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1、2.2.2 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體1精選ppt溫故而知新植物細(xì)胞雜交(馬鈴薯番茄)融合的原生質(zhì)體AB再生出細(xì)胞壁植物細(xì)胞的融合雜種細(xì)胞AB雜種植株脫分化愈傷組織再分化植物組織培養(yǎng)原生質(zhì)體B原生質(zhì)體A去 壁去 壁人工誘導(dǎo)植物細(xì)胞A植物細(xì)胞B2精選ppt一、動(dòng)物細(xì)胞融合1.概念: 動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。 融合后形成的具有兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為雜交細(xì)胞。3精選ppt2、動(dòng)物細(xì)胞融合基本原理:與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同,即細(xì)胞膜的流動(dòng)性3、誘導(dǎo)方式物理法:化學(xué)法:生物法:滅活的病毒電激、振動(dòng)、離心聚乙二醇(PEG)例如:仙臺(tái)病毒
2、(喪失感染性、保留抗原結(jié)構(gòu))4精選ppt滅活的病毒顆粒黏附于細(xì)胞表面細(xì)胞膜被病毒顆粒穿通細(xì)胞膜連接細(xì)胞融合,形成雜種細(xì)胞(細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性)4.過(guò)程5精選ppt、植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)方法用途獲得雜種植株細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞的全能性去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合物理(離心、振蕩、電激)化學(xué)(聚乙二醇)物理、化學(xué)方法(同左)滅活的病毒6精選ppt、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的發(fā)展簡(jiǎn)史告訴我們:科學(xué)技術(shù)是不斷發(fā)展的。那么,實(shí)現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞融合有什么意義呢?打破生殖隔離,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能;廣泛應(yīng)用
3、多個(gè)學(xué)科領(lǐng)域;重要用途:制備單克隆抗體。7精選ppt二、單克隆抗體傳統(tǒng)的抗體的生產(chǎn)方法及缺陷是什么?B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后,可以產(chǎn)生特異性抗體。動(dòng)物在免疫反應(yīng)過(guò)程中,體內(nèi)產(chǎn)生特異性抗體種類可達(dá)百萬(wàn)種以上,每種抗體對(duì)特定的抗原具有特異性免疫作用。但每一個(gè)淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。產(chǎn)量低、純度低;而且制備抗體特異性差。分析: B淋巴細(xì)胞與抗體的關(guān)系8精選ppt、單克隆抗體(概念) 由單個(gè)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖(克?。?,形成基因型相同的細(xì)胞群,這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。 那么,如何大量獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體?(即單克隆抗體)在體外,一個(gè)淋巴細(xì)胞是不可
4、能無(wú)限增殖的。9精選ppt一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體骨髓瘤細(xì)胞(癌細(xì)胞)能無(wú)限增殖雜種細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、設(shè)計(jì)方案:動(dòng)物細(xì)胞融合創(chuàng)始人:米爾斯坦單克隆抗體既能產(chǎn)生特異性抗體,又能大量繁殖10精選ppt動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)B 、BB 、B瘤 、瘤瘤 、瘤只有雜種細(xì)胞才能活動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)3.單克隆抗體制備過(guò)程獲得產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞11精選ppt4、單克隆抗體的特點(diǎn)和應(yīng)用與常規(guī)抗體相比,單克隆抗體特異性強(qiáng),靈敏度高,產(chǎn)量高,優(yōu)越性十分明顯。應(yīng)用:特點(diǎn):作為診斷試劑:準(zhǔn)確,高效,簡(jiǎn)易、快速疾病治療運(yùn)載藥物(作為運(yùn)載對(duì)應(yīng)疾病的藥物的 “生物導(dǎo)彈“。)“生物導(dǎo)彈”單克隆抗體藥物12精選ppt 4、下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法,設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌的實(shí)驗(yàn)方案(4)、圖中B為_過(guò)程,常用_作為誘導(dǎo)劑,該細(xì)胞繼承_的遺傳特性,既能_,又能(1)、該實(shí)驗(yàn)方案的目的是_ _ (3)、A是從小鼠的脾臟中取得_ _,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生_制備單克隆抗體B淋巴細(xì)胞抗體細(xì)胞融合滅活病毒雙親細(xì)胞分泌抗體無(wú)限增殖B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到小鼠腹腔AC13精選ppt 4、下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法,設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌的實(shí)驗(yàn)方案 (5)、C過(guò)程指細(xì)胞培養(yǎng),該過(guò)程包括_培養(yǎng)和_培養(yǎng)兩個(gè)階段,其中_代以內(nèi)的的細(xì)胞屬于細(xì)胞株。原代傳代50B體外培
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