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文檔簡介
1、實驗五 植物染色體組型分析一、實驗?zāi)康?掌握染色體組型分析的各種數(shù)據(jù)指標(biāo) 掌握植物染色體核型分析的標(biāo)準(zhǔn)和方法。1二、實驗原理核型或染色體組型分析 (karyotype analysis) 是染色體研究中對染色體的各種特征進(jìn)行定量和定性表述的一種基本方法, 表述的內(nèi)容主要有: 染色體數(shù)目和染色體形態(tài) , 包括染色基數(shù)、B-染色體,性染色體,染色體絕對長度, 相對長度值, 著絲粒, 次縊痕以及隨體數(shù)目和著絲粒位置等特征。 這些對研究植物系統(tǒng)演化, 物種之間的親緣關(guān)系、起源、進(jìn)化與分類, 遠(yuǎn)緣雜交及遺傳工程中的染色體鑒別都有重要意義。核型模式圖是指將一個染色體組的全部染色體逐個按其特征繪制下來,再按
2、長短、形態(tài)等特征排列起來的圖像。2三、實驗材料1.供核型分析的細(xì)胞必須具備下列標(biāo)準(zhǔn) : 染色體處于細(xì)胞分裂中期 染色體數(shù)目齊全 , 而且分散良好 , 沒有重疊 各染色體鋪展平整, 染色體各組成部分顯示清楚, 著色均勻。2.實驗用品 毫米尺、剪刀、膠水、計算器 染色體放大照片3四 .實驗方法染色體數(shù)目確定染色體形態(tài)特征: 長度:絕對、相對 相對長度=每條染色體的長度/全套染色體長度 臂比=長臂/短臂 著絲點指數(shù)=短臂/(長+短臂) 隨體的有無4分組排隊原則著絲粒類型相同,相對長度相近的分一組同一組的按染色體長短順序配對排列各指數(shù)相同的染色體配為一對可根據(jù)隨體的有無進(jìn)行配對將染色體按長 短排隊,短
3、臂向上5五.實驗步驟 1 計數(shù): 沿邊緣剪下染色體,編號 2 測量:(有隨體的染色體在表內(nèi)以星號“*”標(biāo)記) 表1 核型分析參數(shù)表(草表)63. 配對:根據(jù)所測數(shù)據(jù)結(jié)合目測,按次縊痕的有無和位置、隨體的形態(tài)和大小、臂比值、染色體長度和形態(tài)相似將同源染色體配對;4 .排列: 染色體長的在前,等長的染色體以短臂長的在前;5 .剪貼 : 著絲粒處于同一水平線上,短臂在上,長臂在下;6 .計算 每對同源染色體絕對長度每對同源染色體相對長度= 100% 染色體總長度 e 染色體長臂臂比 = 染色體短臂 最長染色體長度染色體長度比= 最短染色體長度7翠菊的核型分析染色體長度:大小89著絲粒位置 : 以上述
4、臂比值確定。 臂比值 著絲粒位置 簡寫 1.00 正中部著絲粒 (median point) M 1.01-1.70 中部著絲粒 (median point) m 1.71-3.00 近中部著絲粒 (submedian region ) sm 3.01-7.00 近端部著絲粒 (subterIIlialregion ) st 7.01 以上 端部著絲粒 (terminal point) t 頂端著絲粒 (terminal point) T 107. 表格 : 核型分析中各項測量的平均數(shù)值應(yīng)列表 , 列表內(nèi)容力求簡明和實用 , 其格式項目如下 : 表 2 染色體相對長度、臂比和類型 序號 相對長
5、度 % 著絲粒指數(shù) 臂比 類型 (短臂+長臂=總長度) 1 2 3 4 5 6 ( 注 ) 列表時在具隨體染色體的順序號上標(biāo)上“*”號。118. 繪制核型模式圖 (idiogram): 以表2中所列各染色體的相對長度平均值繪制。9. 核型公式 : 即綜合核型分析的結(jié)果 , 將一種生物核型書寫成一公式, 它簡明扼要 , 便于記憶和比較 , 如玉米核型為 :2n = 20=12m+6sm + 2m(SAT) 。 SAT 代表具隨體染色體。1210. 核型分類 : 表 4.2 按對稱到不對稱的核型分類 臂比大于2:1的染色體的百分比最長/最短 0-0 0.01-0.50 0.51-0.99 1.0 4
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