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文檔簡介

1、PAGE PAGE 8附件1 河北省 初篩實(shí)驗(yàn)室HIV抗體檢測標(biāo)本登記表標(biāo)本編號姓名性別年齡地 址初篩試劑及結(jié)果初篩日期檢驗(yàn)者報(bào)告日期備注附件2 河北省 初篩中心實(shí)驗(yàn)室HIV抗體檢測接收標(biāo)本登記表標(biāo)本編號姓名性別年齡地 址送檢單位聯(lián)系人及電話驗(yàn)收人初篩試劑及結(jié)果初篩日期送檢日期方法及結(jié)果報(bào)告日期附件3 HIV抗體檢測試驗(yàn)記錄 編號試劑名稱:生物梅里埃試驗(yàn)方法:批號: 效期:室溫: 孵育溫度: 實(shí)驗(yàn)日期:標(biāo)本人群: 標(biāo)本數(shù):試驗(yàn)起始時(shí)間:送檢單位: 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)間:檢測者: 復(fù)核者:實(shí)驗(yàn)步驟:樣品、試劑、酶標(biāo)板條室溫平衡 分鐘。取 條板條,放在板架上,撕去板條上的封條。在所有板孔中參加100L的樣

2、品稀釋液,包括要做質(zhì)控的板孔。在確定的板孔中參加50L的標(biāo)本或質(zhì)控。設(shè)3個(gè)陰性對照和1個(gè)HIV1陽性對照、1個(gè)HIV2陽性對照。在參加標(biāo)本之后參加質(zhì)控,并填寫加樣順序表(見下表)。在微板上蓋上貼膜,洗板前撕去貼膜,37孵育60分鐘。在進(jìn)行孵育的過程中,準(zhǔn)備以下試劑:1洗液1:25:濃磷酸鹽緩沖液 ml,加蒸餾水 ml 。2TMB底物液1:1:TMB ml,尿過氧化物 ml。臨用前配制31M硫酸:取 濃硫酸98%濃硫酸相當(dāng)于18M,加蒸餾水 ml。磷酸鹽緩沖液浸泡板孔60秒,洗板機(jī)洗板,洗6次。每孔參加100LTMB底物液,不要混勻或振蕩,棄去多余的TMB底物液。室溫 環(huán)境中孵育30分鐘,閉光顯

3、色。每孔參加100L 1M硫酸,終止反響。在450nm和620nm雙波長讀取每孔的吸光度,并打印結(jié)果。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12ABCDEFGH結(jié)果分析: 呈陽性反響,需復(fù)檢;其余均為陰性反響。河北省性病艾滋病預(yù)防監(jiān)測中心HIV抗體檢測試驗(yàn)記錄 編號試劑名稱:金豪試驗(yàn)方法:批號: 效期:室溫: 孵育溫度: 實(shí)驗(yàn)日期:標(biāo)本人群: 標(biāo)本數(shù):試驗(yàn)起始時(shí)間:送檢單位: 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)間:檢測者: 復(fù)核者:實(shí)驗(yàn)步驟:1樣品、試劑、酶標(biāo)板條室溫平衡30分鐘。2將酶聯(lián)反響板從密封袋中取出,取下 條板條,放在板架上。按順序編號,設(shè)一個(gè)空白對照孔,兩個(gè)陽性對照孔,兩個(gè)陰性對照孔。 3每孔

4、參加50l樣品稀釋液,取陽性對照和陰性對照分別充分混勻后各50l參加對照孔中,空白對照孔只加樣品稀釋液,其余每個(gè)孔加待檢血清50l,要先加樣品,后加對照輕輕振蕩,充分混勻。并填寫加樣順序表(見 表)。4用不干膠封片封蓋反響板,置37溫育30分鐘。5溫育期間配制洗滌液:取20洗滌液 ml,加蒸餾水 ml。6撕去貼膜,用洗滌液洗5次,然后在吸水紙上拍干。7除空白孔外每孔加酶標(biāo)抗原100l,用不干膠片封蓋反響板。37溫育30分鐘。8. 洗板5次(同步驟6),拍干。9每孔加顯色劑A50l ,顯色劑B50l,輕輕振蕩后置37暗處顯色10分鐘,每孔加終止劑50l。10選擇酶標(biāo)儀450nm和620 nm雙波

5、長測定,用空白孔調(diào)零點(diǎn),測定各孔的吸光度。并打印結(jié)果。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12ABCDEFGH結(jié)果分析: 呈陽性反響,需復(fù)檢;其余均為陰性反響。河北省性病艾滋病預(yù)防監(jiān)測中心HIV抗體檢測試驗(yàn)記錄 編號試劑名稱:上??迫A試驗(yàn)方法:批號: 效期:室溫: 孵育溫度: 實(shí)驗(yàn)日期:標(biāo)本人群: 標(biāo)本數(shù):試驗(yàn)起始時(shí)間:送檢單位:試驗(yàn)結(jié)束時(shí)間:檢測者: 復(fù)核者:實(shí)驗(yàn)步驟:1將試劑盒、樣本室溫平衡30分鐘;2取 條板條,固定于支架,按順序編號,設(shè)2個(gè)空白對照,3個(gè)陰性對照和2個(gè)HIV陽性對照??瞻讓φ湛撞患訕悠泛兔附Y(jié)合物,只加底物和終止液。在確定的板孔中參加100L的標(biāo)本或質(zhì)控要先

6、加樣品,后加對照。并填寫加樣順序表(見表);3覆蓋粘膠紙,置37孵育60分鐘;4按1:25的比例稀釋洗滌液,取 ml洗滌液,參加 ml蒸餾水; 5取出已孵育完畢的反響板,棄去粘膠紙,吸干板內(nèi)液體;6將洗滌液注滿每孔(約300l孔),吸干,反復(fù)5次,在干凈紗布上將板拍干;7每孔加酶結(jié)合物1OOl,取新粘膠紙覆蓋反響板,置37孵育30分鐘;8洗滌同步驟5、6;9每孔參加底物緩沖液50l、TMB50l,混勻,置37顯色lO分鐘;10加終止液50l振蕩反響板5秒鐘,使之充分混勻;11在酶標(biāo)讀數(shù)儀中,取波長450nm(建議使用雙波長酶標(biāo)儀比色,參考波長630nm), 以空白對照孔校零,讀取每孔吸收值(加

7、終止液后,務(wù)必在15分鐘內(nèi)讀數(shù)完畢)。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12ABCDEFGH結(jié)果分析: 呈陽性反響,需復(fù)檢;其余均為陰性反響。附件4HIV抗體檢測試驗(yàn)記錄 編號試劑名稱:萬泰試驗(yàn)方法:酶聯(lián)免疫批號: 效期:室溫:25C 孵育溫度:37C 實(shí)驗(yàn)日期:標(biāo)本人群: 標(biāo)本數(shù):試驗(yàn)起始時(shí)間:送檢單位: 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)間:檢測者: 復(fù)核者:實(shí)驗(yàn)步驟:樣品、試劑、酶標(biāo)板條室溫平衡15- 30 分鐘。取 條板條,放在板架上,撕去板條上的封條。在每孔中參加100l酶標(biāo)試劑,空白孔除外 。在確定的板孔中參加20l的標(biāo)本或陰陽性對照,震蕩混勻。設(shè)1個(gè)空白對照,3個(gè)陰性對照和2個(gè)HIV 陽性對照 ,并填寫加樣順序表(見下表)。在微板上蓋上貼膜洗板前撕去貼膜,37孵育60分鐘。 配制洗滌液,取10濃縮洗滌液 ml,加去離子水 ml1:10稀釋備用。磷酸鹽緩沖液浸泡板孔60秒,洗板機(jī)洗板,每孔6次程序已編號。每孔參加顯色劑A、B各50l,輕輕振蕩混勻 。封板膜封板后37閉光顯色30分鐘 。每孔參加100l終止液,輕輕振蕩混勻,終止反響。在450nm和620nm雙波長讀取每孔的吸光度,并打印結(jié)果。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12ABCDEFGH結(jié)果分析: 呈陽性反響,需復(fù)檢;其余均為陰性反響。附件5HIV抗體檢測試驗(yàn)記錄 20 21 22 2

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