體外診斷試劑臨床試驗(yàn)※仁濟(jì)-糖化白蛋白檢測(cè)試劑盒（酶法）-臨床試驗(yàn)報(bào)告

1、糖化白蛋白檢測(cè)試劑盒（酶法）臨床試驗(yàn)報(bào)告申辦者：XX醫(yī)療科技（中國(guó)）有限公司臨床試驗(yàn)報(bào)告產(chǎn)品通用名稱(chēng)：糖化白蛋白檢測(cè)試劑盒（酶法）試驗(yàn)開(kāi)始日期：2016年4月試驗(yàn)完成日期：2016年5月研究單位：上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院主要研究者：（簽名）試驗(yàn)機(jī)構(gòu)：上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院（蓋章）統(tǒng)計(jì)單位：上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院（蓋章）統(tǒng)計(jì)學(xué)負(fù)責(zé)人：（簽名）申辦單位：XX醫(yī)療科技（中國(guó)）有限公司（蓋章）申辦單位的聯(lián)系人及聯(lián)系方式：報(bào)告日期：2016年5月原始資料保存地點(diǎn)：上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院目錄 TOC o 1-1 h z u HYPERLINK l _Toc451957129

2、臨床試驗(yàn)報(bào)告 PAGEREF _Toc451957129 h 1 HYPERLINK l _Toc451957130 研究報(bào)告摘要 PAGEREF _Toc451957130 h 3 HYPERLINK l _Toc451957132 一、臨床試驗(yàn)背景 PAGEREF _Toc451957132 h 5 HYPERLINK l _Toc451957133 二、產(chǎn)品的檢測(cè)原理及方法 PAGEREF _Toc451957133 h 5 HYPERLINK l _Toc451957134 三、產(chǎn)品的預(yù)期用途 PAGEREF _Toc451957134 h 6 HYPERLINK l _Toc4519

3、57135 四、臨床試驗(yàn)?zāi)康暮蛢?nèi)容 PAGEREF _Toc451957135 h 7 HYPERLINK l _Toc451957136 五、試驗(yàn)總體說(shuō)明 PAGEREF _Toc451957136 h 7 HYPERLINK l _Toc451957137 六臨床試驗(yàn)結(jié)果及統(tǒng)計(jì) PAGEREF _Toc451957137 h 10 HYPERLINK l _Toc451957138 七. 結(jié)論 PAGEREF _Toc451957138 h 13 HYPERLINK l _Toc451957139 附件一：樣本信息記錄表 PAGEREF _Toc451957139 h 14 HYPERLI

4、NK l _Toc451957140 附件二：試驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表 PAGEREF _Toc451957140 h 14 HYPERLINK l _Toc451957141 附件三：相關(guān)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)及信息 PAGEREF _Toc451957141 h 14 HYPERLINK l _Toc451957142 附件四：臨床試驗(yàn)主要研究人員的簡(jiǎn)歷信息 PAGEREF _Toc451957142 h 14研究報(bào)告摘要研究單位：上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院產(chǎn)品名稱(chēng)：糖化白蛋白檢測(cè)試劑盒（酶法）臨床試驗(yàn)類(lèi)別：體外診斷試劑注冊(cè)申請(qǐng)的臨床驗(yàn)證主要研究者：李敏研究目的：驗(yàn)證考核試劑同參比試劑對(duì)于臨床樣本的檢

5、測(cè)一致性樣本數(shù)量：105例（考核試劑與參比試劑相關(guān)性）51例（血清血漿相關(guān)性）共計(jì)156例入選標(biāo)準(zhǔn)：樣本性別不限，年齡不限，隨機(jī)入組；醫(yī)院已經(jīng)檢測(cè)結(jié)束的正常及異常水平的該項(xiàng)目樣本或相關(guān)項(xiàng)目樣本，并有確切臨床診斷信息；正常沒(méi)有相關(guān)疾病的人群的樣本。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸患者的樣本；經(jīng)過(guò)多次反復(fù)凍融的（3次以上）樣本；樣本信息不全或樣本量不足以完成全部試驗(yàn)及存留的樣本；臨床試驗(yàn)時(shí)候認(rèn)為不能入組的樣本，應(yīng)予以排除。試驗(yàn)后如有樣本因不符合要求被剔除，應(yīng)予以說(shuō)明；如剔除樣本后樣本數(shù)量不能滿(mǎn)足試驗(yàn)要求，應(yīng)予以補(bǔ)充樣本，以達(dá)到數(shù)量要求。評(píng)價(jià)指標(biāo)：雙變量相關(guān)性大于0.95。兩種試劑檢測(cè)的結(jié)果做散點(diǎn)圖，

6、分析其線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)，r20.95。試驗(yàn)結(jié)果的偏差95%在偏差均值2SD范圍內(nèi)。Bland-Altman偏倚圖顯示若95%以上的差值在1.96SD范圍內(nèi)，可視為結(jié)果具有一致性。分析和結(jié)論：分析：上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院一共入組156例，其中105例樣本在日立7600全自動(dòng)生化分析儀（使用考核試劑以及參比試劑）上測(cè)定血清中濃度，在日立7600全自動(dòng)生化分析儀上測(cè)定同一樣本中血清與血漿的濃度共51例。其中#215檢測(cè)血清血漿結(jié)果均為負(fù)值，考慮為檢測(cè)儀器誤差所致，因此剔除此樣本，實(shí)際進(jìn)行統(tǒng)計(jì)的樣本數(shù)為50例。其中實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示考核試劑同參比試劑的檢測(cè)結(jié)果一致性非常好，其定量結(jié)果總結(jié)如下：血清樣本：

7、樣本數(shù)數(shù)量105雙變量相關(guān)系數(shù)（R）0.9884線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)（R2）0.9770線(xiàn)性方程Y=0.9686*X+1.163血清血漿樣本：樣本數(shù)數(shù)量50雙變量相關(guān)系數(shù)（R）0.9821線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)（R2）0.9645線(xiàn)性方程Y=0.9210*X+0.982結(jié)論：通過(guò)本次臨床試驗(yàn)的比較分析，考核試劑同參比試劑的檢測(cè)結(jié)果雖然在一定程度上存在著差異，但總體差異不明顯，兩種試劑的檢測(cè)結(jié)果線(xiàn)性相關(guān)性非常好（r=0.9884）。報(bào)告日期：2016年5月25日一、臨床試驗(yàn)背景糖化白蛋白(GA)是血液中葡萄糖與白蛋白發(fā)生非酶糖化反應(yīng)的早期糖基化產(chǎn)物。因白蛋白在體內(nèi)的半衰期較短（約17天），且白蛋白與血糖的結(jié)合速度

8、比血紅蛋白快，所以GA對(duì)短期內(nèi)血糖變化比糖化血紅蛋白（HbA1c）敏感，通常認(rèn)為GA測(cè)定可反映患者近期（約2周）的血糖控制情況，目前GA已成為臨床上應(yīng)用較廣泛的血糖檢測(cè)指標(biāo)。多項(xiàng)研究表明，30天內(nèi)的血糖水平影響HbA1c水平達(dá)50%，而90天120天只影響10%。所以，在血糖檢測(cè)體系中GA是對(duì)HbA1c的有效補(bǔ)充。近年來(lái)，GA與HbA1c的關(guān)系受到廣泛重視，通過(guò)研究GA與HbA1c的關(guān)系可進(jìn)一步認(rèn)識(shí)GA的臨床意義。動(dòng)脈粥樣硬化是長(zhǎng)期慢性炎癥性過(guò)程，它并非在糖尿病確診后才啟動(dòng)，在血糖升高但仍未達(dá)到糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)時(shí)就已啟動(dòng)，隨著血糖的增高而進(jìn)展加速。既往研究表明，作為糖尿病患者體內(nèi)主要的早期糖基化

9、產(chǎn)物，GA可通過(guò)破壞內(nèi)皮細(xì)胞功能，導(dǎo)致血管壁的氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)、刺激平滑肌細(xì)胞增殖和遷移等病理過(guò)程，加快動(dòng)脈粥樣硬化和糖尿病血管并發(fā)癥的發(fā)生與發(fā)展。因此GA在糖尿病動(dòng)脈粥樣硬化病理生理機(jī)制中起到重要作用。GA是反映過(guò)去2-3周平均血糖水平的一項(xiàng)指標(biāo)。比血糖檢測(cè)“金標(biāo)準(zhǔn)”HbA1c的反映周期要短一些。因此，GA在治療效果的確認(rèn)以及臨床用藥量的調(diào)整方面比A1c具有優(yōu)勢(shì)。另外，在許多血紅蛋白代謝異常的情況下，A1c的結(jié)果受到影響不能真實(shí)反映患者的血糖水平，而GA的結(jié)果則不受影響，如糖尿病腎病透析患者、貧血患者、妊娠期婦女的血糖檢測(cè)等，因此GA為血糖監(jiān)測(cè)的首選指標(biāo)。二、產(chǎn)品的檢測(cè)原理及方法1.糖化白

10、蛋白的測(cè)定第一反應(yīng)為糖化白蛋白在特異性蛋白酶的作用下，發(fā)生反應(yīng)生成糖化氨基酸。第二反應(yīng)為糖化氨基酸在果糖氨基酸氧化酶（FAOD）的作用下，生成過(guò)氧化氫。過(guò)氧化氫在4-氨基安替比林以及N，N-雙（4-磺丁基）-m-苯胺鈉鹽（DSBmT）的共存下，經(jīng)過(guò)過(guò)氧化酶（POD）的作用，變換成紅紫色色素。通過(guò)測(cè)定此紅紫色色素的吸光度進(jìn)而計(jì)算出糖化白蛋白的濃度。糖化白蛋白：蛋白酶第一反應(yīng) 糖化白蛋白 糖化氨基酸FAOD第二反應(yīng) 糖化氨基酸+O2+H2O 葡萄糖醛酮+氨基酸+H2O2POD H2O2+4-氨基安替比林+DSBmT 紅紫色色素2）白蛋白的測(cè)定在第一反應(yīng)中，還原型白蛋白變成氧化型白蛋白。在第二反應(yīng)中

11、，氧化型白蛋白在溴甲酚藍(lán)（BCP）的作用下，白蛋白與BCP生成藍(lán)色結(jié)合體，測(cè)定此藍(lán)色結(jié)合體的吸光度進(jìn)而計(jì)算出白蛋白的濃度。第一反應(yīng) 還原型白蛋白 氧化型白蛋白BCP第二反應(yīng) 氧化型白蛋白 白蛋白-BCP結(jié)合體3）糖化白蛋白值（%）的計(jì)算得出的糖化白蛋白濃度除以白蛋白濃度，為使測(cè)定值與常規(guī)檢測(cè)方法（露喜佳GA-L，旭化成制藥株式會(huì)社）測(cè)定的結(jié)果相一致，需要用以下公式進(jìn)行補(bǔ)正。補(bǔ)正公式：（糖化白蛋白濃度/白蛋白濃度）48.9+1.9三、產(chǎn)品的預(yù)期用途本產(chǎn)品用于定量檢測(cè)血清或血漿中GA的濃度。四、臨床試驗(yàn)?zāi)康暮蛢?nèi)容4.1 臨床試驗(yàn)?zāi)康尿?yàn)證考核試劑同參比試劑對(duì)于臨床樣本的檢測(cè)一致性。4.2 臨床試驗(yàn)內(nèi)

12、容通過(guò)考核試劑對(duì)按照方案要求入組的樣本的檢測(cè)結(jié)果同參比試劑對(duì)同一樣本的檢測(cè)結(jié)果的分析對(duì)比，統(tǒng)計(jì)出兩種試劑檢測(cè)的一致性。五、試驗(yàn)總體說(shuō)明5.1 臨床試驗(yàn)流程按照臨床試驗(yàn)方案設(shè)定的流程進(jìn)行檢測(cè)。5.2 考核試劑信息5.2.1 名稱(chēng)及主要成分名稱(chēng)規(guī)格糖化白蛋白檢測(cè)試劑盒（酶法）GA酶液40mL2GA酶液13.4mL2 ALB緩沖液40mL2ALB顯色劑20mL2校準(zhǔn)品1mL用3校準(zhǔn)品1mL用35.2.2 儲(chǔ)存條件及有效期儲(chǔ)存條件：210有效期：制造日起14個(gè)月5.2.3 試劑信息本臨床試驗(yàn)使用的是日立的7600系列全自動(dòng)生化分析儀。生產(chǎn)廠(chǎng)家：XX醫(yī)療株式會(huì)社產(chǎn)品名稱(chēng)：糖化白蛋白檢測(cè)試劑盒（酶法）試劑

13、校準(zhǔn)品質(zhì)控品產(chǎn)品批號(hào)005RLM005RLM005RLM有效期2016-082016-082016-08容量GA：40ml2GA：13.4ml2ALB：40ml2ALB：20ml21ml2濃度31ml2濃度65.2.4 操作步驟具體請(qǐng)?jiān)斠?jiàn)考核試劑產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)，見(jiàn)附件三.1。5.3 參比試劑信息及第三方驗(yàn)證試劑信息5.3.1 參比試劑生產(chǎn)廠(chǎng)家：旭化成制藥株式會(huì)社產(chǎn)品名稱(chēng)：Lucica GA-L糖化白蛋白測(cè)定試劑盒（酶法）試劑校準(zhǔn)品質(zhì)控品產(chǎn)品批號(hào)1502A1501A1501A有效期2016-092016-062016-06容量GA R-1：40ml2GA R-2：10ml2ALB R-1：40ml2

14、ALB R-2：20ml21ml23ml2濃度1參比試劑的詳細(xì)操作步驟及相關(guān)注意事項(xiàng)請(qǐng)?jiān)斠?jiàn)參比試劑的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)，見(jiàn)附件三.2。5.3.2第三方驗(yàn)證試劑生產(chǎn)廠(chǎng)家四川邁克生物科技股份有限公司產(chǎn)品名稱(chēng)糖化白蛋白檢測(cè)試劑盒（酶法）產(chǎn)品批號(hào)TBD有效期TBD5.4 臨床試驗(yàn)的樣本量按照臨床試驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)要求，本單位的樣本量應(yīng)不低于100例.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院一共入組156例，其中105例樣本分別在日立7600全自動(dòng)生化分析儀（使用考核試劑以及參比試劑）上測(cè)定血清中濃度，在日立7600全自動(dòng)生化分析儀上測(cè)定同一樣本中血清與血漿的濃度共51例。其中#215檢測(cè)血清血漿結(jié)果均為負(fù)值，考慮為檢測(cè)儀器

15、誤差所致，因此剔除此樣本，實(shí)際進(jìn)行統(tǒng)計(jì)的樣本數(shù)為50例?？倶颖纠龜?shù)為155例。因總臨床樣本數(shù)已經(jīng)滿(mǎn)足臨床試驗(yàn)方案的要求，因此，本臨床單位不再另行補(bǔ)充樣本以滿(mǎn)足100例的要求。5.5 臨床試驗(yàn)單位信息名稱(chēng)：上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院地址：上海市浦東新區(qū)浦建路160號(hào)電話(huà)總機(jī))5.6 臨床樣本的入選與排除按照臨床試驗(yàn)方案的要求，隨機(jī)入組了156例樣本，其中用于檢測(cè)血清血漿的#215血清血漿測(cè)定結(jié)果均為負(fù)值，考慮為檢測(cè)儀器誤差所致，因此剔除此樣本，故實(shí)際進(jìn)行統(tǒng)計(jì)的樣本數(shù)為50例。其他樣本均符合入組要求。5.7臨床樣本的保存及運(yùn)輸方式均符合臨床試驗(yàn)方案的要求。5.8樣本

16、相關(guān)信息記錄入組樣本的相關(guān)信息符合臨床試驗(yàn)方案的要求。5.9臨床樣本分組符合臨床試驗(yàn)方案的要求。六臨床試驗(yàn)結(jié)果及統(tǒng)計(jì)6.1 樣本說(shuō)明樣本信息見(jiàn)附件一。本次臨床試驗(yàn)使用了105例血清樣本進(jìn)行了考核試劑和參比試劑的檢測(cè)，50例同一樣本考核試劑血清血漿結(jié)果相關(guān)性的檢測(cè)。檢測(cè)后，105例血清樣本經(jīng)Bland-Altman偏倚圖比較兩組結(jié)果的差值，有101個(gè)樣本結(jié)果（95.05%95%）的差值在均值1.96SD范圍內(nèi)，可視為結(jié)果具有一致性，無(wú)需剔除或補(bǔ)充樣本。6.2定量檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)描述說(shuō)明：以下統(tǒng)計(jì)中，考核試劑指的是XX醫(yī)療株式會(huì)社生產(chǎn)的糖化白蛋白測(cè)定試劑盒（酶法），參比試劑指的是旭化成制藥株式會(huì)社生產(chǎn)

17、的糖化白蛋白測(cè)定試劑盒（酶法）。試驗(yàn)數(shù)據(jù)見(jiàn)附件二。6.2.1 線(xiàn)性相關(guān)及散點(diǎn)圖考核試劑和參比試劑的檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)系數(shù)為r=0.9884（r2=0.9770），兩者的線(xiàn)性方程為：Y=0.9686*X+1.163，兩組檢測(cè)結(jié)果高度相關(guān)。以自變量（參比試劑結(jié)果）為X軸，因變量（考核試劑結(jié)果）為Y軸做散點(diǎn)圖，結(jié)果如下：考核試劑與參比試劑相關(guān)性考核試劑GA%參比試劑GA%6.2.2偏倚圖（bland-altman）分析以參比試劑和考核試劑的差值作為縱坐標(biāo)，參比試劑作為橫坐標(biāo)，做散點(diǎn)圖，進(jìn)行差值偏倚分析。105例血清樣本經(jīng)Bland-Altman偏倚圖比較兩組結(jié)果的差值，有4個(gè)樣本結(jié)果超出均值1.96SD

18、范圍，有96.19%（95%）的差值在均值1.96SD范圍內(nèi)，可視為結(jié)果具有一致性，因此無(wú)需剔除或補(bǔ)充樣本。6.3 血清與血漿樣本比對(duì)結(jié)果血清樣本檢測(cè)結(jié)果和血漿樣本檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)系數(shù)為r=0.9821（r2=0.9645），兩者線(xiàn)性方程為：Y=0.9210*X+0.982。以同一患者的血清檢測(cè)結(jié)果為自變量Xi，血漿檢測(cè)結(jié)果為因變量Yi，以Yi對(duì)Xi作散點(diǎn)圖，結(jié)果如下：血清與血漿相關(guān)性考核試劑血漿GA%考核試劑血清GA%七. 結(jié)論通過(guò)本次臨床試驗(yàn)的比較分析，考核試劑同參比試劑的檢測(cè)結(jié)果無(wú)顯著性差異，兩種試劑的檢測(cè)結(jié)果線(xiàn)性相關(guān)性高度相關(guān)（r=0.9884）。經(jīng)Bland-Altman偏倚圖比較兩組

19、結(jié)果的差值，有96.19%（95%）的差值在均值1.96SD范圍內(nèi)，可視為結(jié)果具有一致性。同時(shí)，考核試劑在進(jìn)行血漿樣本與血清樣本檢測(cè)結(jié)果比對(duì)時(shí)，兩組結(jié)果的線(xiàn)性相關(guān)性良好。本次臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示考核試劑與參比試劑對(duì)臨床樣本的檢測(cè)具有等效性，適用于臨床使用。附件一：樣本信息記錄表請(qǐng)查看附件附表1_GA_樣本篩選入選表附件二：試驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表1. 考核試劑和參比試劑數(shù)據(jù)記錄表2. 血清與血漿對(duì)比實(shí)驗(yàn)檢測(cè)數(shù)據(jù)請(qǐng)查看附件附表2_GA_測(cè)定結(jié)果統(tǒng)計(jì)。附件三：相關(guān)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)及信息考核試劑產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)參比試劑產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)附件四：臨床試驗(yàn)主要研究人員的簡(jiǎn)歷信息李敏職 稱(chēng)：研究員職 務(wù)：上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)

20、院檢驗(yàn)科科主任1975 年1月出生，醫(yī)學(xué)博士，研究員，博士研究生導(dǎo)師。2005 年 10 月至 2008年 3 月以博士后身份在美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院（NIH）工作?，F(xiàn)任中國(guó)微生物學(xué)會(huì)臨床微生物學(xué)專(zhuān)業(yè)委員會(huì)青年委員會(huì)副主任委員；上海醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會(huì)青年委員（兼學(xué)會(huì)工作秘書(shū)）、青年學(xué)組組長(zhǎng)；上海市分子診斷技術(shù)準(zhǔn)入及基因擴(kuò)增檢驗(yàn)技術(shù)評(píng)審專(zhuān)家；美國(guó)微生物學(xué)會(huì)（American Society for Microbiology）會(huì)員等；擔(dān)任PLoS One 、中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志編委以及Infect Immun、EMI 等 6 本國(guó)際雜志審稿人等。醫(yī)療專(zhuān)長(zhǎng)：目前主要從事“病原性微生物耐藥和致病機(jī)理”等研究工作。先后在Nat Med、Mol Cell、PNAS等國(guó)際專(zhuān)業(yè)期刊發(fā)表SCI論著35篇，以第一或通訊作者發(fā)表SCI論著13篇（13篇論文影響因子累計(jì)84.7分，他引379次）；其中近5年發(fā)表SCI論著25篇，第一或通訊作者10篇（10篇論著總影響因子67.1分，他引208次）近5年主持國(guó)家自然基金5項(xiàng)(包括優(yōu)秀青年科學(xué)基金1項(xiàng))、國(guó)家教育部基金2項(xiàng)、上海市科委基金1項(xiàng)以及上海市人才基金3項(xiàng)等。 研究成果受邀在美國(guó)“Gord