PCR實(shí)驗(yàn)室程序性文件

1、XX 市第二人民醫(yī)院基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系文件 WEY-JYK-PCR-CXWJ 程 序 文 件 編制： 審核： 批準(zhǔn)： 受控狀態(tài)： 在控 編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 頒布日期：2020.07.28 實(shí)施日期：2020.07.28 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 修訂 序號(hào) 修訂的章節(jié) 條款 修訂頁(yè) 簡(jiǎn)要修訂內(nèi)容 批準(zhǔn)人 批準(zhǔn)日期 目錄 基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室設(shè)置與管理程序 . 1 實(shí)驗(yàn)室醫(yī)療廢棄物物管理程序 . 3 實(shí)驗(yàn)室記錄管理程序 . 5 實(shí)驗(yàn)室生物防護(hù)程序 . 7 儀器設(shè)備管理程序 . 10 儀器設(shè)備校準(zhǔn)程序 . 13 實(shí)驗(yàn)室防污染程序 . 15 試劑耗材管理程序 . 19 標(biāo)本的管

2、理程序 . 22 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果報(bào)告程序 . 24 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制管理程序 . 26 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果報(bào)告程序 . 28 抱怨處理程序 . 30 檢驗(yàn)過(guò)程中發(fā)生故障時(shí)的應(yīng)急處理程序 . 31 實(shí)驗(yàn)室清潔消毒程序 . 33 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室設(shè)置與管理程序 1. 目的：規(guī)范 PCR 實(shí)驗(yàn)室管理制度。 2. 適用范圍：PCR 實(shí)驗(yàn)室布局設(shè)置、儀器設(shè)備、日常操作。 3. 具體內(nèi)容： 3.1. 基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室分試劑準(zhǔn)備、

3、標(biāo)本制備、基因擴(kuò)增分析三 個(gè)區(qū)，各區(qū)實(shí)驗(yàn)物品應(yīng)有明顯的標(biāo)示，嚴(yán)禁混用。 3.2. 實(shí)驗(yàn)室審核人員須有衛(wèi)生部臨檢中心或其授權(quán)機(jī)構(gòu)頒發(fā)的 培訓(xùn)上崗證方能進(jìn)行基因擴(kuò)增檢測(cè)工作。 3.3. 實(shí)驗(yàn)室工作人員必須嚴(yán)格按照核酸擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)操作程序進(jìn) 行。 3.4. 實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前必須先做好實(shí)驗(yàn)室內(nèi)和工作臺(tái)的清潔消毒，以 及離心管、吸頭等一次性用品的高壓滅菌處理。 3.5. 工作人員應(yīng)遵循單項(xiàng)走動(dòng)的原則：試劑準(zhǔn)備區(qū)標(biāo)本制備 區(qū) 擴(kuò)增分析區(qū)。 3.6. 嚴(yán)格遵守室內(nèi)質(zhì)控，每批標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)時(shí)都必須附上陰、 陽(yáng)性對(duì)照，必要時(shí)繪制質(zhì)控圖。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后若對(duì)照品結(jié)果出現(xiàn) 異常時(shí)應(yīng)立即暫扣本次結(jié)果，及時(shí)尋找原因并加以糾正后，才 能發(fā)

4、出報(bào)告。 3.7. 非本室工作人員未經(jīng)允許不得進(jìn)入基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室，工作 人員在工作時(shí)也不能隨意進(jìn)出，以免造成不應(yīng)有的污染。 1 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 3.8. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)用 2000mg/L 含氯消毒液消毒實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，并 以紫外線照射實(shí)驗(yàn)室。試驗(yàn)中使用過(guò)的吸頭、離心管等應(yīng)置于 2000mg/L 含氯消毒液中浸泡消毒后集中焚毀。 3.9. 每天工作必須填寫好日常工作核查表，下班前處理好廢棄 物品， 關(guān)好水、電和門窗。 3.10.

5、實(shí)驗(yàn)室工作人員必須嚴(yán)格遵守本室一切制度。 2 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 實(shí)驗(yàn)室醫(yī)療廢棄物物管理程序 1. 目的：為防止實(shí)驗(yàn)室廢棄物對(duì)環(huán)境造成污染。 2. 適用范圍：主要適用于實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增前、擴(kuò)增后的廢棄物處理。 3. 具體內(nèi)容： 3.1. 收集 實(shí)驗(yàn)室工作人員對(duì)試驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生的醫(yī)療廢棄物應(yīng)采取安 全、有效、經(jīng)濟(jì)的隔離和處理方法，集中保存，統(tǒng)一處理。 3.2. 標(biāo)識(shí) 廢棄物應(yīng)裝入黃色垃圾袋，所有收集傳染性廢物的容器都應(yīng) 有“生物危害”標(biāo)

6、志。裝有銳利物品的容器在任何時(shí)候都應(yīng)有“生 物危害”標(biāo)志。所有運(yùn)輸未經(jīng)處理的廢棄物的容器上都應(yīng)有“生 物危害”標(biāo)志。 3.3. 包裝 所有的廢棄物都必須進(jìn)行包裝，并應(yīng)依據(jù)廢物的性質(zhì)及數(shù)量 選用適合的包裝材料。應(yīng)使用黃色聚乙烯或聚丙烯包裝袋，并應(yīng) 標(biāo)記有傳染性物品。有液體的傳染性廢料時(shí)，應(yīng)確保容器無(wú)泄漏。 3.4. 處置 傳染性廢物的處置即減少或限制其潛在致病性的過(guò)程，滅菌 和焚燒是最常用的處置方法。處置的主要目的是去除污染，使病 源體數(shù)量減少到致病水平以下。產(chǎn)生的廢液用化學(xué)消毒滅菌 3 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)

7、驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 （0.55%含氯消毒劑處理），壓力蒸氣滅菌處理過(guò)程應(yīng)保證在121 進(jìn)行（被處理物中心溫度不低于115），時(shí)間 6090 分鐘（不 少于 20 分鐘）。至少每月應(yīng)使用一次生物指示劑監(jiān)測(cè)處理效果。 3.5. 轉(zhuǎn)運(yùn) 試驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生的醫(yī)療廢棄物必須在高壓滅菌后才能離開(kāi)實(shí)驗(yàn) 室，運(yùn)輸工具應(yīng)有明顯的標(biāo)記和防泄漏設(shè)備。在處理、運(yùn)輸、裝 卸過(guò)程中應(yīng)確保傳染性廢物的包裝完好，一般不得使用機(jī)械進(jìn)行 裝卸。長(zhǎng)途運(yùn)輸應(yīng)請(qǐng)專業(yè)人員進(jìn)行操作。 4 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/

8、0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 實(shí)驗(yàn)室記錄管理程序 1. 目的：實(shí)驗(yàn)室記錄是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量證明資料及質(zhì)量體系運(yùn)作的重要 組成部分，記錄必須真實(shí)完整地反映進(jìn)行狀態(tài)，并進(jìn)行有效的規(guī) 范化管理。 2. 適用范圍：記錄范圍涉及實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)的各個(gè)環(huán)節(jié)， 與質(zhì)量體系運(yùn) 行直接相關(guān)。 主要包括樣本信息、試劑采購(gòu)和配制記錄、實(shí)驗(yàn)操 作記錄、儀器使用和儀器維修保養(yǎng)記錄、各區(qū)溫度和濕度、各區(qū) 人員流動(dòng)記錄、冰箱溫度、室內(nèi)清潔、抱怨處理、加樣器校準(zhǔn)、 溫度計(jì)校準(zhǔn)、儀器校準(zhǔn)、室內(nèi)質(zhì)控等紀(jì)錄。 3. 具體內(nèi)容： 3.1. 病人和標(biāo)本信息：接收標(biāo)本后，在標(biāo)本登記表

9、中登記病人和標(biāo) 本信息，包括：病人姓名、性別、年齡、檢測(cè)、標(biāo)本類型、標(biāo) 本狀態(tài)、送檢日期、標(biāo)本接收人等，對(duì)不符合檢測(cè)要求的標(biāo)本 在“拒收標(biāo)本登記表”上記錄，并及時(shí)通知送檢單位。 3.2. 檢測(cè)過(guò)程中的實(shí)驗(yàn)記錄：在專用實(shí)驗(yàn)記錄簿上記載，不同實(shí)驗(yàn) 區(qū)的記錄簿不得混用。試劑準(zhǔn)備和貯存區(qū)應(yīng)記錄檢測(cè)所用的試 劑盒情況（名稱、批號(hào)、數(shù)量）；標(biāo)本制備區(qū)記錄檢測(cè)標(biāo)本數(shù) 及在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行的操作過(guò)程；在擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)記錄質(zhì)控結(jié) 果和分析。 3.3. PCR 儀運(yùn)行結(jié)束，運(yùn)行和結(jié)果文件應(yīng)保存在專門的數(shù)據(jù)文件 5 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR

10、 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 夾中。文件名應(yīng)保持唯一性。 3.4. 當(dāng)日試驗(yàn)結(jié)束后，認(rèn)真填寫涉及試驗(yàn)前、中、后的各項(xiàng)記錄， 記錄要與實(shí)際相符。 3.5. 實(shí)驗(yàn)記錄要真實(shí)，不得隨意涂改，如確需更改，應(yīng)在所需更改 內(nèi)容上劃雙紅線，填上新內(nèi)容，說(shuō)明更改原因并簽名。 6 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 實(shí)驗(yàn)室生物防護(hù)程序 1. 目的：確保檢測(cè)工作不影響工作人員的身心健康，廢棄標(biāo)本不造 成環(huán)境

11、污染。 2. 適用范圍：臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室全體人員。 3. 具體內(nèi)容： 3.1. 嚴(yán)格執(zhí)行生物防護(hù)和安全制度，監(jiān)控各種危險(xiǎn)因素，采取有效 控制措施，注意個(gè)人生物安全防護(hù)，實(shí)驗(yàn)中嚴(yán)格按照各種標(biāo)準(zhǔn) 操作程序操作。 3.2. 每天更換廢液缸的 5500mg/L有效氯含量消毒液，并保證 5500mg/L 有效氯含量消毒液用量為廢液缸內(nèi)總液量的 1/5 左 右。正確配置使用消毒液。 3.3. 實(shí)驗(yàn)臺(tái)面日常清潔時(shí)使用 75的酒精擦拭。每區(qū)每天實(shí)驗(yàn)前 后紫外燈照射3060 min，如有需要可延長(zhǎng)照射時(shí)間，對(duì)工作 臺(tái)面實(shí)驗(yàn)前后也要用紫外燈照射3060 min，并作好記錄。 3.4. 標(biāo)本采集、運(yùn)送過(guò)程中，

12、應(yīng)保持容器完好，無(wú)泄漏。工作桌面 或地面一旦有標(biāo)本污染時(shí)，應(yīng)及時(shí)用含氯消毒液清潔，再用 75%的酒精清潔桌面。 3.5. 實(shí)驗(yàn)廢棄物、患者樣本均可能具有傳染性，應(yīng)按照生物傳染性 質(zhì)對(duì)待，應(yīng)嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理制度處理。 3.6. 有下列情況之一者，還需另外消毒：手接觸有傳染性的微生物； 7 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 水龍頭、水池肥皂、工作服可能同時(shí)被大量細(xì)菌污染者。消毒 劑可用2000mg/L 有效氯含量消毒液。 3.7. 在基

13、因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室門上需貼上生物危害標(biāo)志，非工作需 要，其他人員不得入內(nèi)。與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的任何私人物品嚴(yán)禁入內(nèi)。 3.8. 實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)接受生物安全相關(guān)培訓(xùn)，了解病原體感染的 途徑和預(yù)防方法。 3.9. 接觸感染性物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室人員必須作好個(gè)人防護(hù)，戴好手套、 口罩和帽子，禁止裸手接觸任何物質(zhì)，不要戴著手套觸摸皮膚。 3.10. 實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入PCR實(shí)驗(yàn)工作區(qū)，應(yīng)換上各區(qū)的專用工作服， 離開(kāi)時(shí)脫下該區(qū)的工作服，并掛在指定的地方。工作結(jié)束后， 立即洗手才可離開(kāi)。 3.11. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后必須立即對(duì)工作區(qū)進(jìn)行清潔消毒。桌面在工作 結(jié)束后，必須立即用消毒液（2000mg/L 有效氯含量消毒液或 75%酒精等

14、）擦拭，并將可移動(dòng)紫外燈調(diào)至距實(shí)驗(yàn)臺(tái)60-90cm 內(nèi)照射消毒30-60min。 3.12. 保證實(shí)驗(yàn)室所用的實(shí)驗(yàn)消耗品均經(jīng)過(guò)高壓滅菌處理。 3.13. 制定防火、防盜措施：及時(shí)檢查電線是否老化，發(fā)現(xiàn)隱 患應(yīng)及時(shí)排除；防盜措施：設(shè)內(nèi)保安全機(jī)制，由 PCR 室工 作人員為安全員，負(fù)責(zé)工作完畢后檢查門窗。 3.14. 要嚴(yán)格執(zhí)行以上各項(xiàng)措施，并定期由室負(fù)責(zé)人對(duì)以上措施 的落實(shí)情況予以調(diào)查。如調(diào)查不合格，對(duì)相應(yīng)責(zé)任人進(jìn)行處罰， 8 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2

15、020.07.28 并限期整改。 3.15. 工作人員在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中懷疑被感染、發(fā)生重大生物污染時(shí)， 應(yīng)立即停止試驗(yàn)并報(bào)告上級(jí)，并暫時(shí)關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室，進(jìn)行嚴(yán)格的 消毒，并根據(jù)實(shí)際情況，采取相應(yīng)有效措施避免感染的發(fā)生或 蔓延。如遇實(shí)驗(yàn)中手指被劃破，應(yīng)立即用水沖洗、消毒包扎傷 口，樣品或檢測(cè)試劑濺入眼睛內(nèi)立即用大量清水沖洗；濺入嘴 內(nèi)，先吐出殘留的液體后用水反復(fù)漱口，并立即上報(bào)實(shí)驗(yàn)室負(fù) 責(zé)人，并有實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人上報(bào)醫(yī)院感染科，同時(shí)抽血做相應(yīng)病 原體檢測(cè)。后續(xù)傷者應(yīng)在接觸后6 周、3 個(gè)月、6 個(gè)月及12 個(gè) 月各采血檢查一次。 3.16. 實(shí)驗(yàn)中若發(fā)生標(biāo)本破裂或外泄時(shí)，應(yīng)立即停止工作，將破 裂標(biāo)本放入生物

16、垃圾桶，用5500mg/L 次氯酸鈉溶液消毒污染 處，再用75%乙醇擦拭干凈，用紫外燈照射1 小時(shí)后開(kāi)始工作。 9 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 儀器設(shè)備管理程序 1. 目的：確保實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備得到妥善的管理。確保檢測(cè)質(zhì)量，保 障儀器設(shè)備的使用壽命。 2. 適用范圍：本程序適用于基因擴(kuò)增檢驗(yàn)診斷室所有的儀器設(shè)備的 購(gòu)置、驗(yàn)收、使用、校正和維護(hù)管理。 3. 具體內(nèi)容： 3.1. 儀器購(gòu)買原則：根據(jù)醫(yī)院有關(guān)規(guī)定本著“質(zhì)優(yōu)價(jià)廉”進(jìn)行，所 購(gòu)儀

17、器必須三證齊全（生產(chǎn)許可證、產(chǎn)品注冊(cè)證、經(jīng)營(yíng)執(zhí)照）， 并能與基因診斷實(shí)驗(yàn)室的工作條件相符 3.2. 儀器的購(gòu)買程序 3.2.1. 儀器廠家的確定：先由實(shí)驗(yàn)操作人員提出初步意見(jiàn)，提 供2 家或2 家以上（特殊情況1 家亦可）廠家的有關(guān)儀 器信息，提交醫(yī)院招標(biāo)審核討論。 3.2.2. 儀器的購(gòu)買：由藥械科負(fù)責(zé)與供貨商聯(lián)系供貨。 3.2.3. 儀器的驗(yàn)收：供貨商送來(lái)儀器后由藥械科人員和實(shí)驗(yàn)操 作人員共同驗(yàn)收，在廠家的供貨清單上簽字。 3.2.4. 儀器的放置：根據(jù)儀器本身的要求及基因診斷實(shí)驗(yàn)室各 區(qū)的要求安放儀器。 3.2.5. 基因診斷實(shí)驗(yàn)室的主要儀器設(shè)備均需建立檔案，檔案內(nèi) 容包括：設(shè)備的名稱及

18、型號(hào)、制造商名稱、設(shè)備編號(hào)、 10 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 啟用日期、目前放置地點(diǎn)、設(shè)備責(zé)任人，并應(yīng)有儀器的 標(biāo)準(zhǔn)操作SOP 或其它技術(shù)資料復(fù)印件。 3.3. 常規(guī)儀器設(shè)備的操作使用程序 3.3.1. 儀器設(shè)備的使用授權(quán) HYPERLINK . 僅有本實(shí)驗(yàn)室工作人員有權(quán)使用實(shí)驗(yàn)室的儀器設(shè) 備。 HYPERLINK 儀. 器設(shè)備的使用者在使用前首先必須熟悉儀器設(shè)備 的操作使用程序并經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人考核認(rèn)可。 HYPERLINK . P

19、CR 實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有工作人員均經(jīng)工程師操作培訓(xùn)，共 同完成實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)系統(tǒng)的建立，管理文件的撰寫工 作。 3.3.2. 儀器設(shè)備的使用 HYPERLINK . 儀器設(shè)備的使用嚴(yán)格遵守分區(qū)使用管理。 HYPERLINK . 儀器設(shè)備的使用必須嚴(yán)格遵循儀器設(shè)備的標(biāo)準(zhǔn)操作 規(guī)程。 3.3.3. 儀器設(shè)備的維護(hù)保養(yǎng) HYPERLINK . 儀器設(shè)備應(yīng)定期校準(zhǔn)，具體參照“儀器設(shè)備校準(zhǔn)程 序”。 HYPERLINK . 儀器出現(xiàn)故障應(yīng)作記錄和處理意見(jiàn)，如不能正常使 用，應(yīng)聯(lián)系廠家設(shè)備維修人員或相關(guān)專門維修單位 進(jìn)行處理，并填寫維修記錄。 11 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CX

20、WJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 HYPERLINK . 儀器應(yīng)有工作狀態(tài)標(biāo)識(shí)，正常運(yùn)行的各區(qū)儀器應(yīng)貼 有相應(yīng)的標(biāo)簽（綠色）以表明其狀態(tài)。待維護(hù)的儀 器用黃色標(biāo)簽。有故障待修暫停儀器用紅色標(biāo)簽。 需定期作校準(zhǔn)或檢定的儀器應(yīng)有校準(zhǔn)或檢定日期及 下次校準(zhǔn)或檢定日期的記錄。 HYPERLINK . 本實(shí)驗(yàn)室所有儀器、設(shè)備均為專用不外借。 12 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 20

21、20.07.28 儀器設(shè)備校準(zhǔn)程序 1. 目的：確保實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備得到妥善的管理，確保檢測(cè)質(zhì)量。 2. 適用范圍：本程序適用于適用于實(shí)驗(yàn)室所有的儀器設(shè)備。 3. 具體內(nèi)容： 3.1. 校準(zhǔn)方法： 3.1.1. 定量擴(kuò)增儀、生物安全柜、冷凍高速離心機(jī)功能性儀器 由各生產(chǎn)廠家每年進(jìn)行一次維修檢測(cè)，并將此作為校準(zhǔn) 依據(jù)。 3.1.2. 移液器校準(zhǔn)外送專業(yè)機(jī)構(gòu)專業(yè)人員進(jìn)行校準(zhǔn)。 3.1.3. 干式恒溫器使用經(jīng)質(zhì)量檢定的溫度計(jì)進(jìn)行自行校準(zhǔn)。 3.1.4. 移動(dòng)紫外線消毒車由實(shí)驗(yàn)室工作人員季度對(duì)紫外燈管的 紫外線進(jìn)行測(cè)試。新燈管要求紫外線強(qiáng)度大于或等于 90UW/cm2, 舊燈管紫外線強(qiáng)度大于或等于70

22、UW/cm2。 并將此作為校準(zhǔn)依據(jù)。 3.2. 校準(zhǔn)計(jì)劃 3.2.1. 啟用校準(zhǔn)：設(shè)備在投入使用時(shí)實(shí)施啟用校準(zhǔn)。 3.2.2. 周期校準(zhǔn)：設(shè)備在投入使用后，每年實(shí)施一次校準(zhǔn)。 3.2.3. 維修后校準(zhǔn)：設(shè)備在維修后須經(jīng)校準(zhǔn)方可重新投入使用。 3.2.4. 校準(zhǔn)計(jì)劃外的校準(zhǔn)：如在檢測(cè)及EQA，IQC 活動(dòng)中發(fā)現(xiàn) 存在結(jié)果漂移或偏差及其它可疑情況時(shí)，通過(guò)分析對(duì)可 13 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 疑設(shè)備及時(shí)實(shí)施校準(zhǔn)。 3.2.5. 移液器

23、的校準(zhǔn)順序：按照單一流向規(guī)定，對(duì)移液器的校 準(zhǔn)首先校準(zhǔn)試劑準(zhǔn)備區(qū)，然后依次為樣本處理區(qū)和 PCR 擴(kuò)增區(qū)。每校準(zhǔn)完一個(gè)區(qū)的移液器，將其放回原處后， 再取下一個(gè)區(qū)的移液器進(jìn)行校準(zhǔn)。 3.2.6. 校準(zhǔn)安排在不進(jìn)行樣本檢測(cè)的日期完成。 3.2.7. 校準(zhǔn)的有效標(biāo)識(shí)：經(jīng)校準(zhǔn)的設(shè)備上應(yīng)標(biāo)明本次校準(zhǔn)日期。 14 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 實(shí)驗(yàn)室防污染程序 1. 目的：預(yù)防臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增過(guò)程中污染的發(fā)生,避免假陽(yáng) 性結(jié)果的干擾，保證檢測(cè)

24、質(zhì)量。 2. 適用范圍：適用于臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)報(bào)告體系中污 染的控制。 3. 具體內(nèi)容： 3.1. 污染的定義：PCR 污染來(lái)源主要包括標(biāo)本間交叉污染，PCR 試劑污染，PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物的污染，實(shí)驗(yàn)中克隆質(zhì)粒的污染。 預(yù)防污染即從樣本采集到樣本檢測(cè)各階段及實(shí)驗(yàn)室環(huán)境各方 面進(jìn)行控制以防止污染的發(fā)生。 3.2. 污染的預(yù)防 3.2.1. 實(shí)驗(yàn)室的基本設(shè)置 臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室分三個(gè)區(qū)，（1）試劑準(zhǔn)備區(qū)， （2）標(biāo)本處理區(qū)，（3）擴(kuò)增分析區(qū)。各區(qū)相應(yīng)隔離，有獨(dú)立 緩沖間，并遵循從123 區(qū)的單方向工作。各區(qū)有完善的清 潔及消毒措施，并定期清潔和消毒。各區(qū)物品嚴(yán)格分開(kāi)，不能 串用。 微

25、量移液器應(yīng)定區(qū)使用，定期校準(zhǔn)，定時(shí)滅菌（半年滅菌 一次，或浸泡或高壓，周期與校準(zhǔn)相吻合）。 3.2.2. 標(biāo)本的采集和保存 15 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 由專人收集標(biāo)本，標(biāo)本保存方法依據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目而定。接收 標(biāo)本在 PCR 三個(gè)工作區(qū)以外，根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目要求采集 標(biāo)本。分裝標(biāo)本時(shí)嚴(yán)格禁止將分裝的標(biāo)本又回倒入原始容器。 標(biāo)本根據(jù)相應(yīng)要求進(jìn)行保存。 3.2.3. 試劑選擇 優(yōu)先選用使用 UNG/dUTP 防污染體系的試 劑。 3.2

26、.4. 技術(shù)人員 技術(shù)人員進(jìn)行崗前培訓(xùn)及定期考核，以確保 熟練掌握PCR 技術(shù)。嚴(yán)格遵循標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行檢測(cè)， 操作避免氣溶膠的污染。 3.2.5. 質(zhì)量保證 HYPERLINK . 實(shí)驗(yàn)方法的建立：采用商業(yè)試劑盒或文獻(xiàn)報(bào)道的實(shí) 驗(yàn)方法，如為實(shí)驗(yàn)室自己建立的方法，必須防止污 染的發(fā)生。 HYPERLINK . 設(shè)立陽(yáng)性和陰性質(zhì)量控制：陽(yáng)性質(zhì)量控制包括弱陽(yáng) 性質(zhì)量控制；陰性質(zhì)量控制包括陰性對(duì)照和試劑對(duì) 照。 HYPERLINK . 由實(shí)驗(yàn)室主任定期檢查質(zhì)量控制曲線，以保證檢測(cè) 結(jié)果的精確。 HYPERLINK . 實(shí)驗(yàn)完畢依次以2000mg/L 次氯酸鈉、酒精、水徹底 消毒清潔工作臺(tái)，長(zhǎng)時(shí)間紫外

27、照射消毒實(shí)驗(yàn)室空氣 及工作臺(tái)面和其他實(shí)驗(yàn)設(shè)備。 16 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 3.2.6. 污染源的查找 HYPERLINK . 試劑污染:設(shè)立陰陽(yáng)性對(duì)照,有利于監(jiān)測(cè)反應(yīng)體系各 成分的污染情況。選擇陽(yáng)性對(duì)照時(shí)，應(yīng)選擇擴(kuò)增弱， 且重復(fù)性好的樣品，因強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照可產(chǎn)生大量不必 要的擴(kuò)增序列，反而可能成為潛在的污染源。每次 擴(kuò)增陰性對(duì)照除包括一般陰性對(duì)照（陰性血清）外， 均應(yīng)包括 PCR 體系中各試劑的試劑對(duì)照，即包括 PCR 反應(yīng)所需的

28、全部成分，而不加模板DNA，這對(duì) 監(jiān)測(cè)試劑中 PCR 產(chǎn)物殘留污染是非常有益的。如果 擴(kuò)增結(jié)果中試劑對(duì)照為陽(yáng)性結(jié)果，就是某一種或數(shù) 種試劑被污染了。此時(shí)，要全部更換一批新的試劑 進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增時(shí)設(shè)立不同的反應(yīng)管，每一管含有 一種被檢測(cè)試劑，在檢出污染試劑后，應(yīng)馬上處理。 HYPERLINK . 環(huán)境污染：在排除試劑污染的可能性外，更換試劑 后，若不久又發(fā)現(xiàn)試劑被污染了，如果預(yù)防措施比 較嚴(yán)密，則考慮可能為環(huán)境污染。 環(huán)境污染中常見(jiàn)的污染源主要有：模板提取時(shí) 真空抽干裝置；離心機(jī)；冰箱門把手，冷凍架，門 把手或?qū)嶒?yàn)臺(tái)面等。 可用擦拭實(shí)驗(yàn)來(lái)查找可疑污染源。用無(wú)菌水浸 泡過(guò)的滅菌棉簽擦拭可疑污染源；

29、0.1ml 去離子水浸 17 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 泡；取5ml 做PCR 實(shí)驗(yàn)。 HYPERLINK . 氣溶膠污染:如果經(jīng)過(guò)上述追蹤實(shí)驗(yàn)，仍不能查找到 確切污染源，則污染可能是由空氣中PCR 產(chǎn)物的氣 溶膠造成的，此時(shí)就應(yīng)該更換實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所，若條件不 允許，則重新設(shè)計(jì)新的引物（與原引物無(wú)相關(guān)性）。 3.2.7. 污染的處理 可使用稀酸處理法：對(duì)可疑器具用 1mol/L 鹽酸擦拭或浸泡，使殘余DNA 脫嘌呤；也可使用紫外照 射（U

30、V）法：紫外波長(zhǎng)（nm）一般選擇254/300nm，照 射1 小時(shí)即可。反應(yīng)液污染:丟棄已污染的反應(yīng)液。 18 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 試劑耗材管理程序 1. 目的：規(guī)定試劑購(gòu)買原則、驗(yàn)收的程序和試劑的正確貯存。 2. 適用范圍：本程序適用于實(shí)驗(yàn)室所購(gòu)的診斷試劑盒、實(shí)驗(yàn)耗材。 3. 具體內(nèi)容： 3.1. 試劑的購(gòu)買和管理 3.1.1. 試劑購(gòu)買原則：PCR 檢測(cè)試劑選用原則“質(zhì)優(yōu)價(jià)廉”并 與實(shí)驗(yàn)室所使用儀器配套，所購(gòu)試劑必須三證齊

31、全。 3.1.2. 試劑購(gòu)買程序 HYPERLINK . 試劑廠家的確定：先由具體檢測(cè)人員提供 2 家或 2 家以上（特殊情況 1 家亦可）試劑生產(chǎn)廠家的相關(guān) 試劑信息，將申請(qǐng)?zhí)峤凰幮悼?，藥械科與經(jīng)銷商議 價(jià)。 HYPERLINK . 試劑的購(gòu)買：實(shí)驗(yàn)室人員提前 1 月以上上報(bào)采購(gòu)申 請(qǐng)單，交由藥械科與供貨商聯(lián)系供貨。 3.1.3. 試劑生產(chǎn)廠商的變更：為保證試劑使用的穩(wěn)定性，原則 上一年內(nèi)不變更試劑生產(chǎn)廠商，如在使用過(guò)程中發(fā)現(xiàn)質(zhì) 量問(wèn)題，操作人員及時(shí)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人匯報(bào)，必要時(shí)提 出更換試劑生產(chǎn)廠家的要求，交試劑審核組討論決定。 3.1.4. 試劑驗(yàn)收： HYPERLINK . 藥械科工作人員

32、與實(shí)驗(yàn)室工作人員負(fù)責(zé)核對(duì)試劑品 19 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 名、數(shù)量和價(jià)格，并在供貨清單上簽字。 HYPERLINK . 實(shí)驗(yàn)室操作人員負(fù)責(zé)試劑質(zhì)量驗(yàn)收（內(nèi)外包裝驗(yàn) 收）： HYPERLINK 外. 包裝要求：包裝完整無(wú)損、標(biāo)識(shí)清楚齊全（品名、 廠家、批準(zhǔn)文號(hào)、生產(chǎn)日期、效期）、所購(gòu)試劑需 保證至少仍有三個(gè)月以上效期； HYPERLINK . 內(nèi)包裝要求：內(nèi)包裝完好無(wú)損、無(wú)泄漏，試劑各部 分、說(shuō)明書齊全。供貨清單由試劑管理人員保

33、管， 試劑驗(yàn)收后登記存儲(chǔ)。 3.1.5. 試劑儲(chǔ)存：試劑盒保存按照說(shuō)明書規(guī)定進(jìn)行。PCR 檢測(cè) 試劑分區(qū)保存：擴(kuò)增反應(yīng)體系試劑保存于試劑儲(chǔ)存區(qū)； 對(duì)照品、定量校準(zhǔn)品、核酸提取試劑儲(chǔ)存于樣品處理區(qū)。 3.1.6. 試劑出現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題，立即書面通知實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人員，在 其知情同意下，聯(lián)系經(jīng)銷商辦理退換貨手續(xù)。 3.2. 實(shí)驗(yàn)耗材的購(gòu)買和管理 3.2.1. 購(gòu)買：由實(shí)驗(yàn)室工作人員填寫申請(qǐng)，按需提出所購(gòu)耗材 的品名、規(guī)格、數(shù)量，由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人簽字同意后藥械 科購(gòu)買。 3.2.2. 驗(yàn)收：消耗品購(gòu)進(jìn)后由實(shí)驗(yàn)室工作人員核對(duì)數(shù)量、規(guī)格， 查驗(yàn)外包裝是否破損，如發(fā)生破損或其它質(zhì)量問(wèn)題，給 予退回。由實(shí)驗(yàn)室工作人員

34、負(fù)責(zé)進(jìn)行質(zhì)量驗(yàn)收。 20 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 3.2.3. 實(shí)驗(yàn)操作人員對(duì)庫(kù)存試劑定期每月檢查，并填寫試劑使 用記錄表，不使用過(guò)期試劑，并杜絕浪費(fèi)現(xiàn)象。 21 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 標(biāo)本的管理程序 1. 目的：加強(qiáng)標(biāo)本采集、運(yùn)送、貯存、廢棄的管理，保證檢驗(yàn)結(jié)果

35、準(zhǔn)確性與有效性。 2. 適用范圍：本程序適用于各類臨床標(biāo)本的管理。 3. 具體內(nèi)容： 3.1. 標(biāo)本的唯一性標(biāo)識(shí)：標(biāo)識(shí)構(gòu)成-病人姓名、標(biāo)本采集日期、 檢測(cè)、該檢測(cè)批次的標(biāo)本序號(hào)，無(wú)間隔符號(hào)。標(biāo)本的唯一性標(biāo) 識(shí)須字跡清晰明了，不得隨意作任何涂改；必須時(shí)，在舊標(biāo)識(shí) 上劃雙線更改，更改后應(yīng)保持舊標(biāo)識(shí)可辨識(shí)。 3.2. 標(biāo)本的采集、驗(yàn)收、拒收：檢測(cè)標(biāo)本為血清時(shí)，要求用真空采 血管采集血液標(biāo)本；檢測(cè)標(biāo)本為鼻咽試子時(shí)，要求用專用的采 集試子采集標(biāo)本，接收標(biāo)本時(shí)應(yīng)核對(duì)標(biāo)本與檢驗(yàn)申請(qǐng)單的一致 性。標(biāo)本接受人須檢查標(biāo)本狀態(tài)：標(biāo)本合乎要求，須在標(biāo)本記 錄上注明合格，作進(jìn)一步處理；標(biāo)本不合格，工作人員有權(quán)拒 受標(biāo)本

36、，其它后續(xù)處理過(guò)程中發(fā)現(xiàn)的不合格，應(yīng)記錄其狀態(tài)并 通知相關(guān)科室重新送檢。 3.3. 標(biāo)本的安全處理：實(shí)驗(yàn)室所有的廢棄標(biāo)本、使用過(guò)的耗材等均 應(yīng)永濃度為2000mg/L 的有效氯消毒液噴灑消毒，然后再作相 應(yīng)的處理。所有標(biāo)本均可能具有傳染性，須嚴(yán)格遵守檢驗(yàn)中心 有關(guān)院內(nèi)感染及醫(yī)用垃圾的管理和處理規(guī)定，工作人員須注意 22 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 保持并隨時(shí)檢查容器的完整和無(wú)標(biāo)本外泄發(fā)生。 23 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)：

37、 WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果報(bào)告程序 1. 目的：檢測(cè)報(bào)告是過(guò)程的最終輸出，為使報(bào)告的生成、發(fā)放、管 理受控，特制訂本程序。 2. 適用范圍：本程序適用于本基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室所有臨床檢測(cè)的 結(jié)果報(bào)告，只有經(jīng)PCR 培訓(xùn)并獲得上崗證的工作人員才有權(quán)審核 和簽發(fā)報(bào)告單。 3. 具體內(nèi)容： 3.1. 檢測(cè)結(jié)果的報(bào)告應(yīng)準(zhǔn)確、清晰、明確、客觀和及時(shí)，杜絕虛假 報(bào)告。 3.2. 實(shí)時(shí)熒光 PCR 測(cè)定時(shí)，其檢測(cè)數(shù)據(jù)要經(jīng)過(guò)分析，避免因非特 異性熒光而造成假陽(yáng)性結(jié)果。根據(jù)質(zhì)

38、控品判斷 PCR 擴(kuò)增的有 效性，只有當(dāng)質(zhì)控品的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)在控時(shí)，才可發(fā)出報(bào)告，否則 應(yīng)重新測(cè)定。 3.3. 定性結(jié)果報(bào)告以陽(yáng)性/陰性報(bào)告，根據(jù)擴(kuò)增曲線判讀試驗(yàn)結(jié)果。 3.4. 病人檔案及測(cè)定結(jié)果及病人檔案一并登記到實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表 中，由室負(fù)責(zé)人管理所有病人資料。每份報(bào)告均應(yīng)由我實(shí)驗(yàn)室 出具；報(bào)告內(nèi)容至少應(yīng)包括：病人姓名、性別、年齡、樣本號(hào)、 標(biāo)本特性、標(biāo)本狀態(tài)、標(biāo)本接收日期及測(cè)定、測(cè)定方法、結(jié)果、 參考范圍以及操作者和審核者的簽名和檢測(cè)日期等內(nèi)容。否則 視為無(wú)效或虛假報(bào)告單。以上記錄實(shí)行完整保存，至少保存2 24 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/

39、修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 年以上。 3.5. 報(bào)告單應(yīng)及時(shí)發(fā)出。 3.6. 打印當(dāng)日檢測(cè)報(bào)告匯總表，存檔，妥善保存2 年以上 3.7. 當(dāng)臨床科室醫(yī)生要求電話報(bào)告結(jié)果時(shí)，應(yīng)先確認(rèn)對(duì)方身份，核 對(duì)其所查詢的病人姓名、病區(qū)床號(hào)等情況，方可報(bào)告，并明確 告知對(duì)方，實(shí)驗(yàn)的最終結(jié)果以檢測(cè)報(bào)告單為準(zhǔn)。 25 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制管理程序 1.

40、 目的：監(jiān)控本實(shí)驗(yàn)室常規(guī)工作的可靠性和有效性，確定檢測(cè)結(jié)果 能否報(bào)告。 2. 適用范圍：本程序適用于實(shí)驗(yàn)室臨床檢測(cè)實(shí)驗(yàn)全過(guò)程，實(shí)驗(yàn)室工 作人員均須熟知并遵守本程序，并逐步完善室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng) 工作。 3. 具體內(nèi)容： 3.1. 室內(nèi)質(zhì)控 3.1.1. 由于核酸擴(kuò)增的高敏感性，為避免假陽(yáng)性和假陰性，必 須對(duì)DNA 和RNA 分析的各步進(jìn)行質(zhì)量控制，以保證測(cè) 定結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。室內(nèi)質(zhì)控包括標(biāo)本制備、逆 轉(zhuǎn)錄、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析中的每一步。 3.1.2. 逆轉(zhuǎn)錄和擴(kuò)增：包括陽(yáng)性質(zhì)控和陰性質(zhì)控。對(duì)逆轉(zhuǎn)錄和 核酸擴(kuò)增的質(zhì)控可使用內(nèi)標(biāo)質(zhì)控方法也可采用外標(biāo)質(zhì)控 方法。 3.1.3. 在測(cè)定血清/血漿病原

41、體時(shí)，應(yīng)使用質(zhì)控品作為質(zhì)控樣本， 與待測(cè)臨床標(biāo)本等同處理提取核酸及擴(kuò)增，以判斷逆轉(zhuǎn) 錄及擴(kuò)增檢測(cè)的效果。 3.1.4. 質(zhì)控樣本在擴(kuò)增時(shí)必須使用與患者的標(biāo)本相同的主反應(yīng) 混合液。 26 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 3.1.5. 每一個(gè) PCR 反應(yīng)都必須設(shè)外加陰性質(zhì)控（污染監(jiān)測(cè)質(zhì) 控）。 3.1.6. 測(cè)定結(jié)果的評(píng)價(jià)： HYPERLINK . 采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)方法，在判斷結(jié)果時(shí)， 應(yīng)先對(duì)擴(kuò)增的熒光信號(hào)作出定性判斷，然后再進(jìn)

42、行 定量分析，避免一些非特異性熒光信號(hào)對(duì)結(jié)果分析 的干擾。 HYPERLINK . 當(dāng)質(zhì)控標(biāo)本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)在控時(shí)，方可發(fā)出臨床標(biāo)本的 檢測(cè)報(bào)告。 HYPERLINK . 每次實(shí)驗(yàn)的質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)均要作記錄，如有失控現(xiàn)象應(yīng) 及時(shí)分析失控原因并采取措施，并做記錄。 3.2. 室間質(zhì)評(píng) 3.2.1. 參加甘肅省或衛(wèi)生部臨檢中心相關(guān)檢測(cè)的室間質(zhì)量評(píng) 價(jià)。 3.2.2. 室間質(zhì)控樣本的接收和驗(yàn)收參見(jiàn)室間質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī) 程。 3.2.3. 質(zhì)控標(biāo)本的檢測(cè)按常規(guī)臨床標(biāo)本對(duì)待，檢測(cè)結(jié)果須在截 止日期前上報(bào)。 3.2.4. 對(duì)室間質(zhì)評(píng)的反饋結(jié)果進(jìn)行分析，確定工作中須修正的 環(huán)節(jié)。 27 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編

43、號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果報(bào)告程序 1. 目的：檢測(cè)報(bào)告是過(guò)程的最終輸出，為使報(bào)告的生成、發(fā)放、管 理受控，特制訂本程序。 2. 適用范圍：本程序適用于本基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室所有臨床檢測(cè)的 結(jié)果報(bào)告，只有經(jīng)PCR 培訓(xùn)并獲得上崗證的工作人員才有權(quán)審核 和簽發(fā)報(bào)告單。 3. 具體內(nèi)容： 3.1. 檢測(cè)結(jié)果的報(bào)告應(yīng)準(zhǔn)確、清晰、明確、客觀和及時(shí)，杜絕虛假 報(bào)告。 3.2. 實(shí)時(shí)熒光 PCR 測(cè)定時(shí)，其檢測(cè)數(shù)據(jù)要經(jīng)過(guò)分析，避免因非特 異性熒光而造成假陽(yáng)性結(jié)果。根

44、據(jù)質(zhì)控品判斷 PCR 擴(kuò)增的有 效性，只有當(dāng)質(zhì)控品的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)在控時(shí)，才可發(fā)出報(bào)告，否則 應(yīng)重新測(cè)定。 3.3. 每份報(bào)告均應(yīng)由我實(shí)驗(yàn)室出具；報(bào)告內(nèi)容至少應(yīng)包括：醫(yī)院名 稱、病人姓名、性別、年齡、科室、樣本號(hào)、標(biāo)本特性、標(biāo)本 狀態(tài)、標(biāo)本接收日期、測(cè)定方法、結(jié)果、參考范圍以及操作者 和審核者的簽名和檢測(cè)日期等內(nèi)容。否則視為無(wú)效或虛假報(bào)告 單。以上記錄實(shí)行完整保存，至少保存2 年以上。 3.4. 報(bào)告單應(yīng)及時(shí)發(fā)出，住院病人報(bào)告單及時(shí)(12h 內(nèi))送至送檢科 室；門診病人（愿檢盡檢人員）報(bào)告單應(yīng)告知患者報(bào)告時(shí)間（24h 28 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版

45、本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 之內(nèi)），并于此時(shí)間內(nèi)送至門診報(bào)告存放處；發(fā)熱門診病人應(yīng) 當(dāng)在規(guī)定時(shí)間內(nèi)（6h）出具報(bào)告單。 3.5. 當(dāng)臨床科室醫(yī)生要求電話報(bào)告結(jié)果時(shí)，應(yīng)先確認(rèn)對(duì)方身份，核 對(duì)其所查詢的病人姓名、病區(qū)床號(hào)等情況，方可報(bào)告，并明確 告知對(duì)方，實(shí)驗(yàn)的最終結(jié)果以檢測(cè)報(bào)告單為準(zhǔn)。 29 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 抱怨處理程序 1. 目的：“抱怨

46、”往往提示實(shí)驗(yàn)室存在著尚未得到認(rèn)識(shí)的漏洞或問(wèn) 題。為正確處理好“抱怨”，鞏固和完善實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系，特制 訂本程序。 2. 適用范圍：本程序適用于來(lái)自于患者，臨床醫(yī)護(hù)人員或?qū)嶒?yàn)室工 作人員針對(duì)檢測(cè)結(jié)果質(zhì)量、服務(wù)質(zhì)量或?qū)嶒?yàn)室管理等問(wèn)題的投訴。 每個(gè)實(shí)驗(yàn)室工作人員均有責(zé)任接待申訴者，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人對(duì)抱怨 進(jìn)行處理，如超出室負(fù)責(zé)人職權(quán)范圍，上報(bào)醫(yī)院有關(guān)部門處理。 3. 具體內(nèi)容： 3.1. 接到抱怨 3.2. 記錄抱怨 3.3. 提出針對(duì)具體抱怨的處理方法 3.3.1. 對(duì)患者提出的合理要求及時(shí)進(jìn)行處理。 3.3.2. 調(diào)查事情原委，根據(jù)調(diào)查結(jié)果對(duì)相關(guān)責(zé)任人進(jìn)行處罰。 3.3.3. 向患者或醫(yī)生解釋相關(guān)

47、實(shí)驗(yàn)程序和可能臨床情況，幫助 客戶解除疑慮。 3.4. 征求抱怨方對(duì)處理方法的意見(jiàn) 3.5. 執(zhí)行解決方案 3.6. 記錄最后的處理結(jié)果 30 XX 市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 文件編號(hào)： WEY-JYK-PCR-CXWJ 版本/修訂號(hào)： A/0 PCR 實(shí)驗(yàn)室程序文件 頒布日期： 2020.07.28 實(shí)施日期： 2020.07.28 檢驗(yàn)過(guò)程中發(fā)生故障時(shí)的應(yīng)急處理程序 1. 目的：為避免因儀器設(shè)備發(fā)生故障和試劑盒發(fā)生質(zhì)量問(wèn)題而影響 到臨床檢測(cè)報(bào)告的及時(shí)性和準(zhǔn)確性，特制定本程序。 2. 適用范圍：本程序適用于可能影響到檢測(cè)報(bào)告發(fā)出的儀器設(shè)備和 試劑等，對(duì)于潛在著一定的可能影響檢測(cè)質(zhì)量的不確定因素，一 旦發(fā)生，作為對(duì)應(yīng)措施，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有一套相應(yīng)的應(yīng)急處理程序， 室負(fù)責(zé)人有責(zé)任組織并直接監(jiān)督本程序的實(shí)施。 3. 具體內(nèi)容： 3.1. 科室負(fù)責(zé)人接到異常情況報(bào)警后，立即現(xiàn)場(chǎng)確認(rèn)異常情況的性 質(zhì)：觀察有無(wú)誤操作、偶發(fā)現(xiàn)象或確屬不能立即排除的故障。 3.2. 用紅牌故障標(biāo)志標(biāo)示故障儀器，放置到其它實(shí)驗(yàn)室，以防被錯(cuò) 誤使用。 3.3. 小型儀器配送廠家維修