維生素類藥物分析

1、關(guān)于維生素類藥物的分析第一張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月維生素： 是維持人體正常代謝機(jī)能所必需的微量營養(yǎng)物質(zhì)。人體不能合成維生素。第二張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 VitA、D2、D3、 E、K1 等 脂溶性水溶性 VitB族(B1、B2、B6、B12) VitC、葉酸、煙酸、泛酸分類：第三張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月-H 維生素A醇-COCH3 維生素A醋酸酯-COC15H31 維生素A棕櫚酸酯R :第一節(jié) 維生素A的分析全反式第四張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月維生素A 325.5 100% 全反式新維生素Aa 328 75% 2順新維生素

2、Ab 320.5 24% 4順新維生素Ac 310.5 15% 2，4順異維生素Aa 323 21% 6順異維生素Ab 324 24% 2，6順 相對生物效價(jià)順反異構(gòu)（一）結(jié)構(gòu)：具有共軛多烯側(cè)鏈的環(huán)己烯一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)第五張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月VitA2VitA3共軛多烯側(cè)鏈易發(fā)生脫氫、脫水、聚合反應(yīng)鯨醇第六張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月環(huán)氧化物VitA醛VitA酸第七張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月CHCl3（二）性質(zhì)1.溶解性：易溶于有機(jī)溶劑和植物油等，不溶于水2.不穩(wěn)定性3.紫外吸收特性4.與三氯化銻呈色第八張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6

3、月（一）三氯化銻反應(yīng)條件： 無水、無醇CHCl3二、鑒別試驗(yàn)SbCl3水SbOCl乙醇可使碳正離子的正電荷消失第九張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月藍(lán)色紫紅第十張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月BP（2008）max為326nm一個(gè)吸收峰UV法（二）max為350390nm三個(gè)吸收峰第十一張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月去水VitA（VitA3）VitA第十二張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第十三張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月USP 顯色劑 磷鉬酸 規(guī)定斑點(diǎn)顏色和Rf值BP 對照品法 顯色劑 三氯化銻TLC法（三）第十四張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作

4、于2022年6月立體異構(gòu)體氧化產(chǎn)物及光照產(chǎn)物合成中間體去氫維生素A（ VitA2）去水維生素A（ VitA3）UV法（三點(diǎn)校正法）（一）含量測定三、第十五張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月三點(diǎn)校正法1. 前提條件：（1）雜質(zhì)的吸收在310340nm波長范圍內(nèi)呈一條直線，且隨波長的增大吸收度減?。唬?）物質(zhì)對光的吸收具有加和性。第十六張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月測定對象：VitA醋酸酯第一法 等波長差法第二法 等吸收比法(皂化法)測定對象：VitA醇2. 波長的選擇：（1） 1 VitA的max（如VitA酯 328nm）（2） 2 3 分別在1的兩側(cè)各選一點(diǎn)第十七張，PP

5、T共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第十八張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第二步：求3、測定法（1）基本步驟: 第一步：A選擇，A328測定或A328校正第三步 求效價(jià)第十九張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第四步：求標(biāo)示量A*D*換算因數(shù)*WW*100*標(biāo)示量100第二十張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月?lián)Q算因數(shù)：單位E 數(shù)值所相當(dāng)?shù)男r(jià)數(shù)（由純品計(jì)算而得）第二十一張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十二張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十三張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 判斷 是否在326329nm之間改用第二法是否 求算 并與規(guī)定

6、值比較1、 維生素A醋酸酯-第一法（等波長差法）A值的選擇：第二十四張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 規(guī)定值 差值 判斷差值是否超過第二十五張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月03%15%3%第二法第二法 計(jì)算 A328（校正） 用A328計(jì)算有超過0.02無超過f第二十六張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 VitAD膠丸中VitA的含量測定 精密稱取本品(規(guī)格10000VitAIU/丸)裝量差異項(xiàng)下（平均裝量0.08262g/丸）的內(nèi)容物 0.2399g 至250ml量瓶中，用環(huán)己烷稀釋至刻度，搖勻；精密量取2.0ml，置另一20 ml量瓶中，用環(huán)己烷稀釋至刻度，搖勻

7、。以環(huán)己烷為空白，測定最大吸收波長為328nm，并在下列波長處測得吸收度為A300 ：0.354A316 ：0.561A328 ：0.628A340 ：0.523A360 ：0.216A300 /A328 ：0.555A316/A328 ：0.907A328/A328 ：1.000A340/A328 ：0.811A360/A328 ：0.299 求本品中維生素A的含量？第二十七張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月A300 /A328 ：0.564A316/A328 ：0.893A328/A328 ：1.000A340/A328 ：0.833A360/A328 ：0.344 0.555 0

8、.907 1.000 0.811 0.299 + 0.010.01 0 + 0.02 + 0.04 =第二十八張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十九張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月水溶性脂溶性2、維生素A醇-等吸收比法（皂化法、6/7A法 第三十張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 判斷max是否在323327nm之間取未皂化樣品采用色譜法純化后再測定 計(jì)算是否0.730.73第三十一張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月03%3%f第三十二張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）高效液相色譜法色譜柱：硅膠；流動相：正己烷-異丙醇（997：3）檢測波長：

9、325nm流 速: 1.2ml/min內(nèi) 標(biāo)：VA醋酸酯第三十三張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月三氯化銻比色法（三）優(yōu)點(diǎn)： 簡便 快速max 618nm620nm缺點(diǎn)：呈色不穩(wěn)定 （5 10s內(nèi)）水分干擾與標(biāo)準(zhǔn)曲線溫差1專屬性差三氯化銻有腐蝕性標(biāo)準(zhǔn)曲線法第三十四張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月氨基嘧啶環(huán)CH2噻唑環(huán)(季銨鹽)第二節(jié) 維生素B1的分析HClCl-一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）結(jié)構(gòu)第三十五張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月1. 溶解性：易溶于水，水溶液呈酸性。3. UV共軛雙鍵max = 246nm二、性質(zhì)2. 硫色素反應(yīng)4. 與生物堿沉淀試劑反應(yīng)5.氯化物的特性

10、第三十六張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月專屬性反應(yīng)二、鑒別試驗(yàn)（一）硫色素?zé)晒夥磻?yīng)第三十七張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十八張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月硫色素，藍(lán)色熒光2H第三十九張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月VitB1H+H+H+H+（二）沉淀反應(yīng)第四十張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月S元素反應(yīng)（三）其他反應(yīng)H+Cl-第四十一張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月三、含量測定冰醋酸+醋酐，電位法指示終點(diǎn)（一）非水溶液滴定法第四十二張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月UV法（二）= 421A = ECL片劑、注射劑第四十三

11、張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月NaOH（三）硫色素?zé)晒夥ㄔ?.第四十四張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月+ NaOH + 鐵氰化鉀 + 異丁醇+ NaOH + 異丁醇+ NaOH + 鐵氰化鉀 + 異丁醇+ NaOH + 異丁醇SdAb對照液供試液dSbAC樣-=C標(biāo)特點(diǎn)3、（1）靈敏度高，線性范圍寬（2）專屬性強(qiáng)，氧化產(chǎn)物及代謝產(chǎn)物不干擾，可用于制劑分析，體液分析等。第四十五張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第三節(jié) 維生素C的分析L抗壞血酸結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、（一）結(jié)構(gòu)二烯醇內(nèi)酯兩個(gè)手性碳（C4,C5）第四十六張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）性質(zhì)1.

12、溶解性：易溶于水水溶液呈酸性2. 酸性：一元酸，C3OH的pKa = 4.17，C2OH的pKa = 11.573. 旋光性：手性C（C4、C5）4. 還原性5. 水解反應(yīng)：6. 具糖的性質(zhì)：具糖類的性質(zhì)與反應(yīng)7. UV特征*第四十七張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月有活性有活性無活性二烯醇結(jié)構(gòu)-還原反應(yīng)第四十八張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月利用還原性：與氧化劑的反應(yīng)鑒別試驗(yàn)二、第四十九張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（一）與AgNO3反應(yīng)（二）與2，6 - 二氯靛酚反應(yīng)氧化型還原型第五十張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月與堿性酒石酸銅反應(yīng)USP與KMnO

13、4反應(yīng)（三）與其他氧化劑反應(yīng)四、薄層色譜法: Rf值第五十一張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（藍(lán)色）50(吡咯)（五）糖類的反應(yīng)第五十二張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月BP0.01mol/L HCl（六）UV第五十三張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月三、雜質(zhì)檢查（一）溶液的澄清度與顏色檢查（二）鐵、銅離子的檢查維生素C原料藥 片 劑 注射劑維生素C原料藥糠醛縮合呈色原子吸收法（三）草酸的檢查：氯化鈣第五十四張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月指示劑 淀粉（一）碘量法四、含量測定原理：利用Vc強(qiáng)的還原性H+第五十五張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 取本

14、品約0.2g，精密稱定，加新沸過的冷水100ml與稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液顯藍(lán)色，在30秒內(nèi)不褪。每1ml碘滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于8.806mg的C6H8O6。2、方法原料藥第五十六張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（2）酸性環(huán)境 稀醋酸 （1）新沸冷H2O減慢VitC被O2氧化速度（3）立即滴定 趕走水中O2減少O2的干擾3、討論第五十七張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月4. 附加劑干擾的排除片劑 過濾注射劑 抗氧劑 丙酮甲醛Na2SO3 NaHSO3 Na2S2O3 Na2S2O5 第五十八張，P

15、PT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月CHHOOaS3aSO+H2NHON2252HONHCOS3a第五十九張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月(二) 2，6 - 二氯靛酚滴定法1、原理2、方法自身指示終點(diǎn)法第六十張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（2）快速滴定 2min內(nèi) （1）酸性環(huán)境 HPO3-HAc 穩(wěn)定VitC防止其他還原性物質(zhì)干擾（3）亦可剩余比色測定 （定量過量）（測剩余染料）3、討論第六十一張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（4）缺點(diǎn) 需經(jīng)常標(biāo)定貯存一周不穩(wěn)定專屬性強(qiáng)，多用于含 Vc的制劑和食品的分析（5）優(yōu)點(diǎn)第六十二張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6

16、月（三）高效液相色譜法血漿中維生素C的測定(穩(wěn)定性） 標(biāo)準(zhǔn)溶液包括樣品預(yù)處理過程均需加入偏磷酸，偏磷酸同時(shí)可用于血樣中的蛋白沉淀；當(dāng)天取血當(dāng)天測定；處理好的樣品亦需冰箱保存第六十三張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第四節(jié) 維生素D的分析一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）結(jié)構(gòu)維生素 D2(麥角骨化醇) 維生素D3(膽骨化醇) 第六十四張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月1.性狀：無色針狀結(jié)晶或白色結(jié)晶性粉末；無臭，無味。2.溶解性：宜溶于有機(jī)溶劑，在植物油中略溶，在水中不溶。3.不穩(wěn)定性：含有多個(gè)烯鍵，所以極不穩(wěn)定，宜氧化變質(zhì)，效價(jià)降低，毒性增強(qiáng)。（二）性質(zhì)第六十五張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2

17、022年6月4旋光性 維生素D2 6個(gè)手性碳原子 維生素D3 5個(gè)手性碳原子5顯色反應(yīng)：甾類化合物氯仿溶液 黃色 紅色 紫色 綠色6紫外吸收特性：無水乙醇 265nm 醋酐硫酸第六十六張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月二、鑒別試驗(yàn) （一）顯色反應(yīng)1與醋酐-濃硫酸反應(yīng) 氯仿溶液 黃色 紅色 紫色 綠色醋酐硫酸2與三氯化銻反應(yīng) 本品1,2-二氯乙烷 三氯化銻試液 橙紅色 粉紅色 第六十七張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月3其它顯色反應(yīng) 維生素D 三氯化鐵 橙黃色 二氯丙醇 乙酰氯 綠色 （二）比旋度鑒別無水乙醇溶液 維生素D2 比旋度為102.5至107.5 維生素D3 比旋度為1

18、05至112 第六十八張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）其它鑒別方法 薄層色譜法、HPLC法制備衍生物測熔點(diǎn) 紫外、紅外吸收光譜 （四）維生素D2、D3的區(qū)別反應(yīng)維生素D2 維生素D3 96%乙醇 10ml 取0.1ml 乙醇1ml和85%硫酸5ml 紅色max570nm 黃色 max495nm 第六十九張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月三、雜質(zhì)檢查（一）麥角甾醇的檢查維生素D290%乙醇溶液 洋地黃皂苷溶液 不得發(fā)生渾濁或沉淀 第七十張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）前維生素D的光照產(chǎn)物第七十一張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月四、含量測定正相高效

19、液相色譜法 （一）維生素D測定法 含量以單位表示每單位相當(dāng)于維生素D 0.025g 注意：計(jì)算的是維生素D及前維生素D經(jīng)折 算成維生素D的總量第七十二張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月測定在半暗室及避免氧化的情況下進(jìn)行第一法：無干擾雜質(zhì)第二法：有VA及其他雜質(zhì)干擾第三法：用第二法時(shí)，前 VD峰受雜質(zhì)干擾 僅VD峰可分離第七十三張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 第一法內(nèi)標(biāo)物：鄰苯二甲酸二甲酯色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：填充劑：硅膠流動相：正己烷-正戊醇（997：3）檢測波長：254nm無干擾雜質(zhì)第七十四張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月維生素D3光照前維生素D3反式維生素

20、D3維生素D3速甾醇D3與維生素D3的比保 留 時(shí) 間分離度1.01.0溶液組成先后進(jìn)樣5次，維生素D3 峰面積的 RSD2.0 % 0.50.61.01.1系統(tǒng)適用性試驗(yàn)第七十五張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月校正因子測定：維生素D的校正因子: f1=Asmi/Aims前維生素D折算成維生素D的校正因子:f2=（Asmr-f1msAr1）/（Ar2ms）含量測定：計(jì)算維生素D及前維生素D折算成 維生素D的總量mi=（f1Ai1+f2Ai2）ms/As第七十六張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第二法第一步：皂化提取供試品OH-加熱回流冷卻乙醚提取乙醚提取液揮干乙醚殘?jiān)状既芙?/p>

21、供試溶液A有VA及其他雜質(zhì)干擾第七十七張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第二步：分離收集供試品溶液ARP-HPLC維生素D前維生素D維生素A及其他雜質(zhì)疊峰分離收集供試品溶液B維生素D及前維生素D第三步：按第一法進(jìn)行含量測定（內(nèi)標(biāo)法）揮干內(nèi)標(biāo)的正己烷溶液溶解第七十八張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第三法第一步：皂化提取同第二法得供試品溶液A第二步：供試品溶液ARP-HPLC維生素D前維生素D維生素A及其他雜質(zhì)疊峰分離供試品溶液C收集揮干異辛烷溶解90、1.5h揮干正己烷溶解前維生素D維生素D第三步：用第一法色譜條件按外標(biāo)法計(jì)算含量用第二法時(shí)，前 VD峰受雜質(zhì)干擾第七十九張，PP

22、T共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月苯并二氫吡喃醇第五節(jié) 維生素E的分析 一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）結(jié)構(gòu)第八十張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月名 稱R1R2相對活性-生育酚-生育酚-生育酚-生育酚CH3CH3HHCH3HCH3H1.00.50.20.1*第八十一張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月生物效價(jià) 右旋體 ： 消旋體 = 1.4 ：10dl生育酚醋酸酯第八十二張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）性質(zhì)1、溶解性：易溶于有機(jī)溶劑，不溶于水4、UV2、水解性：酯鍵易水解3、氧化性第八十三張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月7515（一）硝酸反應(yīng)橙紅色二、鑒別試驗(yàn)第八

23、十四張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（橙紅色）生育紅生育酚HNO3強(qiáng)氧化劑第八十五張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月三氯化鐵聯(lián)吡啶反應(yīng)O（二）第八十六張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月生育酚對-生育醌紅色Fe3+O第八十七張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月max = 284nmmin = 254nm0.01%無水乙醇中UV法（三）第八十八張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月薄層板 硅膠G展開劑 環(huán)己烷 -乙醚（4 ：1）顯色劑 硫酸（105 5） TLC法（四）（五）其他鑒別方法 紅外、氣相色譜法第八十九張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）生育酚 三、雜質(zhì)檢查 1. 原理：游離生育酚還原性，硫酸鈰滴定2. 試劑：硫酸鈰滴定液（0.01mol/L） 指示劑：二苯胺（亮黃灰紫）（一）酸度：游離醋酸第九十張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月四、含量測定GC法（一）GC特點(diǎn)1、選擇性好靈敏度高速度快分離效能好揮發(fā)性低、不穩(wěn)定、極性強(qiáng)衍生化。易受樣品蒸氣壓限制第九十一張，PPT共九十八頁，創(chuàng)作于2022年6月固定液硅酮（OV-17）擔(dān)體硅藻土或高分子多孔小球柱溫265檢測器氫火焰離子化檢測器(FID)內(nèi)標(biāo)正三