shodex糖類(lèi)色譜柱使用說(shuō)明書(shū)

1、Shodex使用說(shuō)明書(shū)SUGAR系列SH1011，SH1821，SC1011，SC1821，SP0810，SC1211，SZ5532感謝您購(gòu)買(mǎi)Shodex系列色譜柱！在使用之前，請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)，以保證色譜柱的最佳使用狀態(tài)和使用壽命。1介紹色譜柱的填料為剛性的苯乙烯/DVB基質(zhì)的強(qiáng)離子交換樹(shù)脂，專(zhuān)用于糖類(lèi)的分離。ShodexSUGAR系列色譜柱在糖類(lèi)的分離和分析上表現(xiàn)出優(yōu)秀的性能，是應(yīng)用于食品、生物化學(xué)品、天然產(chǎn)物中糖分析的首選。ShodexSUGAR系列色譜柱的基本分離原理是體積排阻色譜，除此之外，還有分配色譜的原理和離子相互作用，比如配位交換，樣品與抗衡離子互相作用，使得在精細(xì)結(jié)構(gòu)上不同的

2、各種單糖得以分離。另外，SH系列的色譜柱由于具有顯著的離子排斥作用，可同時(shí)分離有機(jī)酸和糖。2型號(hào)和特點(diǎn)ShodexSUGAR系列色譜柱有7種型號(hào)，每種型號(hào)在抗衡離子、孔徑尺寸、孔結(jié)構(gòu)以及糖的選擇性上有所不同。表一型號(hào)和特點(diǎn)型號(hào)1)抗衡離子分離模式規(guī)格mm)排阻限理論塔板數(shù)儲(chǔ)存溶劑2)SH1011H+SEC+IE3)8*3001,000215,000H2OSH1821H+SEC+IE8*30010,000215,000H2OSC1011Ca2+SEC+LE48*3001,000212,000H2OSC1821Ca2+)SEC+LE8*30010,000210,000H2OSP0810Pb2+SE

3、C+LE8*3001,000210,000H2OSC1211Ca2+P5)+LE6*25025,00025%CH3CN/H2OSZ5532Zn2+P+LE6*15025,00070%CH3CN/H2O5）分配機(jī)理以下六種保護(hù)柱可用于表一中的色譜柱。表二保護(hù)柱型號(hào)抗衡離子規(guī)格（mm）儲(chǔ)存溶劑1）應(yīng)用色譜柱SH-GH+6*50H2OSH系列SC-LGH+6*50H2OSC和SP系列SP-GCa2+6*50H2OSP系列SC-GCa2+4.6*1025%CH3CN/H2OSC1211SZ-GPb2+4.6*1070%CH3CN/H2OSZ5532KS-G2)Ca2+6*50H2OSC和SP系列3使用

4、條件和范圍1）標(biāo)準(zhǔn)使用條件表三標(biāo)準(zhǔn)使用條件型號(hào)流動(dòng)相流速（ml/min）柱溫（C）SH10110.01NH2SO40.51.05060SH18210.01NH2SO40.51.05060SC1011H2O0.51.07080SC1821H2O0.51.07080SP0810H2O0.51.07080SC121125%CH3CN/H2O0.51.05060SZ55322）可用范圍70%CH3CN/H2O0.51.05060表四可用范圍型號(hào)流動(dòng)相流速（ml/min）柱溫（C）柱壓（MPa）SH1011H2O0.05N最大1.5H2SO4最高95最大5.0SH1821H2O0.05N最大1.5H2S

5、O4最高95最大5.0SC1011H2O20%CH3CN/H2O最大1.5最高95最大4.0SC1821H2O20%CH3CN/H2O最大1.5最高95最大4.0SP0810H2O20%CH3CN/H2O最大1.0最高95最大3.0SC1211H2O45%CH3CN/H2O最大1.0最高95最大4.0SZ5532H2O95%C最大2.0最高80最大4.0H3CN/H2O4流動(dòng)相用作流動(dòng)相的純水必須為去離子水，經(jīng)至少0.45微孔濾膜過(guò)濾。在使用之前，流動(dòng)相必須充分脫氣，防止氣泡產(chǎn)生，影響色譜柱的使用。ShodexSUGAR系列色譜柱在使用時(shí)都必須加熱，所以脫氣尤為重要。建議使用ShodexDEG

6、AS系列脫氣設(shè)備。SH系列盡管可以使用去離子水可作為流動(dòng)相，但堿金屬仍有可能在填料上吸附，會(huì)改變柱子的色譜行為，建議在流動(dòng)相中加入少許的硫酸或磷酸以防止金屬離子的吸附。SC系列和SP0810基本上使用去離子水作為流動(dòng)相。極性的有機(jī)溶劑也可添加在流動(dòng)相中，可提高色譜柱對(duì)糖醇的分離能力，并減少疏水物質(zhì)的吸附。添加有機(jī)溶劑的比例最大不可超過(guò)20%。SC系列在流動(dòng)相中加入鹽可提高離子化合物的分離能力?？杉尤氲柠}為Ca(NO3)2和CaSO4,pH值范圍在37之間。另外，如果樣品中含有大量的重金屬，在流動(dòng)相中加入1050ppm的Ca-EDTA,以防止損害色譜柱性能。SC1211和SZ5532所用的流動(dòng)相

7、基本上為水和有機(jī)溶劑的混合溶液，一般有機(jī)溶劑用乙腈。分離機(jī)理是基于分配色譜。請(qǐng)參照表四的使用范圍選擇流動(dòng)相。5流速正常情況下，建議使用表三中的流速，表四中注明了可使用的流速范圍。一般來(lái)說(shuō)，糖類(lèi)在液體中的擴(kuò)散速度遠(yuǎn)小于其他物質(zhì)。流速越慢，分離度越高。在低聚物的分離中，更低的流速能獲得更令人滿意的分離效果。6柱加熱如上所述，糖類(lèi)在溶劑中的擴(kuò)散速度很慢，因此，通過(guò)加熱色譜柱在流動(dòng)相允許的高溫條件下分離能獲得更好的分離度。一般情況下，建議使用表三所示的溫度。如果SC系列和SP0810在使用時(shí)沒(méi)有加熱到50C，糖的端基差向異構(gòu)體會(huì)被分離，特別注意一定要在合適的溫度下使用色譜柱。SH系列色譜柱不適用于高溫

8、下分離蔗糖和蜜三糖（棉子糖），因?yàn)樯V柱的填料性質(zhì)類(lèi)似于這兩種糖的分解催化劑。如果不可避免的要在SH系列色譜柱上分離這兩種糖，就必須在40C左右的條件下使用，以防止糖的分解。當(dāng)在SP0810和SC系列色譜柱之前使用保護(hù)柱時(shí)，保護(hù)柱也必須加熱，否則，可能導(dǎo)致糖的端基差向異構(gòu)體被分離或產(chǎn)生峰展寬。如果不加熱保護(hù)柱，建議選擇SUGARKS-G系列。色譜柱聯(lián)用如果不能獲得滿意的分離效果，可使用相同型號(hào)或不同型號(hào)的幾根色譜柱聯(lián)用來(lái)提高分離度。目前僅限于SP0810與SC系列和SUGARKS系列聯(lián)用，而且必須按以下順序連接。SUGARKS+SC+SP0810如果需要使用保護(hù)柱，必須使用與第一根柱子匹配的。

9、參考保護(hù)柱與色譜柱的匹配表或其他關(guān)于色譜柱聯(lián)用的技術(shù)文件。樣品的處理通常用流動(dòng)相來(lái)溶解樣品。將溶液用至少045um的微孔濾膜過(guò)濾后再注入色譜柱分析。推薦使用Shodex次性濾膜。任何含有蛋白質(zhì)的樣品必須在過(guò)濾前將蛋白質(zhì)除去。含有重金屬離子、表面活性劑（乳化劑）或油性物質(zhì)的樣品，可能會(huì)在色譜柱上產(chǎn)生吸附，在樣品過(guò)濾之前可通過(guò)H-型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂將其除去?？赏ㄟ^(guò)OH-型陰離子交換樹(shù)脂除去樣品中的有機(jī)酸。SH系列色譜柱是可以分離有機(jī)酸的，不需要這步樣品處理，但堿性樣品必須調(diào)為中性才能進(jìn)樣，否則，色譜柱的性能會(huì)有損傷。色譜柱的保存完成分析過(guò)程后，將流速降低至0.30.5ml/min,關(guān)閉柱溫箱，保持泵

10、沖洗色譜柱直到溫度降至室溫。當(dāng)溫度降至室溫后，停泵，拆下色譜柱并用柱旋塞將色譜柱密封好。將封好的色譜柱放置于沒(méi)有陽(yáng)光直射，溫度波動(dòng)小的地方保存。色譜柱性能的恢復(fù)由于Shodex這個(gè)系列的色譜柱填料時(shí)不同的抗衡離子交換樹(shù)脂，而樣品中所含的離子會(huì)與其發(fā)生吸附作用和離子交換作用，導(dǎo)致抗衡離子的變化，損害色譜柱性能。因此，有必要對(duì)色譜柱進(jìn)行清洗，恢復(fù)其性能。下表中列出了各個(gè)型號(hào)色譜柱的清洗溶劑和清洗方法，以恢復(fù)色譜柱性能。表五色譜柱性能的恢復(fù)型號(hào)溶劑柱溫（C）操作過(guò)程SH系列0.005NH2SO450以0.5ml/min流速?zèng)_洗50mlSC1011SC18210.1MCa(NO3)250以0.5ml/

11、min流速?zèng)_洗50mlSP08101)0.2MPb(NO3)27095注入50u1,重復(fù)34次SC12112)0.1MCa(NO3)250以0.5m1/min流速?zèng)_洗30mlSZ55322)0.1MZn(NO3)250以0.5m1/min流速?zèng)_洗30ml色譜柱性能測(cè)試表列出了色譜柱性能測(cè)試的條件。表六測(cè)試條件型號(hào)流動(dòng)相流速溫度(C)樣品進(jìn)樣體積(ml/min)(ul)SH系列0.01NH2SO41.0501%丙三醇5SC1011H2O1.0801%丙三醇5SC1821SP0810H2O1.0801%丙三醇5SC121125%CH3CN/H2O1.0501%丙三醇10SZ553270%CH3CN

12、/H21.0501%丙三醇5O計(jì)算公式：NTP=5.54X(Rt/W)2其中NTP：理論塔板數(shù)，Rt：保留時(shí)間，W：半峰寬。ShodexSUGARSP0810的介紹由于色譜柱采用了比其他型號(hào)的SUGAR系列色譜柱更軟的裝填料，使用時(shí)要特別注意，尤其是在啟動(dòng)泵和停泵的時(shí)候，緩慢變化流速，不要使壓力驟然變化過(guò)大。在使用之前，請(qǐng)?jiān)陂喿xShodexSUGAR系列色譜柱說(shuō)明書(shū)的同時(shí)熟記以下的介紹。I色譜柱的安裝和拆卸（1）安裝色譜柱，啟動(dòng)泵：1）設(shè)置流速為0.20.3ml/min2）將色譜柱兩端的柱旋塞取下，在連接管路之前，確保流動(dòng)相事先已充分脫氣，管路已用流動(dòng)相清洗。確認(rèn)有液體從可管路流出，保持連接管

13、路的通暢。3）確認(rèn)流速的設(shè)置是正確的，啟動(dòng)泵，除去管路中的空氣。4）保持泵運(yùn)行狀態(tài)，將色譜柱按標(biāo)示的正確方向接入系統(tǒng)中。接好之后，確認(rèn)兩端沒(méi)有溶劑泄漏。5）加熱色譜柱至70C.6）溫度達(dá)到設(shè)定值后，逐步的增加流速直至正常使用值。（2）結(jié)束一天的分析過(guò)程后，第二天繼續(xù)分析時(shí)：1）降低泵流速至0.20.3ml/min,保持泵運(yùn)行。2）關(guān)掉柱溫箱。3）到溫度降到室溫時(shí),停泵。4）讓色譜柱連接在色譜系統(tǒng)中。（3）重新開(kāi)始分析：1）確認(rèn)泵流速設(shè)置在0.20.3ml/min2）打開(kāi)柱溫箱加熱色譜柱。3）加熱色譜柱到設(shè)定溫度。4）當(dāng)溫度達(dá)設(shè)置值時(shí)啟動(dòng)泵。5）逐步的增加流速到正常使用值。（4）完成分析后,拆下

14、色譜柱：1）降低流速至0.20.3ml/min,保持泵運(yùn)行。2）關(guān)掉柱溫箱。3）讓柱溫降到室溫。4）到柱溫降到室溫時(shí),停泵,拆下色譜柱。5）將柱旋塞擰緊,密封好色譜柱,保存于溫度波動(dòng)小的地方。II仔細(xì)的使用色譜柱有機(jī)溶劑可作為流動(dòng)相，如乙醇和乙腈，最高濃度不要超過(guò)20%。任何情況下都要避免泵壓力或流速的驟然變化，建議使用無(wú)脈沖的泵或在泵系統(tǒng)中安裝脈沖阻尼器，以保證流動(dòng)相無(wú)脈動(dòng)輸出。在使用時(shí)保持柱溫在7095C范圍內(nèi)，否則端基異構(gòu)體會(huì)分離出來(lái)導(dǎo)致峰展寬。每根色譜柱的最大工作壓力為3.0MPa。推薦使用壓力限制裝置。最大流速可設(shè)置為1.0ml/min,但在柱溫40C條件下，最大流速設(shè)置為0.5ml

15、/min。根據(jù)I部分的建議設(shè)置泵的啟動(dòng)和停止。建議使用保護(hù)柱，保護(hù)柱不僅可以有效避免雜質(zhì)對(duì)色譜柱的傷害，也減緩了脈沖和壓力變化對(duì)色譜柱的影響。保護(hù)柱的選擇，請(qǐng)參考說(shuō)明書(shū)部分。警惕：不要在規(guī)定的壓力和流速范圍外使用色譜柱，否則，色譜柱的性能會(huì)被損害，通過(guò)清洗步驟也不能恢復(fù)其性能。13保證說(shuō)明ShowaDenkoK.K.保證：Shodex色譜柱在送達(dá)用戶處時(shí)，如果用戶按照使用說(shuō)明書(shū)操作，我們確保色譜柱能達(dá)到柱子出廠檢定證書(shū)的水平(附在色譜柱包裝盒中)。對(duì)于本說(shuō)明書(shū)沒(méi)有涉及到的特殊目的的用途，ShowaDenkoK.K不作任何保證。如果柱子的規(guī)格與說(shuō)明書(shū)有任何不符之處，請(qǐng)用戶在收到柱子后的10天內(nèi)告知ShowaDenkoK.K.。ShowaDenkoK.K.有責(zé)任為用戶進(jìn)行柱子的更換。對(duì)于任何間接的，或由于和儀器連接而引起的附帶的或相應(yīng)的破壞，無(wú)論這種破壞是在擔(dān)保范圍以內(nèi)，還是由于疏忽引起的，均不在退換柱子的保證范圍內(nèi)。下列情況不予保修如果沒(méi)有按照操作說(shuō)明書(shū)操作2）如果由ShowaDenkoK.K.指定之外的任何個(gè)人或公司重裝過(guò)柱子3）如果柱子被處理過(guò)4）如果柱子由使用者轉(zhuǎn)售他人，而未預(yù)先書(shū)面告知ShowaDenkoK.K.5）由于如下原因造成柱子性能和出廠檢定證書(shū)的水平不一致：a）電腦病毒b）使用者所用的樣品，試劑，氣體或冷卻水中有不純物c）和柱子連接使用的設(shè)備，儀器或部件斷裂或出現(xiàn)