6課程名稱生化實驗甲指導老師成績

1、實驗課程名稱： 生化實驗（甲）指導老師：成績：_實驗名稱：酶的基本性質實驗底物專一性、激活劑和抑制劑、最適溫度（. 影響酶活性的激活劑和抑制劑）實驗類型： 同組學生： 陳頌贊、一、實驗目的和要求（必填）二、實驗內容和原理（必填）三、實驗材料與試劑（必填）四、實驗器材與儀器（必填）五、操作方法和實驗步驟（必填）六、實驗數據和處理七、實驗結果與分析（必填）八、心得一、實驗目的和要求1. 了解激活劑和抑制劑對酶促反應速度的影響。2. 學習檢定激活劑和抑制劑影響酶促反應速度的原理和方法。二、實驗內容和原理在酶促反應過程中，酶的活性常受某些物質的影響，有些物質能使酶的活性增加，稱為激活劑；某些物質它們并

2、不引起酶蛋白變性，但能使酶分子上的某些必需基團（主要是指酶活性中心上的一些基團）發(fā)生變化，因而引起酶下降，甚至喪失，致使酶反應速度降低，稱為酶的抑制劑。酶的激活劑種類：1、一些簡單的無機離子，如Mg2+、Cl-等；2、一些中等大小的有機分子，如抗壞血酸等也是激活劑，它們對某些含巰基的酶具有激活作用；3、有些酶的催化作用易受某些抑制劑的影響，因而能除去抑制劑的物質也可稱為激活劑，如 EDTA能除去重金屬，因而能解除重金屬對酶的抑制作用。4、具有蛋白質性質的大分子物質，這些激活劑是指可對某些無活性的酶原起作用的酶。酶的抑制劑有許多種：如重金屬離子（Ag+、Hg2+、Pb2、Cu2等）、CO、氯化物

3、、H2S、砷化物、氟化物、生物堿、有機磷等都是抑制劑。少量的激活劑或抑制劑就能影響酶的活性，而且常具有特異性。值得注意的是激活劑和抑制劑不是，各種激活劑對酶的作用是不同的。本實驗利用淀粉被水解的不同階段產物與碘有不同顏色反應，定性觀察唾液淀粉酶在酶促反應中激專業(yè)：生物科學：學號：3130000985日期：2014.11.4地點：生物實驗中心裝訂線活或抑制現象。淀粉經酶促水解為葡萄糖的不同階段的產物與碘作用的顏色反應如下：淀粉紫色糊精紅色糊精無色糊精麥芽糖葡萄糖I2顯藍色顯紫色顯紅色不顯色不顯色不顯色（碘色）（碘色）（碘色）仍為多糖（無還原性）（有還原性）本實驗中，Cl-為唾液淀粉酶的激活劑；C

4、u2+為唾液淀粉酶的抑制劑。利用淀粉被水解的不同階段產物與碘有不同的呈色反應，定性觀察唾液淀粉酶在酶促反應中激活和抑制現象。淀粉 + 碘藍色水解的程度是通過水解混合物遇碘溶液所呈現的顏色之變化來判斷的。三、實驗材料與試劑1、實驗材料新鮮唾液2、實驗試劑 唾液淀粉酶（學生）取唾液 1ml 至 50ml 量筒中，用蒸餾水稀釋至 50ml，用棉花過濾備用。唾液稀釋倍數因人而異，可稀釋 50400 倍，甚至更高。0.1%淀粉溶液1.0%氯化鈉溶液1.0%硫酸銅溶液1.0%硫酸鈉溶液碘化鉀-碘液四、實驗器材與儀器裝訂線1.試管及試管架2.量筒3.漏斗4.脫脂棉花5.點滴板6.吸量管7.恒溫水?。?7）五

5、、操作方法和實驗步驟取試管 4 支，按下表操作：注意： 找出準確的保溫時間，是本實驗是實驗能否成功的關鍵步驟之一，唾液淀粉酶液濃度可根據個人情況而定，通過 37水浴溶保溫計時，反應時間最好在 815min 以內，只有確定準確的保溫時間才能進行實驗。 加入酶液后，務必充分搖勻，保證酶與全部淀粉液接觸的反應才能得到理想的顏色梯度變化結果。 碘化鉀碘液不要過早地加到點滴板上，以免碘液揮發(fā)，影響顯色效果。六、實驗數據和處理裝訂線試管試劑處理12340.1%淀粉溶液(ml)33331% 硫酸銅溶液(ml)11% 氯化鈉溶液(ml)11% 硫酸鈉溶液(ml)1蒸餾水(ml)1唾液淀粉酶(ml)1111混勻

6、，37恒溫水浴，保溫 10min碘化鉀-碘液（滴）1111觀察結果深藍色淡黃色深藍色紅棕色七、實驗結果與分析一號管顏色最深說明銅離子對唾液淀粉酶有較強的抑制性；二號管顏色最淺說明氯離子對唾液淀粉酶有促進作用；3 號管顏色介于 4 號（蒸餾水）與 1 號之間，但比理論色深，說明鈉離子對唾液淀粉酶有一定抑制作用，而且本實驗用的酶不夠強或稀釋倍數過高。八、心得激活劑可分哪幾類？本實驗中 NaCl、硫酸銅是屬于哪種類型？答：激活劑可分為：簡單無機離子、中等大小有機分子、能出去抑制劑的物質、具有蛋白質性質的大分子物質等。NaCl 屬于簡單無機離子；CuSO4 屬于重金屬抑制劑。本實驗中，1，2，3，4 管各有何用意？為什么要設計第 3 管和第 4 管？答：第 4 管作為空白對照；第 3 管用以證明 Na+ 和 SO42- 不影響淀粉酶的活性；第 2 管證明 Cl-對于淀粉酶是激活劑；第 1 管證明 Cu+對于淀粉酶是抑制劑。抑制劑與變性