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1、植物組織中丙二醛含量 的測(cè)定小組成員:江容宇 陳玲 許 麗娟 王龍鳳1 一 原 理 植物器官在逆境條件下或衰老時(shí), 往往發(fā)生膜脂過氧化作用,丙二醛(MDA)是其中產(chǎn)物之一, 通常將其作為脂質(zhì)過氧化指標(biāo), 用于表示細(xì)胞膜脂過氧化程度和植物對(duì)逆境條件反應(yīng)的強(qiáng)弱。2 二 材料、儀器設(shè)備及試劑 (一)材料 植物葉片(經(jīng)逆境條件處理) (二)儀器設(shè)備 研缽, 試管, 移液管, 恒溫水浴鍋, 離心機(jī),分光光度計(jì) (三) 試劑 10 % 三氯乙酸 (TCA) 0.6% 硫代巴比妥酸 (TBA)3材料正常生長(zhǎng)的以及經(jīng)逆境處理的西紅柿植物的葉片。4試劑5 %三氯醋酸溶解定容.()硫代巴比妥酸()的配制5儀器設(shè)備
2、研體剪刀分光光度計(jì); 分光光度計(jì) 恒溫水??;試管:20 mL4 離心機(jī)。6方法與步驟新鮮葉片,去污,剪碎,混勻稱三份,0.5g左右分別置于三只研體中,加5%TCA研磨所得勻漿在3000r/min下離心取上層清液,加,,混勻在度的水浴上煮沸,冷卻后再離心一次分別測(cè)定上層清液在,和處的吸光值,并按公式算出濃度7(3) 計(jì)算 按公式計(jì)算MDA的含量(mol/g): MDA的濃度(mol/L) .()代表波長(zhǎng)下的吸光值代表波長(zhǎng)下的吸光值代表波長(zhǎng)下的吸光值 8 四 注意事項(xiàng)取上清液時(shí)要小心,不要將沉淀取出使用離心機(jī)時(shí), 一定要注意平衡. 返回9思考題 不同植物在同一逆境下,丙二醛含量變化不同,說明了什么?10植物器官衰老或在逆境下遭受傷害,往往發(fā)生膜脂過氧化作用,丙二醛(MDA)是膜脂過氧化的最終產(chǎn)物,其含量可以反映植物遭受逆境傷害的程度。MDA從膜上產(chǎn)生的位置釋放出來后,可以與蛋白質(zhì)、核酸反應(yīng),從而喪失功能,還可使纖維素分子間的橋鍵松弛,或抑制蛋白質(zhì)的合成。不同植物體內(nèi),各個(gè)反應(yīng)進(jìn)行的程度不同,因而最終的丙二醛含量會(huì)有所不同;這與植物的耐受程度也是有關(guān)系的。我會(huì)11丙二醛在植物中含量是不是越少越好?丙二醛含量高,說明植物細(xì)胞膜質(zhì)過氧化程度高,細(xì)胞膜受到的傷害嚴(yán)重,同時(shí)也會(huì)告
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