(完整版)PCR試題答案版

1、PCR 培訓(xùn)班考試試題一、選擇題（共20 題，每題 2 分）1 、 PCR技術(shù)擴(kuò)增 DNA,需要的條件是 ( A ) 目的基因引物四種脫氧核苷酸 DNA聚合酶等 mRNA核糖體A、 B 、 C 、 D 、2、鎂離子在 DNA或 RNA體外擴(kuò)增反應(yīng)的濃度一般為（ D ）A、0.3-1mmol/L B 、0.5-1mmol/L C、0.3-2mmol/L D、0.5-2mmol/L3、多重 PCR需要的引物對(duì)為（ D）A、一對(duì)引物B 、半對(duì)引物C 、兩對(duì)引物 D 、多對(duì)引物4、PCR是在引物、模板和4 種脫氧核糖核苷酸存在的條件下依賴于DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng)，其特異性決定因素為（B ）A、模板

2、 B、引物 C 、dNTP D 、鎂離子5、在 PCR反應(yīng)中，下列哪項(xiàng)可以引起非靶序列的擴(kuò)增的擴(kuò)增( C)A、TaqDNA聚合酶加量過(guò)多B 、引物加量過(guò)多C、A、B都可D、緩沖液中鎂離子含量過(guò)高6、PCR技術(shù)的發(fā)明人是（ A）A、Mullis B、史蒂文 . 沙夫 C 、蘭德?tīng)?. 才木7、PCR產(chǎn)物短期存放可在（A ）保存。A、4 B 、常溫C、-80 D、高溫8、PCR產(chǎn)物長(zhǎng)期儲(chǔ)存最好置于（D ）。A、4 B 、常溫C 、16D 、-20 9、PCR的基本反應(yīng)過(guò)程包括（ A）A、變性、退火、延伸 B 、變性、延伸 C 、變性、退火10、在實(shí)際工作中，基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室污染類型包括( D)A、擴(kuò)

3、增產(chǎn)物的污染 B 、天然基因組 DNA的污染 C 、試劑污染和標(biāo)本間交叉污染D、A、B、C都可能11、PCR技術(shù)于哪一年發(fā)明（ A）A、1983B、1971C、 1987D、199312、Taq DNA聚合酶酶促反應(yīng)最快最適溫度為（C ）A、37B、50-55 C、70-75 D、80-85 13、以下哪種物質(zhì)在 PCR反應(yīng)中不需要（ D ）A、Taq DNA聚合酶 B、 dNTPs C 、鎂離子 D、 RNA酶14、PCR檢測(cè)中，經(jīng)過(guò)n 個(gè)循環(huán)的擴(kuò)增，拷貝數(shù)將增加（C ）A、nB、2nC、2nD、n215、PCR基因擴(kuò)增儀最關(guān)鍵的部分是（A、溫度控制系統(tǒng) B 、熒光檢測(cè)系統(tǒng)A ）C 、軟件系

4、統(tǒng)D 、熱蓋16、以下哪項(xiàng)不是臨床 PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的一般原則（ A ）A、各區(qū)合并 B 、注意風(fēng)向 C 、因地制宜 D 、方便工作17、PCR實(shí)驗(yàn)室一般包括 ( D )A、試劑準(zhǔn)備區(qū) B、標(biāo)本制備區(qū)C 、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)D 、A、B、C 都含18、PCR技術(shù)不僅為遺傳病的診斷帶來(lái)了便利，而且改進(jìn)了檢測(cè)細(xì)菌和病毒的方法。若要檢測(cè)一個(gè)人是否感染了艾滋病病毒，你認(rèn)為可以用 PCR擴(kuò)增血液中的（D）。A、白細(xì)胞 DNA B、病毒蛋白質(zhì) C 、血漿抗體D 、病毒核酸19、如果反應(yīng)體系中加入模板 DNA分子 100 個(gè)，則經(jīng)過(guò) 30 個(gè)循環(huán)后， DNA分子的數(shù)量將達(dá)到（ D ）個(gè)。A、100×

5、; 30B 、100×30× 2C、100×302D、100×23020、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的分析方法主要有（D）A 、凝膠電泳分析法 B 、點(diǎn)雜交法 C 、熒光探針定量 PCR法 D 、A、B、C 都是二、判斷題（共20 題，每題 2 分）1、PCR引物設(shè)計(jì)的目的是在擴(kuò)增特異性和擴(kuò)增效率間間取得平衡。（ ）2、在 PCR反應(yīng)中，dATP在 DNA擴(kuò)增中可以提供能量， 同時(shí)作為 DNA合成的原料。（ ）3、DNA擴(kuò)增過(guò)程未加解旋酶， 可以通過(guò)先適當(dāng)加溫的方法破壞氫鍵， 使模板 DNA 解旋。（ ）4、PCR反應(yīng)中，復(fù)性過(guò)程中引物與 DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿

6、基互補(bǔ)配對(duì)原則完成。（ ）5、PCR與細(xì)胞內(nèi) DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高。 （ ）6、PCR技術(shù)可用于基因診斷，判斷親緣關(guān)系等。 （ ）7、PCR技術(shù)需在體內(nèi)進(jìn)行。（×）8、PCR反應(yīng)體系中的緩沖液相當(dāng)于細(xì)胞中的體液。（）9、核酸的復(fù)制是由5 3 方向進(jìn)行的。（）10、配對(duì)的堿基總是A 與 T 和 G與 C。（）11、HBsAg 轉(zhuǎn)陰性后一段時(shí)間才出現(xiàn)可檢測(cè)的HBsAb ，此段間隔期稱之為“窗口期”。（）12、市面上多數(shù)試劑用淬滅基團(tuán)Q 基團(tuán)和報(bào)告基團(tuán)R 基團(tuán)來(lái)標(biāo)記熒光定量PCR的探針。（）13、PCR反應(yīng)體系中 Mg2+的作用是促進(jìn) Taq DNA 聚合酶活性。（）14、

7、若標(biāo)本中含有蛋白變性劑（如甲醛） ， PH、離子強(qiáng)度、 Mg2+等有較大改變都會(huì)影響Taq 酶活性。（）15、每個(gè)子代 DNA 分子中均保留一條親代 DNA 鏈和一條新合成的 DNA 鏈，這種復(fù)制方式稱之為半保留復(fù)制。 （）16、發(fā)生溶血的標(biāo)本對(duì)PCR 結(jié)果沒(méi)影響。（×）17、“平臺(tái)效應(yīng)”是描述PCR 后期循環(huán)產(chǎn)物對(duì)數(shù)累積趨于飽和。 （）18、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（ reverse transcription-PCR ，RT-PCR）就是在應(yīng)用 PCR方法檢測(cè) RNA病毒時(shí)，以 RNA 為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下形成 cDNA 鏈，然后以 cDNA 為模板進(jìn)行正常的 PCR 循環(huán)擴(kuò)增。（）19、在定量 PCR 中，72這一步對(duì)熒光探針的結(jié)合有影響， 故去除，實(shí)際上 55仍可充分延伸，完成擴(kuò)增復(fù)制。 （）20、PCR 可應(yīng)用于遺傳病、腫瘤及病原體檢測(cè)三大方面（）三、簡(jiǎn)答 ( 共兩題，每題 10 分)1、PCR技術(shù)答： PCR技術(shù)是用一對(duì)寡聚核苷酸作為引物（要點(diǎn)1：2 分），通過(guò)高溫變性、低溫退火、中溫延伸（要點(diǎn)2：5 分）這一周期的多