不同產(chǎn)地巖黃連中總生物堿和脫氫卡維丁的比較研究

1、不同產(chǎn)地巖黃連中總生物堿和脫氫卡維丁的比擬研究【關(guān)鍵詞】巖黃連生物堿脫氫卡維丁高效液相色譜StudyfTtalAlkalidsandDehydravidineinrydalisSaxilaBuntingfrDifferentAreasAbstrat:bjetiveTestablishaethdfrthententdeterinatinfttalalkalidsanddehydravidineinrydalissaxilaBunting,andanalyzethetntentsfrdifferentareas.ethdsDehydravidineasthestandardandusingultr

2、aviletspetrphtetertdeterinethententfttalalkalids.HPLasperfredntheLihrspher-18lun;0.011/LKH2P4(pH=3)-H3N(7525)servedasbilephaseandthedetetinavelengthasat283n,thelunteperatureat30andtheflratebEing1.0l/in,tdeterinethententfdehydravidine.ResultsThententsfttalalkalidsanddehydravidinefrGuangxiandGuizhuere

3、higher,andthesetntentsfrGuangxiererestable.nlusinThisethdissiple,sensitive,speifiandanbeusedfrthequalityntrlfrydalissaxilaBunting,andthequalityfrGuangxiisbetterandstable.Keyrds:rydalissaxilaBunting；Alkalids；Dehydravidine；HPL巖黃連為罌粟科植物石生黃堇rydalissaxilaBunting的全草，因其具有近似黃連的成效，且生長(zhǎng)于巖縫中或巖石旁，故得此名，是黔、桂高寒山區(qū)珍貴

4、的中草藥材。本品味苦、性涼，具有清熱解毒、利濕、止痛止血之成效，主治肝炎、口舌腐敗、火眼、目豁、痢疾、腹瀉、腹痛、痔瘡出血等1。巖黃連中主要有效成分是以脫氫卡維丁為代表的生物堿類化合物。而這類化合物具有潛在的抗HBV活性和肝保護(hù)活性。本研究首次采用分光光度法和HPL法對(duì)我國(guó)廣西、貴州、四川3個(gè)主要產(chǎn)地的巖黃連中總生物堿和脫氫卡維丁的量進(jìn)展測(cè)定。結(jié)果證明，采用分光光度法和HPL法分析測(cè)定巖黃連藥材中總生物堿和脫氫卡維丁的量，方法可行，結(jié)果穩(wěn)定，為巖黃連藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)和控制及資源的綜合利用提供了有效的方法和根據(jù)。1儀器與材料Agilet1100系列高效液相色譜儀，VD檢測(cè)器，hestatinsys

5、te工作站，752紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)。脫氫卡維丁對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，111667-202201)。巖黃連購(gòu)自藥材市場(chǎng)，產(chǎn)地分別為廣西、貴州、四川。經(jīng)本院中藥鑒定教研室陳建偉教授鑒定，均為罌粟科植物石生黃堇rydalissaxilaBunting的全草。2方法與結(jié)果2.1總生物堿的測(cè)定2.1.1供試品溶液的制備將巖黃連藥材粉碎，過(guò)20目篩，取粉末約0.1g，精細(xì)稱定，置具塞錐形瓶中，精細(xì)參加1%Hl的甲醇溶液25l，稱定，超聲處理40in，冷卻后補(bǔ)足重量，搖勻，過(guò)濾，取續(xù)濾液125l量瓶中，用1%Hl的甲醇溶液定容，作為供試品溶液。2.1.2測(cè)定波長(zhǎng)的選擇對(duì)照品溶液及供試品溶液在2

6、00700n掃描，發(fā)現(xiàn)均在347n處有最大吸收峰，以此作為檢測(cè)波長(zhǎng)。2.1.3線性范圍考察精細(xì)稱取脫氫卡維丁對(duì)照品13.0g，置25l量瓶中，用1%Hl的甲醇溶液定容至25l，配成0.52g/l的貯備液。精細(xì)量取上述貯備液1.0l置10l量瓶中，參加1%Hl的甲醇溶液至刻度，搖勻，配制成每毫升含有52g對(duì)照品溶液。分別取對(duì)照品溶液0.50，1.00，1.50，2.00，2.50l于10l量瓶，參加1%Hl的甲醇溶液至刻度，搖勻后于347n處測(cè)吸光度。以濃度為縱坐標(biāo)，以吸光度為橫坐標(biāo)進(jìn)展線性回歸，得回歸方程Y=64.62X-0.021，r=0.9992，線性范圍為2.613.0g/l。2.1.4

7、精細(xì)度實(shí)驗(yàn)取濃度為7.8g/l對(duì)照品溶液，重復(fù)操作5次，測(cè)得吸光度，RSD為0.5%。2.1.5供試品溶液穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取同一供試品溶液，分別于0，1，2，4，6，8，12，24h進(jìn)展顯色測(cè)定，吸光度的RSD為0.9%，說(shuō)明供試品溶液在24h內(nèi)根本穩(wěn)定。2.1.6重復(fù)性實(shí)驗(yàn)稱取同一批樣品(廣西巖黃連)粗粉6份，按上述方法制備樣品并測(cè)定含量，測(cè)得總生物堿的RSD為1.1%。2.1.7加樣回收率實(shí)驗(yàn)精細(xì)稱取已測(cè)知含量的巖黃連(廣西巖黃連)粗粉9份，每3份一組，按樣品中總生物堿含量的120%，100%，80%3個(gè)程度分別精細(xì)參加脫氫卡維丁對(duì)照品溶液，然后按供試品溶液的制備項(xiàng)下制備，測(cè)定結(jié)果，平均加樣回收

8、率為99.3%，RSD=2.3%。2.2脫氫卡維丁含量測(cè)定2.2.2供試品溶液的制備將巖黃連藥材粉碎，過(guò)20目篩，取粉末約0.1g，精細(xì)稱定，置25l量瓶中，參加1%Hl的甲醇溶液約20l，超聲處理40in，冷卻后定容，搖勻，過(guò)微孔濾膜(0.45)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。2.2.3線性范圍考察精細(xì)稱取脫氫卡維丁對(duì)照品13.0g，置25l量瓶中，用1%Hl的甲醇溶液定容至25l，配成0.52g/l的貯備液。分別取貯備液0.50，1.00，1.50，2.00，2.50l于10l量瓶，參加1%Hl的甲醇溶液至刻度，分別汲取不同濃度的對(duì)照品溶液進(jìn)樣，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)，進(jìn)展線性回歸

9、，得回歸方程Y=33.05X-34.12，r=0.9997?？梢?jiàn)脫氫卡維丁在26130g/l范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。2.2.4精細(xì)度實(shí)驗(yàn)取濃度為78g/l對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)得峰面積，RSD為0.72%。2.2.5供試品溶液穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取同一供試品溶液，分別于0，1，2，4，6，8，12，24h進(jìn)樣，測(cè)得峰面積，RSD為1.21%，說(shuō)明供試品溶液在24h內(nèi)根本穩(wěn)定。2.2.6重復(fù)性實(shí)驗(yàn)稱取同一批樣品(廣西巖黃連)粗粉6份，按上述方法制備樣品并測(cè)定含量，測(cè)得脫氫卡維丁含量的RSD為1.73%。2.2.7加樣回收率實(shí)驗(yàn)精細(xì)稱取已測(cè)知含量的巖黃連(廣西巖黃連)粗粉9份，每3份一組，按樣品中脫氫

10、卡維丁含量的120%，100%，80%3個(gè)程度分別精細(xì)參加脫氫卡維丁對(duì)照品溶液，然后按供試品溶液制備方法制備，測(cè)定結(jié)果，平均加樣回收率為100.3%，RSD=2.1%。2.3樣品測(cè)定將不同產(chǎn)地巖黃連樣品，分別按總生物堿及脫氫卡維丁測(cè)定方法測(cè)定，計(jì)算含量。結(jié)果見(jiàn)表1。表1不同產(chǎn)地巖黃連的總生物堿及脫氫卡維丁含量略3.1對(duì)照品的選擇巖黃連藥材中含有脫氫卡維盯鹽酸小檗堿、黃連堿、脫氫阿卟卡維盯脫氫異阿卟卡維盯脫氫斯氏紫堇堿、巴馬盯四氫巴馬丁等多種生物堿，但脫氫卡維丁又名巖黃連堿，為巖黃連中特有成分，且在藥材中含量較高，又比擬容易得到，應(yīng)選擇測(cè)定藥材中脫氫卡維丁的含量，并以脫氫卡維丁為對(duì)照測(cè)定藥材中總生物堿的含量。實(shí)驗(yàn)證明此方法可以有效的對(duì)巖黃連藥材的質(zhì)量進(jìn)展控制。3.2樣品溶液制備方法的考察根據(jù)巖黃連中所含生物堿類化合物的性質(zhì)，選擇了鹽酸、醋酸、磷酸的甲醇溶液為提取溶劑，其中鹽酸的甲醇提取效率較高，提取方法考察了熱回流、冷浸、索氏提娶超聲提取等，以冷浸法提取效率最低，其它三種根本一致，考慮操作的簡(jiǎn)便易行，因此本實(shí)驗(yàn)采用了鹽酸甲醇超聲提齲同時(shí)又利用正交試驗(yàn)法對(duì)提取次數(shù)、提取時(shí)間、提取溶劑的用量、鹽酸的濃度進(jìn)展考察，確定了本文的提取方法。3.3巖黃連總生物