化妝品祛斑美白功效測(cè)試方法2021

1、 化妝品祛斑美白功效測(cè)試方法Test Method for Efficacy Measurement ofSkin Whitening Cosmetic Products第一法 紫外線誘導(dǎo)人體皮膚黑化模型祛斑美白功效測(cè)試法1范圍本方法規(guī)定了通過(guò)紫外線誘導(dǎo)人體皮膚黑化模型對(duì)化妝品祛斑美白功效的測(cè)試方法。2定義最小紅斑量(Minimal erythema dose , MED ):引 起皮膚清晰可見(jiàn)的紅斑，其范圍達(dá)到照射點(diǎn)大部分區(qū)域所需 要的紫外線照射最低劑量(j/m2 )或最短時(shí)間(s )。個(gè)體類型角(individual type angle , ITA ):通過(guò)皮 膚色度計(jì)或反射分光光度計(jì)測(cè)

2、量皮膚顏色空間數(shù)據(jù)來(lái)表征人體皮膚顏色的參數(shù)，計(jì)算公式如下:IT A = arctan(L -50) 180b* )兀黑素指數(shù)(melanin index , MI ):通過(guò)測(cè)定皮膚表面 對(duì)特定波長(zhǎng)光譜的吸收來(lái)表征皮膚中黑素含量的參數(shù)。3試驗(yàn)方法受試者的選擇按入選和排除標(biāo)準(zhǔn)選擇合格的受試者，確保各測(cè)試區(qū)最 終完成有效例數(shù)均不低于30人。入選標(biāo)準(zhǔn)1860歲，健康男性或女性；測(cè)試部位膚色I(xiàn)TA。值在20。41。者;無(wú)過(guò)敏性疾病，無(wú)化妝品或其它外用制劑過(guò)敏 史；既往無(wú)光感性疾病史，近期內(nèi)未使用影響光感 性的藥物；受試部位的皮膚應(yīng)無(wú)色素沉著、炎癥、瘢痕、色素痣、多毛等現(xiàn)象；能夠接受測(cè)試區(qū)域皮膚使用人工光

3、源進(jìn)行曬黑 者；能理解測(cè)試過(guò)程，自愿參加試驗(yàn)并簽署書(shū)面知情同意書(shū)者。排除標(biāo)準(zhǔn)妊娠或哺乳期婦女，或近期有備孕計(jì)劃者；有銀屑病、濕疹、異位性皮炎、嚴(yán)重座瘡等皮 膚病史者；近1個(gè)月內(nèi)口服或外用過(guò)皮質(zhì)類固醇激素等抗 炎藥物者；近2個(gè)月內(nèi)口服或外用過(guò)任何影響皮膚顏色的 產(chǎn)品或藥物（如氫醍類制劑）者；近3個(gè)月內(nèi)參加過(guò)同類試驗(yàn)或3個(gè)月前參加過(guò) 同類試驗(yàn)，但試驗(yàn)部位皮膚黑化印跡沒(méi)有完全褪去者；近2個(gè)月內(nèi)參加過(guò)其他臨床試驗(yàn)者；其他臨床評(píng)估認(rèn)為不適合參加試驗(yàn)者。受試物試驗(yàn)產(chǎn)品：祛斑美白化妝品。陽(yáng)性對(duì)照：黑化區(qū)空白對(duì)照。陽(yáng)性對(duì)照：按附錄I配方配制的7%抗壞血酸（維 生素C ）制品（4c冷藏、鋁管避光保存卜受試物涂抹

4、由工作人員按照隨機(jī)表對(duì)應(yīng)測(cè)試區(qū)進(jìn)行受試物的涂抹, 涂樣面積應(yīng)不小于6cm2 ,涂樣量為2.000.05mg/cm2o每個(gè) 測(cè)試區(qū)之間的間隔應(yīng)不小于l.Ocmo產(chǎn)品使用頻率應(yīng)根據(jù)產(chǎn) 品使用說(shuō)明，如需每天多次涂抹，每次涂抹間隔時(shí)間不小于 4小時(shí)。試驗(yàn)部位：優(yōu)先選擇背部作為試驗(yàn)部位，也可選擇 大腿、上臂等非曝光部位。每個(gè)黑化測(cè)試區(qū)面積應(yīng)不小于 0.5cm2 ,并應(yīng)位于每個(gè)涂樣區(qū)域內(nèi)。試驗(yàn)儀器日光模擬儀：采用具有連續(xù)性光譜輻射、能夠產(chǎn) 生UVA+UVB波長(zhǎng)紫外線的宛弧燈日光模擬儀。290nm以下 的波長(zhǎng)應(yīng)用適當(dāng)?shù)倪^(guò)濾系統(tǒng)去除，輸出波譜需經(jīng)過(guò)計(jì)量檢定 或校準(zhǔn)。皮膚色度儀：具有可以測(cè)量國(guó)際照明委員會(huì)（CI

5、E ） 制定的顏色空間數(shù)據(jù)的儀器。皮膚黑素檢測(cè)儀：具有基于光譜吸收的原理檢測(cè) 皮膚MI值的儀器。環(huán)境條件試驗(yàn)過(guò)程中視覺(jué)評(píng)估、儀器測(cè)試環(huán)節(jié)都應(yīng)在溫度為21士 1.相對(duì)濕度為5010% RH的環(huán)境下進(jìn)行，視覺(jué)評(píng)估還應(yīng) 在恒定光照（色溫55006500K的日光燈管或LED光照）條 件下進(jìn)行，受試者需在此環(huán)境條件下適應(yīng)至少30分鐘后方 可進(jìn)行評(píng)估和測(cè)試。試驗(yàn)流程按照要求招募入組志愿受試者，簽署書(shū)面知情同 意書(shū)。入組前根據(jù)入選和排除標(biāo)準(zhǔn)等詢問(wèn)受試者一系列關(guān)于 疾病史、健康狀況等問(wèn)題，同時(shí)對(duì)受試部位皮膚進(jìn)行符合性 評(píng)估和膚色測(cè)試篩選，并記錄。合格受試者進(jìn)入建立人體皮膚黑化模型階段。首 先應(yīng)確定每位受試者試

6、驗(yàn)部位的MEDo然后在試驗(yàn)部位選 定各測(cè)試區(qū)，用日光模擬儀在相同照射點(diǎn)按0.75倍MED劑 量每天照射1次，連續(xù)照射4天。照射結(jié)束后的4天為皮膚黑化期不作任何處理。照射結(jié)束后第5天，對(duì)各測(cè)試區(qū)皮膚顏色進(jìn)行視 覺(jué)評(píng)估和膚色儀器檢測(cè)，應(yīng)剔除一致性差的測(cè)試區(qū)（ITA。值 與全部測(cè)試區(qū)均值相差大于5的區(qū)域卜當(dāng)天開(kāi)始在各黑化 測(cè)試區(qū)根據(jù)隨機(jī)表涂抹相應(yīng)受試物。連續(xù)涂抹受試物至少4周，在涂抹后1周、2周、3周和4周應(yīng)對(duì)皮膚顏色進(jìn)行視覺(jué)評(píng)估和儀器檢測(cè)，并記錄。3.6,5.1視覺(jué)評(píng)估由皮膚科醫(yī)生借助由淺至深膚色的色卡對(duì)各測(cè)試區(qū)膚 色進(jìn)行分別評(píng)估，并及時(shí)記錄評(píng)分。皮膚色度儀測(cè)量在各個(gè)訪視時(shí)點(diǎn)，用皮膚色度儀分別測(cè)量

7、各測(cè)試區(qū)域的L a b*值，每個(gè)區(qū)域測(cè)試三次，記錄并計(jì)算ITA。值， ITA。值越大，膚色越淺，反之膚色越深。皮膚黑素檢測(cè)儀測(cè)量在各訪視時(shí)點(diǎn)，用皮膚黑素檢測(cè)儀分別測(cè)量各測(cè)試區(qū)域 的MI值，每個(gè)測(cè)試區(qū)測(cè)試三次，并記錄；MI值越小，表示 皮膚黑素含量越低，反之皮膚黑素含量越高。數(shù)據(jù)分析應(yīng)用統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料表示 為：均值土標(biāo)準(zhǔn)差，并進(jìn)行正態(tài)分布檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布要 求，自身前后的比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，否則采用兩個(gè)相關(guān)樣 本秩和檢驗(yàn)；等級(jí)資料使用前后的比較，采用兩個(gè)相關(guān)樣本 秩和檢驗(yàn)；測(cè)試區(qū)和對(duì)照區(qū)之間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)或 秩和檢驗(yàn)；同時(shí)，計(jì)算各參數(shù)隨時(shí)間變化的回歸系數(shù)（斜率

8、 Z值），顯著性水平均為P0.05o試驗(yàn)結(jié)論試驗(yàn)產(chǎn)品涂抹前后任一時(shí)間點(diǎn)膚色視覺(jué)評(píng)分差值或ITA 差值與陽(yáng)性對(duì)照相比有顯著改善(P0.05 )，或經(jīng)回歸系數(shù)分 析整體判斷試驗(yàn)產(chǎn)品與陰性對(duì)照相比皮膚黑化顯著改善時(shí) (PvO.05 ),則認(rèn)定試驗(yàn)產(chǎn)品具有祛斑美白功效性，否則認(rèn)為 試驗(yàn)產(chǎn)品無(wú)祛斑美白功效。4檢驗(yàn)報(bào)告檢驗(yàn)報(bào)告應(yīng)包括下列內(nèi)容：樣品編號(hào)、名稱、生產(chǎn)批號(hào)、 生產(chǎn)及送檢單位、樣品物態(tài)描述以及檢驗(yàn)起止時(shí)間等，檢驗(yàn) 項(xiàng)目、材料和方法、檢驗(yàn)結(jié)果、結(jié)論。檢驗(yàn)報(bào)告應(yīng)有授權(quán)簽 字人簽字，歸檔報(bào)告應(yīng)有檢驗(yàn)人、校核人和授權(quán)簽字人分別 簽字，均需加蓋試驗(yàn)機(jī)構(gòu)檢驗(yàn)檢測(cè)專用章或公章。其中檢驗(yàn) 結(jié)果以表格形式給出，如下

9、表12 :表1試驗(yàn)產(chǎn)品及對(duì)照檢測(cè)結(jié)果 表1試驗(yàn)產(chǎn)品及對(duì)照檢測(cè)結(jié)果 # 使用后受試物受試者 姓名 性編號(hào) （首字母）別使用前 1周2周3周4周ITA MI ITA MI ITA MI ITA MI ITA MI01020304 TOC o 1-5 h z ,05試06驗(yàn)07產(chǎn)08品0910平均值比標(biāo)準(zhǔn)差SD01020304陰06 TOC o 1-5 h z 性07對(duì)08照0910平均值又標(biāo)準(zhǔn)差SD01020304 TOC o 1-5 h z 陽(yáng)0506性07對(duì)08照0910平均值又 標(biāo)準(zhǔn)差SD注：計(jì)量資料數(shù)據(jù)結(jié)果表 表2試驗(yàn)產(chǎn)品及對(duì)照檢測(cè)結(jié)果 使用后受試物受試者編號(hào)（溫）,使用前 1周2周3周4

10、周視覺(jué)膚色等級(jí)視覺(jué)膚色等級(jí)視覺(jué)膚色等級(jí)視覺(jué)膚色等級(jí)視覺(jué)膚色等級(jí)01020304試 驗(yàn) 產(chǎn) 品050607080910最小值Min中位數(shù)Median最大值Max0102030405陰06性07對(duì)08照091()最小值Min中位數(shù)Median最大值Max0102030405陽(yáng)06性07對(duì)08照091()最小值Min中位數(shù)Median最大值Max注：等級(jí)資料數(shù)據(jù)結(jié)果表附錄I 7%抗壞血酸（維生素C）陽(yáng)性對(duì)照物的制備方法.在紫外線誘導(dǎo)人體皮膚黑化模型祛斑美白功效試驗(yàn)中，應(yīng)同時(shí)測(cè)定按表3配方制備的陽(yáng)性對(duì)照物，作為試驗(yàn)質(zhì)量控制參考。.陽(yáng)性對(duì)照為7%抗壞血酸（維生素C ）制品。.陽(yáng)性對(duì)照物的配方和制備方法見(jiàn)

11、下表3 ：表3 7%抗壞血酸（維生素C）的制備成分重量比A相：水(water)8.65甘油(glycerin)23.00Al丙二醉(propylene glycol)6.00羥苯甲酯(methylparaben)0.20DETA 二鈉(disodium EDTA)0.05水(water)13.93A2抗壞血酸（維生素C） （ascorbic acid）7.00氫氧化鉀(potassium hydroxide)4.07B相：PEG/PPG-18/18 聚二甲基硅氧烷(PEG/PPG-18/18on ondimethicone)zu.uuB1聚二甲基硅氧烷/乙烯基聚二甲基硅氧烷交聯(lián)聚合物(dime

12、thicone (and) dimethicone/vinyl dimethicon5.00crosspolymer)苯基聚三甲基硅氧烷（phenyl trimethicone）4.00B2杏仁油(pnmus armeniaca(appicot) kernel oil )3.00羥基丙酯(propylparaben)0.10C相：錦綸-12 (nylon-12)5.00注：L制備方法：將Al和B2分別加熱至6570。C ,直至完全溶解，然后冷卻至室溫；再將A2加入到A1中，攪拌均勻（混合物pH值需在6.0左右）；將B1加入到B2中，室溫下 以20002500rpm的轉(zhuǎn)速攪拌5分鐘進(jìn)行均質(zhì)。A、

13、B相分別均質(zhì)好后，以30004000rpm將 A相加入到B相中，再以8000rpm攪拌5分鐘進(jìn)行乳化。乳化完成后，室溫條件下加入C 相，然后以8000-1 OOOOrpm攪拌10分鐘進(jìn)行均質(zhì)，完成。.將配制物分裝到鋁管中，4。C保存，保質(zhì)期為6個(gè)月。.本配方制備物僅限于試驗(yàn)用途，不能用作商業(yè)目的。第二法 人體開(kāi)放使用祛斑美白功效測(cè)試法1范圍本方法規(guī)定了對(duì)化妝品祛斑美白功效的人體開(kāi)放使用 試驗(yàn)的測(cè)試方法。2定義個(gè)體類型角(individual type angle , ITA ):通過(guò)皮 膚色度計(jì)或反射分光光度計(jì)測(cè)量皮膚顏色空間數(shù)據(jù)來(lái)表征人體皮膚顏色的參數(shù)，計(jì)算公式如下:ITA = arctan

14、(L -50) 180b* )兀黑素指數(shù)(melanin index , MI ):通過(guò)測(cè)定皮膚表面 對(duì)特定波長(zhǎng)光譜的吸收來(lái)表征皮膚中黑素含量的參數(shù)。3試驗(yàn)方法受試者的選擇按受試者入選和排除標(biāo)準(zhǔn)選擇合格的受試者，并按隨機(jī)表分為試驗(yàn)組和對(duì)照組，在受試部位左右兩側(cè)色斑對(duì)稱的情 況下，可分為試驗(yàn)產(chǎn)品側(cè)和對(duì)照產(chǎn)品側(cè)，確保最終完成有效 例數(shù)不少于30人/組（側(cè)）。入選標(biāo)準(zhǔn)1860歲,健康女性或男性;受試部位至少有一個(gè)和周圍鄰近皮膚的ITA。差 值大于10。的明顯色斑，且直徑不小于3mm （不能是臨床上 使用外用制劑難以改善的雀斑、色素痣等）；無(wú)過(guò)敏性疾病，無(wú)化妝品及其它外用制劑過(guò)敏 史；既往無(wú)光感性疾病

15、史，近期內(nèi)未使用影響光感 性的藥物；受試部位皮膚應(yīng)無(wú)胎記、炎癥、瘢痕、多毛等 現(xiàn)象；能夠理解試驗(yàn)過(guò)程，自愿參加試驗(yàn)并簽署書(shū)面 知情同意書(shū)者。排除標(biāo)準(zhǔn)妊娠或哺乳期婦女，或近期有備孕計(jì)劃者；患有銀屑病、濕疹、異位性皮炎、嚴(yán)重座瘡等 皮膚病史者；或患有其他慢性系統(tǒng)性疾病者；近1個(gè)月內(nèi)口服或外用過(guò)皮質(zhì)類固醇激素等抗 炎藥物者；近2個(gè)月內(nèi)使用過(guò)果酸、水楊酸等任何影響皮 膚顏色的產(chǎn)品或藥物（如氫醍類制劑）者；近3個(gè)月內(nèi)試驗(yàn)部位使用過(guò)維A酸類制劑或進(jìn) 行過(guò)化學(xué)剝脫、激光、脈沖光等醫(yī)美治療者；不可避免長(zhǎng)時(shí)間日光暴露者；近2月內(nèi)參加過(guò)其他臨床試驗(yàn)者；其他臨床評(píng)估認(rèn)為不適合參加試驗(yàn)者。受試者限制在試驗(yàn)期間受試部位

16、必須使用試驗(yàn)機(jī)構(gòu)提供的 試驗(yàn)產(chǎn)品或?qū)φ债a(chǎn)品，不能使用其他任何具有祛斑美白功效或者可能對(duì)測(cè)試結(jié)果產(chǎn)生影響的產(chǎn)品;在試驗(yàn)期間不能有暴曬情況，并應(yīng)做好試驗(yàn)部 位的防曬工作。受試物試驗(yàn)產(chǎn)品：祛斑美白化妝品。對(duì)照產(chǎn)品：不含祛斑美白功效成分的相應(yīng)試驗(yàn)產(chǎn) 品基質(zhì)配方產(chǎn)品，與試驗(yàn)產(chǎn)品平行測(cè)試。使用方法：由工作人員按照隨機(jī)表發(fā)放試驗(yàn)產(chǎn)品 和對(duì)照產(chǎn)品，并根據(jù)使用說(shuō)明對(duì)受試者進(jìn)行使用指導(dǎo)，確保 受試者正確、連續(xù)使用產(chǎn)品8周；受試部位左右隨機(jī)分側(cè)使 用兩組產(chǎn)品時(shí)，需采用能夠確保受試者正確區(qū)分和使用兩側(cè) 試驗(yàn)產(chǎn)品和對(duì)照產(chǎn)品的監(jiān)控措施（如在試驗(yàn)機(jī)構(gòu)工作人員的 指導(dǎo)、監(jiān)督下使用等），并在試驗(yàn)報(bào)告中說(shuō)明產(chǎn)品使用的監(jiān) 控方式。

17、要求受試者記錄使用時(shí)間及使用過(guò)程中的任何不適 感和不良反應(yīng)癥狀。試驗(yàn)部位：根據(jù)產(chǎn)品使用說(shuō)明確定需要使用祛斑美 白化妝品的試驗(yàn)部位（如面部卜儀器設(shè)備皮膚色度儀：具有可以測(cè)量國(guó)際照明委員會(huì)（CIE ） 制定的顏色空間數(shù)據(jù)的儀器。皮膚黑素檢測(cè)儀：具有基于光譜吸收的原理檢測(cè) 皮膚MI值的儀器。標(biāo)準(zhǔn)圖像拍攝設(shè)備：能夠拍攝正面、左側(cè)和右側(cè) 面部或其它受試部位圖像，具有可見(jiàn)光/偏振光濾鏡的拍攝系 統(tǒng)。環(huán)境條件試驗(yàn)結(jié)果觀察應(yīng)在溫度為211.相對(duì)濕度為5010% RH的恒定環(huán)境下進(jìn)行，視覺(jué)評(píng)估還應(yīng)在恒定光照條件（色 溫55006500K的日光燈管或LED光照）下進(jìn)行，并且所有 受試者應(yīng)在此環(huán)境條件下適應(yīng)至少30

18、分鐘后方可進(jìn)行評(píng)估 和測(cè)試。試驗(yàn)流程按照要求招募入組志愿受試者，簽署書(shū)面知情同 意書(shū)。入組前根據(jù)入選和排除標(biāo)準(zhǔn)等詢問(wèn)受試者一系列關(guān)于 疾病史、健康狀況等問(wèn)題，同時(shí)對(duì)試驗(yàn)部位色斑等皮膚狀況 進(jìn)行符合性評(píng)估和膚色測(cè)試篩選，并記錄。對(duì)入組的合格受試者進(jìn)行產(chǎn)品使用前皮膚基礎(chǔ) 值評(píng)估和測(cè)試，包括視覺(jué)評(píng)估、儀器測(cè)試和標(biāo)準(zhǔn)圖像拍攝， 并記錄；產(chǎn)品使用后2周、4周、8周再次進(jìn)行相同的評(píng)估 和測(cè)試。視覺(jué)評(píng)估在各訪視時(shí)點(diǎn)，由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的皮膚科醫(yī)生借助由淺至深 膚色的色卡對(duì)試驗(yàn)部位色斑區(qū)進(jìn)行膚色評(píng)估，并記錄評(píng)分。皮膚色度以測(cè)量在各訪視時(shí)點(diǎn)，用皮膚色度儀分別測(cè)量試驗(yàn)組（根1| ）及 對(duì)照組（側(cè)）試驗(yàn)部位色斑區(qū)皮膚的*、

19、/ 數(shù)值， 每個(gè)測(cè)試區(qū)測(cè)試三次 記錄并計(jì)算ITA。值。測(cè)試皮膚區(qū)域ITA。值越大，膚色越淺，反之越深。皮膚黑素檢測(cè)儀測(cè)量在各訪視時(shí)點(diǎn)，用皮膚黑素測(cè)試儀分別測(cè)量試驗(yàn)組（側(cè)） 及對(duì)照組（側(cè)）試驗(yàn)部位色斑區(qū)皮膚的MI值，每個(gè)測(cè)試區(qū) 測(cè)試三次，并記錄；測(cè)試區(qū)MI值越小，膚色越淺，反之越深。圖像攝取和分析在各訪視時(shí)點(diǎn)，采用皮膚圖像拍攝系統(tǒng)拍攝標(biāo)準(zhǔn)圖像。用圖像分析軟件分析受試部位不同訪視時(shí)點(diǎn)相關(guān)參數(shù)（色斑 光密度均值、色斑面積占比），并記錄；受試部位圖像色斑 光密度均值越小，膚色越淺。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)應(yīng)用統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料表示 為：均值土標(biāo)準(zhǔn)差，并進(jìn)行正態(tài)分布檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布要 求，自身前后的比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，否則采用兩個(gè)相關(guān)樣 本秩和檢驗(yàn)；等級(jí)資料使用前后的比較，采用兩個(gè)相關(guān)樣本 秩和檢驗(yàn)；試驗(yàn)產(chǎn)品和對(duì)照組之間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn) 或秩和檢驗(yàn)。上述統(tǒng)計(jì)分析均為雙尾檢驗(yàn)，顯著性水平為 a=0.05。試驗(yàn)結(jié)論試驗(yàn)組（側(cè)）使用產(chǎn)品前后任一訪視時(shí)點(diǎn)視覺(jué)評(píng)估、儀 器測(cè)試或圖像分析相關(guān)參數(shù)中任一參數(shù)的變化結(jié)果相差顯 著（P0.05 ）,或使用樣品后測(cè)試值結(jié)果顯著優(yōu)于對(duì)照緞側(cè)） 結(jié)果時(shí)（PvO.05 ），則認(rèn)定試驗(yàn)產(chǎn)品有祛斑美白功效，否則認(rèn) 為試驗(yàn)產(chǎn)品無(wú)祛斑美白功效。4檢驗(yàn)報(bào)告檢驗(yàn)報(bào)告應(yīng)包括下列內(nèi)容：樣品編