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1、動(dòng)物病理剖檢診斷技術(shù)佘 銳 萍中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院病理教研室2003年9月動(dòng)物病理剖檢診斷技術(shù) 教學(xué)大綱 概 論 第一章 病理診斷實(shí)驗(yàn)室的基本設(shè)備及要求 第一節(jié) 病理診斷實(shí)驗(yàn)室的基本構(gòu)成和房屋建筑要求 第二節(jié) 病理診斷實(shí)驗(yàn)室的基本設(shè)備及器械 第二章 病理診斷的基本方法 第一節(jié) 病理診斷的理論依據(jù) 第二節(jié) 病理診斷的基本方法 第三節(jié) 病理診斷的基本程序 第三章 病理剖檢通則及注意事項(xiàng) 第一節(jié) 病理剖檢的一般原則 第二節(jié) 病理剖檢的注意事項(xiàng) 第三節(jié) 剖檢后的清洗消毒工作及尸體處理動(dòng)物病理剖檢診斷技術(shù) 教學(xué)大綱第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容 第一節(jié) 臨床病歷摘要 第二節(jié) 器官病變記錄 第三節(jié) 病
2、理診斷 第四節(jié) 結(jié)論 第五節(jié) 動(dòng)物死后變化的判定和識(shí)別第五章 病料的采集、固定、運(yùn)送 第一節(jié) 病理組織材料的采集固定及運(yùn)送 第二節(jié) 其他實(shí)驗(yàn)室診斷病料的采集與運(yùn)送第六章 各種動(dòng)物的剖檢方法動(dòng)物病理剖檢診斷技術(shù) 概 論 一、病理診斷的定義動(dòng)物病理學(xué)(animal pathology)是以解剖學(xué)組織學(xué). 生理學(xué).生物化學(xué).微生物學(xué)及免疫學(xué)等為基礎(chǔ), 運(yùn)用各種方法和技術(shù)研究疾病的發(fā)生原因(病因?qū)W,etiology).在病因作用下疾病的發(fā)生發(fā)展過程(發(fā)病學(xué)/發(fā)病機(jī)制 pathogenesis),以及機(jī)體在疾病過程中的功能、代謝和形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變(病變,pathological changes/lesio
3、ns),從而揭示患病機(jī)體的生命活動(dòng)規(guī)律的一門科學(xué)。動(dòng)物病理剖檢診斷技術(shù) 概 論 一、病理診斷的定義診斷是以鑒別不同的疾病為目的對(duì)病因和發(fā)病機(jī)理所作的結(jié)論。疾病診斷說到底實(shí)際上是病理診斷。診斷病理學(xué)的任務(wù)主要是研究動(dòng)物及人類各種疾病的病變特點(diǎn), 從而做出疾病的病理學(xué)診斷和鑒別診斷, 直接為臨床防治疾病服務(wù) 動(dòng)物病理剖檢診斷技術(shù)概 論 二、什么是尸體剖檢技術(shù)?尸體剖檢(Autopsy)簡(jiǎn)稱尸檢,它是應(yīng)用病理學(xué)有關(guān)知識(shí)和技術(shù)剖檢死亡畜禽尸體的各種變化。它是病理學(xué)最基本的研究方法之一。通過尸體剖檢可以查出病變和病因,分析各種病變的主次,和相互關(guān)系,確定診斷,查明死因,以利于臨床及時(shí)總結(jié)經(jīng)驗(yàn),改進(jìn)和提高
4、臨床診療水平。同時(shí),通過尸體剖檢可以盡快發(fā)現(xiàn)和確診某些傳染病、寄生蟲病和新發(fā)生的疾病,為防疫部門及時(shí)采取防治措施提供依據(jù)。另外,通過尸體剖檢廣泛收集各種疾病的病理標(biāo)本和病理資料,可以為深入研究和揭示某些疑難病癥的發(fā)病機(jī)理并最終控制它們提供重要的基礎(chǔ)資料。因此掌握尸體剖檢技術(shù),對(duì)于做好疾病的防治工作具有重要意義 動(dòng)物病理剖檢診斷技術(shù)概 論 二、什么是尸體剖檢技術(shù)? 病理剖檢的意義: 1.臨床上疾病的診斷 2.證實(shí)生前診斷的正確與否,以提高臨床診斷 技能(西方醫(yī)學(xué)界流行這樣一句話: “最后一句話必須由病理學(xué)家來說”) 3.小動(dòng)物疾病的診斷,群發(fā)病的診斷(雞、貓、 鼠等) 如傳染病.寄生蟲病。 4.
5、科研中綜合診斷未知病。 動(dòng)物病理剖檢診斷技術(shù) 概 論 病理學(xué)是基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)之間的橋梁 動(dòng)物學(xué). 解剖學(xué) 預(yù)防獸醫(yī)學(xué)(寄.傳) 組織胚胎學(xué).生理學(xué) PATHOLOGY 臨床獸醫(yī)學(xué)(內(nèi).外.產(chǎn)) 生物化學(xué)微生物學(xué) pathology 公共衛(wèi)生學(xué) 可見,pathology是基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)之間的一門橋梁課程, 起承上啟下的作用,在醫(yī)學(xué)教學(xué)中占有重要的地位。 在醫(yī)學(xué)界,病理學(xué)長(zhǎng)期以來被喻為“橋梁醫(yī)學(xué)”和“審判醫(yī)學(xué)”充 分表明它在醫(yī)學(xué)中,特別是在臨床醫(yī)學(xué)中占有不可替代的雙重地位. 這主要是由病理學(xué)的性質(zhì)和任務(wù)所決定的。動(dòng)物病理剖檢診斷技術(shù)概 論病理學(xué)(診斷)在醫(yī)學(xué)診斷中 是最具有權(quán)威 性的一級(jí)診
6、斷。 病理診斷是直接觀測(cè)器官、組織和細(xì)胞病變特征而做出疾病診斷,因而它比臨床上的其他診斷如根據(jù)病史.癥狀和體征等做出的分析性診斷,比用超聲波,X射線.CT.核磁共振等做出 影象診斷等,都更具有直觀性.客觀性和準(zhǔn)確性. 可見,病理學(xué)作為應(yīng)用科學(xué),其任務(wù)是鑒定疾病及其嚴(yán)重程度,在醫(yī)學(xué)診斷中的地位有如一部“法典”.國(guó)外將司“法典”的病理醫(yī)生稱之為“doctors doctor”。在西方醫(yī)學(xué)界流行這樣一句話: “最后一句話要由病理學(xué)家來說”。動(dòng)物病理剖檢診斷技術(shù)概 論 二、什么是尸體剖檢技術(shù)? 尸體剖檢的優(yōu)點(diǎn)尸體剖檢的優(yōu)點(diǎn)是可全面系統(tǒng)地檢查,可隨意取材,不受時(shí)間限制,因而診斷全面確切,對(duì)死因的分析客觀
7、可信。所以,它在總結(jié)經(jīng)驗(yàn)提高診療水平和解決醫(yī)療糾紛法醫(yī)糾紛等方面,在積累系統(tǒng)的病理資料認(rèn)識(shí)新病種及發(fā)展醫(yī)學(xué)等方面,都做出了巨大貢獻(xiàn)。動(dòng)物病理剖檢診斷技術(shù)概 論 二、什么是尸體剖檢技術(shù)?尸體剖檢的缺點(diǎn)是: 由于組織細(xì)胞的死后變化,會(huì)不同程度的影響酶類抗原超微結(jié)構(gòu)以至組織細(xì)胞形態(tài)的檢查。另外,所檢查的多為靜止于死前的晚期病變,無法觀察早期病變及其動(dòng)態(tài)變化過程。動(dòng)物病理剖檢診斷技術(shù)概 論 三、尸體剖檢目的 尸體剖檢的目的在于認(rèn)識(shí)疾病。 但是認(rèn)識(shí)疾病可不是一件容易的事。WHY? 1. 同一疾病有不同的表現(xiàn);不同的動(dòng)物 同一動(dòng)物不同個(gè)體,. 2. 不同的病原可引起相同的病變 如MD、LL,前者 是皰疹病
8、毒,后者是ROSS V引起(60年代才分開) 3.多重感染病變更復(fù)雜,疾病在不同的發(fā)展階段病變 也不一樣。由于免疫程序紊亂造成的不典型病變。 4. 還有死后變化 5. 社會(huì)因素:謊報(bào)病情動(dòng)物病理剖檢診斷技術(shù)概 論 四、本課程要求 通過講授和剖檢實(shí)踐,熟練掌握畜禽疾病的病理學(xué)診斷技術(shù),為獸醫(yī)專業(yè)的有關(guān)人員開展研究工作和病理診斷打下良好基礎(chǔ) 1. 剖檢中要認(rèn)真仔細(xì) 2. 多動(dòng)手剖檢 3. 將尸體剖檢與臨床表現(xiàn)聯(lián)系起來綜合考慮 動(dòng)物病理剖檢診斷技術(shù)概 論二、病理剖檢的方式和方法 病理剖檢的目的在于認(rèn)識(shí)疾病。病理剖檢的方式和方法根據(jù)剖檢的目的不同而有所不同,一般可分三種。 (一)診斷學(xué)的(目的)剖檢方
9、法是為解決臨床上或養(yǎng)殖生產(chǎn)中的疾病診斷問題對(duì)病死的動(dòng)物進(jìn)行的病理學(xué)剖檢診斷。在群發(fā)病診斷時(shí),應(yīng)盡可能多地剖檢病尸體,必要時(shí)還需要對(duì)患病未死的,尤其是瀕死期的動(dòng)物(撲殺)進(jìn)行剖檢,以尋見到典型的病理變化,查明發(fā)病原因,為診斷疾病提供依據(jù)。同時(shí)對(duì)臨床診斷的結(jié)果正確與否進(jìn)行驗(yàn)證。 動(dòng)物病理剖檢診斷技術(shù)概 論 二、病理剖檢的方式和方法(二)科學(xué)研究的(目的)剖檢方法 這是在生物醫(yī)學(xué)研究中,進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)所進(jìn)行的剖檢,這種目的的剖檢工作已在生物學(xué)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。不僅用于疾病的發(fā)病機(jī)理和預(yù)防治療的研究,而且在動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)的研究中也已被廣泛應(yīng)用。為了科研的目的所進(jìn)行的剖檢工作常常是成批地進(jìn)行,剖檢的樣品需要達(dá)到
10、一定的數(shù)量,一般一種處理至少應(yīng)剖檢5個(gè)樣本, 大動(dòng)物不得少于3個(gè)。有一些研究與疾病無關(guān),因此, 剖檢時(shí)不是觀察病理變化,而是觀察一些功能指標(biāo)。以科研為目的的剖檢工作,剖檢方法和觀察重點(diǎn)視研究目的而定,如果是研究新發(fā)生的疾病,則剖檢必須全面系統(tǒng), 不能漏過任何環(huán)節(jié)。 動(dòng)物病理剖檢診斷技術(shù)概 論 二、病理剖檢的方式和方法(三)法獸醫(yī)學(xué)的(目的)剖檢方法 是為法律糾紛提供疾病診斷依據(jù)而進(jìn)行的病理剖檢,常常要求尋找病因或死因。這種性質(zhì)的剖檢要特別慎重地進(jìn)行全面、系統(tǒng)、仔細(xì)地檢查,不能漏掉任何蛛絲馬跡。剖檢人員應(yīng)具有中、高級(jí)專業(yè)技術(shù)職稱,剖檢時(shí),應(yīng)有糾紛雙方具有法人資格的代表到場(chǎng),同時(shí)要有公安司法人員參
11、加,剖檢的結(jié)論方能有效。 第一章 病理診斷實(shí)驗(yàn)室的基本設(shè)備及要求第一節(jié) 病理診斷實(shí)驗(yàn)室的基本構(gòu)成和房屋建筑要求 一、基本構(gòu)成 依規(guī)模大小和投入金費(fèi)的多少不同而不同 一般應(yīng)包括四室一間: 剖檢室 切片室 顯微鏡觀察室 病原鑒定室 化制間 有條件的可設(shè)電鏡室 第一章 病理診斷實(shí)驗(yàn)室的基本設(shè)備及要求第一節(jié) 病理診斷實(shí)驗(yàn)室的基本構(gòu)成和房屋建筑要求 二、建筑要求 不同的房間建筑要求有所不同1. 剖檢室:光照充足,地面 地溝 墻裙 排風(fēng)設(shè)備2. 切片室:光照 防塵(雙層玻璃) 排風(fēng)設(shè)備 空調(diào)設(shè)備3. 顯微鏡觀察室:防塵 防潮 防腐蝕 空調(diào)設(shè)備4. 病原鑒定室:防塵 5. 化制間:位于偏角處 第一章 病理診
12、斷實(shí)驗(yàn)室的基本設(shè)備及要求第二節(jié) 病理診斷實(shí)驗(yàn)室的基本設(shè)備及器械 一、基本設(shè)備1. 剖檢室:剖檢臺(tái).磁盤.照相設(shè)備.冰柜.冰箱2. 切片室:切片機(jī)、水浴鍋、展片臺(tái)、恒溫箱、 冰箱、天平3. 顯微鏡觀察室: 顯微鏡、顯微照相設(shè)備、 干燥器等(顯微圖象分析設(shè)備)4. 病原鑒定室:超凈工作臺(tái)、生化培養(yǎng)箱、離 心機(jī)、酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀、電泳儀 5. 化制間:焚尸爐 第一章 病理診斷實(shí)驗(yàn)室的基本設(shè)備及要求第二節(jié) 病理診斷實(shí)驗(yàn)室的基本設(shè)備及器械 二、器械及消耗性設(shè)備 剖檢室里一般應(yīng)配備如下各種用具:削皮刀、解剖刀、外科刀、腦刀、外科剪、腸剪、骨剪、軟骨剪、長(zhǎng)鑷、尖頭鑷、鼠齒鑷、無齒鑷、板鋸、弓鋸、雙刃鋸、骨固定
13、鉗、斧、鑿、探針、卷尺、天平、量杯、磨刀棒、磁盤、注射器、針頭、棉花、棉花線蠅、磁桶等。還應(yīng)備有膠皮手套、滑石粉、工作服、橡皮或塑料圍裙、膠靴、線手套、酒精燈、吸管、平皿、洗手盆等。 第一章 病理診斷實(shí)驗(yàn)室的基本設(shè)備及要求第二節(jié) 病理診斷實(shí)驗(yàn)室的基本設(shè)備及器械 二、器械及消耗性設(shè)備 在基層養(yǎng)殖單位,可能無專門的剖檢室,剖檢器械也不可能如此齊全,但至少應(yīng)備有削皮刀、手術(shù)刀、剪、腸剪、板鋸、鑷子、錘子、磁盤、尺子等。 注意必須應(yīng)備有消毒防護(hù)設(shè)備 剖檢器械清洗消毒所用的消毒液如0.05%洗必泰、0.1%新潔爾滅, 3%來蘇兒液及用于剖檢人員預(yù)防感染的3%碘酊,70%酒精,消毒棉花、紗布及橡皮膠等。另
14、外,還應(yīng)備有過氧乙酸、漂白粉、氫氧化鈉等用于地面、空氣消毒的藥品。第二章 病理診斷的基本方法第一節(jié) 病理診斷的理論依據(jù) 不同的疾病作用于機(jī)體,所引起的器官組織的病理形態(tài)學(xué)變化及其相互組合不同。所以,病理形態(tài)學(xué)變化常常是提示診斷的出發(fā)點(diǎn),并成為建立診斷的重要依據(jù)。不同病原體引起的機(jī)體反應(yīng)有其特異性, 例如雞新城疫病雞的腺胃黏膜出血、腸道黏膜棗核樣出血潰瘍;痘病的痘疹;雞馬立克氏病病雞的內(nèi)臟結(jié)節(jié)狀腫瘤、坐骨神經(jīng)不對(duì)稱性腫脹;豬瘟病豬的淋巴結(jié)周邊出血、脾臟的邊緣紅色梗死等病變特點(diǎn),都是具有證病意義的病變?nèi)?,此即可作為診斷疾病依據(jù)。 第二章 病理診斷的基本方法第一節(jié) 病理診斷的理論依據(jù)如仔豬梭菌性腸炎
15、的診斷可根據(jù)流行病學(xué)及癥狀: 發(fā)生于l周齡仔豬 ,紅色 下痢、病程短 、 死亡率高 病變的特點(diǎn): 腸腔充滿含血液體 壞死性腸炎 第二章 病理診斷的基本方法第一節(jié) 病理診斷的理論依據(jù) 但是,值得注意的是,上述的特異性是相對(duì)的。雖然病原體不同,但機(jī)體對(duì)病原體的反應(yīng)是有限的,即是個(gè)性與共性的問題。 一方面不同的疾病可引起相同的病變; 另一方面同一種疾病在不同的個(gè)體引起的病變可不全一致。而且同一種疾病即使是在同一個(gè)個(gè)體的不同發(fā)展階段表現(xiàn)也不一樣。 診斷不能只以一種診斷證據(jù)為依據(jù),故提倡綜合診斷。同時(shí),在群發(fā)病的診斷中要注意,不要僅以某一個(gè)個(gè)體的病變特點(diǎn)為依據(jù)下結(jié)論,要盡量多剖檢,進(jìn)行綜合分析,抓主要矛
16、盾 。 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 一、病/尸體剖檢診斷(By eyes)通過剖檢觀察器官病變(豬瘟.豬丹毒.雞瘟等)對(duì)疾病作出診斷, 這是最基本的方法之一 。主要是用肉眼或輔之以放大鏡尺秤等工具,有時(shí)加用大體標(biāo)本染色等觀察,對(duì)大體標(biāo)本和病變器官的大小形狀色澤質(zhì)地重量界限表面和切面狀態(tài)等病變特征進(jìn)行細(xì)致地觀察和檢測(cè)。大體觀察可見到病變的整體形態(tài)和許多重要性狀,具有微觀觀察不能取代的優(yōu)勢(shì),因此不能片面地只注重組織學(xué)觀察及其他高技術(shù)檢查,它們各有所長(zhǎng),應(yīng)配合使用。 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 二、病理組織學(xué)診斷(By microscope) 通過
17、觀察器官的組織病理學(xué)變化,對(duì)疾病作出診斷。如巴氏桿菌病. 沙門氏菌病. 結(jié)核病. 腫瘤等。 組織和細(xì)胞學(xué)觀察或鏡下觀察(microscopic appearance鏡下變化)采取病變組織制成病理組織切片(histopathological slide)或?qū)⒚撀浼?xì)胞制成涂片,經(jīng)不同方法染色后,在光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察,分析歸納組織細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)變化,診斷疾病及判定其類型及階段等。由于分辨率比肉眼增加了數(shù)百倍,加深了對(duì)病變的認(rèn)識(shí),因而顯著地提高了診斷的準(zhǔn)確性。到目前為止,傳統(tǒng)的組織學(xué)觀察方法仍然是病理學(xué)研究和診斷的無可替代的最基本的方法。 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 三、活體
18、組織檢查和細(xì)胞學(xué)檢查 (一)活體組織檢查(Biopsy)簡(jiǎn)稱活檢 即 用局部切取、細(xì)針吸取、鉗取、搔刮和手術(shù)摘取等方法,從患病動(dòng)物活體獲取病變組織進(jìn)行病理檢查等?;铙w組織檢查的優(yōu)點(diǎn)是材料新鮮,保持活組織狀態(tài),可以在疾病的各個(gè)階段取材。缺點(diǎn)是不能在活動(dòng)物身上任意取材,不能做全面系統(tǒng)的檢查,取材有局限性。 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 三、活體組織檢查和細(xì)胞學(xué)檢查 (一) 活體組織檢查(Biopsy) 此方法在人醫(yī)臨床上是非常常用的病理診斷方法,尤其是腫瘤病的診斷。在獸醫(yī)臨床上,國(guó)外也已應(yīng)用很普遍,國(guó)內(nèi)也已開始應(yīng)用。如在動(dòng)物醫(yī)院寵物的腫瘤病、皮膚病.某些消化道疾病的診斷中;
19、還有在畜禽的某些群發(fā)病診斷中,也可用活體組織檢查法,如口蹄疫或水皰病的生前診斷取水皰液作檢查。對(duì)珍惜動(dòng)物的疾病診斷(如大熊貓等等),活體組織檢查可能更具優(yōu)勢(shì)。 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 三、活體組織檢查和細(xì)胞學(xué)檢查(二) 細(xì)胞學(xué)檢查(Cytilogy) 即對(duì)從患病動(dòng)物體內(nèi)收集來的細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢查,又稱脫落細(xì)胞學(xué)或涂抹細(xì)胞學(xué)檢查,是通過采取病變處脫落的細(xì)胞,涂片染色后進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢查。細(xì)胞的來源可以是應(yīng)用各種采集器在生殖道.食道.鼻咽部等病變部位直接采集的脫落細(xì)胞,也可以是自然分泌物()、滲出物()及排泄物(如尿)中的細(xì)胞或用細(xì)針直接穿刺病變部位所吸取的細(xì)胞。如取血液
20、制作成血細(xì)胞涂片,取口腔分泌物、消化道排泄物等等作涂/抹片,直接或經(jīng)染色后在顯微鏡下觀察。 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 三、活體組織檢查和細(xì)胞學(xué)檢查 (二) 細(xì)胞學(xué)檢查(Cytilogy) 細(xì)胞學(xué)檢查的優(yōu)點(diǎn): 方法簡(jiǎn)易,病體痛苦小。缺點(diǎn)是取材受限脫落細(xì)胞常有變性.細(xì)胞分散.沒有組織結(jié)構(gòu)等,使診斷受到一定限制。(包括血液細(xì)胞)。 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 上述三種方法是是病理學(xué)研究和病理診斷中最基本、最重要、最常用的方法。國(guó)外把這三種研究方法喻為病理科室和病理醫(yī)學(xué)的 “A B C”。 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 四.
21、組織.細(xì)胞化學(xué)觀察(histochemistry or cytochemistry observation) (一)一般組織 (細(xì)胞) 化學(xué)觀察 應(yīng)用某些能與組織細(xì)胞某些化學(xué)成分進(jìn)行特異性結(jié)合的顯色試劑,顯示組織細(xì)胞內(nèi)某些化學(xué)成分(如蛋白質(zhì).酶類.核酸.糖原.脂肪等)的變化。其中,觀察組織切片的稱組織化學(xué)(histochemistry),觀察涂抹細(xì)胞或培養(yǎng)細(xì)胞的稱細(xì)胞化學(xué)(cytochemistry)。其優(yōu)點(diǎn)是,可在原位反映出組 織細(xì)胞化學(xué)成分的變化,初步把純形態(tài)觀察與 機(jī)能代謝聯(lián)系起來,能加深對(duì)疾病本質(zhì)的認(rèn)識(shí)。 另外也有利于病變的鑒別診斷。 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方
22、法 四、組織.細(xì)胞化學(xué)觀察(二)免疫組織.細(xì)胞化學(xué)觀察(immunohisto-chemistry) 免疫組織化學(xué)又稱免疫細(xì)胞化學(xué)(Immunocytochemistry) 是組織化學(xué)的分支。其主要原理是用標(biāo)記的抗體(或抗原)對(duì)細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原(或 抗體)的分布進(jìn)行細(xì)胞和組織原位的定性、定位或定量檢測(cè),經(jīng)過組織化學(xué)的呈色反映之后,用顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡觀察。 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 四、組織.細(xì)胞化學(xué)觀察(二)免疫組織.細(xì)胞化學(xué)觀察 凡是能作抗原的物質(zhì),如蛋白質(zhì).多肽.核酸.酶. 激素. 磷脂.多糖. 細(xì)胞膜表面的膜抗原和受體以及病原體(包括細(xì)菌和
23、病毒抗原)等都可用相應(yīng)的特異性抗體在組織、細(xì)胞內(nèi)將其用免疫組織(細(xì)胞)化學(xué)手段檢出和研究。根據(jù)標(biāo)記物的不同,可分為免疫熒光、免疫酶標(biāo) 膠體金標(biāo)記技術(shù)。 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 鵝副粘病毒人工感染鵝脾臟.箭頭示陽性染色的網(wǎng)狀細(xì)胞第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法鵝副粘病毒自然感染鵝十二指腸陽性染色的上皮細(xì)胞第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法雞腎型傳支病毒人工感染雞腎小管上皮細(xì)胞呈陽性反應(yīng)第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法蜂蜜處理組局部組織中的胰多肽陽性反應(yīng)物第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法SP
24、免疫組化顯色,示圓頂內(nèi)陽性反應(yīng)細(xì)胞及粘膜底端的陽性反應(yīng)細(xì)胞。(2010) 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 四、組織.細(xì)胞化學(xué)觀察(三)核酸原位雜交(nucleic acid hybridization in situ) 與原位PCR技術(shù) 1. 核酸原位雜交是用已知序列核酸作為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交對(duì)其實(shí)行檢測(cè)的方法,是將組織化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)相結(jié)合來檢測(cè)和定位核酸的技術(shù)。適用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、細(xì)胞涂片、培養(yǎng)細(xì)胞爬片等。 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 四、組織.細(xì)胞化學(xué)觀察(三)核酸原位雜交與原位PCR技術(shù) 核酸分子雜交
25、技術(shù)原理 核酸雜交是利用核酸具有變性.復(fù)性和嚴(yán)格的堿配對(duì)原理而實(shí)現(xiàn)的.如雙股螺旋的DNA在堿性條件下, 加熱至9598則發(fā)生變性解鏈變成單鏈.在一定離子濃度和降溫時(shí),互補(bǔ)單鏈重新連接成雙鏈,即退火,也稱復(fù)性(renaturation).這時(shí)如果加入外源被標(biāo)記的序列互補(bǔ)的單鏈DNA或RNA片段探針(probe),則可與解開的一條單鏈互補(bǔ)連接成帶標(biāo)記的異質(zhì)雙鏈分子,即核酸分子雜交。 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 四、組織.細(xì)胞化學(xué)觀察(三)核酸原位雜交與原位PCR技術(shù)(分子雜交技術(shù)原理)探針是指一種只和某種靶分子特異性結(jié)合并有方法檢測(cè)到的分子. 探針的堿基序列是已知的, 探
26、針上的堿基與被測(cè)核酸一定完全互補(bǔ)才能結(jié)合(雜交)上. 在DNA分子中只有鳥嘌呤-胞嘧啶 (G-C ). 腺嘌呤-胸腺嘧啶(A-T ) 才能配對(duì). RNA分子中也一樣, 只是尿嘧啶(U)代替了胸腺嘧啶. 即腺嘌呤-尿嘧啶(A-U) 和(G-C). 探針上標(biāo)記有放射性同位素或標(biāo)有生物素.地高辛等供檢查用. 只要組織或細(xì)胞內(nèi)存在著與探針互補(bǔ)的核酸分子就可檢測(cè)到. 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法四、組織.細(xì)胞化學(xué)觀察(三)核酸原位雜交與原位PCR技術(shù)(分子雜交技術(shù)原理) 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 四、組織.細(xì)胞化學(xué)觀察 (三)核酸原位雜交(nuclei
27、c acid hybridization in situ) 與原位PCR技術(shù) 2. 原位PCR 則是將組織切片或細(xì)胞涂片中的核酸(DNA或RNA均可以)片段在原位進(jìn)行擴(kuò)增,在擴(kuò)增中摻入示蹤劑,或擴(kuò)增后再行原位雜交等,以觀察基因表達(dá)等。但原位PCR應(yīng)用最廣的還是用來檢測(cè)組織或細(xì)胞中的病原微生物如HPV.HIV.禽流感.動(dòng)物及人的冠狀病毒細(xì)菌等.其敏感性比原位雜交有明顯提高。 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法五.超微結(jié)構(gòu)觀察或電鏡觀察(ultrastructural / electron microscope observation ) 運(yùn)用透射和掃描電子顯微鏡技術(shù),對(duì)組織細(xì)胞
28、的內(nèi)部及表面的超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀測(cè),從亞組織(細(xì)胞器)甚至是大分子水平上了解組織細(xì)胞的形態(tài)和機(jī)能變化,使之對(duì)某些疾病的診斷和鑒別診斷更加確切,而且更能加深對(duì)疾病本質(zhì)的認(rèn)識(shí)。尤其在腫瘤疾病的診斷中,細(xì)胞病理學(xué)診斷有助于腫瘤的分類. 判斷腫瘤的性質(zhì)(良惡性)。結(jié)合負(fù)染色法可觀察病毒的形態(tài)和定位。 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 五.超微結(jié)構(gòu)觀察或電鏡觀察SYP免疫電鏡細(xì)胞化學(xué)顯色,示呈陽性反應(yīng)的異嗜性白細(xì)胞. 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法SP免疫電鏡細(xì)胞化學(xué)顯色,示陽性反應(yīng)細(xì)胞,顆粒較多,形態(tài)多樣,電子密度不均,顆粒直徑270740nm。 第二章 病理診斷
29、的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法五、超微結(jié)構(gòu)觀察或電鏡觀察(ultrastructural / electron microscope observation ) 超微病理學(xué)觀察有其局限性:由于放大倍率太高,只見局部不見全局,加之許多超微結(jié)構(gòu)變化沒有特異性,常給診斷帶來困難。因此,必須以肉眼組織學(xué)病變?yōu)榛A(chǔ),宏觀與微觀密切結(jié)合, 才能更好地發(fā)揮其優(yōu)勢(shì), 起到 較重要的輔助診斷作用。 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 六、器官.組織或細(xì)胞培養(yǎng)(tissure or cell culture) 人工培養(yǎng)的活體標(biāo)本器官組織或細(xì)胞培養(yǎng),是指從人體或動(dòng)物體內(nèi)采取活的器官組織或單細(xì)
30、胞,用適宜的培養(yǎng)基(液)和創(chuàng)造相似于體內(nèi)的其他條件,在體外進(jìn)行培養(yǎng)并進(jìn)行各種研究的技術(shù)方法。此類方法是生物醫(yī)學(xué)各個(gè)領(lǐng)域常用的研究技術(shù)之一。在病理學(xué)研究中,此方法可以研究在各種病因的作用下細(xì)胞、組織病變的發(fā)生和發(fā)展的動(dòng)態(tài)過程和規(guī)律。根據(jù)研究的目的和條件的不同,培養(yǎng)的標(biāo)本可以是細(xì)胞水平的,也可以是組織水平或半器官器官水平。研究腫瘤代謝、腫瘤分類、病毒病的診斷及發(fā)病機(jī)理等研究。 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 六、器官.組織或細(xì)胞培養(yǎng)(tissure or cell culture) 人工培養(yǎng)的活體標(biāo)本器官.組織或細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn): 體外培養(yǎng)條件單純?nèi)菀卓刂?,可以避免體內(nèi)復(fù)雜因素
31、的干擾,故有利于分析結(jié)果和得出結(jié)論。而且比動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和本體觀察周期短見效快節(jié)省時(shí)間、節(jié)省開支。其缺點(diǎn)是 畢竟體外人工環(huán)境與體內(nèi)環(huán)境有區(qū)別,而且是脫離了機(jī)體整體的神經(jīng)體液等因素的調(diào)控,所以其研究結(jié)果不可能與體內(nèi)過程完全一致。另外,體外培養(yǎng)要求一定的設(shè)備嚴(yán)格的環(huán)境和技術(shù)條件,一般實(shí)驗(yàn)室不易達(dá)到。 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 七、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)在人為控制條件下, 運(yùn)用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的方法, 在適宜動(dòng)物身上復(fù)制動(dòng)物和人類的某些疾病的模型;是生物醫(yī)學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域均可利用的技術(shù)方法之一。通過疾病復(fù)制過程可以研究疾病的病因?qū)W、發(fā)病學(xué)、病理變化及疾病的轉(zhuǎn)歸。并可根據(jù)研究的需要, 對(duì)其進(jìn)行各種方式的觀
32、察研究。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)是可以不受任何限制地按研究者的主觀設(shè)計(jì)進(jìn)行研究??梢匀我饪刂茖?shí)驗(yàn)條件任意施加有害的影響因素,可以隨時(shí)和任意取材活檢和處死尸檢。其缺點(diǎn)是動(dòng)物與人之間及不同動(dòng)物之間有許多種屬差異,因而不能把動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的研究結(jié)果不加分析、無條件地直接套用于人或相應(yīng)的動(dòng)物。,僅可為人體疾病的研究提供參考。第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 八、流式細(xì)胞術(shù) (flow cytometry, FCM) 流式細(xì)胞術(shù)是近年發(fā)展起來的新技術(shù),其原理是將特殊處理的細(xì)胞懸液經(jīng)過一細(xì)管,同時(shí)用特殊光線照射,當(dāng)細(xì)胞通過時(shí),光線發(fā)生不同角度的散射,經(jīng)檢測(cè)器變?yōu)殡娪嵦?hào),再經(jīng)電子計(jì)算機(jī)貯存分析后畫出直方
33、圖等。這一方法每秒鐘能分析1,000至10,000個(gè)細(xì)胞。流式細(xì)胞術(shù)能進(jìn)行多種細(xì)胞特征分析,包括細(xì)胞大小, 胞漿的顆粒狀態(tài), 細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)及所分布的細(xì)胞周期,核型倍體數(shù)與DNA含量,胞膜表面標(biāo)記物變化及細(xì)胞內(nèi)酶的含量等等。 圖象分析技術(shù)(image analysis) 第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 九 、生物芯片技術(shù) /基因芯片技術(shù)基因芯片技術(shù)是近年來發(fā)展起來的一項(xiàng)生物醫(yī)學(xué)高新技術(shù),實(shí)際上是一種反向斑點(diǎn)雜交技術(shù)?;蛐酒?gene chip)又稱DNA芯片 (DNA chip),是指固著在固相載體上的高密度的DNA微點(diǎn)陣,即將大量靶基因或寡核苷酸片段有序地、高密度地(點(diǎn)
34、與點(diǎn)間距小于500m)排列在如硅片、玻璃片、聚丙烯或尼龍膜等載體上。代表不同檢測(cè)基因的探針被固定于固相基板上,而被檢測(cè)的DNA或cDNA 用放射性核素或熒光物標(biāo)記后與固相陣列雜交。然后通過放射自顯影或激光共聚焦顯微檢測(cè)雜交信號(hào)的強(qiáng)弱和分布,再通過計(jì)算機(jī)軟件處理分析,得到有關(guān)基因的表達(dá)譜。一套完整的基因芯片系統(tǒng)包括芯片陣列儀、激光掃描儀、計(jì)算機(jī)及生物信息軟件處理系統(tǒng)等。第二章 病理診斷的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 十、病原學(xué)分離鑒定 包括血清學(xué)檢測(cè)、細(xì)菌和病毒分離培養(yǎng)技術(shù) 血清學(xué)檢測(cè)可以檢測(cè)病原因子、病原代謝產(chǎn)物及疾病過程中的病理性產(chǎn)物。 細(xì)菌和病毒的分離鑒定、細(xì)菌染色 第二章 病理診斷
35、的基本方法第二節(jié) 病理診斷的基本方法 十、病原學(xué)分離鑒定(細(xì)菌染色)仔豬梭菌性腸炎:糞便樣品涂片,可見單一的大桿狀細(xì)菌 C. D. Buergeit 等 第二節(jié) 病理診斷的基本方法十、病原學(xué)分離鑒定: 血圖片細(xì)菌染色 示 炭疽桿菌 第二節(jié) 病理診斷的基本方法十、病原學(xué)分離鑒定: 脾觸片細(xì)菌染色 示 炭疽桿菌第二節(jié) 病理診斷的基本方法十、病原學(xué)分離鑒定 組織觸片細(xì)菌染色:炭疽桿菌 第二節(jié) 病理診斷的基本方法十、病原學(xué)分離鑒定 組織觸片細(xì)菌染色:炭疽桿菌第二章 病理診斷的基本方法第三節(jié) 病理診斷的基本程序 一、臨床病史調(diào)查 通過問診了解患病動(dòng)物的臨床表現(xiàn),要做到心中有數(shù), 有的放矢。主要了解臨床情
36、況, 發(fā)病表現(xiàn), 飼養(yǎng)管理情況等, 群發(fā)病和單發(fā)病各有其特點(diǎn)。 群發(fā)?。簜魅静?急性、傳染、發(fā)病多; 急性中毒-與飲食有關(guān)當(dāng)懷疑為炭疽時(shí),禁止剖檢 !第二章 病理診斷的基本方法第三節(jié) 病理診斷的基本程序 二、檢查與初診1、病/尸體剖檢診斷2、組織病理學(xué)觀察診斷3、細(xì)胞病理學(xué)觀察診斷4、超微病理學(xué)觀察診斷5、病原學(xué)診斷6、必要時(shí)應(yīng)深入養(yǎng)殖場(chǎng)現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行調(diào)研 同時(shí),進(jìn)行相關(guān)的病原學(xué)檢查第二章 病理診斷的基本方法第三節(jié) 病理診斷的基本程序 三、綜合診斷與結(jié)論 分析的結(jié)論常有學(xué)術(shù)性意義。對(duì)上述全部的觀察資料進(jìn)行綜合分析、綜合判斷, 結(jié)合病原學(xué)鑒定的結(jié)果, 對(duì)疾病作出確切的診斷。 四、防治措施建議根據(jù)綜合診
37、斷結(jié)果,提出相應(yīng)的防治措施。 第二章 病理診斷的基本方法第三節(jié) 病理診斷的基本程序 臨床病史調(diào)查 病/尸體剖檢診斷 組織病理學(xué)觀察診斷 細(xì)胞病理學(xué)觀察診斷 病原學(xué)檢查 病理學(xué) 檢查與初診 超微病理學(xué)觀察診斷 (細(xì)菌培養(yǎng) 組織和細(xì)胞化學(xué)觀察 涂片染色) 必要時(shí)應(yīng)深入養(yǎng)殖場(chǎng) 現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行調(diào)研 綜合診斷與結(jié)論 防治措施建議第三章 病理剖檢通則及注意事項(xiàng)第一節(jié) 病理剖檢的一般原則 一、剖檢人員的組織和安排 病理剖檢工作應(yīng)由具有一定專業(yè)技術(shù)知識(shí)的人員來執(zhí)行,在剖檢之前應(yīng)做好人員安排,剖檢工作的人員組成一般包括主檢員1人,助檢員12人,記錄員1人,在場(chǎng)人可包括單位負(fù)責(zé)人以及有關(guān)人員,若屬法獸醫(yī)學(xué)剖檢應(yīng)有司法公
38、安人員以及糾紛雙方法人代表參加。主檢人是剖檢工作質(zhì)量的重要保證,一般應(yīng)具有較高的專業(yè)水平,通曉獸醫(yī)專業(yè)基礎(chǔ)理論,尤其是病理學(xué)的理論和病理剖檢技術(shù)。在病理診斷室,必須應(yīng)由中級(jí)職稱以上的病理專家主持病理剖檢。 第三章 病理剖檢通則及注意事項(xiàng)第一節(jié) 病理剖檢的一般原則 二、剖檢用具的準(zhǔn)備1剖檢器械的準(zhǔn)備,應(yīng)根據(jù)被檢剖檢動(dòng)物的種類不同而不同。在條件較好的單位,剖檢室里一般應(yīng)配備如下各種剖檢用具:1)刀類:2)剪類:3)鋸類:4)鑷子類:5)斧、鑿子、金屬尺、探針、鑷子、量筒、量杯、磨刀棒、6)量具:卷尺、天平、量杯等;7)病料容器:8)攝相裝置:9)運(yùn)送裝置:10)現(xiàn)場(chǎng)病原分離鑒定設(shè)備:11)防護(hù)設(shè)備
39、:12)其他物品:2消毒藥品的準(zhǔn)備 常用的藥品有過氧乙酸、漂白粉、氫氧化鈉、新潔爾滅、百毒殺、23%碘酒、70%酒精、福爾馬林(4%甲醛水溶液)、高錳酸鉀、草酸、生石灰等。還應(yīng)備有剖檢人員預(yù)防感染消毒的23%碘酒、70%酒精、消毒棉花、紗布及橡皮膠等。 第三章 病理剖檢通則及注意事項(xiàng)第一節(jié) 病理剖檢的一般原則 三、剖檢地點(diǎn)的選擇 在相關(guān)高等院校、科研機(jī)構(gòu)、獸醫(yī)院等有條件的單位,病理診斷室應(yīng)設(shè)有專門的病理剖檢室,其場(chǎng)地選擇應(yīng)符合我國(guó)政府發(fā)布的環(huán)境保護(hù)法及獸醫(yī)法的規(guī)定。動(dòng)物疾病診斷所或中心應(yīng)建在與畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)、公共場(chǎng)所、居民住宅、水源地和交通要道有一定距離(至少500米)的地方。野外進(jìn)行剖檢時(shí),應(yīng)符
40、合上述法規(guī)要求,保證人畜安全,防止疾病擴(kuò)散,選擇距離畜群、居民區(qū)較遠(yuǎn)的偏僻的地方。 第三章 病理剖檢通則及注意事項(xiàng)第一節(jié) 病理剖檢的一般原則 四、剖檢時(shí)間的要求 應(yīng)盡早進(jìn)行剖檢,因?yàn)閯?dòng)物死后體內(nèi)將發(fā)生自溶和腐敗,夏季尤為明顯。因死后自溶、腐敗影響病變的辨認(rèn)和剖檢診斷的效果,以致喪失剖檢價(jià)值。剖檢工作最好在白天進(jìn)行,因?yàn)榘滋煸谧匀还饩€下才能正確的反映器官組織固有的顏色。在緊急情況下,必須在夜間剖檢時(shí),光線一定要充足,不能在有色燈光下剖檢。第三章 病理剖檢通則及注意事項(xiàng)第二節(jié) 病理剖檢的注意事項(xiàng) 一、剖檢前的要求 動(dòng)手剖檢前應(yīng)詳細(xì)了解尸體來源、病史、臨床癥狀、治療經(jīng)過和臨死前的表現(xiàn)。若臨床表現(xiàn)發(fā)病
41、急劇,咽喉及頭部腫脹,死后天然孔出血,有炭疽病的跡象時(shí),應(yīng)首先采耳血作染色鏡檢,鏡檢見有炭疽桿菌或懷疑為炭疽病時(shí),則病尸體嚴(yán)禁剖檢,應(yīng)將病尸體置于焚尸爐(坑)中焚燒火化,所有與患病動(dòng)物接觸過的場(chǎng)地、用具進(jìn)行徹底消毒,與病畜接觸過的人員應(yīng)進(jìn)行藥物預(yù)防。只有在確診不是炭疽病和其他禁止剖檢的疾病后,方可作尸體剖檢。第三章 病理剖檢通則及注意事項(xiàng)第二節(jié) 病理剖檢的注意事項(xiàng) 二、剖檢記錄要求 剖檢時(shí),剖檢者應(yīng)認(rèn)真細(xì)致地檢查病變,客觀地描述記錄檢查所見,切忌主觀片面、草率從事。 第三章 病理剖檢通則及注意事項(xiàng)第二節(jié) 病理剖檢的注意事項(xiàng) 三、剖檢人員的衛(wèi)生防護(hù)要求 剖檢人員在剖檢前及過程中應(yīng)時(shí)刻警惕感染人畜
42、共患傳染病和尚未被證實(shí)而可能對(duì)人類健康有危害作用的病原微生物或寄生蟲。因此,剖檢者必須要穿工作服,戴膠手套和線手套以及工作帽、口罩,或防護(hù)眼鏡,穿膠靴。剖檢過程中應(yīng)經(jīng)常用低濃度的消毒液沖洗手套上和器械上的血液及其他分泌物、滲出物等。剖檢不慎而工作人員發(fā)生外傷時(shí)應(yīng)立即停止剖檢,用碘酒消毒傷口后包扎。如果剖檢的是炭疽等人畜共患性傳染病時(shí),除局部用5%石炭酸消毒外,應(yīng)立即到醫(yī)院就診治療,并對(duì)現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行徹底消毒。 第三章 病理剖檢通則及注意事項(xiàng)第三節(jié) 剖檢后的清洗消毒工作及尸體處理 為了防止病原擴(kuò)散和保障人與動(dòng)物健康,必須在整個(gè)尸體剖檢過程中保持清潔并注意嚴(yán)格消毒。剖檢時(shí),可疑傳染病的尸體,用高濃度消毒
43、液噴撒或浸泡,如需搬動(dòng)或運(yùn)輸時(shí),應(yīng)將天然孔用消毒液浸泡后的棉球堵塞,放入不漏水的密閉的專用尸體車內(nèi),亦可用塑料薄膜多層包扎進(jìn)行運(yùn)輸。第三章 病理剖檢通則及注意事項(xiàng)第三節(jié) 剖檢后的清洗消毒工作及尸體處理 剖檢完畢后,應(yīng)據(jù)疾病的種類妥善處理,基本原則是防止疾病擴(kuò)散和蔓延以免尸體成為疾病的傳染源,剖檢后的尸體按 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)畜禽病害肉尸及其產(chǎn)品無害化處理規(guī)程 處理,應(yīng)全部作焚燒銷毀處理。銷毀時(shí)應(yīng)采用密閉的容器運(yùn)送尸體。銷毀方法有兩種:濕法化制和焚毀。濕法化制是指將整個(gè)尸體投入濕化機(jī)內(nèi)進(jìn)行化制(熬制工些用油)。焚毀是將整個(gè)尸體或其他廢棄物投入焚化爐中燒毀炭化。第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容
44、 病理剖檢對(duì)診斷疾病和提高醫(yī)療水平有重大意義,所以在剖檢病尸時(shí)要求準(zhǔn)確而詳盡地檢查并用文字記錄下來。每一份記錄應(yīng)包括以下四個(gè)重要部分:臨床病歷摘要器官病變記錄病理診斷和結(jié)論。 見表第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容第一節(jié) 臨床病歷摘要 病歷摘要包括: 一、一般情況登記:畜別、性別、年齡、 住院號(hào)、入院日期 二、主訴:1. 2. 3. 三、發(fā)病經(jīng)過:記述本病起始及各期的 經(jīng)過情形 四、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果:細(xì)菌培養(yǎng)、毒物化驗(yàn)等 五、臨床診斷:1. 2. 3.第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容第二節(jié) 器官病變記錄 常分為兩個(gè)部分 一為肉眼觀察記錄:為剖檢當(dāng)時(shí)所見的變化,因臟器不能長(zhǎng)期保存,故要求詳細(xì)、真實(shí)。
45、 二為鏡下觀察記錄第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容第二節(jié) 器官病變記錄 一、肉眼觀察記錄 可采用文字?jǐn)⑹?、填表及畫圖等方式。 (一)剖檢記錄內(nèi)容 (1)為了減少遺漏和錯(cuò)誤, 應(yīng)在剖檢時(shí)記錄下所有可見的病理變化;并在剖檢后由剖檢人再作修改、補(bǔ)充和整理。 (2)敘述文字力求簡(jiǎn)潔明確,對(duì)各器官的位置.大小.形態(tài).表面.切面.顏色.硬度都要如實(shí)記錄。 第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容第二節(jié) 器官病變記錄 一、肉眼觀察記錄 可采用文字?jǐn)⑹?、填表及畫圖等方式。 (一)剖檢記錄內(nèi)容 (3)記錄病變時(shí)不可濫用病理診斷和病理組織學(xué)上的名詞。 (4)對(duì)于各器官的描寫,不僅要說明其陽性變化, 凡與臨床診斷不符的陰性
46、情況也要說明。 第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容第二節(jié) 器官病變記錄 一、肉眼觀察記錄 (一)剖檢記錄內(nèi)容 (5)對(duì)器官硬度及器官的固有結(jié)構(gòu)描述,應(yīng)注意有空腔時(shí)要說明其腔壁及內(nèi)容物的性狀;有潰瘍時(shí)要說明潰瘍邊緣及基底的性狀。 (6)敘述大小時(shí),須準(zhǔn)確測(cè)量其輕重及長(zhǎng)短。應(yīng)對(duì)臟器的邊緣.切面的變化情況進(jìn)行客觀描述。第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容第二節(jié) 器官病變記錄 一、肉眼觀察記錄 (一)剖檢記錄內(nèi)容(7)對(duì)器官顏色的變化應(yīng)準(zhǔn)確客觀,因?yàn)槠鞴俚念伾淖兓D芴崾灸承┎∽? 如判斷顏色時(shí)切面較表面正確, 因?yàn)楸砻嬗邪ぃ划?dāng)包膜有改變時(shí)可影響其下組織的色澤。 第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容第二節(jié)
47、器官病變記錄 一、肉眼觀察記錄 (二) 剖檢記錄提綱 記錄應(yīng)反映剖檢當(dāng)時(shí)的情況,故其順序應(yīng)和剖檢的次序一致。下面所述只是一個(gè)剖檢記錄提綱。 (1) 外部檢查 (2) 胸腹壁 (3) 腹腔 (4) 胸腔 (5) 心包膜 (6)頸部器官 包括胸腺、甲狀腺、 甲狀旁腺以及咽喉、氣管等 (7) 心臟(8)肺、氣管及支氣管 (9)脾 (10)淋巴結(jié) 包括體表、頸、腋及腹股溝等淋巴結(jié)。 第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容第二節(jié) 器官病變記錄 一、肉眼觀察記錄 (二) 剖檢記錄提綱 (11) 肝.膽管及門靜脈 (12) 消化道包括食管 腸全部,及其內(nèi)容物的性狀 (13) 胰 (14) 腎上腺 (15) 腎 在
48、慢性腎炎時(shí)包膜不易剝離, 如勉強(qiáng)剝 離,則腎表面組織部分撕脫. (16) 膀胱及輸尿 (17) 雄性生殖器 包括前列腺、精囊、睪丸、副睪、 輸精管等 (18)雌性生殖器 包括子宮、輸卵管、卵巢、 闊韌帶、乳腺等 第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容第二節(jié) 器官病變記錄 一、肉眼觀察記錄 (二) 剖檢記錄提綱 (19) 頭部 腦及腦膜、口腔、鼻腔等 (20) 垂體 大小、前后葉及莖部有無變化 (21) 脊髓 周圍神經(jīng)也在此描寫 (22)骨及關(guān)節(jié) 記錄密質(zhì).海綿質(zhì)的厚度及鈣化狀況,是否 變軟或變硬,注意關(guān)節(jié)軟骨之厚度.滑液膜及韌帶。 (23)骨髓 描述肋、胸骨骨髓的色澤及密度。如有 血 液病, 須另檢
49、查股、脛、肱各骨之骨髓。 (24) 大血管 注意主動(dòng)脈.肺動(dòng)脈.腔靜脈及其分枝 有無阻塞及管壁之改變,必要時(shí)檢查胸導(dǎo)管。第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容第二節(jié) 器官病變記錄第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容第二節(jié) 器官病變記錄第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容第二節(jié) 器官病變記錄 二、顯微鏡檢查記錄 有條件的地區(qū)應(yīng)作病理組織學(xué)檢查。各器官之切片檢查記錄可按照肉眼觀察記錄內(nèi)所列的次序排列。包括細(xì)胞化學(xué)、免疫組織化學(xué)等 三、病原學(xué)檢查結(jié)果記錄 化學(xué)檢查結(jié)果可列于顯微鏡檢查記錄之后。細(xì)菌學(xué)檢查記錄,不僅包括鑒定結(jié)果,還應(yīng)簡(jiǎn)述細(xì)菌的培養(yǎng)情況及染色性狀。 四、電鏡觀察記錄 第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容第
50、三節(jié) 病理診斷 根據(jù)肉眼所見變化(有條件時(shí)應(yīng)包括病理組織學(xué)變化)作出病理診斷。病理診斷應(yīng)按病變的重要性依次排列,與死亡有直接關(guān)系的列在最前面,順序?qū)⒋我呐帕杏诤蟆?第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容第四節(jié) 結(jié) 論 由剖檢人根據(jù)各種重要病理變化,綜合臨床及其他化驗(yàn)結(jié)果,分析各種病變的關(guān)系、臨床和病理的聯(lián)系以及死亡的原因,對(duì)本病例作一簡(jiǎn)要的結(jié)論。 作好以上記錄后,最好將結(jié)果登記在尸檢診斷登記冊(cè)上,以便日后查閱作統(tǒng)計(jì)。 第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容第五節(jié) 動(dòng)物死后變化的判定和識(shí)別 動(dòng)物死亡后,各系統(tǒng).各器官組織的功能和代謝過程均完全停止,由于體內(nèi)組織酶和細(xì)菌的作用及外界環(huán)境的影響,組織的原有結(jié)構(gòu)
51、和性狀發(fā)生一系列變化,叫做尸體變化或稱為死征。死征是動(dòng)物死后發(fā)生的,與生前病變無關(guān),剖檢時(shí)若不注意,易于與生前病變相混淆。影響診斷的可靠性。因此,學(xué)會(huì)正確的判定和識(shí)別尸體變化,對(duì)于正確的做出病理診斷十分重要。尸體變化或死征包括如下幾種: 一、尸 冷 動(dòng)物死后,由于體內(nèi)物質(zhì)代謝停止,產(chǎn)熱終止,而體表散熱過程仍在繼續(xù)進(jìn)行,因此尸體逐漸變冷,直至與外界環(huán)境溫度一致。 第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容第五節(jié) 動(dòng)物死后變化的判定和識(shí)別 二、尸 僵 動(dòng)物死后,由于肌纖維的硬化和收縮,使尸體變得僵硬的現(xiàn)象。一般發(fā)生于死后16小時(shí), 1020小時(shí)最明顯,3648小時(shí)后出現(xiàn)緩解(解僵)。 尸僵的順序是從頭部頸部
52、胸前肢軀干后肢。尸僵的表現(xiàn)是關(guān)節(jié)僵直,不能屈伸,口角緊閉,難以開啟。尸僵發(fā)生的快慢和完全程度,因不同情況有所不同,急死和營(yíng)養(yǎng)狀況良好的動(dòng)物尸僵發(fā)生快而明顯。死于慢性病和瘦弱的動(dòng)物,尸僵發(fā)生慢且不完全。外界溫度高時(shí)尸僵的發(fā)生和緩解較溫度低時(shí)要快。如果心肌在生前有顯著變性,則僵硬不明,而呈現(xiàn)肌肉質(zhì)度柔軟,內(nèi)腔擴(kuò)張,充滿血液。死于心力衰竭的動(dòng)物心臟大多處于這種狀態(tài)。第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容第五節(jié) 動(dòng)物死后變化的判定和識(shí)別 三、尸 斑 動(dòng)物死后,心跳停止,位于心血管內(nèi)的血液,由于心肌和平滑肌的收縮而被排擠到靜脈系統(tǒng)內(nèi),在血液凝固以前,血液因重力作用而流到尸體低位部的血管中,使這些部位呈暗紅色,
53、此現(xiàn)象叫尸體的墜積性充血。若死亡時(shí)間較久,紅細(xì)胞崩解,將周圍組織染成紅色,稱為尸斑浸潤(rùn)。根據(jù)尸斑和舌脫出的位置,可以推斷動(dòng)物死亡時(shí)躺臥的狀態(tài)和死亡的時(shí)間。 第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容第五節(jié) 動(dòng)物死后變化的判定和識(shí)別 四、血液凝固 動(dòng)物死后,血流停止,血液中抗凝血因素喪失而發(fā)生血液凝固,在心腔和大血管中可看到暗紅色的血凝塊。死后血凝塊的特征是色暗紅、表面光滑而有彈性,與心血管壁不粘連,應(yīng)注意與生前凝血(血栓)的區(qū)別。貧血或?yàn)l死期長(zhǎng)的動(dòng)物,因死后紅細(xì)胞下沉,血凝塊上層呈淡黃色、下層呈暗紅色。死于窒息的動(dòng)物,因血中含有大量二氧化碳,血液常不凝固。死于敗血癥的動(dòng)物,常血凝不良。 第四章 病理剖檢
54、記錄的編寫和內(nèi)容第五節(jié) 動(dòng)物死后變化的判定和識(shí)別 五、自溶及腐敗 動(dòng)物死后各器官功能停止,組織代謝也隨之停止,但組織細(xì)胞內(nèi)酶的活性尚存,組織細(xì)胞在組織中蛋白水解酶的作用下發(fā)生自體分解,即為自溶。自溶在含酶豐富的內(nèi)臟器官如肝、腎等發(fā)生較快,尤其是胃腸道表現(xiàn)得最明顯。初期胃腸粘膜可自行脫落,嚴(yán)重時(shí)可發(fā)生穿孔。 第四章 病理剖檢記錄的編寫和內(nèi)容第五節(jié) 動(dòng)物死后變化的判定和識(shí)別 五、自溶及腐敗 組織自溶時(shí)產(chǎn)生的分解產(chǎn)物,為腐敗微生物生長(zhǎng)繁殖提供了良好的營(yíng)養(yǎng)條件,隨著時(shí)間推移,大量腐敗菌生長(zhǎng)繁殖,導(dǎo)致蛋白質(zhì)徹底分解,產(chǎn)生大量氣體如二氧化碳、氨氣、硫化氫、腐胺、尸胺等等,因此可見胃腸道充氣,肝包膜下出現(xiàn)氣
55、泡,并具有惡臭。組織蛋白分解形成的硫化氫與血中的血紅蛋白或從其中游離出的鐵結(jié)合,生成硫化血紅蛋白與硫化鐵而使組織呈污綠色。尸體腐敗使畜體生前病變表現(xiàn)受到破壞。給剖檢工作帶來困難。所以,在動(dòng)物死后應(yīng)盡早進(jìn)行剖檢 第五章 病料的采集、固定、運(yùn)送第一節(jié) 病理組織材料的采集固定及運(yùn)送 實(shí)際工作中為了能全面正確地診斷疾病,需要采取病理材料送檢化驗(yàn),或確定發(fā)病死亡原因,為此在這里將分別敘述各種病理材料的選取、固定、包裝運(yùn)送的方法及其注意事項(xiàng)。 一、組織材料的選取 剖檢者在剖檢過程中,應(yīng)根據(jù)需要親自動(dòng)手,有目的進(jìn)行選擇,不可任意地切取或委托他人完成.同時(shí)要注意: 1.病理組織材料應(yīng)及時(shí)固定,以免發(fā)生死后變化
56、影響診斷。 第五章 病料的采集、固定、運(yùn)送第一節(jié) 病理組織材料的采集固定及運(yùn)送 一、組織材料的選取 2.切取組織材料時(shí),在同一塊組織中應(yīng)包括病灶 和正常組織兩個(gè)部分。3. 各種疾病病變部位不同,選取病理材料時(shí)也不完全一樣.遇病因不明的病例時(shí),應(yīng)多選取組織,以免遺漏病變.第五章 病料的采集、固定、運(yùn)送第一節(jié) 病理組織材料的采集固定及運(yùn)送 一、組織材料的選取 4選取病理材料時(shí),切勿擠壓或損傷組織,即或是在腸粘膜上沾有糞便,也不得用手或其它用具刮抹。組織塊在固定前最好不要用水沖,非沖不可時(shí)只可以用生理鹽水輕輕沖洗。5先取的組織材料要求全面,能包括各該器官的主要結(jié)構(gòu)。如腎組織應(yīng)含有腎皮質(zhì)、髓質(zhì)、腎盂及
57、包膜,腸應(yīng)含有粘膜、漿膜等。 第五章 病料的采集、固定、運(yùn)送第一節(jié) 病理組織材料的采集固定及運(yùn)送 一、組織材料的選取 6選取的組織材料,厚度不應(yīng)超過24毫米,才容易迅速固定。其面積應(yīng)不小于1.5-3平方厘米,以便盡可能全面地觀察病變。7相類似的組織應(yīng)分別置于不同的瓶中或切成不同的形狀。如:十二指腸可在組織塊一端剪一個(gè)缺跡、空腸剪兩個(gè)缺跡、回腸剪三個(gè)缺跡等,并加以描繪,注明該組織在器官上的部位,或用大頭針插上編號(hào),備以后辨認(rèn)。 第五章 病料的采集、固定、運(yùn)送第一節(jié) 病理組織材料的采集固定及運(yùn)送 二、病理組織材料的固定 1為避免材料的擠壓和扭轉(zhuǎn),裝盛容器最好用廣口瓶薄壁組織,如胃腸道.膽囊等,可將
58、其漿膜面貼附在厚紙片上再投入固定液中。 2固定液要充足,最好要10倍于該組織體積。 3固定時(shí)間的長(zhǎng)短,依固定液種類而異,過長(zhǎng)或過短均不適宜。如用10%福爾馬林液固定,應(yīng)于2448小時(shí) 后, 用水沖洗10分鐘,再放入新液中保存。 第五章 病料的采集、固定、運(yùn)送第一節(jié) 病理組織材料的采集固定及運(yùn)送 二、病理組織材料的固定3固定時(shí)間的長(zhǎng)短,依固定液種類而異,過長(zhǎng)或過短均不適宜。如用10%福爾馬林液固定,應(yīng)于2448小時(shí)后, 用水沖洗10分鐘,再放入新液中保存。4在厚紙上用鉛筆寫好剖檢編號(hào)(用石蠟浸漬),與組織塊一同保存。瓶外亦應(yīng)須注明號(hào)碼。10%福爾馬林液之配制,市售的甲醛液一分加水9分混合而成。為
59、了保持固定液的中性反應(yīng),可加入少量碳酸鈣或碎大理石,用其上層清液 第五章 病料的采集、固定、運(yùn)送第一節(jié) 病理組織材料的采集固定及運(yùn)送 三、病理組織的包裝與運(yùn)送 1如將標(biāo)本運(yùn)送他處檢查時(shí),應(yīng)把瓶口用石蠟等封住,并用棉花和油布包妥, 盛在金屬盒或筒中, 再放入木箱中。木箱的空隙要用填充物塞緊, 以免震動(dòng),若送大塊標(biāo)本時(shí),先將標(biāo)本固定幾天,以后取出浸漬固定液的紗布幾層,先裝入金屬容器中,再放入木箱。傳染病病列的標(biāo)本,一定要先固定殺菌,后置金屬容器中包裝,切不可麻痹大意,以免途中散布傳染。 第五章 病料的采集、固定、運(yùn)送第一節(jié) 病理組織材料的采集固定及運(yùn)送 三、病理組織的包裝與運(yùn)送 2.冬季寒冷時(shí),為
60、防止運(yùn)送中凍壞組織,可先用10%福爾馬林固定,以后再用30%-50%甘油福爾馬林或甘油酒清固定運(yùn)送。 3. 執(zhí)行剖檢的單位, 最好留有各種臟器的代表組織, 以備必要時(shí)復(fù)檢之用。 第五章 病料的采集、固定、運(yùn)送第二節(jié) 其他實(shí)驗(yàn)室診斷病料的采集與運(yùn)送 剖檢者不但要注意病尸的形態(tài)學(xué)變化,而且需要研究微生物學(xué)病原和各種毒物。因?yàn)橛袝r(shí)形態(tài)學(xué)的變化比較輕微,而病原微生物檢查或毒物的分析卻能找到家畜發(fā)病與死亡的原因,故剖檢者要負(fù)責(zé)采集材料。如果要運(yùn)送至外單位進(jìn)行檢查化驗(yàn)時(shí),剖檢者還應(yīng)將采集的材料作初步處理,附上詳細(xì)說明,方可寄送。 第五章 病料的采集、固定、運(yùn)送第二節(jié) 其他實(shí)驗(yàn)室診斷病料的采集與運(yùn)送 為了使
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