實(shí)驗(yàn)一薄層色譜和紙色譜教學(xué)課件

1、實(shí)驗(yàn)一 紙色譜和薄層色譜實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)色譜法的原理掌握使用薄層色譜和紙色譜對(duì)化合物進(jìn)行分離和鑒定色譜法的一般原理利用混合物各組分在固定相和流動(dòng)相中的分配平衡常數(shù)的差異進(jìn)行分離。當(dāng)帶有樣品的流動(dòng)相流經(jīng)固定相時(shí)，由于固定相對(duì)各組分的吸附或溶解性能的不同，使吸附力較弱獲溶解度較小的組分在固定相中移動(dòng)速度較快，經(jīng)過(guò)多次反復(fù)平衡，將混合物中各組分分離。薄層色譜薄層色譜：薄層色譜（Thin Layer Chromatography），常用TLC表示，是一種微量，快速和簡(jiǎn)便的色譜方法。一般是將固定相，如硅膠和三氧化鋁，負(fù)載在一張薄層板上，將樣品置于固定相之后，流動(dòng)相通過(guò)毛細(xì)管效應(yīng)從下往上流動(dòng)而使樣品分開(kāi)。TL

2、C是有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)室中使用的非常多實(shí)驗(yàn)操作，常常用來(lái)檢測(cè)反應(yīng)和柱色譜前判斷使用展開(kāi)劑的極性。薄層色譜實(shí)驗(yàn)藥品和儀器藥品： 偶氮苯，蘇丹紅，混合物（自配），環(huán)己烷/乙酸乙酯 9:1儀器：TLC板，毛細(xì)管，廣口瓶，鉛筆0.5cm0.5 cm1. 準(zhǔn)備TLC板2. 展開(kāi)展開(kāi)劑：環(huán)己烷/乙酸乙酯 9:13. 干燥、顯色 自身有顏色有共軛體系的使用紫外燈 各種顯色劑4. 計(jì)算Rf值Rf = D1/D25. 分析結(jié)果通過(guò)比較Rf值，確定混合物中各組分分別是什么物質(zhì)紙色譜紙色譜（Paper Chromatography）：紙色譜法是以紙作為載體的色譜法。按分離原理屬于分配色譜法的范疇。固定相一般為濾紙纖維上吸

3、附的水分，流動(dòng)相(展開(kāi)劑)為有機(jī)溶劑。由于濾紙纖維的毛細(xì)管現(xiàn)象，溶劑在含水的濾紙上緩慢上升，流動(dòng)相各組分在濾紙上受兩相溶劑的影響，產(chǎn)生分配現(xiàn)象，親脂性強(qiáng)的流動(dòng)相中分配的多，移動(dòng)速度快。紙色譜實(shí)驗(yàn)藥品和儀器藥品：甘氨酸，亮氨酸，混合物（自配），展開(kāi)劑（水/正丁醇/醋酸 5:4:1，取上層液體）儀器：濾紙，大試管，帶鉤塞子，鉛筆實(shí)驗(yàn)操作類(lèi)似于TLC展開(kāi)裝置圖 兩張色譜濾紙，分別點(diǎn)上甘氨酸， 混合物，以及亮氨酸，混合物 使用茚三酮乙醇溶液進(jìn)行顯色 通過(guò)比較Rf值確定混合物中各 組分。注意事項(xiàng)1、制板和活化：鋪板厚度0.25-1mm且均勻；晾干；一塊 一塊鋪；活化時(shí)烘箱要從低溫開(kāi)始2、點(diǎn)樣：畫(huà)線時(shí)不能將板劃破；點(diǎn)樣斑點(diǎn)直徑小于2mm， 斑間距1-1.5cm，標(biāo)準(zhǔn)左樣品右；點(diǎn)樣結(jié)束干燥后再 進(jìn)行下一步3、展開(kāi)：展開(kāi)劑用9：1的環(huán)己烷和乙酸乙酯混合溶劑， 一般原則：根據(jù)樣品的極性、溶解度和吸附劑的活性等 因素考慮。溶劑的極性越大對(duì)樣品的洗脫力越強(qiáng)。4、顯色：照原樣畫(huà)出斑點(diǎn)形狀5、要求在原始記錄中畫(huà)出板的真實(shí)展開(kāi)情況并計(jì)算Rf值人有了知識(shí)，就會(huì)具備各種分析能力，明辨是非的能力。所以我們要勤懇讀書(shū)，廣泛閱讀，古人說(shuō)“書(shū)中自有黃金屋?！蓖ㄟ^(guò)閱讀科技書(shū)籍，我們能豐富知識(shí)，培養(yǎng)邏輯思維能力；通過(guò)閱讀文學(xué)作品，我們能提高文學(xué)鑒賞水平，培養(yǎng)文學(xué)情