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文檔簡介

1、鹽析法沉淀蛋白質(zhì)的原理是什么在溶液中加入中性鹽使生物大分子沉淀析出的過程稱為“鹽析”。除了蛋白質(zhì)和酶以外，多肽、多糖和核酸等都可以用鹽析法進(jìn)行沉淀分離。鹽析法應(yīng)用最廣的還是在蛋白質(zhì)領(lǐng)域，已有八十多年的歷史，其突出的優(yōu)點(diǎn)是：成本低，不需要特別昂貴的設(shè)備。操作簡單、安全。對(duì)許多生物活性物質(zhì)具有穩(wěn)定作用。蛋白質(zhì)和酶均易溶于水，因?yàn)樵摲肿拥?COOH、-NH2和-OH都是親水基團(tuán)，這些基團(tuán)與極性水分子相互作用形成水化層，包圍于蛋白質(zhì)分子周圍形成1nm100nm顆粒的親水膠體，削弱了蛋白質(zhì)分子之間的作用力，蛋白質(zhì)分子表面極性基團(tuán)越多，水化層越厚，蛋白質(zhì)分子與溶劑分子之間的親和力越大，因而溶解度也越大。親

2、水膠體在水中的穩(wěn)定因素有兩個(gè)：即電荷和水膜。因?yàn)橹行喳}的親水性大于蛋白質(zhì)和酶分子的親水性，所以加入大量中性鹽后，奪走了水分子，破壞了水膜，暴露出疏水區(qū)域，同時(shí)又中和了電荷，破壞了親水膠體，蛋白質(zhì)分子即形成沉淀。通過鹽析沉淀蛋白質(zhì)的原理實(shí)際上是降低蛋白質(zhì)的溶解度，從而使蛋白質(zhì)聚集并最終從溶液中沉淀出來。蛋白質(zhì)的沉淀實(shí)際上是蛋白質(zhì)分子聚集而從溶液中沉淀出來的現(xiàn)象。一般來說，檢查是對(duì)富含蛋白質(zhì)的物質(zhì)進(jìn)行的。如果在實(shí)驗(yàn)過程中需要分離和提取步驟，則需要有效去除大量干擾測(cè)定的蛋白質(zhì)沉淀，以使所測(cè)毒物完整保留在溶液中，因此需要鹽析以沉淀出蛋白。蛋白質(zhì)沉淀法實(shí)際上是在實(shí)驗(yàn)室分析有二毒物質(zhì)過程中對(duì)生物樣品進(jìn)行預(yù)處理的相對(duì)通用和常用的方法。鹽析法沉淀蛋白質(zhì)的原理是：由于向蛋白質(zhì)溶液中加入了大量的鹽，如硫酸銨、氯化鈉等，因此使得蛋白質(zhì)表面的電荷被中和，破壞了其表面的水化膜，于是達(dá)到蛋白質(zhì)沉淀的效果。蛋白質(zhì)的基本單位是氨基酸，氨基酸脫水縮合后連成肽鏈，而蛋白質(zhì)就是由一條或多條多肽鏈組成的生物大分子。其分子表面多為親水基團(tuán)，可吸引水分子使其表面形成一層水化膜，抑

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