng)范圍較小。血漿的理化特性相對(duì)恒定是內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的首要表現(xiàn)。第9頁(yè)，共15頁(yè)，2022年，5月20日，2點(diǎn)16分，星期二血清:是指血液中既不含血細(xì)胞（血清不含紅細(xì)胞和白細(xì)胞）也

4、不含凝固因子的成分；也就是除去纖維蛋白原的血漿 血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應(yīng)被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。凝血塊收縮，其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過(guò)程中，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊，所以血清中無(wú)纖維蛋白原，這一點(diǎn)是與血漿最大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中，血小板釋放出許多物質(zhì)，各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化，如凝血酶原變成凝血酶，并隨血清存放時(shí)間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾，血液中許多化學(xué)成分的分

5、析，都以血清為樣品。 人體的血液由有形成分和無(wú)形成分組成，白血球、紅血球、血小板是有形成分，血清是血液中的無(wú)形成分。用顯微鏡可以觀察到血液中的白血球、紅血球、血小板等有形成分，血清為去除纖維蛋白原后的無(wú)形成分，顏色微黃，透亮。 血清的基本成分是水，水中溶有蛋白質(zhì)、脂肪、糖、無(wú)機(jī)鹽、維生素等營(yíng)養(yǎng)成分，也溶有人體代謝產(chǎn)物。血清中有抗體，這是被稱作免疫球蛋白的蛋白質(zhì)。 第10頁(yè)，共15頁(yè)，2022年，5月20日，2點(diǎn)16分，星期二抗毒血清： 因制作時(shí)是將蛇毒、病原菌產(chǎn)的毒等小量多次地注射到免子、馬血管內(nèi)，每日慢慢加大注射量，一定時(shí)間后，因該動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生抗體，經(jīng)檢測(cè)，達(dá)到一定效價(jià)后，就可以抽血。血液分

6、離血清后再經(jīng)提純，就成了抗毒血清。 如蛇、白喉、破傷風(fēng)、狂犬病抗毒血清等都是如此制備，用來(lái)治療相應(yīng)毒素反應(yīng)。 該生物制劑是異種血清，對(duì)人會(huì)有過(guò)敏反應(yīng)，注射前均要做皮試。陰性可注射，陽(yáng)性必需作脫敏療法才行。 第11頁(yè)，共15頁(yè)，2022年，5月20日，2點(diǎn)16分，星期二破傷風(fēng)抗毒素是一種免疫馬血清，對(duì)人體是一種異性蛋白，具有抗原性（過(guò)敏反應(yīng)），因此在用藥前先作過(guò)敏試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果為陰性可直接注射破傷風(fēng)抗毒素，試驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性者，則應(yīng)進(jìn)行脫敏注射，即小劑量分4-5次注射破傷風(fēng)抗毒素。在用過(guò)破傷風(fēng)抗毒素超過(guò)一周者，如再使用，還須重作皮膚試驗(yàn)。 抗血清或抗體仍能產(chǎn)生可觀察到的標(biāo)準(zhǔn)免疫反應(yīng)時(shí)的稀釋度。如抗血清的效價(jià)為1:1000，即抗血清稀釋1000倍時(shí)仍能產(chǎn)生可觀察到的免疫反應(yīng)。 效價(jià) 第12頁(yè)，共15頁(yè)，2022年，5月20日，2點(diǎn)16分，星期二指抗體的物理狀態(tài)及其在體內(nèi)的滯留時(shí)間，以其與抗原反應(yīng)的多少來(lái)表示其免疫效果，稱為抗體效價(jià)?？贵w效價(jià)測(cè)定 抗體效價(jià)測(cè)定是根據(jù)大分子顆?？乖谄湎鄳?yīng)的抗體相結(jié)合，在適量的電解質(zhì)存在及一定的溫度下，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間可出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集團(tuán)塊，醫(yī)學(xué)稱為凝集反應(yīng)，一般均以標(biāo)準(zhǔn)抗原測(cè)定免疫血清或