《動(dòng)物傳染病學(xué)（豬?。氛n件4-5(13)豬傳染性胃腸炎 流行性腹瀉 輪狀病毒病

1、豬腹瀉性疾病及其控制 蔡旭旺 農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室204 電 話QQ:2532609832 E-mail： 1. 概述豬的腹瀉是集約化養(yǎng)豬生產(chǎn)條件下的一種典型的多因素性疾病，給養(yǎng)豬業(yè)造成重大經(jīng)濟(jì)損失。 腸炎與腹瀉是引起仔豬死亡的重要原因之一，若豬場(chǎng)管理不當(dāng)，腸炎與腹瀉常成為一個(gè)豬場(chǎng)長(zhǎng)期難以解決的問題。豬的腹瀉可以由傳染性和非傳染性因子引起。1.1 引起腸炎與腹瀉的主要病因細(xì)菌及其毒素病毒寄生蟲真菌變態(tài)反應(yīng)營養(yǎng)無機(jī)物中毒普通病腸炎腹瀉1.2 引起腹瀉的主要傳染性因子 豬瘟病毒 偽狂犬病毒病毒性病原 傳染性胃腸炎病毒 豬流行性腹瀉病毒 豬輪狀病毒 豬圓環(huán)病毒 致病性

2、大腸桿菌 沙門氏桿菌細(xì)菌性病原 C型魏氏梭菌 豬痢疾短螺旋體 其它（彎曲菌、胞內(nèi)勞森菌） 球蟲寄生蟲性病原 隱孢子蟲 蠕蟲（結(jié)腸小袋纖毛蟲等） 黃曲霉毒素真菌及其毒素 鐮刀菌毒素 其它 1.3 引起腹瀉的生物性病原可分原發(fā)性腹瀉病原：只限制在腸道局部繁殖的病原，是引起腸炎和腹瀉的直接病因。繼發(fā)性腹瀉病原：是全身循環(huán)經(jīng)過性傳染病的病原，在這些病原中，腹瀉是作為被病原侵害的組織器官在腸道出現(xiàn)的一種結(jié)果。1.4 幾種腹瀉疾病的發(fā)病年齡區(qū)間 24小時(shí) 5天 3周 5周 10周 20周 30周 成年 類圓線蟲 大腸桿菌 嚴(yán)重癥狀 TGE 輕微癥狀 嚴(yán)重癥狀 PEG 輕微癥狀 梭菌性腸炎 輪狀病毒腸炎 球

3、蟲 沙門氏菌腸炎 豬痢疾2. 豬傳染性胃腸炎（Transmissible gastraenteritis of pigs，TGE）豬傳染性胃腸炎是一種急性胃腸道傳染病，以嘔吐，嚴(yán)重腹瀉和脫水為特征。各種年齡豬都可發(fā)病，10日齡以內(nèi)仔豬病死率很高，可達(dá)100%，5周齡以上豬的死亡率很低，成年豬幾乎沒有死亡。病理變化主要是腸道的卡他性炎癥和小腸黏膜微絨毛萎縮。2.1 概述豬傳染性胃腸炎病毒，屬于冠狀病毒科冠狀病毒屬，基因組為單股正鏈RNA。有囊膜，形態(tài)多樣，呈圓形、橢圓型和多邊形，直徑約為80120nm，表面有一層棒狀纖突。只有一個(gè)血清型，病毒能在豬腎、豬甲狀腺和唾液腺等細(xì)胞中繁殖繼代，引起細(xì)胞病

4、變的能力因病毒株而異。2.2 病原冠狀病毒粒子結(jié)構(gòu)示意圖。病毒存在于病豬各器官、體液和排泄物中，以空腸、十二指腸和腸系膜淋巴結(jié)含毒量最高，在發(fā)病早期呼吸系統(tǒng)和腎臟的含毒量也相當(dāng)高。病毒不耐熱，在4以上很不穩(wěn)定，加熱5645分鐘，6510分鐘死亡。但在4以下的低溫可以長(zhǎng)時(shí)間的保持其感染性。腸道內(nèi)的病毒在20可保存6個(gè)月，在18保存18個(gè)月僅下降1個(gè)對(duì)數(shù)滴度。對(duì)光線敏感，在陽光下曝曬6小時(shí)即被滅活。紫外線能使病毒迅速滅活，但在陰暗處歷時(shí)7天仍保持感染力。病毒在pH48穩(wěn)定，pH2.5時(shí)則被滅活。病毒對(duì)乙醚，氯仿敏感，所有對(duì)囊膜病毒有效的消毒劑對(duì)其均有效。0.5%石炭酸在37處理30分鐘可殺死病毒。

5、冠狀病毒復(fù)制示意圖 冠狀病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞后，首先直接以病毒基因組RNA為模板翻譯出RNA聚合酶，然后利用該酶完成負(fù)鏈亞基因組RNA的轉(zhuǎn)錄、各結(jié)構(gòu)蛋白mRNA的合成，以及基因組RNA的復(fù)制。結(jié)構(gòu)蛋白和基因組RNA復(fù)制完成后，在宿主細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)裝配成新的病毒顆粒，并通過高爾基體分泌到細(xì)胞外，完成其生命周期。3. 流行病學(xué)傳染源：主要是病豬和康復(fù)后帶毒豬。病毒主要存在于豬的小腸黏膜（空腸含毒量最高可達(dá)106PID豬感染劑量）、腸內(nèi)容物、腸系膜淋巴結(jié)和扁桃體中。可隨糞便排毒達(dá)8周之久，最長(zhǎng)的達(dá)104天。傳播途徑：主要通過食入被污染的飼料經(jīng)消化道傳染，也可通過空氣經(jīng)呼吸道傳染。密閉豬舍，濕度大，豬只集中的

6、豬場(chǎng)更易傳播。易感動(dòng)物：各種年齡的豬均有易感性，但10日齡以內(nèi)仔豬的發(fā)病率和死亡率較高。斷奶豬、肥育豬和成年豬發(fā)病的癥狀輕微，大多數(shù)能自然康復(fù)。其它動(dòng)物無易感性。流行特點(diǎn)：多發(fā)生在冬春寒冷季節(jié)，即12月至4月之間。一旦發(fā)生，在豬群里迅速傳播，數(shù)日內(nèi)可使豬群大部分豬受感染。新疫區(qū)呈流行性，老疫區(qū)則呈地方流行性或周期性流行，發(fā)病率降低，癥狀較輕。4. 臨床癥狀潛伏期隨豬的年齡而有差異，仔豬1224小時(shí)，大豬24日。突然發(fā)病，傳播迅速。仔豬先突然發(fā)生嘔吐，接著發(fā)生急劇的水樣腹瀉，糞便為黃綠色或灰色，有時(shí)呈白色，并含凝乳塊。部分病豬體溫先短期升高，發(fā)生腹瀉后下降。病豬迅速脫水，很快消瘦，嚴(yán)重口渴，食飲

7、減退或廢絕。一般經(jīng)27天死亡，10日齡以內(nèi)的仔豬有較高的致死率，隨著日齡的增長(zhǎng)致死率降低，病愈仔豬生長(zhǎng)發(fā)育較緩慢。架子豬，肥豬和成年豬的癥狀較輕，發(fā)生一至數(shù)日的減食，腹瀉、體重迅速減輕，有時(shí)出現(xiàn)嘔吐，哺乳母豬泌乳減少或停止。一般37日恢復(fù)，極少發(fā)生死亡。病豬消瘦、脫水。病豬嘔吐和腹瀉。豬傳染性胃腸炎：架子豬呈水樣腹瀉。豬傳染性胃腸炎：架子豬呈水樣腹瀉。嘔吐物。 腹瀉糞便。5. 病理變化主要病變?cè)谖负托∧c。仔豬胃內(nèi)充滿凝乳塊，胃底部黏膜輕度充血，有時(shí)在黏膜下有出血斑。小腸內(nèi)充滿黃綠色或灰白色液狀物，含有泡沫和未消化的小乳塊，小腸壁變薄，彈性降低，以致腸管擴(kuò)張，呈半透明狀。腸系膜血管擴(kuò)張，淋巴結(jié)腫

8、脹，腸系膜淋巴管內(nèi)見不到乳糜。將空腸縱向剪開，用生理鹽水將腸內(nèi)容物沖掉，在玻璃平皿內(nèi)鋪平，加入少量生理鹽水，在低倍顯微鏡下或放大鏡下觀察，可見到空腸絨毛顯著縮短。組織學(xué)檢查，黏膜上皮細(xì)胞變性，脫落。腎常發(fā)生變性，并有白色尿酸鹽沉積。胃漿膜出血。胃底黏膜充血、點(diǎn)狀或斑狀出血。小腸擴(kuò)張，腸壁極薄。小腸彌漫性充血、出血和變薄，腸管擴(kuò)張。腸壁極薄，由于細(xì)菌感染致黏膜嚴(yán)重出血。左為病豬腸絨毛變平，右為正常?？漳c與回腸絨毛顯著萎縮。萎縮絨毛 正常絨毛6. 診斷病原學(xué)檢查病毒分離：取病豬的肛拭、糞、腸內(nèi)容物或空腸、回腸段為病料，經(jīng)處理后接種豬腎細(xì)胞培養(yǎng)，盲傳2代以上分離病毒，用中和試驗(yàn)或免疫電鏡作鑒定。RT

9、-PCR。 血清學(xué)檢查免疫熒光試驗(yàn)：取急性期病豬的空腸制成冰凍切片，熒光抗體染色后在熒光顯微鏡下觀察，如胞漿內(nèi)發(fā)現(xiàn)亮綠色熒光即可確診。下痢初期熒光抗原最多，至感染后7天則減少，因此采樣時(shí)間必須適當(dāng)，若同時(shí)配合組織學(xué)檢查，其可靠性更大。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、微量中和試驗(yàn)、間接血凝試驗(yàn)：也是本病常用的血清學(xué)診斷方法。雙份血清的中和試驗(yàn)，康復(fù)血清效價(jià)4倍于病初血清為陽性。鑒別診斷 本病應(yīng)與豬流行性腹瀉、輪狀病毒腹瀉、豬大腸桿菌病和豬痢疾等相區(qū)別。7. 防制治療：尚無特效治療方法，患病期間大量補(bǔ)充等滲葡萄糖氯化鈉溶液，供給大量清潔飲水和易消化的飼料，可使較大的病豬加速恢復(fù)，減少死亡。口服四環(huán)

10、素、磺胺、呋喃西林、黃連素、高錳酸鉀等可防止繼發(fā)感染，減輕癥狀。預(yù)防：保健措施：通過血清學(xué)調(diào)查對(duì)豬場(chǎng)進(jìn)行監(jiān)測(cè)，豬的交易必須控制在TGE血清學(xué)陰性的豬場(chǎng)。對(duì)后備種豬的買賣必須進(jìn)行TGE的檢查。對(duì)飼養(yǎng)的仔豬需進(jìn)行抽樣檢查，每群可抽樣510頭。所有來自其它地區(qū)新購進(jìn)的豬必須對(duì)TGE進(jìn)行隔離檢查。如在育種群和繁殖群出現(xiàn)腹瀉時(shí)要禁止種畜的出售。免疫措施：免疫機(jī)理主要是細(xì)胞免疫和黏膜免疫，肌肉接種無效，口、鼻內(nèi)接種可行。經(jīng)胃腸外接種滅活疫苗和弱毒苗，僅能在乳汁中產(chǎn)生少量IgA分泌型抗體。通過母源抗體的被動(dòng)傳遞來保護(hù)仔豬免受TGEV的侵襲。給妊娠母豬產(chǎn)前2040天口服強(qiáng)毒能夠產(chǎn)生良好乳汁免疫。將發(fā)病豬的糞便

11、直接接種母豬或其它豬，讓其集中發(fā)病，集中處理，縮短發(fā)病時(shí)間，提高母豬初乳中的抗體水平，被動(dòng)保護(hù)仔豬。有散布強(qiáng)毒，使本病常在的危險(xiǎn)，一定要在豬場(chǎng)沒有其它傳染病發(fā)生的情況下，嚴(yán)格控制下，謹(jǐn)慎進(jìn)行。感染TGE病毒的豬對(duì)其它疾病的抵抗力或免疫機(jī)能明顯改變。在出現(xiàn)TGE癥狀之前以及已出現(xiàn)TGE癥狀時(shí)，給豬注射豬瘟弱毒疫苗，常不能產(chǎn)生對(duì)豬瘟的有效免疫力。8. 豬流行性腹瀉（Porcine epidemic diarrhea，PED）豬流行性腹瀉是一種急性接觸性腸道傳染病，特征為嘔吐、腹瀉和脫水，各種年齡豬均易感。本病的流行特點(diǎn)、臨診癥狀和病理變化都與豬傳染性胃腸炎十分相似，但哺乳仔豬死亡率較低，在豬群中的

12、傳播速度相對(duì)緩慢。20世紀(jì)80年代初以來，中國陸續(xù)有發(fā)病的報(bào)道，并分離到病毒。8.1 概述8.2 病原冠狀病毒科冠狀病毒屬的成員，呈球形，有囊膜，單股正鏈線性RNA。可在PK和ST細(xì)胞中增殖，并產(chǎn)生明顯的CPE，不能凝集人、兔、豬、鼠、犬、馬、羊、牛的紅細(xì)胞。對(duì)外界抵抗力弱，對(duì)乙醚、氯仿敏感，一般消毒藥物都可將其殺滅。 8.3 流行病學(xué)本病毒可在豬群中持續(xù)存在，各種年齡的豬都易感。哺乳仔豬、架子豬和育肥豬的發(fā)病率可達(dá)100%，母豬的發(fā)病率則為1590%。傳播途徑是消化道。病毒多經(jīng)發(fā)病豬的糞便排出，以運(yùn)輸車輛、飼養(yǎng)員的鞋子或其它帶毒動(dòng)物作傳播媒介。多發(fā)生于寒冷季節(jié)，呈地方性流行。 8.4 臨床癥

13、狀主要表現(xiàn)為水樣腹瀉，或者伴隨嘔吐。1周內(nèi)新生仔豬常于腹瀉后24天內(nèi)因脫水而死亡，病死率可達(dá)50%。斷奶豬和肥育豬以及母豬常呈現(xiàn)沉郁和厭食臨診癥狀，持續(xù)腹瀉47天，逐漸恢復(fù)正常。成年豬僅表現(xiàn)沉郁、厭食、嘔吐等癥狀，若沒有繼發(fā)其它疾病和護(hù)理得當(dāng)，很少發(fā)生死亡。8.5 病理變化小腸膨脹，充滿淡黃色液體，腸壁變薄，個(gè)別小腸黏膜有出血點(diǎn)。小腸絨毛變短，重癥者絨毛萎縮，甚至消失。腸系膜淋巴結(jié)水腫。胃充滿膽汁樣的黃色液體。病豬嚴(yán)重脫水，小腸膨脹，腸壁變薄。斷奶仔豬嚴(yán)重腸炎和腸道內(nèi)黃色內(nèi)容物。萎縮絨毛。 正常絨毛。小腸絨毛萎縮（HE染色）。8.6 診斷發(fā)生于寒冷季節(jié)。直接取病豬的糞便檢查PEDV粒子或接種胎

14、豬腸組織原代細(xì)胞或Vero細(xì)胞培養(yǎng)分離病毒。在仔豬可用熒光抗體與病豬小腸冰凍切片染色作出本病的確診。RT-PCR。PED X40PED X 100PED X 400熒光抗體檢測(cè)豬流行性腹瀉病毒（綠色）。 1 2 3 M525bp400bp600bpFig. RT-PCR products of PED viral RNA M: Marker 1: sample 2: negative 3: Positive（PED） RT-PCR檢測(cè)豬流行性腹瀉病毒。免疫組織化學(xué)染色方法標(biāo)記小腸細(xì)胞內(nèi)的豬流行性腹瀉病毒（棕色）。豬流行性腹瀉在仔豬、架子豬和育肥豬的發(fā)病率都很高，哺乳仔豬發(fā)病死亡率最高，而豬傳染

15、性胃腸炎在架子豬、育肥豬發(fā)病率較低。豬流行性腹瀉多為水樣腹瀉，或在腹瀉過程中有嘔吐，多發(fā)生于食后；而豬傳染性胃腸炎是先嘔吐，后腹瀉。豬流行性腹瀉病死率較豬傳染性胃腸炎低，在豬群中傳播亦較慢。鑒別診斷8.7 防制目前尚無特效治療藥物，對(duì)癥治療可以減輕脫水、酸中毒和防止并發(fā)感染。可對(duì)懷孕母豬在分娩前2周以病豬的糞便或小腸內(nèi)容物進(jìn)行人工感染，具體方法與豬傳染性胃腸炎所用的類似。免疫TGE-PED二聯(lián)滅活苗或弱毒苗。9. 輪狀病毒感染（Rotavirus infection）由輪狀病毒引起的兒童（6個(gè)月2歲）及幼齡畜禽（如8周齡以內(nèi)豬）的急性胃腸道傳染病。臨床上以腹瀉和脫水為特征。成年人和成年動(dòng)物一般

16、呈隱性感染。9.1 概述9.2 病原屬于呼腸孤病毒科輪狀病毒屬。雙鏈RNA病毒，無囊膜，有雙層衣殼，從內(nèi)向外呈放射狀，形態(tài)似車輪。病毒很難在細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，對(duì)理化因素有較強(qiáng)的抵抗力，耐酸堿（pH3.510）。共11個(gè)基因片段，編碼6個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白（VP14、VP6、VP7）和5個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白（NSP15）。外衣殼蛋白VP4（血凝素，決定血清型和感染性），VP7（糖蛋白，促病毒穿入），均為中和抗原。根據(jù)內(nèi)衣殼VP6的抗原性，輪狀病毒可分為A、B、C、D、E 、F 6群。輪狀病毒在電鏡下的形態(tài)。輪狀病毒的大體結(jié)構(gòu)。9.3 流行病學(xué)患病的人、畜和隱性感染者都是傳染源。通過糞便向外散毒，經(jīng)消化道傳染易感人畜禽。傳播迅速，多發(fā)生在秋冬寒冷季節(jié)。仔豬多發(fā)，發(fā)病率高死亡率低。主要