草魚魚蛋白水解工藝的研究

1、草魚魚蛋白水解工藝的研究 1雖然已有文獻報道遲緩愛德華氏菌具有抵抗血清殺菌作用，但其分子機制尚不清楚。為此，將同等菌量的遲緩愛德華氏菌與不同體積的魚血漿孵育，獲取全菌蛋白，進行基于等電聚焦雙向電泳的蛋白質組學分析，發(fā)現(xiàn)YihK和GpmA為顯著上調的差異蛋白。這些發(fā)現(xiàn)有助于闡明病原菌對魚血漿反應的分子機制。 根據(jù)中國金槍魚漁業(yè)觀察員項目于2006年211月在東太平洋水域作業(yè)的中國金槍魚延繩釣漁船上收集的數(shù)據(jù)，本研究對大眼金槍魚攝食強度的時空變動進行了分析。結果表明，小個體大眼金槍魚的攝食強度較大個體大眼金槍魚高，叉長小于140cm的大眼金槍魚攝食強度相對較大。34月的攝食強度較小，511月的攝食

2、強度相對較大。3月空胃率相對較高，511月，大眼金槍魚空胃率均低于15%。200350m水層中的大眼金槍魚攝食活動非常活躍。各月份和不同叉長組大眼金槍魚攝食強度均存在顯著性差異，且不同水層大眼金槍魚攝食強度也存在顯著性差異。本試驗比較研究了黃顙魚和青梢紅鲌在形態(tài)學參數(shù)、營養(yǎng)組成和A/E比值等方面的差異。結果表明，黃顙魚的臟體比、肝體比、腸脂比和性腺成熟系數(shù)顯著高于青梢紅鲌（P 0.05）。黃顙魚全魚、肌肉、卵巢中脂肪含量顯著高于青梢紅鲌（P 0.05），而全魚和卵巢中蛋白質含量顯著高于青梢紅鲌（P 0.05）。這兩種魚肌肉和卵巢中脂肪酸組成也存在顯著差異（P 0.05）。黃顙魚與青梢紅鲌全魚和

3、肌肉中的氨基酸組成相似。然而，這兩種魚卵巢中氨基酸組成存在顯著差異（P岱衢洋自交子代正交子代官井洋自交子代。Gad-1座位對應的1條酶帶，正交子代相對遷移率Rf 0.082低于其他3個家系的0.096，7528肉眼已能從凝膠上清晰分辨，可將此酶帶作為區(qū)別正交子代和其他3個子代間的標記。采用隨機擴增多態(tài)DNA（RAPD）技術對大黃魚四個子代各20個樣本進行群體遺傳差異的檢測。14條引物共檢測到89個位點，各子代的多態(tài)位點比例在24.01%29.41%之間，平均遺傳雜合度為0.21350.2644，Shannon多樣性指數(shù)在0.08710.1673之間。遺傳多樣性水平，反交子代岱衢洋自交子代正交子

4、代官井洋自交子代，提示通過雜交試圖提高乃至恢復大黃魚的遺傳多樣性水平的方法是可行的。結合生產(chǎn)實際情況，推測反交子代可能同時具有雙親的優(yōu)良性狀，顯示出較強的雜種優(yōu)勢，岱衢族雄魚與閩-粵東族雌魚的反交組合可能成為大黃魚雜交育種的最優(yōu)組合。研究探討了紫菜共附生真菌Cladosporium sp.的次生代謝產(chǎn)物的粗提物N5及兩種純化物DLF3、DLF4對壇紫菜（Porphyra haitanensis）葉狀體和絲狀體生長的影響。研究結果表明：粗提物N5在低濃度10-8 10-6 mg/mL范圍時，對絲狀體和葉狀體的生長有促進作用，但隨N5濃度的升高，促進作用降低，甚至表現(xiàn)抑制作用。5N5在10-6 m

5、g/mL時，絲狀體日相對生長速率可增長18.8%（p0.01），同時藻膽蛋白的生物合成量相對增加了2.90mg/g；N5在10-8 mg/mL時，葉狀體日相對生長速率變化較大，增加了2.76%（p0.05），同時藻膽蛋白相對增加量可達14.16mg/g（p0.01）。在10-8 10-4mg/mL范圍內(nèi)，純化物DLF3和 DLF4對絲狀體生長均表現(xiàn)了完全的抑制作用，并且隨濃度升高，抑制作用加強。在10-8mg/mL時， DLF3和DLF4分別可降低絲狀體日相對生長速率4.5%和76.5%。DLF3和DLF4對葉狀體生長影響均極顯著（p0.01），低濃度時促進其生長，隨濃度升高而表現(xiàn)抑制作用，但

6、最適濃度范圍有所不同，分別在10-8mg/mL 和10-6 mg/mL時表現(xiàn)較強的促進作用，葉狀體日相對生長速率分別增加了7.94%和2.00%。 香魚(Plecoglossus altivelis)是一種名貴的經(jīng)濟魚類。本研究建立香魚巨噬細胞培養(yǎng)，檢測鰻弧菌對巨噬細胞呼吸爆發(fā)和噬菌能力影響。巨噬細胞由頭腎組織經(jīng)梯度離心，貼壁分離來獲得，并通過姬姆薩染色證實。進一步的研究發(fā)現(xiàn)鰻弧菌（Listonella anguillarum）可以刺激香魚巨噬細胞產(chǎn)生呼吸爆發(fā)，其還原NBT的能力比靜息狀態(tài)顯著性增高。鰻弧菌加入到培養(yǎng)的巨噬細胞，在4 h香魚巨噬細胞大量吞噬細菌，在12 h香魚巨噬細胞內(nèi)含的細菌

7、減少。這是我國香魚巨噬細胞體外培養(yǎng)的首次報道，香魚巨噬細胞對鰻弧菌有很強殺傷能力，是抵抗病原體侵染的重要防線。根據(jù)2007年秋季在黃海北部海域進行的定點底拖網(wǎng)調查，對黃鮟鱇（Lophius litulon）的攝食生態(tài)進行了初步研究。結果表明，北黃海的黃鮟鱇在秋季主要以底層魚類和蝦類為食，優(yōu)勢餌料生物是矛尾蝦虎魚（Chaeturichthys stigmatias）和脊腹褐蝦（Crangon affinis），其中矛尾蝦虎魚在食物組成中所占的比例最高，免費發(fā)布廣告 jsx6是黃鮟鱇最重要的餌料生物。典范對應分析表明，水深、經(jīng)度和緯度對黃鮟鱇的食物組成有顯著影響（P0.05）。黃鮟鱇攝食矛尾蝦虎魚

8、和脊腹褐蝦的體長范圍分別是32152 mm和3479 mm，平均體長分別為80.8 1.88 mm（S.E.）和53.2 3.11 mm（S.E.），它與兩種餌料生物的體長之間沒有顯著的相關關系。黃鮟鱇與矛尾蝦虎魚和脊腹褐蝦體長的比率分別為1.195.14和2.386.02，平均值分別為2.67 0.09（S.E.）和4.23 0.29（S.E.），黃鮟鱇與兩種餌料生物體長的比率與黃鮟鱇的體長之間存在極顯著的正相關關系。本文采用常規(guī)解剖、石蠟切片、蘇木精-曙紅染色（H-E）和顯微攝像等組織學研究技術，研究了雜食性的鯉魚和肉食性的鱸魚肝臟的解剖與組織結構，并對其進行了較為詳細的比較。結果表明：兩

9、種魚肝臟的形態(tài)、大小、色澤、致密度及膽囊狀況等均有區(qū)別；組織結構上兩種魚肝臟均外被薄層漿膜，切片上由于伸入肝臟實質內(nèi)結締組織較少，很難區(qū)分為肝小葉的結構。中央靜脈形狀多變，且分布很不規(guī)則。小葉周緣門管區(qū)有小葉間動脈血管、小葉間靜脈血管和小葉間膽管分布。胰臟外分泌組織組織包于肝臟組織之內(nèi)，沿門靜脈分枝周圍分布，構成肝胰臟，與肝臟組織有薄層結締組織界膜分開。肝胰臟主要由腺泡構成，腺泡內(nèi)有泡心細胞。鯉魚肝胰臟較發(fā)達，所含腺泡較多，腺細胞主要含有大量嗜酸性的酶原顆粒，少量腺細胞核致密，胞質被H-E染為桔黃色；花鱸肝胰臟較少且其中所含腺泡較少，腺細胞亦含大量嗜酸性的酶原顆粒?；|肝臟內(nèi)沿門靜脈分枝周圍分

10、布有大量黑色素巨噬細胞集合體，鯉魚肝臟中未觀察到類似組織結構。7根據(jù)2007年秋季在黃海北部海域進行的定點底拖網(wǎng)調查，對細紋獅子魚（Liparis tanakae）的攝食生態(tài)進行了初步研究。結果表明，北黃海的細紋獅子魚在秋季主要以蝦類和底層魚類為食，屬于底棲動物食性魚類，其優(yōu)勢餌料生物是脊腹褐蝦（Crangon affinis）。在調查海域最北部的一個站位，細紋獅子魚還攝食了較多的大瀧六線魚（Hexagrammos otakii）魚卵。典范對應分析表明，水深、經(jīng)度、緯度和體長對細紋獅子魚的食物組成有顯著影響（P0.05）。脊腹褐蝦與細紋獅子魚體長之間呈顯著的正相關（r = 0.326，P0.0

11、5）；脊腹褐蝦（r = -0.372，P0.01）和中華安樂蝦（r = -0.799，P0.01）與細紋獅子魚體長的比率與細紋獅子魚體長之間均呈極顯著的負相關關系。回歸分析表明，細紋獅子魚的胃總重和空胃重均隨著體長的增加呈指數(shù)增長。從患暴發(fā)性出血性敗血癥中華鱉的腹腔液、腸、心、肝、和胃等組織中分離培養(yǎng)得到8株細菌。通過光、電鏡觀察和16S rDNA序列測定、比對，對所分離細菌進行鑒定。結果表明，它們分別為格氏乳球菌、假單胞菌、海氏腸球菌、屎腸球菌、人蒼白桿菌、惰性嗜血桿菌、弗氏檸檬酸桿菌和遲鈍愛德華氏菌。用含慶大霉素、頭孢唑啉、羅紅霉素、阿莫西林和阿米卡星的藥敏紙片對格氏乳球菌、弗氏檸檬酸桿菌

12、和遲鈍愛德華氏菌進行藥敏試驗發(fā)現(xiàn)，格氏乳球菌對頭孢唑啉和阿莫西林中度敏感，抑菌圈直徑平均值分別為14 mm和16 mm；弗氏檸檬酸桿菌對阿莫西林敏感，抑菌圈直徑平均值為23 mm；遲鈍愛德華氏菌對慶大霉素和阿米卡星中度敏感，抑菌圈直徑平均值分別為15 mm和17 mm。北京DHL電話 jsx 8采用紫外分光光度法和酶學分析方法研究了鹽度（14和36）脅迫下12h內(nèi)經(jīng)溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）篩選過的三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）F2代（以下簡稱篩選蟹F2）的血藍蛋白含量及血清酶活力的變化，用普通三疣梭子蟹F1代（以下簡稱普通蟹F1）作為

13、對照。結果表明：在高鹽和低鹽脅迫下，篩選蟹F2和普通蟹F1的血藍蛋白含量、三種保護酶（SOD、POD和CAT）和磷酸酶（ACP和AKP）活力隨時間變化呈現(xiàn)有升有降的不同變化趨勢。另外，無論在低鹽還是高鹽脅迫下，篩選蟹F2的血藍蛋白含量和各項血清酶活力分別在0h（正常水平）和鹽度脅迫下均顯著高于普通蟹F1（p0.05）?？偨Y：低鹽和高鹽脅迫對三疣梭子蟹的非特異性免疫影響顯著且表現(xiàn)出時間效應；在正常和抗鹽度脅迫下，篩選蟹F2比普通蟹F1在非特異性免疫因子方面更具免疫優(yōu)勢。采用Winkler法測定水中溶氧含量，通過比較對照呼吸室與試驗呼吸室水中溶解氧含量之差確定長蛸耗氧率及窒息點，并在不同程度的溶氧

14、脅迫下測定長蛸體內(nèi)多種酶的活力變化。結果表明：長蛸耗氧率在一個晝夜內(nèi)呈現(xiàn)“低-高-低-高”的趨勢；耗氧率與水溫(1030 )呈正相關，與pH值(6.49.2)呈負相關；隨著鹽度的升高(1431)，長蛸耗氧率表現(xiàn)為兩頭大, 中間平穩(wěn), 曲線呈凹狀分布；雌性長蛸耗氧率高于雄性。窒息點隨長蛸體重的增加而降低，平均體重為（30.56.0277）g的長蛸窒息點為0.4179mg/L；平均體重為 (54.54.6547) g的長蛸窒息點為0.3902 mg/L；平均體重為(9711.3578) g的長蛸窒息點為0. 2738mg/L。隨著溶氧脅迫程度的增加，LDH活力呈先升后降趨勢，脂肪酶活力下降，SOD

15、、POD、CAT、ACP、AKP和蛋白酶活力均呈“降-升-降”趨勢。9 通過測定黃姑魚精子的激活率、運動時間及壽命研究了不同環(huán)境因子對黃姑魚精子活力的影響。結果表明，黃姑魚精液中精子濃度為（1.410.12）1010個/ ml；精子激活與運動的適宜鹽度為2535、適宜pH為7.58.5。在pH 8.08.3、鹽度25條件下，精子激活率達（87.005.54）%，運動時間及壽命分別為（33614.02）s及（405.3312.22）s。精子激活與運動的適宜NaCl、KCl、MgCl2及葡萄糖溶液濃度分別為300500mmolL-1、600mmolL-1、8001000 mmolL-1及900 m

16、molL-1；精子在CaCl2溶液中有聚集現(xiàn)象出現(xiàn)，且運動時間及壽命明顯縮短；精子在缺少HCO3-的人工海水中未能被激活；精子在無Ca2+或Mg2+的人工海水中激活率均超過80%，但運動時間及壽命均有所縮短。 于2008年11月在浙江新昌采集20尾光唇魚，采用垂直聚丙烯酰胺平板電泳，對光唇魚的肝臟、脾臟、心臟、腎臟、腦、鰓耙、眼睛、背鰭和肌肉等9種組織器官中的10種同工酶進行研究，并分析了其酶譜表型。結果表明，除了過氧化氫酶（CAT）和酸性磷酸酶(ACP) 只顯示微弱且不穩(wěn)定的區(qū)帶外，乳酸脫氫酶(LDH)、蘋果酸脫氫酶(MDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、蘋果酸酶(MEP)、醇脫氫酶(ADH)、過氧化物酶(POD)、