梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷

1、關(guān)于梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷課件第一張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷 梅毒（Syphilis）是由蒼白螺旋體（Treponema Pallidum TP）感染引起的一種慢性性傳播疾病，本病表現(xiàn)復(fù)雜、病期長(zhǎng)，幾乎可侵犯全身各個(gè)器官，發(fā)展過(guò)程時(shí)隱時(shí)現(xiàn)，癥狀和體征呈多樣化，自然感染過(guò)程（不治療）可產(chǎn)生不同臨床癥狀的一期、二期、三期梅毒。第二張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM病原體梅毒螺旋體特點(diǎn)1.小而細(xì)螺旋狀，長(zhǎng)614um,直徑0.250.3um.有814規(guī)則、緊密螺旋。2.透明不容

2、易著色.3.微需氧（13）,人工培養(yǎng)不生長(zhǎng)。4.繁殖方式為裂殖.5. 對(duì)熱敏感，驟冷超低溫保存數(shù)年，復(fù)活后接種動(dòng)物其毒性、活力、形態(tài)不變。第三張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM致病機(jī)理梅毒螺旋體破損皮膚及粘膜感染 24周潛伏感染局部螺旋體大量繁殖硬下疳 經(jīng)38周 癥狀自行消失 TP附近淋巴結(jié) 血液播散 全身組織和器官 二期梅毒 三期梅毒 心血管、神經(jīng)等損害。第四張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM傳播途徑 性傳播：性接觸是主要的傳染途徑未經(jīng)治療的患者在感染后的1年內(nèi)最具有傳染性。隨著病期的

3、延長(zhǎng)，傳染性越來(lái)越小。到感染后4年，通過(guò)性接觸一般無(wú)傳染性。第五張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM傳播途徑 垂直傳播：胎傳在妊娠任何階段，梅毒螺旋體均可通過(guò)胎盤(pán)傳染。病期越長(zhǎng)，傳染性越小。早期梅毒的母親，發(fā)生流產(chǎn)、死產(chǎn)、胎兒先天梅毒或新生兒死亡率高于晚期梅毒的母親。第六張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM傳播途徑間接傳播：污染物、輸血。第七張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM各期梅毒標(biāo)本采集及檢查方法 臨床癥狀 取材部位 檢查方法一期梅毒

4、 硬下疳、淋巴結(jié) 暗視野檢查 血液 血清學(xué)檢查二期梅毒 皮損、淋巴結(jié) 暗視野檢查 血液 血清學(xué)檢查隱性梅毒 血液 血清學(xué)檢查三期梅毒 血液 血清學(xué)檢查神經(jīng)梅毒 血液、腦脊液 血清學(xué)檢查第八張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷方法梅毒病原體檢查血清學(xué)檢查暗視野檢查法鍍銀染色法直接免疫熒光法確證試驗(yàn): FTA-ABS、TPHA、TPPA、TP-ELISA、 TP-RT 19S-IgM初篩試驗(yàn)：VDRL、USRRPR、TRUST第九張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷方

5、法病原體（梅毒螺旋體）檢查： 一、暗視野檢查 二、直接熒光抗體檢查 三、涂片染色檢查法：鍍銀染色、吉姆薩染色、墨汁負(fù)染色。第十張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM病原體檢查法 一、暗視野檢查法 原理一期梅毒硬下疳、腫大淋巴結(jié)的淋巴液。二期梅毒皮膚粘膜損害、扁平疣、梅毒疹。梅毒孕婦羊水(7周) 以上標(biāo)本均有梅毒螺旋體存在，此時(shí)用暗視野顯微鏡檢查能找到梅毒螺旋體。第十一張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM病原體檢查法 檢查方法1、皮損取材：在載玻片加一滴生理鹽水，用棉拭子蘸取無(wú)菌生理鹽水抹去皮損

6、（硬下疳、潰瘍、梅毒疹、扁平疣）表面污物，擠壓皮損周?chē)?，用鈍刀刮取組織液混入載玻片鹽水中，加蓋玻片后暗視野鏡檢。2、腫大淋巴結(jié)取材：酒精消毒淋巴結(jié)表面，用1ml無(wú)菌注射器配12號(hào)針頭，吸取無(wú)菌生理鹽水0.25-0.5ml,無(wú)菌操作穿刺淋巴結(jié)并注入鹽水，再吸入注射器內(nèi)，如此反復(fù)2-3次，取少量淋巴液于載玻片上，加蓋玻片后暗視野鏡檢。第十二張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM病原體檢查法3、羊膜穿刺：梅毒孕婦的羊膜穿刺由專(zhuān)職人員操作，將取得的羊水直接滴于載玻片上加蓋玻片暗視野鏡檢。第十三張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31

7、WWW.ZHCCDC.COM病原體檢查法 結(jié)果 暗視野鏡檢可觀察到特征性的梅毒螺旋體。螺旋整齊，數(shù)目固定（814）。白色透明折光性強(qiáng)。特征性運(yùn)動(dòng)方式：旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)、伸縮移行、彎曲前行。第十四張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM暗視野顯微鏡法直接鏡檢圖像（1000）第十五張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM病原體檢查法 臨床意義 、暗視野檢查可作為梅毒診斷的確證試驗(yàn)，若發(fā)現(xiàn)有梅毒螺旋體，即可確診為梅毒感染。 、此法特別適用于血清學(xué)試驗(yàn)陰性的早期梅毒診斷，尤其對(duì)早期有硬下疳，但梅毒血清反應(yīng)尚未呈陽(yáng)性

8、者意義更大。 3、暗視野檢查是目前快速診斷先天性梅毒可靠的檢查方法。第十六張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM病原體檢查法注意事項(xiàng) 1、取材前，要清潔皮損表面的污物。 2、應(yīng)多取組織液提高陽(yáng)性率，但要盡量避免出血。 3、取材后立即觀察，以免影響活力 4、注意梅毒螺旋體的特征及運(yùn)動(dòng)方式，以鑒別其它螺旋體。 5、口腔中存在其他螺旋體，不推薦用于口腔皮損檢查。第十七張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM病原體檢查法 6、陰性結(jié)果不能排除梅毒，應(yīng)稍后復(fù)查或做 血清學(xué)檢查。 原因可能是： 螺旋體數(shù)量不足

9、 已用過(guò)抗生素或某些外用藥 損害接近自然消退第十八張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM病原體檢查法二.直接免疫熒光試驗(yàn)（DFA） TP-Ag （標(biāo)本） TPMcAb-FITC37 x30分TPAg-Ab-FITC 洗滌封片熒光鏡檢萊果綠色梅毒螺旋體第十九張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM直接免疫熒光法鏡檢圖像（1000）第二十張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM病原體檢查法方法學(xué)評(píng)價(jià)：DFA法特異性及敏感性均大于暗視野顯微鏡 檢測(cè)。可區(qū)分

10、梅毒螺旋體與非致病性螺旋體，可適 用于口、肛周等部位的損害?？梢蛉〔摹晒馑?、抗體質(zhì)量及操作技術(shù)等 因素而致假陰性。第二十一張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM病原體檢查法三.鍍銀染色法標(biāo)本涂片（TP）自然干燥固定、媒染 洗滌銀氨液染色封片鏡檢可見(jiàn)棕褐色梅毒螺旋體第二十二張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM病原體檢查法 觀察有無(wú)染成棕褐色的梅毒螺旋體。染色陽(yáng)性，又有典型皮損可確診。染色陰性，不能完全排除梅毒。某些腐生螺旋體可導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。第二十三張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2

11、011.8.31WWW.ZHCCDC.COM病原體檢查法常見(jiàn)病原體檢查方法比較方法 評(píng)價(jià)暗視野檢查特異性高，可作梅毒確證試驗(yàn)，需較高技術(shù)及暗視野顯微鏡。DFA可區(qū)分梅毒螺旋體和非梅毒螺旋 體，對(duì)試劑要求較高，需熒光顯微鏡。鍍銀染色法染色技術(shù)要求較高，銀氨液配制非常關(guān)鍵，標(biāo)本可長(zhǎng)期保存。第二十四張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒血清學(xué)試驗(yàn) 根據(jù)抗體的特性和反應(yīng)性質(zhì)梅毒血清學(xué)試驗(yàn)分為： 非梅毒螺旋體血清試驗(yàn)(初篩試驗(yàn)) 梅毒螺旋體血清試驗(yàn)(確證試驗(yàn))第二十五張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.C

12、OM梅毒血清學(xué)試驗(yàn)-非梅毒螺旋體血清試驗(yàn)抗原：心磷脂、卵磷脂、膽固醇混合物。 方法有： 性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(VDRL) 加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)( USR) 不加熱血清反應(yīng)素環(huán)狀卡片實(shí)驗(yàn)( RPR) 甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(TRUST)第二十六張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒血清學(xué)試驗(yàn)-梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)抗原：梅毒螺旋體 目前常用方法有： 1.梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)(TPHA ) 2.梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA ) 3.熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS） 4.梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（TP-ELISA） 5.

13、梅毒螺旋體快速診斷試驗(yàn)（TP-RT）其他方法: 梅毒螺旋體19S-IgM抗體測(cè)定試驗(yàn) 梅毒螺旋體抗體試驗(yàn)（化學(xué)發(fā)光法） 第二十七張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM非梅毒螺旋體血清試驗(yàn)-TRUST原理 VDRL-甲苯胺紅Ab（血清） 紅色凝集物（肉眼觀察） 方法 定性 定量血清 原血清 1：2 1：4 1：8 50 50 50 50抗原 1滴 1滴 1滴 1滴(1618ul) 混勻，旋轉(zhuǎn)式搖床（100轉(zhuǎn)分）轉(zhuǎn)動(dòng)分鐘，立 即觀察結(jié)果。第二十八張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM非梅毒螺旋體血清

14、試驗(yàn)-TRUST結(jié)果 定性試驗(yàn) 陽(yáng)性：出現(xiàn)由小至大的紅色絮狀物（14）。 陰性：顆粒均勻、細(xì)小、不出現(xiàn)凝集。 定量試驗(yàn) 以出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)的最高稀釋度作為最終滴度。第二十九張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COMTRUST凝集圖像第三十張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM非梅毒螺旋體血清試驗(yàn)-TRUST臨床意義 1.非特異性反應(yīng)的初篩試驗(yàn)，可用作療效觀察、判愈、復(fù)發(fā)或再感染指征。 2.初篩試驗(yàn)陽(yáng)性可表示： 現(xiàn)癥感染患者 接受治療近期患者 生物學(xué)假陽(yáng)性者第三十一張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6

15、月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM非梅毒螺旋體血清試驗(yàn)-TRUST注意事項(xiàng) 1.試劑保存 ，不能以下冰凍。 2.實(shí)驗(yàn)環(huán)境以2329 為宜，用前試劑恢復(fù)室 溫。 3.試劑在效期內(nèi)使用，懷疑試劑失效，需用試 劑陰、陽(yáng)對(duì)照及已知陰、陽(yáng)標(biāo)本對(duì)照。 4.用旋轉(zhuǎn)式搖床，不能用平衡式振蕩儀。 5.試驗(yàn)要用純血清，以防假陰性。 6.血清加抗原后要充分混勻分開(kāi)。第三十二張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM非梅毒螺旋體血清試驗(yàn)-TRUST 7.試驗(yàn)完畢立即觀察結(jié)果，否則影響結(jié)果準(zhǔn)確性。 8.定性陽(yáng)性者，確診治療前應(yīng)作定量試驗(yàn)，一是可以了解患者抗體滴

16、度，便于復(fù)查作比較，以判斷療效和預(yù)后觀察；二可以避免“前帶現(xiàn)象”。 9.初篩試驗(yàn)陽(yáng)性，應(yīng)做確證試驗(yàn)以排除生物學(xué)假陽(yáng)性。 10.AIDS合并感染梅毒，梅毒血清可陰性，應(yīng)作暗視野檢查螺旋體，同時(shí)做HIV檢查。第三十三張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒螺旋體血清試驗(yàn)-TPPA一、TPPA(梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)) 原理 TP-Ag（明膠顆粒）Ab（血清） 洋紅 色凝集（肉眼觀察）第三十四張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒螺旋體血清試驗(yàn)-TPPA方法 定性、定量試驗(yàn)孔號(hào) 1 2 3 4

17、5 6 7 8 血清稀釋液 100 25 25 25 25 25 25 25 血清標(biāo)本 25 25 25 25 25 25 25 25 25標(biāo)本稀釋度 1:5 1:10 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640非致敏顆粒 25致敏顆粒 25 25 25 25 25最終滴度 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280輕輕振蕩混勻，置濕盒內(nèi)室溫（1530 ）小時(shí)后觀察結(jié)果。第三十五張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒螺旋體血清試驗(yàn)-TPPA結(jié)果 定性試驗(yàn)2+4+：顆粒凝集覆蓋整個(gè)孔底，邊緣粗糙

18、 呈膜狀。1+：顆粒凝集呈多邊性粗糙大環(huán)狀。+/-：顆粒濃集于孔底呈小環(huán)狀：顆粒聚集于孔中央，邊緣光滑呈小紅點(diǎn)。 定量試驗(yàn) 出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)的最高稀釋度作為最終滴度第三十六張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒螺旋體血清試驗(yàn)-TPPA第三十七張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒螺旋體血清試驗(yàn)-TPPA臨床意義 1. 確證試驗(yàn)陽(yáng)性可診斷梅毒感染，一種是現(xiàn)癥感染者，另一種是治愈者。2.由于特異性梅毒螺旋體抗體可終生陽(yáng)性，因此不能用來(lái)作為療效觀察及治愈的判斷標(biāo)準(zhǔn)。一般只作定性試驗(yàn)，根據(jù)臨床需要才

19、做定量試驗(yàn)。第三十八張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒螺旋體血清試驗(yàn)-TPPA注意事項(xiàng)1.反應(yīng)板要清潔干凈，遐免假陽(yáng)性。2.要用U形板不能用V形板，遐免假陰性。3.試劑保存 ，不能以下冰凍。4.反應(yīng)溫度以1830 為宜，用前試劑恢復(fù)至室溫。5.試劑要在有效期內(nèi)使用，不同批號(hào)不要混用。6.血清要分純，不能混有血液有形成分。第三十九張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒螺旋體血清試驗(yàn)-TPPA 7.如未致敏顆粒出現(xiàn)凝集，應(yīng)做吸收試驗(yàn)或 改用其它方法。 8.對(duì)于可疑陽(yáng)性結(jié)果（1：80），建

20、議作連 續(xù)觀察或暗視野檢查。 9. AIDS合并感染梅毒，血清學(xué)試驗(yàn)可陰 性，應(yīng)作暗視野檢查螺旋體。第四十張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒螺旋體血清試驗(yàn)-TPPA方法學(xué)評(píng)價(jià)：優(yōu)點(diǎn)： 1、試劑穩(wěn)定，批間差小 2、結(jié)果判讀清晰明確 3、敏感性和特異性較TPHA進(jìn)一步提高不足：結(jié)果判定主觀，較難實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。第四十一張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒螺旋體血清試驗(yàn)- FTA-ABS二、熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS)TP-AgTP-Ab（滅活吸收后血清）37 x30分鐘TP

21、-Ag-AbPBS洗滌TP-Ag-Ab+IgG-FITC37 x30分鐘TP-Ag-Ab-IgG-FITCPBS洗滌、封片、熒光鏡檢萊果綠色熒光第四十二張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COMFTA-ABS IgG抗體陽(yáng)性（400）第四十三張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COMFTA-ABS IgM抗體陽(yáng)性（400）第四十四張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒螺旋體血清試驗(yàn)- FTA-ABS方法學(xué)評(píng)價(jià)： FTA-ABS是所有螺旋體試驗(yàn)中最敏感

22、的方法，特異性也很高，被認(rèn)為是檢測(cè)梅毒的“金標(biāo)準(zhǔn)”，且該試驗(yàn)可分開(kāi)檢測(cè)IgM和IgG。但由于該試驗(yàn)需有優(yōu)質(zhì)的熒光顯微鏡和技術(shù)熟練的操作人員才能得到準(zhǔn)確的結(jié)果，故常不被臨床實(shí)驗(yàn)室作為常規(guī)方法開(kāi)展。第四十五張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒螺旋體血清試驗(yàn)TP- IgM三、梅毒IgM抗體血清學(xué)檢測(cè)臨床應(yīng)用 梅毒螺旋體感染人體， 機(jī)體體液免疫系統(tǒng)最早產(chǎn)生的抗梅毒螺旋體特異性抗體是IgM ，然后才是IgG。IgM抗體滴度水平經(jīng)治療下降較快并可轉(zhuǎn)陰性。一期梅毒3 個(gè)月陰轉(zhuǎn)率100，二期梅毒9個(gè)月陰轉(zhuǎn)率100，早期潛伏期梅毒2年陰轉(zhuǎn)率100。第四十六

23、張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒螺旋體血清試驗(yàn)TP- IgM 因此，未經(jīng)治療患者IgM抗體陽(yáng)性可能是活動(dòng)性梅毒的表現(xiàn)。另外，由于IgM聚合體分子量較大，是IgG的5倍，不能通過(guò)某些屏障，因此對(duì)某些疑難病例的診斷具有重要意義。IgM檢測(cè)主要應(yīng)用于以下方面。第四十七張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒螺旋體血清試驗(yàn)TP- IgM先天性梅毒的診斷：IgM不能通過(guò)胎盤(pán)屏 障，新生兒血清中IgM陽(yáng)性，說(shuō)明懷孕期間 胎兒已被母體梅毒螺旋體感染而產(chǎn)生IgM抗 體。早期梅毒診斷：IgM產(chǎn)生最早，

24、理論上當(dāng)其 它血清試驗(yàn)陰性時(shí)初篩試驗(yàn)、確證試驗(yàn) （IgG），可早期檢測(cè)出IgM抗體。晚期梅毒診斷：由于不規(guī)則治療或不治療而 致的晚期梅毒病人，IgM檢測(cè)陽(yáng)性。第四十八張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒螺旋體血清試驗(yàn)TP- IgM活動(dòng)性神經(jīng)梅毒診斷： IgM抗體不能通過(guò)血 腦屏障，神經(jīng)性梅毒活動(dòng)期時(shí)，病人腦脊液 中存在IgM抗體，檢測(cè)可陽(yáng)性。梅毒螺旋體再感染：再次感染梅毒螺旋體， IgM抗體重新出現(xiàn)，檢測(cè)呈陽(yáng)性。第四十九張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒螺旋體血清試驗(yàn)TP- IgM

25、 IgM檢測(cè)方法：FTA-ABS吸收法FTA-ABS分離法IgM捕獲ELISAIgM固相血球吸附法免疫印跡法第五十張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒螺旋體血清試驗(yàn)TP- IgM免疫印跡法原理 梅毒螺旋體抗原提取物用凝膠電泳分離并印跡在硝酸纖維薄膜上，印跡測(cè)試條的抗原與被檢血清中特異性抗梅毒螺旋體IgM（陽(yáng)性血清）結(jié)合，其復(fù)合物再與抗人IgM酶標(biāo)記物結(jié)合，經(jīng)底物顯色后在印跡測(cè)試條上獲得肉眼可見(jiàn)的色帶。第五十一張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒螺旋體血清試驗(yàn)TP- IgM【材料】1

26、TPIgM試劑盒 印跡測(cè)試條 緩沖液（10） 酶標(biāo)抗體（10X） 底物:直接使用 結(jié)果參照標(biāo)準(zhǔn)條 孵育反應(yīng)槽2搖擺式搖床第五十二張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒螺旋體血清試驗(yàn)TP- IgM 【方法】1測(cè)試條處理：將恢復(fù)室溫的測(cè)試條放入孵育反 應(yīng)槽中，每槽1條，加入2.0ml緩沖液，置搖擺式 搖床室溫?fù)u擺5分鐘,加入20ul待檢樣本，置水平 搖床（50轉(zhuǎn)/分鐘）反應(yīng)45分鐘。2洗滌：棄去槽中液體，每槽加2.0ml緩沖液，置 搖床搖擺洗滌5分鐘，共3次。3酶標(biāo)抗體孵育：吸去槽中緩沖液，每槽加入 2.0ml稀釋?zhuān)?：9）酶標(biāo)抗體應(yīng)用液，室溫

27、搖擺 孵育30分鐘。第五十三張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM4洗滌：重復(fù)操作2。5顯色：吸去槽中緩沖液，每槽加入2.0ml底物液，室溫?fù)u擺孵育8-10分鐘。6終止反應(yīng)：吸去槽中液體，用去離子水或蒸餾水洗滌3 次。7觀察結(jié)果，將反應(yīng)完畢的測(cè)試條小心用濾紙吸干，用塑料膜膠面貼于結(jié)果表上，將測(cè)試條與提供的標(biāo)準(zhǔn)條比較判斷結(jié)果。第五十四張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM梅毒螺旋體血清試驗(yàn)TP- IgM【結(jié)果判讀】 1.陽(yáng)性:45KD、17KD及15.5KD帶區(qū)均出現(xiàn)顯色帶。2.陰性:45KD、1

28、7KD及15.5KD帶區(qū)均未出現(xiàn)顯色帶。3.可疑:當(dāng)45KD、17KD及15.5KD中只有一個(gè)或兩個(gè)條帶出現(xiàn),需用其他試驗(yàn)方法復(fù)檢。第五十五張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM【注意事項(xiàng)】1.整個(gè)反應(yīng)過(guò)程要使用搖擺式搖床，以使反應(yīng)完全。2.洗滌要充分，可減少非特異性反應(yīng)，以及避免底色過(guò)深影響結(jié)果觀察。3.中止反應(yīng)洗滌次數(shù)和時(shí)間視具體情況而定，應(yīng)以反應(yīng)色帶與測(cè)試條底色對(duì)比清晰為好。4.試驗(yàn)完畢，立即觀察結(jié)果。第五十六張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM先天性梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷暗視野、初篩試驗(yàn)、確

29、證試驗(yàn)的方法均可 用，目前比較推薦使用19-SIgM診斷先天性 梅毒。先天性梅毒診斷確立可根據(jù)下列四個(gè)指標(biāo)之 一： 暗視野查到梅毒螺旋體 非梅毒螺旋體抗體滴度持續(xù)上升 非梅毒螺旋體抗體滴度高于母親 梅毒IgM抗體陽(yáng)性第五十七張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM神經(jīng)性梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷方法 近些年來(lái)，隨著梅毒發(fā)病率的逐年上升，神經(jīng)梅毒屢有報(bào)道。有報(bào)道13的一期梅毒和2540的二期梅毒患者CSF發(fā)現(xiàn)異常；在未經(jīng)治療的晚期梅毒患者中，神經(jīng)梅毒發(fā)病率可達(dá)9.530。神經(jīng)梅毒的診斷除了臨床癥狀外，主要依據(jù)是實(shí)驗(yàn)室診斷。目前神經(jīng)梅毒的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)主要對(duì)患者的腦脊

30、液（CSF）進(jìn)行相關(guān)梅毒感染指標(biāo)檢測(cè)，包括VDRL、TP-IgM、FTA-ABS、TP-IgG檢測(cè)相對(duì)指數(shù)測(cè)定、TP-PCR 等。第五十八張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM神經(jīng)性梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷方法一、CSF- VDRL VDRL試驗(yàn)對(duì)神經(jīng)性梅毒是特異的，是目前神經(jīng)性梅毒診斷常用方法， CSFVDRL陽(yáng)性的特異性較高（90.6%），美國(guó)CDC2006年指南推薦神經(jīng)梅毒的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)。但報(bào)道敏感性為3078，陰性時(shí)不能排除神經(jīng)梅毒。第五十九張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM神經(jīng)性梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷方

31、法腦脊液（CSF） 檢查結(jié)果 VDRL TPPA/FTA-ABS神經(jīng)性梅毒 + +非神經(jīng)性梅毒 - -/+ 第六十張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM神經(jīng)性梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷方法二、CSF-TP IgM IgM不能通過(guò)血腦屏障，如果CSF中檢測(cè)到TP-IgM抗體，有助于神經(jīng)梅毒的診斷，并可視為活動(dòng)性神經(jīng)梅毒，需要進(jìn)行臨床治療。CSF-TP-IgM方法特異性可達(dá)100%，敏感性較VDRL試驗(yàn)高。第六十一張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM神經(jīng)性梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷方法三、CSF- FTA-ABS CSF

32、熒光TP抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS）：首先吸收CSF中的非特異性TP抗體后，用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)特異性TP抗體，是檢測(cè)TP最特異敏感的方法。由于TP的IgG抗體可以穿過(guò)血腦屏障，故CSF-FTA-ABS可作為神經(jīng)梅毒排除的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)，即檢測(cè)陰性時(shí)可排除TP在CSF中的感染。第六十二張，PPT共六十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2011.8.31WWW.ZHCCDC.COM神經(jīng)性梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷方法四、CSF-TPIgG相對(duì)指數(shù)測(cè)定（ELISA） CSF中TP-IgG相對(duì)指數(shù)測(cè)定（CSF-ELISA）：IgG可以通過(guò)血腦屏障，單一檢測(cè)CSF中TP-IgG不能作為神經(jīng)梅毒診斷的依據(jù)。約75-80%活動(dòng)性神經(jīng)梅毒患者，其CSF中IgG合成率增加，IgG指數(shù)升高，TP特異IgG指