分光光度計(jì)及其操作

1、1第1頁(yè)，共19頁(yè)，2022年，5月20日，9點(diǎn)46分，星期一回顧知識(shí)點(diǎn)：1 單色光 復(fù)合光 互補(bǔ)光2 吸光度、透光率及其關(guān)系 3 朗伯-比爾定律的應(yīng)用（計(jì)算）4 吸光光度法的靈敏度-摩爾吸光 系數(shù)及其計(jì)算5 顯色反應(yīng)和測(cè)定條件的選擇（了解）2第2頁(yè)，共19頁(yè)，2022年，5月20日，9點(diǎn)46分，星期一【知識(shí)目標(biāo)】 1.熟練掌握分光光度計(jì)的基本組成 部件 2.了解分光光度計(jì)的基本組成部件 的作用 3.明確參比溶液的作用【技能目標(biāo)】 4.掌握可見(jiàn)分光光度計(jì)的使用操作 要領(lǐng) 3第3頁(yè)，共19頁(yè)，2022年，5月20日，9點(diǎn)46分，星期一 1. 吸光光度法的分類(lèi)： (1)分子吸光光度法 (2)原子吸

2、吸光度法 2. 吸光光度法的特點(diǎn)： (1) 靈敏度高 (2) 準(zhǔn)確度高 (3) 操作簡(jiǎn)便迅速 (4)應(yīng)用廣泛 4第4頁(yè)，共19頁(yè)，2022年，5月20日，9點(diǎn)46分，星期一3.光的吸收定律 1. 朗伯-比耳定律： A、T、c、bb入射光透射光c 入射光強(qiáng)度透過(guò)光強(qiáng)度5第5頁(yè)，共19頁(yè)，2022年，5月20日，9點(diǎn)46分，星期一一.儀器的組成1.定義： 測(cè)量溶液對(duì)不同波長(zhǎng)光的吸收程度的儀器為分光光度計(jì)2.組成：光源 單色器 吸收池 接受器 測(cè)量系統(tǒng)6第6頁(yè)，共19頁(yè)，2022年，5月20日，9點(diǎn)46分，星期一光電比色法分光光度法（紫外-可見(jiàn)分光光度法）UV-VIS0.575光源單色器吸收池接收器

3、測(cè)量系統(tǒng)參比樣品入射光 透射光 請(qǐng)注意與定義比較7第7頁(yè)，共19頁(yè)，2022年，5月20日，9點(diǎn)46分，星期一以下分別介紹各部件0.575光源單色器吸收池接收器分光光度計(jì)的基本部件 二. 分光光度計(jì)基本構(gòu)造8第8頁(yè)，共19頁(yè)，2022年，5月20日，9點(diǎn)46分，星期一1. 光源 用612V白熾燈 作用：提供光強(qiáng)一定的復(fù)合光(白光) 性能要求: 亮度穩(wěn)定(以使入射光通量強(qiáng)度一定), 故需電源電壓穩(wěn)定, 一般用穩(wěn)壓器提供穩(wěn)壓。9第9頁(yè)，共19頁(yè)，2022年，5月20日，9點(diǎn)46分，星期一124入射狹縫準(zhǔn)直鏡棱鏡 3聚焦鏡出射狹縫 52. 單色器 如下圖15組合為一體:用棱鏡或光柵作色散元件單色器的

4、作用：獲得單色光性能要求：?jiǎn)紊饧兌雀?一般光柵優(yōu)于棱鏡) 10第10頁(yè)，共19頁(yè)，2022年，5月20日，9點(diǎn)46分，星期一3. 吸收池 用光學(xué)玻璃(用于可見(jiàn)光度分析) 或石英玻璃(用于紫外光度分析)作用: 盛裝待測(cè)液(使入射光透過(guò)其中的溶液)11第11頁(yè)，共19頁(yè)，2022年，5月20日，9點(diǎn)46分，星期一4. 檢測(cè)器(光電轉(zhuǎn)換器) 用光電池或光電管 (如下圖) e-It作用：將光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào)(產(chǎn)生光電流)12第12頁(yè)，共19頁(yè)，2022年，5月20日，9點(diǎn)46分，星期一5. 指示器 用讀數(shù)標(biāo)尺(如下圖)或數(shù)字表作用: 光電流驅(qū)使指針移動(dòng) 從而指示、讀取 A 或 T 透光度T性能要求:

5、 靈敏、準(zhǔn)確, 符合 A= -lgT13第13頁(yè)，共19頁(yè)，2022年，5月20日，9點(diǎn)46分，星期一三.空白溶液（參比溶液）1.做空白溶液的目的 為了準(zhǔn)確測(cè)出試樣溶液待測(cè)組分的吸光度，必須扣除吸收池壁、溶劑和所加試劑對(duì)光吸收的影響2.操作 置于儀器光路中，用相應(yīng)的調(diào)節(jié)器使T=100 即A=0 14第14頁(yè)，共19頁(yè)，2022年，5月20日，9點(diǎn)46分，星期一四.721型分光光度計(jì)1.主要調(diào)節(jié)器及作用2.操作步驟15第15頁(yè)，共19頁(yè)，2022年，5月20日，9點(diǎn)46分，星期一721型分光光度計(jì)應(yīng)用 1. 測(cè)定組分濃度與含量: 依據(jù)A= -lgT= bc 2. 測(cè)定配合物的組成16第16頁(yè)，共

6、19頁(yè)，2022年，5月20日，9點(diǎn)46分，星期一作業(yè):P232-10.12小結(jié) 1.熟練掌握分光光度計(jì)的基本組成 部件 2.了解分光光度計(jì)的基本組成部件的作用 3.明確參比溶液的作用17第17頁(yè)，共19頁(yè)，2022年，5月20日，9點(diǎn)46分，星期一 自測(cè)題判斷題1.可見(jiàn)分光光度法所用參比溶液的作用是調(diào)A=0.00 2.可見(jiàn)分光光度法測(cè)定KMnO4時(shí),應(yīng)選紫色光為 入射光。 3.光度分析中,測(cè)定的吸光度越大,測(cè)定結(jié)果的相對(duì) 誤差越小。 4.分光光度法，其他條件一定，越大，測(cè)定的靈 敏度越高。 5.朗伯-比爾定律不僅使用于可見(jiàn)分光光度法,也使 用于紫外分光光度法。 6. 透光率T與吸光物質(zhì)濃度成反比。 18第18頁(yè)，共19頁(yè)，2022年，5月20日，9點(diǎn)46分，星期一應(yīng)用題（朗博比爾定律應(yīng)用） 有一濃度為0.01mol/L的CuSO4標(biāo)準(zhǔn)溶液裝在1cm的吸收池內(nèi)在波長(zhǎng)570處 用721型分光