同濟醫(yī)院檢驗科ISO15189體系文件02抗單鏈脫氧核糖核酸抗體(SS-DNA)測定

1、同濟大學附屬同濟醫(yī)院檢驗科免疫組項目操作指導書TJYYJYKMY/XMZ702第2版標題：抗單鏈脫氧核糖核酸抗體(SS-DNA)測定第7章 第02號第 PAGE 3 頁 共 NUMPAGES 3 頁1. 目的：檢測血清標本中的SS-DNA抗體。2. 適用范圍：檢驗科免疫室。3. 項目名稱：抗單鏈脫氧核糖核酸抗體(SS-DNA)測定。4. 方法：酶免疫分析法。5. 檢測原理：SS-DNA抗核抗體是一種抗“自身脫氧核糖核酸和核蛋白”的抗核抗體。采用EIA原理檢測。6. 試劑6.1 品牌：購自上海玉蘭生物技術(shù)研究所。6.2 包裝規(guī)格：48人份。6.3 內(nèi)含物：6.3.1 包被板 12孔X4條;6.3

2、.2 陽性對照 1支;6.3.3 陰性對照 1支;6.3.4. 標本稀釋液 1瓶;6.3.5 酶結(jié)合物 1瓶;6.3.6 底物液A 1瓶;6.3.7. 底物液B 1瓶;6.3.8 濃縮洗滌液(使用蒸餾水稀釋至400ml) 1瓶;6.3.9 終止液 1瓶;7 儀器品牌、型號: BIO RAD UV-3550酶標儀，測定波長為450nm；參考波長為630nm；8 操作步驟：8.1 打印工作單:8.1.1 打開電腦及打印機電源，8.1.2 雙擊齊效檢驗系統(tǒng)，登陸工號與密碼；8.1.3 雙擊報告處理，單擊標本申請信息打開標本申請明細信息查詢，打開左上角的所有信息，選擇未生成報告信息。8.1.4 在檢驗

3、項目處選擇SSDNA執(zhí)行查詢，點擊打印申請單，打印出工作單。8.2 排列待測標本:根據(jù)工作單上的庫位號從標本架中找出相應標本，并按工作單上的 順序排列在樣本架上。8.3 按以下步驟開始操作:8.3.1 將試劑盒放在室溫30分鐘以上，使之與室溫平衡。8.3.2 將已包被的酶標孔中，每孔加2滴（100l）標本稀釋液，血清標本用生理鹽水稀釋10倍后再取10l已稀釋的標本，加入到100l標本稀釋液中，另設陽、陰對照，每孔（50l）（不用稀釋），略微振蕩，放入37恒溫箱中反應30分鐘。8.3.3 將濃縮洗滌液稀釋40倍（蒸餾水配），洗板4次，然后拍干。8.3.4 每孔加入酶標抗體1滴置37反應20分鐘。

4、8.3.5 洗滌6次拍干。8.3.6 每孔加入顯色劑A，B各1滴，反應510分鐘，觀察結(jié)果。（如果室溫低于15則需放在37反應5分鐘）。8.4 結(jié)果判斷：加入終止液1滴，在450nm讀數(shù)，OD0.2為陽性，OD0.2為陰性。8.5 發(fā)送報告：詳見免疫報告發(fā)送程序。9 參考范圍：正常人陰性。10 病人準備、標本要求：標本為血清時最好空腹采血，脂血、溶血不可使用。其它體液標本無特殊要求。11 臨床意義：快速測定系統(tǒng)性紅斑狼倉SLE等結(jié)締組織病患者血清中SS一DNA抗體，具有特異性高，快速、敏感、操作簡單，結(jié)果清晰，可替代傳統(tǒng)的LE細胞鏡檢法。12 注意事項：12.1 洗滌要徹底，否則要出現(xiàn)假陽性。12.2 10分鐘后出現(xiàn)蘭色者作為陽性。12.3 一次未能用完的酶標板需裝入自封袋中并放入干燥劑，再放入冰箱保存。12.4 建議水浴箱中反應，最好用即時