醫(yī)學(xué)專題藥學(xué)

1、中國獸藥典二一五年版（一部） 解讀汪 霞主 要 內(nèi) 容 一、凡例 二、紫外-可見分光光度法 三、高效液相色譜法（氣相色譜法） 四、獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)原則 五、分析方法驗證轉(zhuǎn)移確認(rèn)凡 例 （總則） 一、中華人民共和國獸藥典簡稱中國獸藥典，依據(jù)獸藥管理條例組織制定和頒布實施，是國家監(jiān)督管理獸藥質(zhì)量的法定技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。中國獸藥典一經(jīng)頒布實施，其同品種的上版標(biāo)準(zhǔn)或其原國家標(biāo)準(zhǔn)即同時停止使用。 除特別注明版次外，中國獸藥典均指現(xiàn)行版中國獸藥典。通用的、效期內(nèi)最低標(biāo)準(zhǔn)凡 例 （總則） 二、獸藥典收載的凡例、附錄對獸藥典以外的其他獸用化學(xué)、抗生素、生化藥品等國家標(biāo)準(zhǔn)具同等效力。 其他國家標(biāo)準(zhǔn)：獸藥國家

2、標(biāo)準(zhǔn) 化學(xué)藥品、中藥卷第一冊、獸藥國家標(biāo)準(zhǔn)匯編（獸藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn) 第一、二、三冊）、進(jìn)口獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、農(nóng)業(yè)部公告（未成冊）等未收載在本版獸藥典中的標(biāo)準(zhǔn)。凡 例 （總則） 凡 例 （總則） 三、凡例是為正確使用中國獸藥典進(jìn)行獸藥質(zhì)量檢定的基本原則，是對中國獸藥典正文、附錄及與獸藥質(zhì)量檢定有關(guān)的共性問題的統(tǒng)一規(guī)定。 凡例是解釋和正確使用中國獸藥典進(jìn)行質(zhì)量檢定的基本原則，并把正文品種、附錄及質(zhì)量檢定有關(guān)的共性問題加以規(guī)定，避免在全書中重復(fù)說明。凡例中的有關(guān)規(guī)定具有法定的約束力。凡 例 （總則） 四、凡例和附錄中采用“除另有規(guī)定外”這一用語，表示存在與凡例或附錄有關(guān)規(guī)定不一致的情況時，則在正文

3、中另作規(guī)定，并按此規(guī)定執(zhí)行。 凡 例 （總則） 六、正文所設(shè)各項規(guī)定是針對符合獸藥生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范的產(chǎn)品而言。 任何違反獸藥GMP或有未經(jīng)批準(zhǔn)添加物質(zhì)所生產(chǎn)的獸藥，即使符合中國獸藥典或按照中國獸藥典暫不能將其添加物或相關(guān)雜質(zhì)定性為何物質(zhì)，亦不能認(rèn)為其符合規(guī)定。正文： 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是按照批準(zhǔn)的處方來源、生產(chǎn)工藝、貯藏運輸條件所制定的、用以檢測獸藥質(zhì)量。制法：所有獸藥的生產(chǎn)工藝應(yīng)經(jīng)驗證，并經(jīng)國務(wù)院獸醫(yī)行政管理部門批準(zhǔn)，生產(chǎn)過程均應(yīng)符合獸藥GMP的要求。檢查：各雜質(zhì)檢查項目系指該獸藥在按既定工藝進(jìn)行生產(chǎn)和正常貯藏過程中可能含有或產(chǎn)生并需要控制的雜質(zhì)，如殘留溶劑、有關(guān)物質(zhì)等，如果改變生產(chǎn)工藝時需增修訂有關(guān)

4、項目。凡 例（正文） 八、中國獸藥典各品種項下收載的內(nèi)容為標(biāo)準(zhǔn)正文。正文系根據(jù)藥物自身的理化與生物學(xué)特性，按照批準(zhǔn)的處方來源、生產(chǎn)工藝、貯藏運輸條件等所制定的、用以檢測獸藥質(zhì)量是否達(dá)到用藥要求并衡量其質(zhì)量是否穩(wěn)定均一的技術(shù)規(guī)定。凡 例（正文） 申請文號 仿產(chǎn)品 不是仿標(biāo)準(zhǔn)凡 例（正文） 九、正文內(nèi)容根據(jù)品種和劑型的不同，按順序可分別列有：（1）品名（包括中文名、漢語拼音與英文名）；（2）有機(jī)藥物的結(jié)構(gòu)式；（3）分子式與分子量；（4）來源或有機(jī)藥物的化學(xué)名稱；（5）含量或效價規(guī)定；（6）處方； （7）制法；（8）性狀；（9）鑒別；（10）檢查；（11）含量測定；（12）類別；（13）作用與用途；

5、（14）用法與用量；（15）注意事項；（16）不良反應(yīng)；（17）休藥期； （18）規(guī)格；（19）貯藏；（20）制劑等。凡 例（附錄） 十、附錄主要收載制劑通則、通用檢測方法和指導(dǎo)原則。制劑通則系按照獸藥劑型分類，針對劑型特點所規(guī)定的基本技術(shù)要求；通用檢測方法系各正文品種進(jìn)行相同檢查項目的檢測時所應(yīng)采用的統(tǒng)一的設(shè)備、程序、方法及限度等；指導(dǎo)原則系為執(zhí)行獸藥典、考察獸藥質(zhì)量、起草與復(fù)核獸藥標(biāo)準(zhǔn)等所制定的指導(dǎo)性規(guī)定。凡 例（附錄） 十四、制法項下主要記載獸藥的重要工藝要求和質(zhì)量管理要求。 （1）所有獸藥的生產(chǎn)工藝應(yīng)經(jīng)驗證，并經(jīng)國務(wù)院獸醫(yī)行政管理部門批準(zhǔn)，生產(chǎn)過程均應(yīng)符合獸藥GMP的要求。 （2）來源

6、于動物組織提取的獸藥，其所用動物種屬要明確，所用臟器均應(yīng)來自經(jīng)檢疫的健康動物，涉及牛源的應(yīng)取自無牛海綿狀腦病地區(qū)的健康牛群；來源于人尿提取的獸藥，均應(yīng)取自健康人群。上述獸藥均應(yīng)有明確的病毒滅活工藝要求以及質(zhì)量管理要求。 （3）直接用于生產(chǎn)的菌種、毒種、來自人和動物的細(xì)胞、DNA重組工程菌及工程細(xì)胞，來源途徑應(yīng)經(jīng)國務(wù)院獸醫(yī)行政管理部門批準(zhǔn)并應(yīng)符合國家有關(guān)的管理規(guī)范。凡 例（項目與要求） 十五、性狀項下記載獸藥的外觀、臭、溶解度以及物理常數(shù)等。 （1）外觀性狀是對獸藥的色澤和外表感觀的規(guī)定。凡 例（項目與要求） 十五、（2）溶解度是獸藥的一種物理性質(zhì)。對在特定溶劑中的溶解性能需做質(zhì)量控制時，在該品

7、種項下另作具體規(guī)定。 試驗法：除另有規(guī)定外，稱取研成細(xì)粉的供試品或量取液體供試品，置252一定容量的溶劑中，每隔5分鐘強(qiáng)力振搖30秒鐘；觀察30分鐘內(nèi)的溶解情況，如無目視可見的溶質(zhì)顆?；蛞旱螘r，即視為完全溶解。凡 例（項目與要求） 十六、鑒別項下規(guī)定的試驗方法，系根據(jù)反映該獸藥某些物理、化學(xué)或生物學(xué)等特性所進(jìn)行的獸藥鑒別試驗，不完全代表對該獸藥化學(xué)結(jié)構(gòu)的確證。凡 例（項目與要求） 十七、檢查項下包括反映獸藥的安全性與有效性的試驗方法和限度、均一性與純度等制備工藝要求等內(nèi)容。 安全性檢查項目： 制法要求、有關(guān)物質(zhì)、高聚物、殘留溶劑、抑菌劑的控制、溶液顏色與澄清度、細(xì)菌內(nèi)毒素或熱原、無菌、過敏反應(yīng)

8、、異常毒性、微生物限度、無機(jī)離子、滲透壓摩爾濃度有效性檢查項目： 溶出度、釋放度、含量均勻度、組分測定、崩解時限、融變時限、乳化穩(wěn)定性、溶解性凡 例（項目與要求） 采用色譜法檢測有關(guān)物質(zhì)時，雜質(zhì)峰（或斑點）不包括溶劑、輔料或原料藥的非活性部分等產(chǎn)生的色譜峰（或斑點）。必要時，可采用適宜的方法對上述非雜質(zhì)峰（或斑點）進(jìn)行確認(rèn)。 處方中含有抑菌劑的注射劑和眼用制劑，應(yīng)建立適宜的檢測方法對抑菌劑的含量進(jìn)行控制。正文已明確列有抑菌劑檢查的品種必須依法對產(chǎn)品中使用的抑菌劑進(jìn)行該項檢查，并應(yīng)符合相應(yīng)的限度規(guī)定。凡 例（項目與要求） 各類制劑，除另有規(guī)定外，均應(yīng)符合各制劑通則項下有關(guān)的各項規(guī)定。 例子：【檢

9、查】 其他 應(yīng)按照各制劑通則項下規(guī)定的檢驗項目進(jìn)行檢查。 各制劑通則項下帶【 】的要 做，不帶的不做。如軟膏劑含量均勻度。凡 例（項目與要求） 十八、含量測定項下規(guī)定的試驗方法，用于測定原料藥及制劑中有效成分的含量，一般可采用化學(xué)、儀器或生物測定方法。 原料藥：純度達(dá)到98.5%以上時，首選容量法； 非水法測定鹽酸鹽含量時革除醋酸汞的使用，采取電位滴定或是篩選合適的溶媒確保終點突躍指示劑變色明顯 UV吸收系數(shù)小于100的、多組分物質(zhì)不宜采用紫外分光光度法，多考慮HPLC 制劑：容量法、永停滴定法、紫外分光光度法等專屬性不強(qiáng)的方法或測定復(fù)方制劑含量時，多考慮HPLC法；一般采用外標(biāo)法，前處理繁雜

10、的，采用內(nèi)標(biāo)法。凡 例（項目與要求） 十九、類別、作用與用途，系指獸藥的主要作用與用途或?qū)W科的歸屬劃分，不排除在臨床實踐的基礎(chǔ)上作其他類別藥物使用。 二十、用法與用量，系指常用的給藥方法和除另有規(guī)定外成年畜禽的常用劑量。凡 例（項目與要求） 二十一、制劑的規(guī)格，系指每一支、片或其他每一個單位制劑中含有主藥的重量（或效價）或含量（）或裝量。注射液項下，如為“1ml10mg”，系指1ml中含有主藥10mg；對于列有處方或標(biāo)有濃度的制劑，也可同時規(guī)定裝量規(guī)格。凡 例（項目與要求） 二十二、貯藏項下的規(guī)定，系為避免污染和降解而對獸藥貯存與保管的基本要求，以下列名詞術(shù)語表示： 遮光 系指用不透光的容器包

11、裝，例如棕色容器或黑紙包裹的無色透明、半透明容器； 避光 系指避免日光直射； 密閉 系指將容器密閉，以防止塵土及異物進(jìn)入； 密封 系指將容器密封以防止風(fēng)化、吸潮、揮發(fā)或異物進(jìn)入； 熔封或嚴(yán)封 系指將容器熔封或用適宜的材料嚴(yán)封，以防止空氣與水分的侵入并防止污染；凡 例（項目與要求） 陰涼處 系指不超過20； 涼暗處 系指避光并不超過20； 冷處 系指210； 常溫 系指1030。 除另有規(guī)定外，貯藏項下未規(guī)定溫度的一般系指常溫。凡 例（項目與要求） 二十三、制劑中使用的原料藥和輔料，均應(yīng)符合本版獸藥典的規(guī)定；本版獸藥典未收載者，必須制定符合獸藥用要求的標(biāo)準(zhǔn)，并需經(jīng)國務(wù)院獸醫(yī)行政管理部門批準(zhǔn)。 本

12、版獸藥典收載的藥用輔料標(biāo)準(zhǔn)是對在品種【類別】項下規(guī)定相應(yīng)用途輔料的基本要求。 制劑生產(chǎn)企業(yè)使用的藥用輔料即使符合本版獸藥典藥用輔料標(biāo)準(zhǔn)，也應(yīng)進(jìn)行藥用輔料標(biāo)準(zhǔn)的適用性驗證。 藥用輔料標(biāo)準(zhǔn)適用性驗證應(yīng)充分考慮藥用輔料的來源、工藝，以及制備制劑的特點、給藥途徑、使用對象以及使用劑量等相關(guān)因素的影響。凡 例（項目與要求） 在采用本版獸藥典或中國藥典收載的藥用輔料時，還應(yīng)考慮制備制劑的給藥途徑、制劑用途、配方組成、使用劑量等其他因素對其安全性的影響。根據(jù)制劑的安全風(fēng)險的程度，選擇相應(yīng)等級的藥用輔料。特別是對注射劑、眼用制劑等高風(fēng)險制劑，在適用性、安全性、穩(wěn)定性等符合要求的前提下應(yīng)盡可能選擇供注射用級別的

13、藥用輔料。 采用本版獸藥典或中國藥典收載的藥用輔料對制劑的適用性及安全性等可能產(chǎn)生影響時，生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)根據(jù)制劑的特點，采用符合要求的藥用輔料，并建立相應(yīng)的藥用輔料標(biāo)準(zhǔn)（更高要求或增加項目）。凡 例（檢驗方法和限度） 凡 例（檢驗方法和限度） 凡 例（檢驗方法和限度） 凡 例（檢驗方法和限度） 二十四、采用本版獸藥典規(guī)定的方法進(jìn)行檢驗時應(yīng)對方法的適用性進(jìn)行確認(rèn)。 二十五、本版獸藥典正文收載的所有品種，均應(yīng)按規(guī)定的方法進(jìn)行檢驗。如采用其他方法，應(yīng)將該方法與規(guī)定的方法做比較試驗，根據(jù)試驗結(jié)果掌握使用，但在仲裁時仍以本版獸藥典規(guī)定的方法為準(zhǔn)。凡 例（檢驗方法和限度） 二十六、本版獸藥典中規(guī)定的各種純度和

14、限度數(shù)值以及制劑的重（裝）量差異，系包括上限和下限兩個數(shù)值本身及中間數(shù)值。規(guī)定的這些數(shù)值不論是百分?jǐn)?shù)還是絕對數(shù)字，其最后一位數(shù)字都是有效位。 試驗結(jié)果在運算過程中，可比規(guī)定的有效數(shù)字多保留一位數(shù)，而后根據(jù)有效數(shù)字修約規(guī)則進(jìn)舍至規(guī)定有效位。計算所得的最后數(shù)值或測定讀數(shù)值均可按修約規(guī)則進(jìn)舍至規(guī)定的有效位，取此數(shù)值與標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的限度數(shù)值比較，以判斷是否符合規(guī)定的限度。凡 例（檢驗方法和限度）修約口訣：四舍六入五考慮，五后非零則進(jìn)一，五后全零看五前，五前偶舍奇進(jìn)一，不論數(shù)字多少位，都要一次修約成。 例：將12.1498修約到一位小數(shù)，12.1 將12.1498修約到兩位有效位數(shù)，12 將1.050修約

15、到一位小數(shù)，1.0 將0.350修約到一位小數(shù)，0.4 將0.0325修約到兩位有效位數(shù)，0.032 將15.4546修約為兩位有效位數(shù)，15凡 例（檢驗方法和限度） 二十七、原料藥的含量（），除另有注明者外，均按重量計。如規(guī)定上限為100以上時，系指用本獸藥典規(guī)定的分析方法測定時可能達(dá)到的數(shù)值，它為獸藥典規(guī)定的限度或允許偏差，并非真實含有量；如未規(guī)定上限時，系指不超過101.0。 例：雙羥萘酸噻嘧啶項下，按干燥品計算，含C11H14N2SC23H16O6應(yīng)為97.0%103%。凡 例（檢驗方法和限度） 二十七、制劑的含量限度范圍，系根據(jù)主藥含量的多少、測定方法誤差、生產(chǎn)過程不可避免的偏差和貯

16、存期間可能產(chǎn)生降解的可接受程度而制定的，生產(chǎn)中應(yīng)按標(biāo)示量100%投料。 高投料時要有理由并驗證。凡 例（標(biāo)準(zhǔn)品、對照品） 二十八、標(biāo)準(zhǔn)品系指用于生物檢定或效價測定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，其特性量值一般按效價單位（或g）計；對照品系指采用理化方法進(jìn)行鑒別、檢查或含量測定時所用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，其特性量值一般按純度（%）計。 標(biāo)準(zhǔn)品與對照品的建立或變更批號，應(yīng)與國際標(biāo)準(zhǔn)品或原批號標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌愤M(jìn)行對比，并經(jīng)過協(xié)作標(biāo)定。然后按照國家獸藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)相應(yīng)的工作程序進(jìn)行技術(shù)審定，確認(rèn)其質(zhì)量能夠滿足既定用途后方可使用。標(biāo)準(zhǔn)品與對照品均應(yīng)按其標(biāo)簽或使用說明書所示的內(nèi)容使用或貯藏。凡 例（計量） 二十九、試驗用的計量儀器均應(yīng)符合國

17、務(wù)院質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督部門的規(guī)定。 三十、（2）本版獸藥典使用的滴定液和試液，其濃度要求精密標(biāo)定的滴定液用“XXX滴定液（YYYmol/L）”表示；作其他用途不需精密標(biāo)定其濃度時，用“YYYmol/L XXX溶液”表示，以示區(qū)別。凡 例（計量） 三十、（3） 水浴溫度 除另有規(guī)定外，均指98100； 熱水 系指7080； 微溫或溫水 系指4050； 室溫（常溫） 系指1030； 冷水 系指210； 冰浴 系指約0； 放冷 系指放冷至室溫。凡 例（計量）（7）液體的滴，系在20時，以1.0ml水為20滴進(jìn)行換算。（8）溶液后標(biāo)示的“（110）”等符號，系指固體溶質(zhì)1.0g或液體溶質(zhì)1.0ml加溶劑使成

18、10ml的溶液；未指明用何種溶劑時，均系指水溶液；兩種或兩種以上液體的混合物，名稱間用半字線“-”隔開，其后括號內(nèi)所示的“:”符號，系指各液體混合時的體積（重量）比例。 例：鹽酸溶液（91000）； 冰醋酸-水-二乙胺（5:5:2）（10）乙醇未指明濃度時，均系指95（ml/ml）的乙醇。凡 例（計量）（9）本版獸藥典所用藥篩，選用國家標(biāo)準(zhǔn)的R40/3系列，分等如下： 篩號 篩孔內(nèi)徑（平均值） 目號 一號篩 2000m70m 10目 二號篩 850m29m 24目 三號篩 355m13m 50目 四號篩 250m9.9m 65目 五號篩 180m7.6m 80目 六號篩 150m6.6m 10

19、0目 七號篩 125m5.8m 120目 八號篩 90m4.6m 150目 九號篩 75m4.1m 200目 凡 例（精確度） 三十二、（1）“精密稱定”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一；“稱定”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的百分之一；“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精密度要求；“量取”系指可用量筒或按照量取體積的有效數(shù)位選用量具。取用量為“約”若干時，系指取用量不得超過規(guī)定量的10。 例：取5ml 用量筒 取5.0ml 用刻度吸管 取5.00ml或精密量取5ml 用移液管凡 例（精確度） 三十二、（1）稱取“0.1g”，系指稱取重量可為0.060.14g

20、；稱取“2g”，系指稱取重量可為1.52.5g；稱取“2.0g”，系指稱取重量可為1.952.05g；稱取“2.00g”，系指稱取重量可為1.9952.005g。凡 例（精確度） 三十二、（2）恒重，除另有規(guī)定外，系指供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后稱重的差異在0.3mg以下的重量；干燥至恒重的第二次及以后各次稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1小時后進(jìn)行；熾灼至恒重的第二次稱重應(yīng)在繼續(xù)熾灼30分鐘后進(jìn)行。 注意：采用烘箱或恒溫減壓干燥箱干燥時，應(yīng)待溫度升至規(guī)定值并達(dá)到平衡后，再放入供試品。 減壓干燥時，稱量瓶蓋勿放入減壓干燥器中，且開啟前應(yīng)緩緩旋開進(jìn)氣閥，以免氣流吹散供試品。凡 例（精確度） 三十二、（

21、3）試驗中規(guī)定“按干燥品（或無水物，或無溶劑）計算”時，除另有規(guī)定外，應(yīng)取未經(jīng)干燥（或未去水、或未去溶劑）的供試品進(jìn)行試驗，并將計算中的取用量按檢查項下測得的干燥失重（或水分、或溶劑）扣除。凡 例（精確度） 三十二、（4）試驗中的“空白試驗”，系指在不加供試品或以等量溶劑替代供試液的情況下，按同法操作所得的結(jié)果；含量測定中的“并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正”，系指按供試品所耗滴定液的量（ml）與空白試驗中所耗滴定液的量（ml）之差進(jìn)行計算。凡 例（精確度） 三十二、（5）試驗時的溫度，未注明者，系指在室溫下進(jìn)行；溫度高低對試驗結(jié)果有顯著影響者，除另有規(guī)定外，應(yīng)以252為準(zhǔn)。 例：為防止HNO2的

22、分解與逸失，用亞硝酸鈉滴定液進(jìn)行永停滴定時，須在30以下進(jìn)行。凡 例（試藥、試液、指示劑） 三十三、試驗用的試藥，除另有規(guī)定外，均應(yīng)根據(jù)附錄試藥項下的規(guī)定，選用不同等級并符合國家標(biāo)準(zhǔn)或國務(wù)院有關(guān)行政主管部門規(guī)定的試劑標(biāo)準(zhǔn)。試液、緩沖液、指示劑與指示液、滴定液等，均應(yīng)符合附錄的規(guī)定或按照附錄的規(guī)定制備。凡 例（試藥、試液、指示劑） 三十四、試驗用水，除另有規(guī)定外，均系指純化水。酸堿度檢查所用的水，均系指新沸并放冷至室溫的水。 三十五、酸堿性試驗時，如未指明用何種指示劑，均系指石蕊試紙。凡 例（說明書、包裝、標(biāo)簽） 三十七、獸藥說明書應(yīng)符合獸藥管理條例及國務(wù)院獸醫(yī)行政管理部門對說明書的規(guī)定。 三十

23、八、直接接觸獸藥的包裝材料應(yīng)符合國務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門的有關(guān)規(guī)定，均應(yīng)無毒、潔凈，與內(nèi)容獸藥應(yīng)不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，并不的影響內(nèi)容獸藥的質(zhì)量。 紫外-可見分光光度法 在190800nm波長范圍內(nèi)測定物質(zhì)的吸光度。 用于鑒別、雜質(zhì)檢查和定量測定 對溶劑的要求 含有雜原子的有機(jī)溶劑末端吸收干擾測定，注意溶劑的使用范圍均不能小于截止使用波長。 水、乙腈 200nm 甲醇、乙醇 205nm 三氯甲烷 245nm紫外-可見分光光度法 溶劑檢查：以空氣為空白（即空白光路中不置任何物質(zhì)），將溶劑置1cm石英吸收池中測定其吸光度。 波長（nm） 吸光度220240不得過0.40241250不得過0.20251300

24、不得過0.10大于300不得過0.05紫外-可見分光光度法測定法 空白：一般為配制供試品溶液的同批溶劑；用同體積的溶劑代替對照品或供試品溶液，然后依次加入等量的相應(yīng)試劑，并用同樣方法處理，制得。 比色池：1cm石英吸收池。 吸光度讀數(shù)：一般為0.30.7。 狹縫波帶寬度：應(yīng)以減小狹縫寬度時供試品的吸光度不再增大為準(zhǔn)。紫外-可見分光光度法測定波長： 在規(guī)定的吸收峰波長2nm以內(nèi)測試幾個點的吸光度，或由儀器在規(guī)定波長附近自動掃描測定，以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確。除另有規(guī)定外，吸收峰波長應(yīng)在該品種項下規(guī)定的波長2nm以內(nèi)，并以吸光度最大的波長作為測定波長。紫外-可見分光光度法 1、鑒別和檢

25、查 分別按各品種項下規(guī)定的方法進(jìn)行。 2、含量測定 一般有以下幾種。 （1）對照品比較法 （2）吸收系數(shù)法：吸收系數(shù)通常應(yīng)大于100，并注意儀器的校正和檢定。 （3）計算分光光度法 （4）比色法高效液相色譜法色譜柱：反相、正相、離子交換、手性分離等。品種正文中未指明色譜柱溫度時系指室溫。 注意： 如使用緩沖液或含鹽溶液作為流動相，在試驗結(jié)束后，應(yīng)先用不含鹽的流動相沖洗，使色譜柱內(nèi)的鹽完全溶解洗脫出來，再用較高濃度的甲醇/乙腈-水溶液沖洗。 長期保存時，反相柱可貯存于甲醇或乙腈中，正相柱可貯存于經(jīng)脫水處理的正己烷中，離子交換柱可貯存于含5%甲醇或含0.05%疊氮化鈉的水中。高效液相色譜法檢測器選

26、擇性通用型線性流動相紫外檢測器二極管陣列檢測器熒光檢測器電化學(xué)檢測器質(zhì)譜檢測器不含鹽示差折光檢測器高效液相色譜法流動相： 用高純度的試劑配制流動相；水應(yīng)為新鮮制備的高純水。pH值應(yīng)用pH計進(jìn)行調(diào)節(jié)，偏差不超過0.2pH值單位。用0.45m或0.22m濾膜過濾，用前脫氣處理。 應(yīng)貯存于玻璃、聚四氟乙烯等容器內(nèi)，不能貯存在塑料容器中。緩沖鹽溶液應(yīng)盡量新鮮配制使用。高效液相色譜法色譜條件： 不可改變：填充劑種類、流動相組分、檢測器類型； 可適當(dāng)改變：色譜柱內(nèi)徑與長度、填充劑粒徑、流動相流速、流動相組分比例、柱溫、進(jìn)樣量、檢測器靈敏度等。高效液相色譜法 調(diào)整流動相組分比例時， 當(dāng)小比例組分的百分比例X

27、小于等于33時，允許改變范圍為0.7X1.3X；當(dāng)X大于33時，允許改變范圍為X-10X+10。使用二極管陣列檢測器檢查峰純度。 例1 兩組分50:50，調(diào)節(jié)范圍為40:6060:40. 例2 兩組分2:98，調(diào)節(jié)范圍為1.4:98.62.6:97.4. 例3 三組分60:35:5，對于35%的組分，調(diào)節(jié)范圍為50:45:570:25:5；對于5%的組分，調(diào)節(jié)范圍為58.5:35:6.561.5:35:3.5. 高效液相色譜法系統(tǒng)適用性試驗 理論板數(shù)：應(yīng)指明測定物質(zhì)，一般為待測物質(zhì)或內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的理論板數(shù)。 分離度：除另有規(guī)定外，待測物質(zhì)色譜峰與相鄰色譜峰之間的分離度應(yīng)大于1.5。 靈敏度：通常以

28、信噪比(S/N)來表示。系統(tǒng)適用性試驗中可以設(shè)置靈敏度實驗溶液來評價色譜系統(tǒng)的檢測能力。有關(guān)物質(zhì)檢查時尤為重要。高效液相色譜法 拖尾因子：以峰高作定量參數(shù)時，除另有規(guī)定外，T值應(yīng)在0.951.05之間；以峰面積作定量參數(shù)時，嚴(yán)重拖尾會對積分造成影響，此時應(yīng)在品種正文項下對拖尾因子作出規(guī)定。 重復(fù)性：采用外標(biāo)法時，通常取各品種項下的對照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣5次，除另有規(guī)定外，其峰面積的RSD應(yīng)不大于2.0%。采用內(nèi)標(biāo)法時，通常配制相當(dāng)于80%、100%和120%的對照品溶液，加入規(guī)定量的內(nèi)標(biāo)溶液，配成3種不同濃度的溶液，分別至少進(jìn)樣2次，計算平均校正因子,其RSD應(yīng)不大于2.0%。 高效液相色譜法測

29、定法 內(nèi)標(biāo)法：可避免樣品前處理及進(jìn)樣體積誤差對測定結(jié)果的影響。 外標(biāo)法 加校正因子的主成分自身對照法（雜質(zhì)檢查） 不加校正因子的主成分自身對照法（雜質(zhì)檢查） 面積歸一化法：用于雜質(zhì)檢查時，由于儀器響應(yīng)的線性限制，峰面積歸一化法一般不宜用于微量雜質(zhì)的檢查。高效液相色譜法 超高效液相色譜儀是適應(yīng)小粒徑(約2m)填充劑的耐超高壓、小進(jìn)樣量、低死體積、高靈敏度檢測的高效液相色譜儀。 相比于HPLC，UPLC的運行時間更短、分離度更好、靈敏度更高、溶劑用量更少。 若需使用小粒徑(約2m)填充劑，輸液泵的性能，進(jìn)樣體積、檢測池體積和系統(tǒng)的死體積等必須與之匹配；如有必要，色譜條件也應(yīng)作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。當(dāng)對其測定

30、結(jié)果產(chǎn)生爭議時，應(yīng)以品種項下規(guī)定的色譜條件的測定結(jié)果為準(zhǔn)。高效液相色譜法方法轉(zhuǎn)換驗證：重點考慮靈敏度、分離度符合性轉(zhuǎn)換前提：色譜柱柱效一致，首選同品牌、同填料但粒徑小的柱。轉(zhuǎn)換需調(diào)整的參數(shù)：流速、進(jìn)樣量、梯度洗脫程序。高效液相色譜法方法轉(zhuǎn)換提示1：原方法中系統(tǒng)適用性試驗*含分離度、靈敏度，比對轉(zhuǎn)換前后方法測試結(jié)果，出峰順序和個數(shù)均一致，系統(tǒng)適用性試驗結(jié)果符合要求，定性和定量無需驗證。*不含靈敏度，定性、定量、溶出度、含量均勻度測定無需驗證；有關(guān)物質(zhì)需驗證靈敏度，達(dá)到對照（品）溶液二十分之一即可。高效液相色譜法方法轉(zhuǎn)換提示2：原方法中沒有系統(tǒng)適用性試驗要求，溶出度、含量均勻度無需驗證；定性要求峰

31、純度、分離度滿意即可；有關(guān)物質(zhì)要求峰純度、分離度滿意，且靈敏度符合要求；定量（包括中藥制劑）要求峰純度、分離度滿意即可；無法進(jìn)行分離度比較，可進(jìn)行23種條件強(qiáng)制破壞試驗后進(jìn)行測定，比較兩者圖譜，雜質(zhì)個數(shù)和相對峰面積輸出應(yīng)基本一致。氣相色譜法載氣源：氦氣、氮氣、氫氣。 注：新方法中應(yīng)注明載氣流速。進(jìn)樣部分：溶液直接進(jìn)樣、自動進(jìn)樣、頂空進(jìn)樣。 注：頂空進(jìn)樣方法中，應(yīng)注明平衡溫度、平衡時間、傳輸線溫度、定量環(huán)溫度等。色譜柱：填充柱、毛細(xì)管柱。柱溫箱：柱溫 檢測器：FID、ECD，等。 溫度設(shè)置：柱、進(jìn)樣口（高于柱溫3050）、檢測器（FID比柱溫高，不低于150 ，通常為250350 ）獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

32、分析方法驗證指導(dǎo)原則 需驗證的情況：建立獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、獸藥生產(chǎn)工藝變更、制劑的組分變更、原分析方法進(jìn)行修訂。 驗證項目：鑒別試驗，限量或定量檢查，原料藥或制劑中有效成分含量測定，制劑中其他成分（如防腐劑等）測定，獸藥溶出度、釋放度中溶出量的測定。 驗證指標(biāo)：準(zhǔn)確度、精密度（包括重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）、專屬性、檢測限、定量限、線性、范圍和耐用性。 在分析方法驗證中，須采用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行試驗。獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)原則 已有重現(xiàn)性驗證，不需要驗證中間精密度。 如一種方法不夠?qū)?，可用其他分析方法予以補(bǔ)充。 視具體情況予以驗證。 項 目內(nèi) 容鑒 別 雜質(zhì)測定含量測定及溶出量測定校正因子定

33、量限 度準(zhǔn)確度-+-+精密度重復(fù)性-+-+中間精密度-+-+專屬性+檢測限-+-定量限-+-+線性-+-+范圍-+-+耐用性+獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)原則準(zhǔn)確度：方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近的程度，一般用回收率（）表示。 1、化學(xué)藥含量測定 原料藥：對照品 與另一方法比較。 制劑： 處方量空白輔料中添加對照品； 制劑中添加對照品 與另一方法比較 準(zhǔn)確度也可由所測定的精密度、線性和專屬性推算出來。獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)原則2、化學(xué)藥雜質(zhì)定量測定 原料藥中添加已知雜質(zhì)； 制劑處方量空白輔料中添加已知雜質(zhì)； 與另一方法比較； 不加校正因子的主成分自身對照法計算。 3、中藥化學(xué)成分測定

34、 用對照品進(jìn)行加樣回收率測定，即向已知被測成分含量的供試品中再精密加入一定量的被測成分對照品，依法測定。獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)原則 4、校正因子的準(zhǔn)確度 絕對（或定量）校正因子是指單位面積的色譜峰代表的待測物質(zhì)的量。待測物質(zhì)與所選定的參照物質(zhì)的絕對校正因子之比，即為相對校正因子。 相對校正因子可采用替代物（對照品）和被替代物（待測物）標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率比值進(jìn)行比較獲得；采用紫外吸收檢測器時，可將替代物（對照品）和被替代物（待測物）在規(guī)定波長和溶劑條件下的吸收系數(shù)比值進(jìn)行比較，計算獲得。 GC和HPLC的相對重量校正因子，正文項下描述為待測物峰面積與相對校正因子的乘積進(jìn)行結(jié)果計算。獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分

35、析方法驗證指導(dǎo)原則 5、數(shù)據(jù)要求 同一濃度（相當(dāng)于100%濃度水平），至少測定6份。 3種不同濃度（化學(xué)藥1.21、11、0.81左右；中藥1.51、11、0.51左右），每種3份測定。 應(yīng)報告測定方法、測定結(jié)果和RSD%或置信區(qū)間。樣品中待測成分含量和回收率限度關(guān)系可參考表2。獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)原則 表2 樣品中待測成分含量和回收率限度待測成分含量回收率限度（%）100%9810110%951021%921050.1%901080.01%8511010g/g（ppm）801151g/g7512010g/kg（ppb）70125獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)原則精密度：在規(guī)定的測試條件

36、下，同一份均勻供試品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。 重復(fù)性：同實驗室、同時間、同人員。 中間精密度：同實驗室、不同時間、不同人員。 重現(xiàn)性：不同實驗室、不同人員。獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)原則精密度的數(shù)據(jù)要求 表3 樣品中待測成分含量和精密度RSD可接受范圍待測成分含量重復(fù)性（RSD%）重現(xiàn)性（RSD%）100%1210%1.531%240.1%360.01%4810g/g（ppm）6111g/g81610g/kg（ppb）1532獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)原則專屬性：在其他成分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）存在下，采用的分析方法能正確測定被測物的能力。 如方法專屬性不強(qiáng)，應(yīng)采用多

37、種不同原理的方法予以補(bǔ)充。 1、鑒別反應(yīng) 應(yīng)呈陰性反應(yīng)獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)原則2、含量測定和雜質(zhì)測定 雜質(zhì)可得：向試樣中加入雜質(zhì)或輔料，考察分離度或測定結(jié)果。 雜質(zhì)不可得：與另一得到驗證方法比較； 加速破壞試驗。 比較測定結(jié)果或雜質(zhì)個數(shù)。獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)原則 檢測限：試樣中被測物能被檢測出的最低量。 檢測限作為限度試驗指標(biāo)和定性鑒別的依據(jù)，沒有定量意義。 1、直觀法 2、信噪比法 3:1或2:1 3、基于響應(yīng)值標(biāo)準(zhǔn)偏差和標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率法 按照LOD=3.3/S公式計算，式中LOD：檢測限；響應(yīng)值的偏差；S：標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率。 4、數(shù)據(jù)要求 上述計算方法獲得的檢測限數(shù)據(jù)須用含量相近的樣品進(jìn)行驗證。獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)原則定量限：被測物能被定量測定的最低量，其測定結(jié)果應(yīng)符合準(zhǔn)確度和精密度要求。 1、直觀法 2、信噪比法 10:1 3、基于響應(yīng)值標(biāo)準(zhǔn)偏差和標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率法 4、數(shù)據(jù)要求 上述計算方法獲得的定量限數(shù)據(jù)須用含量相近的樣品進(jìn)行驗證。應(yīng)附測試圖譜，說明測試過程和定量限結(jié)果，包括準(zhǔn)確度和精密度驗證數(shù)據(jù)。獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)原則線性：在設(shè)計的范圍內(nèi)，測試響應(yīng)值與試樣中被測物濃度呈比例關(guān)系的程度。 至少制備5份不同濃度的對照品溶液。 數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖（或其他數(shù)學(xué)模型）。獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)原則范圍：分析方法能達(dá)到一定