仿制藥一般流程

1、仿制藥一般流程仿制藥一般流程第1頁(yè)一個(gè)完整制劑研發(fā)流程應(yīng)該包含基礎(chǔ)內(nèi)容一、文件調(diào)研和專利查詢二、處方前研究三、原輔料相容性研究四、處方工藝篩選和優(yōu)化五、影響原因試驗(yàn)六、小試穩(wěn)定性樣品制備和穩(wěn)定性研究七、中試放大和中試穩(wěn)定性研究八、藥品申報(bào)工作（資料撰寫、統(tǒng)計(jì)臺(tái)賬樣品整理）仿制藥一般流程第2頁(yè)文件藥品注冊(cè)情況調(diào)研和專利查詢（一）藥品注冊(cè)情況查詢：SFDA、FDA、EMEA（二）文件檢索：我國(guó)數(shù)據(jù)庫(kù)：CNKI、維普、萬(wàn)方 國(guó)外數(shù)據(jù)庫(kù)：Reaxys、Pubmed、CA、SciFinder等（三）專利查詢：中國(guó)專利局、歐洲專利網(wǎng)、美國(guó)專利網(wǎng)、注意：1、在進(jìn)行3.1類申報(bào)時(shí)，F(xiàn)DA資料普通比較詳細(xì)，會(huì)得

2、到很多有用信息。尤其要注意查詢。仿制藥一般流程第3頁(yè)處方前研究1、原料藥理化性質(zhì)2、原料藥生物學(xué)性質(zhì)3、劑型選擇仿制藥一般流程第4頁(yè)1、原料藥理化性質(zhì)包含原料藥色澤、嗅味、pH值、pKa、粒度、晶型、比旋度、光學(xué)異構(gòu)體、熔點(diǎn)、水分、溶解度、脂水分配系數(shù)、溶劑化/或水合狀態(tài)，以及原料藥在固態(tài)和/或溶液狀態(tài)下對(duì)光、熱、濕、氧等條件下穩(wěn)定性情況。有些性質(zhì)能夠經(jīng)過(guò)文件查詢仿制藥一般流程第5頁(yè)對(duì)制劑影響較大一些理化性質(zhì)pH值 注射劑時(shí)要重點(diǎn)考慮pKa 能夠了解藥品在一定pH下解離狀態(tài)，粗略地預(yù)計(jì)口服藥品體內(nèi)吸收粒度 影響藥品溶出速率和溶解度，難溶性藥品要尤其關(guān)注晶型影響藥品溶出速率和溶解度，可能會(huì)影響體

3、內(nèi)吸收溶解度 影響制劑體內(nèi)吸收脂水分配系數(shù)（logP）影響制劑體內(nèi)吸收仿制藥一般流程第6頁(yè)需要給出研究匯報(bào)一些理化性質(zhì)粒度研究：主要針對(duì)難溶性藥品，能夠先考查不一樣粒度原料藥溶出速率影響，進(jìn)而考慮是否在處方設(shè)計(jì)時(shí)，控制原料藥粒度。晶型研究：以前重視程度不夠，現(xiàn)在應(yīng)該引發(fā)足夠重視。因?yàn)榛衔锞蛯?duì)藥品穩(wěn)定性、溶解度和溶出速率有很大影響，另外當(dāng)前存在很多化合物晶型專利，有時(shí)需要繞開保護(hù)晶型選擇另一個(gè)有效晶型。溶解度和溶出速率研究：溶解度分為特征溶解度和表觀溶解度（平衡溶解度），咱們當(dāng)前測(cè)定藥品在不一樣pH值下溶解度都屬于表觀溶解度。仿制藥一般流程第7頁(yè)3、劑型選擇仿制藥要盡可能選擇與原研藥相同劑型

4、，假如確實(shí)要改變劑型，一定要給出充分理由，說(shuō)明新劑型突出優(yōu)點(diǎn)。仿制藥一般流程第8頁(yè) 原輔料相容性 試驗(yàn)方法：HPLC、DSC等 原輔料相容性選擇那些輔料？仿制藥一般流程第9頁(yè) SFDA指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn) 與影響原因條件相同。 輔料用量較大（如稀釋劑等），可按主藥：輔料=1：5百分比混合，若用量較小（如潤(rùn)滑劑等），可按主藥：輔料=20：1百分比混合，取一定量，放置在高濕、高溫、光照條件下10天，重點(diǎn)考查性狀、相關(guān)物質(zhì)等等，必要時(shí)，可用原料藥和輔料分別做平行對(duì)照試驗(yàn)，以判別是原料藥本身改變還是輔料影響。仿制藥一般流程第10頁(yè) FDA相關(guān)指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn) 主藥：填充劑1：10 主藥：崩解劑/粘合劑1：1 主藥：潤(rùn)滑劑

5、10：1 條件為（1）40、RH75%開口；（2）40、RH75%閉口；（3）60閉口。于兩周、四面取樣檢驗(yàn)外觀性狀及相關(guān)物質(zhì)仿制藥一般流程第11頁(yè)處方工藝研究處方設(shè)計(jì)無(wú)專利專利保護(hù)了關(guān)鍵技術(shù)和輔料，只能采取相近技術(shù)和可替換輔料實(shí)現(xiàn)咱們目標(biāo)處方篩選過(guò)程重點(diǎn)要找出評(píng)價(jià)指標(biāo)？仿制藥一般流程第12頁(yè)基礎(chǔ)要求篩選之前要有方案試驗(yàn)過(guò)程要有統(tǒng)計(jì)-真實(shí)、及時(shí)、完整處方優(yōu)化要有比較和設(shè)定關(guān)鍵指標(biāo)試驗(yàn)結(jié)果要有分析和總結(jié)仿制藥一般流程第13頁(yè)處方篩選和優(yōu)化單原因考查，原因較多時(shí)能夠采取正交設(shè)計(jì)和均勻設(shè)明確處方篩選和優(yōu)化評(píng)價(jià)指標(biāo)，如溶出度、釋放度、相關(guān)物質(zhì)等假如研究過(guò)程中發(fā)覺影響制劑質(zhì)量、穩(wěn)定性、藥效主要原因，如原

6、料藥水分或輔料一些指標(biāo)，應(yīng)進(jìn)行重點(diǎn)控制，確保藥品質(zhì)量仿制藥一般流程第14頁(yè)制劑工藝研究處方篩選后進(jìn)行工藝研究。普通同時(shí)進(jìn)行，但在資料中須分條理整理。普通須研究粘合劑用量范圍，制粒設(shè)備參數(shù)，原料粒徑控制，干燥方式及時(shí)間，整粒方式及參數(shù)，混合強(qiáng)度及時(shí)間，壓片速度，硬度等。普通依據(jù)經(jīng)驗(yàn)值作微調(diào)即可，或是對(duì)關(guān)鍵步驟進(jìn)行考查，無(wú)須全部詳細(xì)考查。對(duì)于常規(guī)工藝，經(jīng)過(guò)多批樣品驗(yàn)證即可。仿制藥一般流程第15頁(yè)工藝設(shè)計(jì)依據(jù)劑型特點(diǎn)，結(jié)合已掌握藥品理化性質(zhì)和生物學(xué)性質(zhì)，設(shè)計(jì)幾個(gè)基礎(chǔ)合理制劑工藝假如藥品存在多晶型現(xiàn)象，要注意制劑工藝過(guò)程中粉碎、制粒、包衣過(guò)程對(duì)藥品晶型影響。原料藥單獨(dú)晶型研究比較輕易，與輔料一起進(jìn)行晶

7、型研究難度較大。假如藥品對(duì)濕不穩(wěn)定，應(yīng)注意對(duì)生產(chǎn)環(huán)境濕度進(jìn)行控制，制備工藝盡可能防止水分影響，可采取干法制粒。粉末直接壓片工藝等。易氧化藥品可將溶劑加熱放冷后再溶解藥品，能夠加惰性氣體保護(hù)，溶劑除氧易揮發(fā)性藥品，最終加入，防止制備過(guò)程損失仿制藥一般流程第16頁(yè)影響原因研究樣品批次和規(guī)模 影響原因樣品需要采取最終確定處方工藝，制備批量滿足測(cè)定要求，普通制備一批，固體制劑批量為1000個(gè)制劑單位左右，注射劑則依據(jù)詳細(xì)放樣和測(cè)定要求，普通在幾十個(gè)制劑單位。影響原因批可與小試三批中一批共用樣品進(jìn)行試驗(yàn)。仿制藥一般流程第17頁(yè)放置條件 普通將制劑除去外包裝，分散放置于適宜容器中（常見培養(yǎng)皿），分別進(jìn)行高

8、溫、高濕和光照試驗(yàn)。高溫條件為40和60；高濕條件為RH90%5%和RH75%5%；光照條件為4500Lx500Lx。分為在以上試驗(yàn)條件下放置10天，在第5天和第10天取樣檢測(cè)。若供試品性質(zhì)穩(wěn)定，高溫試驗(yàn)可只進(jìn)行60條件，高濕試驗(yàn)可只進(jìn)行RH90%5%。仿制藥一般流程第18頁(yè)小試穩(wěn)定性樣品制備和穩(wěn)定性研究樣品批次和規(guī)模 制備批量普通為三批，固體制劑批量為1000個(gè)制劑單位，注射劑則依據(jù)放樣和測(cè)定要求放樣，普通每個(gè)批次在幾十個(gè)制劑單位。仿制藥一般流程第19頁(yè)放置條件 分為長(zhǎng)久和加速條件放樣，分別采取擬上市包裝三批進(jìn)行試驗(yàn)。 加速試驗(yàn)普通選擇402、75%5%條件進(jìn)行6個(gè)月試驗(yàn)，在第0、1、2、3

9、、6個(gè)月末取樣測(cè)定。若6個(gè)月內(nèi)樣品經(jīng)檢測(cè)有不符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)現(xiàn)象，應(yīng)在302、65%5%條件下同法進(jìn)行6個(gè)月試驗(yàn)。 長(zhǎng)久試驗(yàn)普通選擇252、60%5%條件進(jìn)行36個(gè)月試驗(yàn)，在第0、3、6、9、12、18、24、36個(gè)月末取樣測(cè)定。仿制藥一般流程第20頁(yè)藥品申報(bào)工作內(nèi)容申報(bào)資料撰寫研發(fā)原始統(tǒng)計(jì)整理樣品制備批統(tǒng)計(jì)、中控統(tǒng)計(jì)、檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)整理研發(fā)儀器和設(shè)備臺(tái)帳整理穩(wěn)定性樣品留取樣臺(tái)賬整理樣品、對(duì)照品使用情況統(tǒng)計(jì)及剩下樣品整理樣品出入庫(kù)臺(tái)賬仿制藥一般流程第21頁(yè)制劑質(zhì)量研究項(xiàng)目性狀判別檢驗(yàn)含量均勻度溶出度釋放度雜質(zhì)殘留溶劑其它含量2022/9/4仿制藥一般流程第22頁(yè)性狀制劑性狀是考查樣品外形和顏色。片劑應(yīng)描

10、述是什么顏色壓制片或包衣片（包薄膜衣或糖衣），除去包衣后片芯顏色，以及片子形狀，如異形片（長(zhǎng)條形，橢圓形，三角形等）；片面有沒有印字或刻痕或有商標(biāo)識(shí)號(hào)等也應(yīng)描述。硬膠囊劑應(yīng)描述內(nèi)容物顏色、形狀等。注射液普通為澄明液體（水溶液），但也有混懸液或粘稠性溶液，需注意對(duì)顏色描述，還應(yīng)考查貯藏過(guò)程中性狀是否有改變。23仿制藥一般流程第23頁(yè)判別通常采取靈敏度較高、專屬性較強(qiáng)、操作較簡(jiǎn)便、不受輔料干擾方法對(duì)制劑進(jìn)行判別。普通采取HPLC法：在含量測(cè)定項(xiàng)下統(tǒng)計(jì)色譜圖中，供試品溶液中主峰保留時(shí)間與對(duì)照品溶液中主峰保留時(shí)間一致2022/9/424仿制藥一般流程第24頁(yè)檢驗(yàn)口服片劑、膠囊劑除按制劑通則檢驗(yàn)外，普通

11、還應(yīng)進(jìn)行溶出度、雜質(zhì)（或已知雜質(zhì)）等檢驗(yàn)；緩控釋制劑、腸溶制劑、透皮吸收制劑等應(yīng)進(jìn)行釋放度檢驗(yàn)；小劑量制劑（主藥含量低）應(yīng)進(jìn)行含量均勻度檢驗(yàn)；注射劑應(yīng)進(jìn)行pH 值、顏色（或溶液顏色）、雜質(zhì)（或已知雜質(zhì)）檢驗(yàn)；注射用粉末或凍干品還應(yīng)檢驗(yàn)干燥失重或水分；大致積注射液檢驗(yàn)重金屬與不溶性微粒等。2022/9/4仿制藥一般流程第25頁(yè)含量均勻度化學(xué)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立規(guī)范化過(guò)程技術(shù)指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)含量均勻度系指小劑量口服固體制劑、粉霧劑或注射用無(wú)菌粉末等制劑中每片（個(gè)）含量偏離標(biāo)示量程度；片劑、膠囊劑或注射用無(wú)菌粉末，規(guī)格小于 10mg（含 10mg）品種或主藥含量小于每片（個(gè)）重量5%品種；其它制劑，標(biāo)示量小于

12、2mg 或主藥含量小于每個(gè)重量 2%品種；復(fù)方制劑應(yīng)對(duì)符合上述條件組分進(jìn)行含量均勻度檢驗(yàn)。對(duì)于藥品有效濃度與毒副反應(yīng)濃度比較靠近品種或混勻工藝較困難品種，每片（個(gè)）標(biāo)示量小于 25mg者，應(yīng)進(jìn)行含量均勻度研究。 版中國(guó)藥典附錄XE含量均勻度系指小劑量或單劑量固體制劑、半固體制劑和非均相液體制劑每片（個(gè)）含量偏離標(biāo)示量程度。片劑、硬膠囊劑或注射用無(wú)菌粉末，每片（個(gè)）標(biāo)示量小于25mg或主藥含量小于每片（個(gè)）重量25%者；內(nèi)容物非均一溶液軟膠囊、單劑量包裝口服混懸液、透皮貼劑、吸入劑和栓劑；復(fù)方制劑僅檢驗(yàn)符合上述條件組分；凡檢驗(yàn)含量均勻度制劑，普通不再檢驗(yàn)重（裝）量差異2022/9/4仿制藥一般流

13、程第26頁(yè)含量均勻度程度取10片（個(gè)）計(jì)算：A+1.80S15.0，供試品符合要求；A+S15.0，不符合要求；如A+1.80S15.0，A+S 15.0，另取20片（個(gè)）復(fù)試。依據(jù)30片（個(gè)）數(shù)據(jù)計(jì)算：A+1.45S 15.0，符合要求；A+1.45S 15.0，不符合要求。單劑量包裝口服混懸劑、內(nèi)充混懸物軟膠囊劑、膠囊型或泡囊型粉霧劑、單劑量包裝眼用、耳用、鼻用混懸劑、固體或半固體制劑，其程度應(yīng)為20%；透皮貼劑、栓劑程度應(yīng)為25%.2022/9/4仿制藥一般流程第27頁(yè)溶出度凡檢驗(yàn)溶出度制劑，不再進(jìn)行崩解時(shí)限檢驗(yàn)。溶出度研究應(yīng)測(cè)定最少三批樣品，考查其溶出曲線和溶出均一性。 對(duì)易溶于水藥品

14、，在質(zhì)量研究中亦應(yīng)考查其溶出度，但溶出度檢驗(yàn)不一定訂入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 2022/9/4仿制藥一般流程第28頁(yè)釋放度 緩釋制劑、控釋制劑、腸溶制劑、透皮貼劑均應(yīng)進(jìn)行釋放度研究。通常應(yīng)測(cè)定最少三批樣品，考查其釋放曲線和釋放均一性，并對(duì)釋藥模式（零級(jí)、一級(jí)、Higuchi方程等）進(jìn)行分析。 凡檢驗(yàn)釋放度制劑，不再進(jìn)行崩解時(shí)限檢驗(yàn)。2022/9/4仿制藥一般流程第29頁(yè)溶出度/釋放度對(duì)測(cè)定方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證，主要從以下幾方面進(jìn)行考慮：1、溶出及釋放方法，主要考查溶出介質(zhì)選擇、溶出條件選擇（槳法或轉(zhuǎn)籃法）、轉(zhuǎn)速選擇，主要經(jīng)過(guò)溶出曲線進(jìn)行評(píng)價(jià)。2、對(duì)溶出檢測(cè)方法進(jìn)行驗(yàn)證，從專屬性和準(zhǔn)確性進(jìn)行評(píng)價(jià)（1）需要進(jìn)行

15、輔料干擾試驗(yàn)（2）進(jìn)行檢測(cè)方法系統(tǒng)適用性試驗(yàn)（3）進(jìn)行回收率試驗(yàn)3、對(duì)試驗(yàn)方法進(jìn)行驗(yàn)證（1）需要進(jìn)行進(jìn)樣精密度試驗(yàn)（2）進(jìn)行溶出液穩(wěn)定性試驗(yàn)4、對(duì)批內(nèi)及批間差異進(jìn)行驗(yàn)證（1）進(jìn)行溶出重復(fù)性試驗(yàn)（2）進(jìn)行溶出均一性試驗(yàn)2022/9/4仿制藥一般流程第30頁(yè)溶出度/釋放度溶出度/釋放度方法確實(shí)立方法學(xué)驗(yàn)證2022/9/4仿制藥一般流程第31頁(yè)方法確實(shí)立 參考上市產(chǎn)品溶出度測(cè)定條件溶出方法選擇：籃法、漿法、小杯法溶出介質(zhì)篩選：自制與參比制劑在pH1.0鹽酸、pH4.5醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液、純化水中溶出曲線要相同，用相同因子（f2）判斷。 不一樣溶出介質(zhì)中溶出曲線，并非溶出越快越好，而

16、應(yīng)該是對(duì)產(chǎn)品有較強(qiáng)區(qū)分能力，而亦能在一定程度上反應(yīng)體內(nèi)實(shí)際吸收情況 2022/9/4仿制藥一般流程第32頁(yè)方法確實(shí)立溶出介質(zhì)體積選擇：使藥品符合漏槽條件 漏槽條件：即所用介質(zhì)體積應(yīng)到達(dá)被測(cè)物質(zhì)在37時(shí)在此介質(zhì)中到達(dá)飽和溶液濃度體積310倍。指溶出到介質(zhì)中藥品很快被介質(zhì)稀釋帶走，藥品溶出不受溶出介質(zhì)中藥品濃度影響，亦即濃度差不是藥品溶出限速步驟。轉(zhuǎn)速選擇：普通從50轉(zhuǎn)開始，若速度提升須有充分理由。 2022/9/4仿制藥一般流程第33頁(yè)方法確實(shí)立溶出度指標(biāo)制訂： 在選擇方法及溶出介質(zhì)和預(yù)選轉(zhuǎn)速下測(cè)定不一樣時(shí)間溶出量，建立溶出曲線，從圖譜上來(lái)確定取樣液時(shí)間，普通溶出曲線拐點(diǎn)處后推10-15分鐘。溶

17、出度均勻性試驗(yàn)（批內(nèi)） ：確定工藝穩(wěn)定性 在確定條件下測(cè)定6片（粒）樣品溶出曲線，6條溶出曲線進(jìn)行比較，應(yīng)基礎(chǔ)均勻一致。 2022/9/4仿制藥一般流程第34頁(yè)方法確實(shí)立溶出曲線試驗(yàn)（重現(xiàn)性，批間） ： 考查方法設(shè)定取樣時(shí)間以及程度是否合理。經(jīng)過(guò)溶出曲線也能夠看出藥品在何時(shí)能到達(dá)最大釋放，以及是否能到達(dá)最大釋放。 2022/9/4溶出曲線RSD要求時(shí)間點(diǎn)溶出結(jié)果RSD第一時(shí)間點(diǎn)20%自第二時(shí)間點(diǎn)至最終時(shí)間點(diǎn)10%仿制藥一般流程第35頁(yè)方法學(xué)驗(yàn)證-只考查一個(gè)介質(zhì)HPLC法或UV法 若用UV須進(jìn)行紫外方法學(xué)考查：最大吸收波長(zhǎng)掃描、輔料干擾試驗(yàn)、濾膜吸附、線性、回收率試驗(yàn)、進(jìn)樣精密度、溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)

18、 若用HPLC測(cè)定須進(jìn)行HPLC方法學(xué)考查：色譜條件、濾膜吸附、線性、進(jìn)樣精密度、回收率試驗(yàn)、溶液穩(wěn)定性試驗(yàn) 2022/9/4仿制藥一般流程第36頁(yè)輔料干擾試驗(yàn)測(cè)定方法：取對(duì)照品溶液掃描，一份同等濃度樣品或樣品濃度略低于對(duì)照品溶液。假如沒有干擾，二條紫外掃描圖基礎(chǔ)重合，假如有干擾，供試品掃描圖會(huì)高于對(duì)照品溶液。 2022/9/4仿制藥一般流程第37頁(yè)濾膜吸附試驗(yàn)注意事項(xiàng)：(1)過(guò)濾時(shí)濾膜與主成份間存在著一個(gè)吸附飽和過(guò)程，濾膜吸附一定量后到達(dá)飽和，不再吸附。(2) 吸附量2%以下時(shí)可忽略不計(jì)；超出2%應(yīng)注意。(3) 0.45m濾膜吸附率高于0.80m。(4)煮沸1.5h處理提升微孔濾膜通透性,減

19、小吸附作用效果好于浸泡24 h。方法：（1）取溶出液，分別過(guò)濾不一樣體積初濾液后測(cè)定，觀察響應(yīng)值改變情況，以知曉被測(cè)藥品與濾膜吸附情況。(2) 取樣后一份不過(guò)濾，直接采取高速離心，取上清液，與過(guò)濾掉一定體積后另一份續(xù)濾液比較，觀察二者間測(cè)定數(shù)據(jù)是否存在顯著性差異。判定自動(dòng)取樣溶出儀固有濾膜是否存在吸附時(shí)，普通采取該法。(3) 對(duì)照品溶液，經(jīng)濾膜過(guò)濾一定體積后，與原溶液進(jìn)行比較，觀察測(cè)定前后數(shù)據(jù)改變情況。2022/9/4仿制藥一般流程第38頁(yè)線性要求：溶出度測(cè)定以釋放量10%120%間選取5個(gè)點(diǎn)即可,每個(gè)濃度進(jìn)3針?？山邮諛?biāo)準(zhǔn)(常量):R0.998(0.990),Y軸截距在100響應(yīng)值2%(25

20、%)以內(nèi),響應(yīng)因子RSD2.0%(10%)。YKX+b假如和含量測(cè)定方法一樣，可不做；假如和含量測(cè)定濃度不一樣，增加線性范圍；假如和含量定方法不一樣，要求要做此項(xiàng)。 2022/9/4仿制藥一般流程第39頁(yè)分別配制濃度為80、100和120供試品溶液各三份，分別測(cè)定其含量，將實(shí)測(cè)值與理論值比較，計(jì)算回收率可接收標(biāo)準(zhǔn)：98.0102.0% RSD2.0 (n=9)每個(gè)樣品進(jìn)3針，共9針 2022/9/4回收率試驗(yàn)仿制藥一般流程第40頁(yè)當(dāng)和含量溶劑不一樣時(shí)，須重新考查。主成份溶解于溶出介質(zhì)后，因進(jìn)行穩(wěn)定性考查。(1)如不穩(wěn)定，則應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)中注明取樣后馬上測(cè)定；(2)溶液不穩(wěn)定時(shí)普通采取對(duì)照品平行操作法

21、。每個(gè)樣1針 2022/9/4溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)仿制藥一般流程第41頁(yè)精密度同含量測(cè)定連續(xù)進(jìn)6針 2022/9/4精密度仿制藥一般流程第42頁(yè)含量測(cè)定方法學(xué)驗(yàn)證HPLC法 考查：系統(tǒng)適用性、專屬性、線性、進(jìn)樣精密度、溶液穩(wěn)定性、耐用性、重復(fù)性、回收率。 2022/9/4仿制藥一般流程第43頁(yè)系統(tǒng)適用性是一份樣品連續(xù)進(jìn)樣6針，在沒有特殊要求條件下，普通是取相關(guān)物質(zhì)項(xiàng)下供試品溶液連續(xù)進(jìn)樣6針 ，主峰峰面積RSD2.0%，主峰保留時(shí)間RSD1.0%。另外，主峰拖尾因子不得大于2.0，主峰與雜質(zhì)峰必須到達(dá)基線分離，主峰理論塔板數(shù)應(yīng)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求。共6針 2022/9/4仿制藥一般流程第44頁(yè)專屬性（陰性

22、對(duì)照試驗(yàn)）配制空白輔料，與樣品相同溶劑溶解，考查輔料是否干擾主藥測(cè)定?？山邮諛?biāo)準(zhǔn)為：空白對(duì)照應(yīng)無(wú)干擾，主成份與各相關(guān)物質(zhì)應(yīng)能完全分離，分離度不得小于2.0。以二極管陣列檢測(cè)器進(jìn)行純度分析時(shí)，主峰純度因子應(yīng)大于980。 2022/9/4仿制藥一般流程第45頁(yè)系統(tǒng)適用性與專屬性區(qū)分和聯(lián)絡(luò)聯(lián)絡(luò)：建立方法時(shí)候，必須要經(jīng)過(guò)系統(tǒng)實(shí)用性及專屬性試驗(yàn)。系統(tǒng)適用性中也有對(duì)分離度進(jìn)行要求，不過(guò)是主要峰；專屬性試驗(yàn)中也對(duì)分離度等進(jìn)行了要求，比置系統(tǒng)實(shí)用性中要求更全方面和嚴(yán)格。區(qū)分：系統(tǒng)實(shí)用性在每次檢測(cè)時(shí)，必須要做，而且要必須合格。專屬性則在方法建立及方法學(xué)中研究，做一次即可 。 2022/9/4仿制藥一般流程第46

23、頁(yè)線性對(duì)照品配制，線性范圍最少5個(gè)點(diǎn)以上，濃度范圍可為供試濃度50%-150%（或者80-120），最少包含回收率最低和最高濃度，分別測(cè)定其主峰面積，計(jì)算對(duì)應(yīng)含量。以含量為橫坐標(biāo)（X），峰面積為縱坐標(biāo)（Y），進(jìn)行線性回歸分析?？山邮諛?biāo)準(zhǔn)為：回歸線相關(guān)系數(shù)（R）不得小于0.998，Y軸截距應(yīng)在100響應(yīng)值2以內(nèi)，響應(yīng)因子相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)小于2.0%。每個(gè)樣進(jìn)3針2022/9/4仿制藥一般流程第47頁(yè)進(jìn)樣精密度詳細(xì)操作：普通可取線性關(guān)系試驗(yàn)項(xiàng)下中間濃度溶液，連續(xù)進(jìn)樣?？山邮諛?biāo)準(zhǔn)為：RSD2.0% 。進(jìn)6針2022/9/4仿制藥一般流程第48頁(yè)溶液穩(wěn)定性取供試品溶液，要求條件下放置8h，分別于0、2、4

24、、6、8h進(jìn)樣，統(tǒng)計(jì)色譜圖，觀察主峰面積（及主要雜質(zhì)及總雜質(zhì)峰面積）改變，并計(jì)算RSD ?？山邮諛?biāo)準(zhǔn)為：RSD2.0% 。每個(gè)樣進(jìn)1針2022/9/4仿制藥一般流程第49頁(yè)耐用性分別考查流動(dòng)相百分比改變5、流動(dòng)相pH值改變0.2、柱溫改變5、流速相對(duì)值改變20時(shí)，儀器色譜行為改變?？山邮諛?biāo)準(zhǔn)為：主峰拖尾因子不得大于2.0，主峰與雜質(zhì)峰必須到達(dá)基線分離；各條件下含量數(shù)據(jù)（n=6）RSD2.0% 。每個(gè)條件進(jìn)1針2022/9/4仿制藥一般流程第50頁(yè)重復(fù)性（用中試樣品）是配制6份含量測(cè)定項(xiàng)下供試品溶液，分別進(jìn)樣，并計(jì)算每針含量，并計(jì)算其RSD ?？山邮諛?biāo)準(zhǔn)為： RSD2.0。進(jìn)8針2022/9/4

25、仿制藥一般流程第51頁(yè)回收率驗(yàn)證時(shí)普通要求分別配制濃度為80、100和120供試品溶液各三份，分別測(cè)定其含量，將實(shí)測(cè)值與理論值比較，計(jì)算回收率。可接收標(biāo)準(zhǔn)為：各濃度下平均回收率均應(yīng)在98.0%-102.0%之間，9個(gè)回收率數(shù)據(jù)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）應(yīng)小于2.0% 。每個(gè)樣進(jìn)3針2022/9/4仿制藥一般流程第52頁(yè)定量限：主峰與噪音峰信號(hào)強(qiáng)度比應(yīng)不得小于10 。檢測(cè)限：主峰與噪音峰信號(hào)強(qiáng)度比應(yīng)不得小于3。都能夠不做 2022/9/4仿制藥一般流程第53頁(yè)雜質(zhì) 藥品中雜質(zhì)按其理化性質(zhì)普通分為三類：有機(jī)雜質(zhì)、無(wú)機(jī)雜質(zhì)及殘留溶劑。有機(jī)雜質(zhì)包含工藝中引入雜質(zhì)和降解產(chǎn)物等，可能是已知或未知。因?yàn)檫@類雜質(zhì)化

26、學(xué)結(jié)構(gòu)普通與活性成份類似或具淵源關(guān)系，故通常又可稱之為相關(guān)物質(zhì)。無(wú)機(jī)雜質(zhì)是指在原料藥及制劑生產(chǎn)或傳遞過(guò)程中產(chǎn)生雜質(zhì)，這些雜質(zhì)通常是已知，主要包含：反應(yīng)試劑、配位體、催化劑、重金屬、其它殘留金屬、無(wú)機(jī)鹽、助濾劑、活性炭等。 殘留溶劑是指在原料藥及制劑生產(chǎn)過(guò)程中使用有機(jī)溶劑。 制劑中雜質(zhì)考查重點(diǎn)是降解產(chǎn)物。 2022/9/4仿制藥一般流程第54頁(yè)相關(guān)物質(zhì)方法學(xué)驗(yàn)證-已知雜質(zhì)（定量）參考標(biāo)準(zhǔn)用HPLC法測(cè)定 系統(tǒng)適用性、專屬性、線性、檢測(cè)限與定量限、精密度、溶液穩(wěn)定性、回收率、耐用性2022/9/4仿制藥一般流程第55頁(yè)已知雜質(zhì)（定量）采取HPLC法，須采取峰面積法，詳細(xì)定量方法有：外標(biāo)法（雜質(zhì)對(duì)照

27、品法）加校正因子主成份本身對(duì)照法不加校正因子主成份本身對(duì)照法峰面積歸一化法。法定量比較準(zhǔn)確，采取時(shí)應(yīng)對(duì)對(duì)照品進(jìn)行評(píng)定和確認(rèn)，并制訂質(zhì)量要求。法應(yīng)對(duì)校正因子進(jìn)行嚴(yán)格測(cè)定，僅適合用于已知雜質(zhì)控制。法前提是假定雜質(zhì)與主成份響應(yīng)因子基礎(chǔ)相同。普通情況下，如雜質(zhì)與主成份分子結(jié)構(gòu)相同，其響應(yīng)因子差異不會(huì)太大。法簡(jiǎn)便快捷，但因各雜質(zhì)與主成份響應(yīng)因子不一定相同、雜質(zhì)量與主成份量不一定在同一線性范圍內(nèi)、儀器對(duì)微量雜質(zhì)和常量主成份積分精度及準(zhǔn)確度不相同等原因，所以在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中采取有一定不足。2022/9/4仿制藥一般流程第56頁(yè)系統(tǒng)適用性配置6份相同濃度雜質(zhì)對(duì)照品溶液進(jìn)行分析，該雜質(zhì)峰面積RSD2.0%，主峰保留

28、時(shí)間RSD1.0%。另外，分離度應(yīng)大于2.0或符合要求、拖尾因子應(yīng)0.8-1.2或符合要求。共6針2022/9/4仿制藥一般流程第57頁(yè)專屬性空白溶劑干擾試驗(yàn) 取溶解樣品用溶劑，進(jìn)樣。空白輔料干擾試驗(yàn)（有輔料時(shí)做）降解試驗(yàn)：酸、堿、熱、光照、氧化 降解對(duì)照品溶液：取樣品，按相關(guān)物質(zhì)供試品濃度配制溶液已知雜質(zhì)定位試驗(yàn) 取已知雜質(zhì)配成一定濃度，進(jìn)樣。取降解對(duì)照品溶液，加入少許已知雜質(zhì)對(duì)照品進(jìn)樣。可接收標(biāo)準(zhǔn)：空白對(duì)照應(yīng)無(wú)干擾，主峰與雜質(zhì)峰應(yīng)完全分離，已知雜質(zhì)峰與其它峰應(yīng)能完全分離，分離度不得小于2.0。 2022/9/4仿制藥一般流程第58頁(yè)強(qiáng)制降解試驗(yàn)酸降解試驗(yàn)：普通選擇0.1N鹽酸，在室溫或加熱

29、條件下進(jìn)行考查。普通破壞24h。再用堿中和。堿降解試驗(yàn)：普通選擇0.1N氫氧化鈉溶液，在室溫或加熱條件下進(jìn)行考查。普通破壞24h 。再用酸中和。高溫降解試驗(yàn)：可分別在固體和溶液狀態(tài)下進(jìn)行考查，詳細(xì)考查溫度與時(shí)間均可依據(jù)詳細(xì)品種。比如，在110考查24小時(shí)。光降解試驗(yàn)： 4000Lx+（-）500Lx照度下放置10天。氧化降解試驗(yàn)：主要在溶液狀態(tài)下進(jìn)行考查，用10或15雙氧水溶液雙氧水破壞24小時(shí)。制劑和空白輔料同時(shí)做2022/9/4仿制藥一般流程第59頁(yè)進(jìn)行破壞性試驗(yàn)時(shí)關(guān)注點(diǎn)和存在問題在選定破壞條件下，藥品應(yīng)有一定量降解。以主成份計(jì)算，普通降解10左右。分離度與峰純度分析：破壞性試驗(yàn)產(chǎn)生降解產(chǎn)

30、物個(gè)數(shù)比較多，采取HPLC法測(cè)定時(shí)，需考慮主成份與降解產(chǎn)物之間、降解產(chǎn)物相互之間分離度，確保降解產(chǎn)物峰與主峰、降解產(chǎn)物峰之間有良好分離度。推薦色譜分析時(shí)采取梯度洗脫，以有效分離降解產(chǎn)物。相關(guān)物質(zhì)濃度考慮：如濃度太大，峰面積平頭，將樣品用流動(dòng)相稀釋至峰高為100mA或峰面積為12萬(wàn)之間。0.1N濃度酸堿對(duì)于一些較為穩(wěn)定藥品來(lái)說(shuō)，是破壞不出什么東西，做法有兩種：1.梯度性增加酸堿濃度，如：0.5N、1.0N、1.5N等2.用水浴加熱輔助。但這種加熱法存在一個(gè)問題，破壞出來(lái)雜質(zhì)是算熱破壞還是純粹是酸堿破壞呢？個(gè)人以為是都有，所以雜質(zhì)又變得不專屬了。2022/9/4仿制藥一般流程第60頁(yè)線性從定量限濃

31、度起，至雜質(zhì)對(duì)照品溶液濃度120%或更高，配制6份濃度不一樣供試液?？山邮諛?biāo)準(zhǔn)為：回歸線相關(guān)系數(shù)（R）不得小于0.990。2022/9/4仿制藥一般流程第61頁(yè)檢測(cè)線與定量限定量限：雜質(zhì)峰與噪音峰信號(hào)強(qiáng)度比應(yīng)不得小于10。檢測(cè)限：雜質(zhì)峰與噪音峰信號(hào)強(qiáng)度比應(yīng)不得小于3。另外：配制6份最低定量限濃度溶液，所測(cè)6份溶液雜質(zhì)峰保留時(shí)間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)小于2.0%，峰面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)小于5.0%。（線性最低點(diǎn)，也可作為進(jìn)樣精密度）2022/9/4仿制藥一般流程第62頁(yè)精密度重復(fù)性：分別配置雜質(zhì)對(duì)照品貯備液與供試品貯備液，然后取供試品貯備液適量稀釋定容，平行制備6份雜質(zhì)濃度（普通為0.1%） ，進(jìn)樣，再進(jìn)雜質(zhì)

32、對(duì)照品，計(jì)算含量及RSD ，RSD10就能夠了）、100%、120%（能夠高點(diǎn)），普通提議和線性對(duì)應(yīng)，這么范圍更明確。普通做50%，100%，150%也能夠接收要。比如某雜質(zhì)程度為0.2%，取已知雜質(zhì)含量樣品適量9份（普通為樣品取樣量二分之一），分別加入該雜質(zhì)濃度為0.1、0.2和0.3雜質(zhì)溶液，稀釋到相關(guān)物質(zhì)供試品溶液濃度。另取雜質(zhì)對(duì)照品，按照標(biāo)準(zhǔn)配制成雜質(zhì)對(duì)照品溶液，分別測(cè)定其含量，計(jì)算回收率。該項(xiàng)目標(biāo)可接收標(biāo)準(zhǔn)為：各濃度下平均回收率均應(yīng)在80%-120%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)小于10%?；厥章首畹忘c(diǎn)為定量限時(shí)，可放寬至70%-130%?；厥章?（測(cè)得對(duì)照品量+樣品中已知含量）-樣品中已知含量

33、）/加入對(duì)照品量 x 100%=測(cè)得對(duì)照品量/加入對(duì)照品量 x 100%2022/9/4仿制藥一般流程第65頁(yè)耐用性分別考查流動(dòng)相百分比改變5、流動(dòng)相pH值改變0.2、柱溫改變5、檢測(cè)波長(zhǎng)改變5nm、流速相對(duì)值改變20以及采取三根不一樣批號(hào)色譜柱進(jìn)行測(cè)定時(shí)，儀器色譜行為改變，每個(gè)條件下各測(cè)試兩次。可接收標(biāo)準(zhǔn)為：各雜質(zhì)峰拖尾因子不得大于2.0，雜質(zhì)峰與其它成份峰必須到達(dá)基線分離；各條件下雜質(zhì)含量數(shù)據(jù)（n=6）相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)小于2.0%，雜質(zhì)含量絕對(duì)值在0.1以內(nèi)。2022/9/4仿制藥一般流程第66頁(yè)相關(guān)物質(zhì)方法學(xué)驗(yàn)證未知雜質(zhì)（程度檢驗(yàn)）用HPLC法測(cè)定 系統(tǒng)適用性、專屬性、檢測(cè)限、精密度、溶液穩(wěn)定性、耐用性2022/9/4仿制藥一般流程第67頁(yè)系統(tǒng)適用性取樣品，按照相關(guān)物質(zhì)供試品濃度配制溶液，進(jìn)樣。可接收標(biāo)準(zhǔn)為：理論踏板數(shù)應(yīng)符合要求，分離度應(yīng)大于2.0或符合要求，拖尾因子應(yīng)0.8-1.2或符合要求。2022/9/4仿制藥一般流程第68頁(yè)專屬性空白溶劑干擾試驗(yàn) 取溶解樣品用溶劑，進(jìn)樣?？瞻纵o料干擾試驗(yàn)（有輔料時(shí)做）降解試驗(yàn)：酸、堿、熱、光照、氧化 降解對(duì)照品溶液：取樣品，按相關(guān)物質(zhì)供試品濃度配制溶液可接收標(biāo)準(zhǔn)：空白對(duì)照應(yīng)無(wú)干擾，主峰與雜質(zhì)峰應(yīng)完全分離。2022/9/4仿制藥一般流程第69頁(yè)檢測(cè)線檢測(cè)限：雜質(zhì)