同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科ISO15189體系文件06EB病毒抗體測(cè)定（E-VCA）測(cè)定

1、同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫組項(xiàng)目操作指導(dǎo)書(shū)TJYYJYKMY/XMZ706第2版標(biāo)題： EB病毒抗體測(cè)定（E-VCA）測(cè)定第7章 第06號(hào)第 PAGE 3 頁(yè) 共 NUMPAGES 3 頁(yè)1. 目的：檢測(cè)血清標(biāo)本中的EB病毒抗體。2. 適用范圍：同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室。3. 項(xiàng)目名稱(chēng)：EB病毒抗體抗體測(cè)定4. 檢測(cè)方法：酶免疫分析法。 檢測(cè)原理：本品系用帶EB病毒殼抗原(VCA)的類(lèi)淋巴母細(xì)胞株作抗原靶細(xì)胞，以辣 根過(guò)氧化物酶標(biāo)羊抗人SIgA抗體(HRP-抗SIgA)檢測(cè)人血清中EB病毒的兔疫球蛋白A?？晒┍茄拾┑容o助診斷之用。 試劑：6.1 品牌：購(gòu)自于捷門(mén)公司。6.2 包裝規(guī)格:24人份

2、. 6.3 內(nèi)含物:每盒試劑含以下成分：6.3.1 EB病毒細(xì)胞涂片(二片)，密封干燥冷存。6.3.2 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)羊抗人SIgA(l支)，凍干品，用酶標(biāo)抗體稀釋液0.3m1溶解后。6.3.3 酶標(biāo)抗體稀釋液(1支)，lml。6.3.4 3-3二氨基聯(lián)苯胺（OPD）2支，凍干制品，避光保存。6.3.5 底物緩沖液 (2瓶，10ml/瓶)，供溶解二氨基聯(lián)苯胺。6.3.6 陽(yáng)性對(duì)照1支(用0.1ml蒸餾水溶解)。7. 操作：7.1 打印工作單:7.1.1 打開(kāi)電腦及打印機(jī)電源，7.1.2 雙擊齊效檢驗(yàn)系統(tǒng)，登陸工號(hào)與密碼；7.1.3 雙擊報(bào)告處理，單擊標(biāo)本申請(qǐng)信息，打開(kāi)標(biāo)本申請(qǐng)明細(xì)信息查詢(xún)，打

3、開(kāi)左上角的所有信息，選擇未生成報(bào)告信息。7.1.4 在檢驗(yàn)項(xiàng)目處選擇EVCA，執(zhí)行查詢(xún)，點(diǎn)擊打印申請(qǐng)單，打印出工作單。7.2 排列被檢測(cè)標(biāo)本:根據(jù)工作單上的庫(kù)位號(hào)找出相應(yīng)標(biāo)本，并按工作單上的順序排列。7.3 按以下步驟開(kāi)始操作:7.3.1 細(xì)胞涂片從冷存處取出，放室溫去除水汽。7.3.2 用PH7.4 0.01MPBS將待檢血清作1:5.1:10稀釋?zhuān)渭佑诩?xì)胞涂片各小孔內(nèi)，右側(cè)二孔分別加陽(yáng)性對(duì)照和PBS陰性對(duì)照。7.3.3 37濕盒作用30分鐘，用以上PBS輕洗3次，每次5分鐘，末次洗后放室溫待干。7.3.4 滴加酶標(biāo)抗體于各小孔內(nèi)，放37濕盒中作用30分鐘、同法輕洗4次。7.3.5 將少量

4、底物緩沖液加入OPD的安瓶中使充分溶解，再混勻在10ml的底物緩沖液中。7.3.6 將30.過(guò)氧化氫溶液用蒸餾水作10倍稀釋?zhuān)?.1mI加入己溶解的OPD溶液中，混勻，滴加于待顯色的涂片上，使各孔浸沒(méi)，避光作用1520分鐘。本液于臨用前配制。7.3.7 傾去顯色液，置于無(wú)水酒精中浸3分鐘脫水。7.3.8 滴加中性樹(shù)膠于涂片上，加蓋玻璃片封固，用普通顯微鏡觀察結(jié)果。7.4 結(jié)果：陰性：細(xì)胞不著色，或呈淺棕色的背景顏色。陽(yáng)性：細(xì)胞呈棕色，在胞膜周?chē)^深，按陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量和著色的強(qiáng)度劃分+ +陽(yáng)性。7.5 發(fā)送報(bào)告：詳見(jiàn)免疫報(bào)告發(fā)送程序。8. 參考范圍：正常人陰性。9. 臨床意義：EB病毒感染后，患者血清中均可出現(xiàn)VCA抗體。IgA類(lèi)抗體雖對(duì)鼻咽癌有較高的特異性，但仍需結(jié)合臨床進(jìn)行判斷.本法可用于早期篩查鼻咽癌患者并對(duì)判斷療效與預(yù)后有一定幫助。10. 標(biāo)本要求：血清，脂血、溶血不可使用11. 注意事項(xiàng)：11.1 各項(xiàng)試劑，應(yīng)按本說(shuō)明書(shū)規(guī)