醫(yī)院新冠核酸檢測污染防范措施

1、XXXX醫(yī)院新冠核酸檢測污染防范措施一、核酸污染來源二、核酸污染預防三、核酸污染處理在大規(guī)模新冠核酸檢測中，出現(xiàn)了少量假陽性的誤報。這些假陽性報 告會給新冠監(jiān)控帶來錯誤的指導，一旦錯誤采取隔離/封閉措施，極大干 擾相關(guān)企事業(yè)單位的正常運營。檢測前后及處理花費的人力和物力也浪費 社會資源，擠占了原本可用于正確防控的資源。一、核酸污染來源這些假陽性結(jié)果大部分是由核酸污染造成的，其來源主要有：1、PCR產(chǎn)物污染；2、克隆質(zhì)粒污染；3、樣本污染；4、試劑污染。PCR會將極少量新冠基因進行指數(shù)復制，操作不當時，這些被大量增 值的新冠核酸會以氣溶膠形式被釋放出來，污染整個實驗室。在進行質(zhì)粒 克隆和抽提時，

2、高濃度質(zhì)粒容易以氣溶膠形式污染實驗室。采樣樣本處理 /放置不當時，被其他樣本或氣溶膠污染。檢測試劑生產(chǎn)或使用不當時， 被氣溶膠或其他方式污染。二、核酸污染預防1、設(shè)置合理的實驗室布局，一般可分為1）試劑準備區(qū)，2）樣本制 備區(qū)，3）核酸擴增區(qū)，4）產(chǎn)物分析區(qū)，qPCR這類不需要電泳分析的可將 產(chǎn)物分析區(qū)與核酸擴增區(qū)合并。2、每個步驟都在相應(yīng)的實驗區(qū)進行，每個區(qū)域內(nèi)實驗器材、物品不 能共用，每個區(qū)完全隔離和獨立通風，控制空氣流動方向。如條件不足， 也必須將擴增區(qū)和分析區(qū)與試劑準備和樣本制備區(qū)隔離。最后廢棄物處理 區(qū)必須遠離以上實驗區(qū)。3、實驗人員、物料須嚴格單向流動，即只能從準備區(qū)到擴展區(qū)和分

3、析區(qū)，避免產(chǎn)生交叉污染。4、定期進行陰性質(zhì)控檢測，在大規(guī)模檢測時，必須添加陰性樣本， 陰性對照品，無模板對照，保證出現(xiàn)污染時可立即發(fā)現(xiàn)。5、使用封閉擴增的檢測方法，如熒光定量PCR，并在擴增完成后不 能打開試管。普通PCR和一些等溫擴增方法需要開蓋，很容易產(chǎn)生氣溶膠 污染。（Novoprotein 熒光定量 PCR，Cat.E096/E094）6、實驗管理操作嚴格規(guī)范：在通風櫥/超凈工作臺操作，實驗前/后 即時擦拭、清潔、消殺實驗臺，實驗中使用一次性手套，如有污染可能， 立即替換手套，移液槍吸取液體輕柔，輕輕吹打，避免飛濺，打開管蓋時 動作輕緩，漩渦震蕩后，離心甩下液滴。使用帶濾芯槍頭，避免液

4、體被吸 入移液槍，所有實驗物品盡可能提前分裝成小包裝，并預先滅菌和分裝好。 實驗廢棄物統(tǒng)一處理。7、使用dUTP+UDG酶防污染體系：在PCR中使用dUTP部分代替dTTP， 使PCR產(chǎn)物中摻入U。在第二次PCR擴增前，使用UDG酶處理PCR反應(yīng)液，可打斷上一次PCR產(chǎn)物中的U,使其無法污染第二次PCR擴增。（Novoprotein 熱敏 UDG，Cat.E063）三、核酸污染處理發(fā)現(xiàn)核酸污染，立即暫停相關(guān)實驗/檢測，對實驗場所、儀器設(shè)備進 行徹底的清潔/消殺/去核酸處理，更換相關(guān)試劑、耗材，實驗人員更換衣 物并進行核酸去除。常用的核酸污染去除方法有：紫外照射、酒精擦拭、通風等。紫外照 射可打斷核酸，但對打斷小于200bp的片段效果不佳。酒精無法消化核 酸，擦拭抹去表面核酸時容易殘留。通風可將空氣中氣溶膠排出，但無法 清除表面殘留，而且需要很長時間。因傳統(tǒng)的核酸污染去除方法并不能完全去除核酸污染，醫(yī)療機構(gòu)新 型冠狀病毒核酸檢測工作手冊（試行）指出，為避免氣溶膠等核酸污染 造成的檢測假陽性，可采用核酸清除劑等試劑清除實驗室殘留核酸。核酸污染是實驗室、生產(chǎn)車間常見的污染事故，嚴重時會導致實驗室、 生產(chǎn)車間封停整頓。在新冠疫情之下，每一個核酸檢測陽性都會被極度重 視，并采取更嚴格的處理措施，一旦相關(guān)單位被檢測出假陽性，將面臨全 面檢測排查和停業(yè)整頓以及人員隔離檢測，會嚴重