人血涂片的制作

1、人血涂片的制作第1頁，共13頁，2022年，5月20日，12點(diǎn)20分，星期日 血涂片的顯微檢查是血液細(xì)胞學(xué)檢查的基本方法，臨床上應(yīng)用極為廣泛，制備厚薄適宜，分布均勻，染色良好的血涂片是血液學(xué)檢查的重要基本技術(shù)之一。 涂片法制片是生物顯微制片的基本方法之一。第2頁，共13頁，2022年，5月20日，12點(diǎn)20分，星期日可分5個(gè)步驟進(jìn)行消毒取血推片染色觀察步驟第3頁，共13頁，2022年，5月20日，12點(diǎn)20分，星期日消毒與取血 消毒 先按摩取血部位，使血流通暢；再用酒精消毒采血針和取血部位（如指尖）。 取血 待酒精干后，刺破皮膚，使血自然流出，勿擠。取干凈載片，讓血滴在離載片一端中45毫米處，

2、注意手指持握載片的邊緣，勿觸及其表面。不能使載片接觸取血部位的皮膚。第4頁，共13頁，2022年，5月20日，12點(diǎn)20分，星期日推片 取一塊邊緣光滑的載片做推片。將其一端置于血滴前方，向后移動(dòng)到接觸血滴，使血液均勻分散在推片與載片的接觸處。然后使推片與載片呈3040角，向另一端平穩(wěn)地推出，如右圖所示。涂片推好后，迅速在空氣中搖，使之自然干燥。第5頁，共13頁，2022年，5月20日，12點(diǎn)20分，星期日染色 用特種玻璃鉛筆在血膜兩側(cè)畫兩條線，防止染液外溢。再將瑞氏染液(伊紅-亞甲基藍(lán))滴在血膜上，至染液淹沒全部血膜，染半分鐘。加等量蒸餾水(或緩沖液)與染液混合再染5分鐘。最后用蒸餾水把染液沖

3、掉，用吸水紙吸干，自然干燥后，即可觀察。第6頁，共13頁，2022年，5月20日，12點(diǎn)20分，星期日觀察紅細(xì)胞 淡紅色，無核的圓形細(xì)胞，因紅細(xì)胞為雙凹形，故邊緣部分染色較深，中心較淺，直徑7-8微米。顆粒白細(xì)胞 嗜中性顆粒白細(xì)胞：體積略大于紅細(xì)胞，細(xì)胞核被染成紫色分葉狀，可分1-5葉。直徑10-12微米。 嗜酸性顆粒白細(xì)胞：略大于嗜中性白細(xì)胞，細(xì)胞核染成紫色，通常為2葉，胞質(zhì)充滿嗜酸性大圓顆粒，被染成鮮紅色。直徑10-15微米。 嗜堿性顆粒白細(xì)胞：體積略小于嗜酸性白細(xì)胞，細(xì)胞質(zhì)中有大小不等被染成紫色的顆粒，顆粒數(shù)目較嗜酸性白細(xì)胞的顆粒少，核1-2葉，染成淡藍(lán)色。直徑10-11微米。第7頁，共

4、13頁，2022年，5月20日，12點(diǎn)20分，星期日無顆粒白細(xì)胞 淋巴細(xì)胞：可觀察到中、小型兩種。小淋巴細(xì)胞與紅細(xì)胞大小相似，圓形，核致密，染成深紫色。周圍僅一薄層嗜堿性染成淡藍(lán)的細(xì)胞質(zhì)。中淋巴細(xì)胞較大，核圓形。直徑6-8微米。 單核細(xì)胞：體積最大，細(xì)胞圓形。胞質(zhì)染成灰藍(lán)色。核呈腎形或馬蹄形，染色略淺于淋巴細(xì)胞的核。直徑14-20微米。 血小板 血小板為不規(guī)則小體，直徑2 - 3微米。其周圍部分淺藍(lán)色，中央有細(xì)小的紫紅色顆粒，聚集成群。 第8頁，共13頁，2022年，5月20日，12點(diǎn)20分，星期日第9頁，共13頁，2022年，5月20日，12點(diǎn)20分，星期日第10頁，共13頁，2022年，5

5、月20日，12點(diǎn)20分，星期日第11頁，共13頁，2022年，5月20日，12點(diǎn)20分，星期日注意事項(xiàng)玻片的清洗：新玻片常有游離堿質(zhì),因此應(yīng)用清洗液或10%鹽酸浸泡24h,然后再?gòu)氐浊逑?。用過的玻片可放入適量肥皂水或合成洗滌劑的清水中煮沸20min,再用熱水將肥皂和血膜洗去,用自來水反復(fù)沖洗,必要時(shí)再置95%乙醇中浸泡1h,然后擦干或烤干備用。使用玻片時(shí)只能手持玻片邊緣,切勿觸及玻片表面,以保持玻片清潔,干燥,中性、無油膩。一張良好的血片,要求厚薄適宜,頭體尾分明,分布均勻,邊緣整齊, 兩側(cè)留有空隙。血片制好后最好立即固定染色,以免細(xì)胞溶解和發(fā)生退行性變。血膜未干透,細(xì)胞尚未牢固附在玻片上,在染色過程中容易脫落, 因此血膜必需充分干燥。第12頁，共13頁，2022年，5月20日，12點(diǎn)20分，星期日注意事項(xiàng)細(xì)胞染色對(duì)氫離子濃度十分敏感,在染色過程中玻片必須化學(xué)清潔,配制瑞氏染液必須用優(yōu)質(zhì)甲醇,稀釋染液必須用緩沖液,沖洗用水應(yīng)近中性, 否則各種細(xì)胞染色反應(yīng)異常,致使細(xì)胞的識(shí)別困難,甚至造成錯(cuò)誤。染色時(shí)間與染液濃度,室溫高低,細(xì)胞多少有關(guān)。染液越淡,室溫越低, 細(xì)胞越多,所需染色時(shí)間越長(zhǎng)或應(yīng)適當(dāng)增加染液量,因此染色時(shí)間應(yīng)視具體情況而定。特別是更換新染料時(shí)必須經(jīng)試染,摸索最佳染色條件。