丹皮酚的提取

1、總提取物收率X二、丹皮酚的提取純化丹皮酚是中藥材丹皮的主要成分之一，含量約為2-3，屬揮發(fā)性成分，能隨水氣揮發(fā)，實驗中采用揮發(fā)油提取裝置提取丹皮酚。稱取丹皮藥材約置圓底燒瓶中，加入水，搭好裝置，熱回流提取，將收集蒸餾液冷卻至室溫，冰浴析出結(jié)晶。剪取合適大小濾紙置于布氏漏斗中，先以水潤濕，將含結(jié)晶溶液以玻璃棒攪拌后緩慢傾入布氏漏斗中，抽濾，以初濾液洗滌結(jié)晶，抽干后將結(jié)晶轉(zhuǎn)移至已知重量表面皿中，記錄結(jié)晶重量。本實驗是以超臨界二氧化碳對牡丹皮內(nèi)部成份牡丹酚進行萃取條件建立并以分析牡丹酚含量最后進行有效成分測試。實驗發(fā)現(xiàn)當(dāng)萃取一定比例的丹參、丹皮的飲片或粉末，以水或任意比例的醇水或酮水進行低溫加熱提取

2、或滲漉或水蒸氣蒸餾，提取液經(jīng)濃縮后，過濾，行大孔吸附樹脂，以水洗去雜質(zhì)后，以任意比例的醇水洗脫至有效成分完全，減壓回收乙醇，干燥得到丹參或丹皮制備物粉末；或餾出液經(jīng)冷卻放置結(jié)晶，得丹皮酚粗品牡丹皮是毛莫科植物牡丹的干燥根皮。其主要有效成分包括丹皮酚、丹皮酚苷、丹皮酚原苷、丹皮酚新苷、芍藥苷等。中國藥典200年0版一部收載的含牡丹皮的成方制劑共32個，占所收載成方制劑的7.0，可%見牡丹皮屬于常用中藥。但在這個成方制劑中，僅有個經(jīng)過提取處理（占）,其余個均為藥材粉碎直接使用，這種現(xiàn)狀難以滿足現(xiàn)代用藥的要求，需要對牡丹皮藥材進行提取，以“去粗取精”因主要有效成分丹皮酚具有升華性，其升華點低（C）,

3、易揮發(fā)，故在減少丹皮酚損失的同時盡可能多的提取他成分以保證綜合治療效果，是牡丹皮藥材提取應(yīng)考慮的問題。本實驗對牡丹皮的幾種提取方法進行了比較，并對其生產(chǎn)實用性進行探討，以期能為該藥材及含該藥材復(fù)方的提取工藝提供參考。1儀器與試藥超臨界流體萃取裝置（德陽四創(chuàng)科技有限公司），島津型紫外光譜儀，型控溫電熱套（山東華魯儀器廠），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海申順生物制品有限公司）。，牡丹皮藥材購自成都市荷花池藥材市場（產(chǎn)地為江蘇鎮(zhèn)江），經(jīng)作者鑒定為毛莨科植物牡丹的干燥根皮。其他試劑均為分析純。方法與結(jié)果2.1牡丹皮藥材中丹皮酚的含量測定為計算提取工藝中丹皮酚的轉(zhuǎn)移率，需測定藥材中的丹皮酚含量。取牡丹皮粗粉3份，每份

4、約0.2精9密9稱定，照中國藥典200年0版一部牡丹皮藥材含量測定項下操作。平行測定次，結(jié)果丹皮酚含量為（），符合藥典規(guī)定（三）。2.2牡丹皮的幾種提取工藝比較醇提法據(jù)文獻工藝條件略作改進：牡丹皮藥材乙醇回流，提取次，每次，提取液合并，濾過測定體積。精密吸取濾液藥典法測定丹皮酚量，并計算丹皮酚總量。取上述濾液于已知重量的蒸發(fā)皿中，水浴揮干并恒重，計算浸膏總量。同法操作次,提取物總量、總提取物收率、丹皮酚的提取率及轉(zhuǎn)移率見表1提取物總量=浸膏總量丹皮酚總量總提取物收率X藥材用量丹皮酚提取量丹皮酚的提取率=X藥材用量丹皮酚提取量丹皮酚的轉(zhuǎn)移率=X丹皮酚含量（2.80%）表1各提取方法的提取情況比較

5、總提取物丹皮酚提丹皮酚轉(zhuǎn)含酚苷類提取方法上率/%取率/%移率/%情況醇提法12.662.4587.5蒸餾-煎煮法13.512.2680.5超臨界萃取法7.280.3111.1煎煮法7.561.1541.1+酚苷類成分鑒別：另取相當(dāng)于藥材的濾液，水浴揮干（除去丹皮酚，因丹皮酚遇乙醇溶液也顯紫色），殘渣加無水乙醇溶解，滴加乙醇溶液滴，振搖，溶液變?yōu)樽霞t色，說明提取液中含有酚苷類成分（鞣質(zhì)遇顯藍色或綠色，不干擾鑒別）蒸餾煎煮法取牡丹皮藥材約加倍量的水直接蒸餾，收集藥材倍量的餾出液，加攪拌溶解，冷藏過夜，濾過收集丹皮酚晶體，低溫干燥后稱重。蒸餾后的藥液濾過備用，藥渣再加倍量的水回流提取，濾過，合并濾液

6、并測定體積。取濾液于已知量的蒸發(fā)皿中，水浴揮干并恒重，計算浸膏總量和提取物總量。同法操作次，總提取物收率、丹皮酚的提取率及轉(zhuǎn)移率見表1酚苷類成分鑒別：取相當(dāng)于藥材的濾液，正丁醇萃取次，每次。合并萃取液，取水浴揮干，同酚苷類鑒別操作，結(jié)果見表1超臨界流體萃取法牡丹皮藥材用超臨界流體萃取裝置萃取，條件如下:萃取溫度C、萃取壓力，解析溫度C,解析壓力，萃取時間，流量-提取物為淡紅棕色液體，重總收率為2冷藏后自動分層，上層為淡黃色液體，下層為淡紅棕色固體，與文獻報道基本相符。提取物加適量乙醇，使其溶解成均一溶液，轉(zhuǎn)人量瓶中，乙醇稀釋至刻度。精密吸取該溶液，藥典法測定丹皮酚量，計算丹皮酚總量，丹皮酚的提

7、取率及轉(zhuǎn)移率見表1酚苷類成分鑒別：取定容后的溶液水浴揮干，同酚苷類鑒別的最后操作，結(jié)果見表1煎煮法據(jù)文獻條件略作改進：牡丹皮藥材加入到倍量的沸水中，煎煮濾過，藥渣同法再煎煮次，濾過，合并濾液并測定體積。取濾液，藥典法測定其丹皮酚量，計算丹皮酚總量。提取物總量的測定同蒸餾一煎煮法的提取物總量測定。同法操作3次，總提取物收率、丹皮酚的提取率及轉(zhuǎn)移率見表1酚苷類成分鑒別：同蒸餾一煎煮法的酚苷類鑒別。結(jié)果見表1。3結(jié)論與討論3.1藥材的提取工藝評價是一件復(fù)雜的工作，需要多方面綜合考慮。以牡丹皮為例，對很多疾病而言，藥材中的丹皮酚是主要有效成分，但其他成分所起的作用如何還不很清楚；對另總提取物收率X外的

8、疾病而言，芍藥苷又成了主要有效成分，所以僅以某一種或幾種成分對所有的提取工藝進行評價未免有失偏頗，而應(yīng)根據(jù)不同治療目的進行有針對性的提取，同時又盡可能多地保留各成分，以確保其療效。3.2醇提法提取工藝簡單，有效成分提取多，似應(yīng)為牡丹皮提取的最佳方法，但問題在于醇提液的后處理困難，因丹皮酚的揮發(fā)性強，實際生產(chǎn)中難于僅除去乙醇而不損失較多的丹皮酚。為測定回收乙醇損失的丹皮酚，進行了試驗。取上述醇提液，置圓底燒瓶中，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓回收乙醇，溫度5,濃縮至相對密度為C）。取濃縮物，藥典法測定其丹皮酚量，結(jié)果表明丹皮酚損失率為.故醇提法不適用于牡丹皮的提取。3.3蒸餾-煎煮法是指先蒸餾提取揮發(fā)性成分，

9、藥渣再加水提取的方法，適用于含揮發(fā)性成分藥材的提取。丹皮酚隨水餾出后，在冷藏狀態(tài)下大量析出，濾過干燥即可用于成型，保存方便且轉(zhuǎn)移率較高；水提液經(jīng)醇沉除雜后，也較易成型。蒸餾煎煮法丹皮酚及總提取物收率均較高，兼顧了多種成分的提取，工藝簡便，是牡丹皮提取的一種切實可行的方法。實驗室最佳工藝蒸餾丹皮酚的時間為，中試時為了充分提取丹皮酚，將時間延長為。為考察提取物的熱穩(wěn)定性，對蒸餾得到的丹皮酚用藥典法及峰面積歸一化法測定其純度，結(jié)果均大于；水提液部分以芍藥苷為指標(biāo)進行了鑒別，在提取物中可檢出芍藥苷。說明在提取時間內(nèi)，丹皮酚及苷類成分的穩(wěn)定性不受影響。在蒸餾煎煮法餾出液中加入藥材量的，可以促使丹皮酚更多地從餾出液中析出。文獻報道是采用重蒸餾法，即餾出液收集晶體后，濾液加入藥材量的再蒸餾。重復(fù)該方法，丹皮酚總提取率為2.2，0略的低于改進后的方法，且在餾出液中直接加入N，操作更簡單，因此采用改進后的方法。超臨界流體萃取法提取的丹皮酚量少，遠低于文獻報道值，但該方法能萃取出大量脂溶性成分，加上萃取溫度低、提取分離可一次完成，具有其鮮明的特點。因是非極性物質(zhì)而酚苷類成分極性較大，故未能將該類萃取出來，這也是導(dǎo)致總提取物收率較低的一個原因。為提高丹皮酚及酚苷類成分的收率，并保持本方法的提取特點，可考慮進一步優(yōu)化提取條件并加入夾帶