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文檔簡介

1、如何從已知靶基因預(yù)測與其相互作用的miRNAs主講人:唐婷婷什么是miRNAs miRNAs(MicroRNAs)是一種2025個核苷酸長度的單鏈小分子RNA,不具有編碼功能。它廣泛存在于植物、病毒、哺乳動物當(dāng)中。 成熟的miRNAs是由較長的初級轉(zhuǎn)錄物經(jīng)過一系列核酸酶的剪切加工而產(chǎn)生,隨后組裝進(jìn)RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體,通過堿基互補(bǔ)配對的方式識別靶mRNA,并根據(jù)互補(bǔ)程度的不同指導(dǎo)沉默復(fù)合體降解mRNA或者阻遏mRNA的翻譯。 本章以大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)為例,詳細(xì)講述如何從已知mRNA預(yù)測與其相互作用的miRNA

2、s。預(yù)測主要涉及幾個常用的生物信息學(xué)預(yù)測網(wǎng)站,如TargetScan,miRanda,miRDB和miRwalk等。本章將一一敘述上述網(wǎng)站的使用以及人工交集方法。第一節(jié) 用TargetScan預(yù)測調(diào)控mRNA的miRNAs首先在搜索欄輸入 http:/進(jìn)入 主頁。 隨后選擇預(yù)測的物種 (圖 ),在 欄中輸入需要預(yù)測的基因名 (圖 )并點(diǎn)擊。隨后可看到與其有可能互補(bǔ)的 及其 序列的保守性(圖 3),之后下拉頁面(圖 4),此時,可根據(jù)第五章方法進(jìn)行 的篩選。第一節(jié) 用TargetScan預(yù)測調(diào)控mRNA的miRNAs圖 1第一節(jié) 用TargetScan預(yù)測調(diào)控mRNA的miRNAs圖 2第一節(jié)

3、用TargetScan預(yù)測調(diào)控mRNA的miRNAs圖 3第一節(jié) 用TargetScan預(yù)測調(diào)控mRNA的miRNAs圖 4第二節(jié) 用miRanda預(yù)測調(diào)控mRNA的miRNAs首先輸入 /microrna/getGeneForm.do進(jìn)入主頁。隨后在 中輸入基因名 ,并選擇相應(yīng)物種,點(diǎn)擊 。(圖5)隨之選擇你所需的 。(圖6)根據(jù)需要選擇靶基因與 的分?jǐn)?shù)(圖7),隨后可見不同 與預(yù)測靶基因可見的結(jié)合位點(diǎn)根據(jù)需要記錄下所需研究的 (圖8)第二節(jié) 用miRanda預(yù)測調(diào)控mRNA的miRNAs圖 5第二節(jié) 用miRanda預(yù)測調(diào)控mRNA的miRNAs圖 6第二節(jié) 用miRanda預(yù)測調(diào)控mRN

4、A的miRNAs圖 7第二節(jié) 用miRanda預(yù)測調(diào)控mRNA的miRNAs圖 8第三節(jié) 用miRDB預(yù)測調(diào)控mRNA的miRNAs首先輸入 :/ / / / 進(jìn)入主頁。選擇靶基因的種屬,并輸入靶基因的名稱 (圖 9)并點(diǎn)擊 之后則會出現(xiàn)網(wǎng)站預(yù)測到的 列表(圖 10)點(diǎn)擊 便可看到此 與 更多信息(圖 11)第三節(jié) 用miRDB預(yù)測調(diào)控mRNA的miRNAs圖 9第三節(jié) 用miRDB預(yù)測調(diào)控mRNA的miRNAs圖 10第三節(jié) 用miRDB預(yù)測調(diào)控mRNA的miRNAs圖 11第三節(jié) 用miRDB預(yù)測調(diào)控mRNA的miRNAs圖 12第四節(jié) 用miRwalk預(yù)測調(diào)控mRNA的miRNAs首先輸

5、入 :/ / .-./ / / / . 進(jìn)入主頁點(diǎn)擊 下拉菜單中的 (圖 12)選擇種屬,并在 中輸入需要預(yù)測的靶基因()如圖(13)所示勾選選項(xiàng),點(diǎn)擊 之后便出現(xiàn)與 相關(guān)的 的列表(圖 14),下拉后可見一個彩色表格,為其他預(yù)測網(wǎng)站預(yù)測結(jié)果的交集(圖 15)。圖 13第四節(jié) 用miRwalk預(yù)測調(diào)控mRNA的miRNAs第四節(jié) 用miRwalk預(yù)測調(diào)控mRNA的miRNAs圖 14第四節(jié) 用miRwalk預(yù)測調(diào)控mRNA的miRNAs圖 15第四節(jié) 用miRwalk預(yù)測調(diào)控mRNA的miRNAs圖 16第五節(jié) 根據(jù)需要建立各網(wǎng)站預(yù)測結(jié)果交集 將各網(wǎng)站預(yù)測 的 復(fù)制到 表格中,并利用查找功能進(jìn)行比對查找并進(jìn)行標(biāo)記(本章以 與 的交集為例(圖 和圖 )后根據(jù)結(jié)果運(yùn)用 進(jìn)行結(jié)果展示,即 檢索到與 相關(guān) 有 個 檢索到的結(jié)果有 個,它們之間的交集有 個,分別為 、 、 、 、 、 、 、(圖 )。第五節(jié) 根據(jù)需要建立各網(wǎng)站預(yù)測結(jié)果交集圖 和圖 第六節(jié) 預(yù)測中需要注意的問題() 在預(yù)測之前,首先要上 進(jìn)行 的確認(rèn),隨后再按照上述方法進(jìn)行預(yù)測,當(dāng)輸入 無法進(jìn)行預(yù)測時,可換成對應(yīng) 進(jìn)行預(yù)測。() 雖然 可以進(jìn)行其他網(wǎng)站的鏈接預(yù)測但其結(jié)果較為局限,有可能因此漏掉一些重要信息,所以還是建議大家分開檢索后,進(jìn)行人工交集。() 每次查閱完后建議大家將

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