島津LC-20AT型高效液相色譜儀的圖文操作手冊

1、島津LC-20AT型高效液相色譜儀的圖文操作手冊柱溫箱島津LC-20AT型高效液相色譜儀、島津LC-20AT型高效液相色譜儀:LC-20AT溶液傳輸單元SPD-M20A二極管陣列檢測器DGU-20A真空脫氣機CBM-20A系統(tǒng)控制器RF-10AXL熒光檢測器SIL-20AVarian380-LC手動進樣器動進樣器烝發(fā)光檢測器功能和用途:1、功能:本儀器采用高壓梯度通過高壓輸液泵分別獨立精確控制流量、調(diào)整溶劑濃度比例，實現(xiàn)高效率、高精度混合；即配備了可提供全波長三維信息的二極管陣列檢測器，全新的光路設(shè)計與有效的梯形狹縫池設(shè)計保證了高分辨率和高靈敏度；也配備了靈敏度更高、選擇性更好的熒光檢測器；還

2、配備了具有高靈敏度、檢測范圍更廣的蒸發(fā)光檢測器。2、用途:本儀器可以高效地分離分析高沸點、熱不穩(wěn)定的有機及生化試樣；二極管陣列檢測器對大部分有機化合物有響應(yīng)；熒光檢測器可以檢測產(chǎn)生熒光的物質(zhì)，對如多環(huán)芳烴、維生素B、黃曲霉素、卟啉類化合物、農(nóng)藥、藥物、氨基酸、甾類化合物等有響應(yīng)；蒸發(fā)光散射檢測器對碳氫化合物、表面活性劑、聚合物、脂肪酸和氨基酸、油和揮發(fā)性低于流動相的任何樣品、不含發(fā)色團的化合物有響應(yīng)。三、操作步驟：1、色譜柱的安裝本儀器配備了SPD-M20A二極管陣列檢測器、RF-10AXL熒光檢測器和Varian380-LC蒸發(fā)光散射檢測器。樣品分析前首先要確定用什么檢測器，然后把色譜柱連接

3、到所需的檢測器上。2、開機a、首先打開UPS,然后依次打開DGU-20A3真空脫氣機、LC-20AT溶液傳輸單元（泵）CBM-20A系統(tǒng)控制器、所選用的檢測器、自動進樣器SIL-20A，CTO-20A柱溫箱電源打開。（HPLC組件的電源開關(guān)大都在儀器的右下角）b、將兩個泵上部中間的黑色旋鈕逆時針旋轉(zhuǎn)90180度，按purge鍵進行自動脫氣，一般設(shè)置為3分鐘；然后按自動進樣器軟鍵盤的purge鍵，對自動進樣器上的樣品進行脫氣，一般為25分鐘。c、雙擊Lcsolution圖標(biāo)。輸入用戶名Admin，點擊OK。單擊系統(tǒng)配置的圖標(biāo)，出現(xiàn)系統(tǒng)配置的對話框。單擊自動配置，儀器自動將能找到的儀器配置，也可以

4、用圖示中的藍色和紅色箭頭分別添加和去掉配置的儀器。需要注意的是，儀器優(yōu)先選擇自動進樣器，如果需要手動進樣，需將自動進樣器去掉。單擊儀器（通訊設(shè)置），選擇正確的儀器類型，然后單擊自動獲取IP地址。單擊系統(tǒng)控制器，出現(xiàn)系統(tǒng)控制器的對話框，繼電器的四個選項需要設(shè)置為start。實HTliJr|=|sllxEiQ；凈。川屜從文件Q)0119(1)sx)方広Q)儀腸采集JWSQ)工員口a)WBUQP哪1阿分析(儀子淆且満息人日志文件“LIutiM用尸宕X徑0匚口LC：I掙氣PDA:就緒1050曲04尸|，|，.PDA運行時I目000/60COsinilijfl(Z54m)OaAUBjeQE(ZTa|m竝

5、|a時冋怨序gaMiin時何證序udiirtflL)-而!SR釉祕I損式叭3象A團！.hMVin索B園1|0000aVin結(jié)束時間1)“US遲度儀確名稱|ST蠟述；儀;8仗署尖8!jftC端口IPMitt：Iscsrttlscsiid|LCM-20*以太兩19216620099PDASHHI20A1921662009610W0OG-iTTr1(5fl-ffiK何DrmWtJIJXB血文件a，刪SQ)S(D方沫儀81(1)采負朗K0i)IAOV!口1)韜助01)系統(tǒng)控制忑(CBV-ZOA序刊號(S)設(shè)IBQO可用4K塊)康說明ET、游息人日志文件/CC沙Loluta*予150時分獅(儀lUb-：

6、#*5Dret咬用千質(zhì)1F采竇81何(1)|:1=11式麗更麗3漿A趙)|ooooMiuJLtQZis：啟為開_|H1rus3fl!翊疔電HIt電譽建電r電件問ift件級電8|FT*|-|f4*ii件*s電團|FTr亭蜒厲護(i)r岀Bwwwt芳肚電ua)d、單擊儀器開關(guān)按鈕，將軟件與儀器連接書LC丈時分析(儀33-Ata“)-敕儲采傲-無標(biāo)JS開仙閻縉如同;文件加a)ns).QmAV呵E6WSffrw-18T13.010.0BUTit耐M自動I時司程序s停止Bi習(xí)Dloi.iSJiTJKIT采IW何g)|結(jié)克時i司a)：|60oo怯莊爐Ftta-ABAB%|黍|聶fT1豊-勺丄豊fcF錄B滬

7、:=構(gòu)式|二元KI2WJS三|Sullar|i000“ixb范a)麗%慮StQ)：144GtPr軸*理相工“站徐汐L“】z、:耒命名直田璋1彌分新(儀簾1JC9W分僑傲ITJM3、方法編輯a、下圖中看到儀器參數(shù)視圖，選擇高級，然后依次改變其中的參數(shù)。如果儀器為PDA檢測器時，則按以下進行設(shè)置。數(shù)據(jù)采集：LC停止時間為0.01。采集時間打勾，結(jié)束時間為分析樣品的時間。LC時間程序：如果等度洗脫，則設(shè)置如圖中0.01controllerstop。進行梯度洗脫時需要如圖所示進行設(shè)置。單擊繪制曲線，可查看梯度曲線。泵：模式選擇二元高壓梯度，設(shè)置泵B的濃度。最大壓力根據(jù)色譜柱的最大壓力進行設(shè)置。PDA：

8、般同時選擇D2和W等，然后輸入開始和結(jié)束時的波長。柱溫箱：設(shè)置柱溫箱的溫度?？刂破鳎簩⑺膫€時間全部打勾。自動進樣器：不需要重新設(shè)置。自動排氣：不需要重新設(shè)置。方法設(shè)置完后，選擇文件，另存為方法文件。當(dāng)儀器穩(wěn)定，基線穩(wěn)定后，可以下載方法，進行樣品的分析。書LC實時外析誠atAAd-G-XHHJ匚叵區(qū)小文件W編伐ASqt）方i*qp仗81a）采集Q）慰勇）工JlQ）由口Q）羽肋Qp才初R；丄第P(wa&越購牙啦p（*i（Dpf*2（a）P事件3Q）P事件4皺聲來集|1時値腔厚型號CM-20A乂才孫度_懈國-9111|11|1.“L,”丫畔2件晉臥、廣込QPDA運麗伺000/2000in11道1(2

9、54m)OhAUH柚？0“國飛0004，”.,.,.麗1i!c右7J1S2460969*!T617斟D|5.I?Wffl正KjifcH啜目Ifi*&沐廈B0總血0.00.s予LC實時分柄（儀SS-AiBin）-無杯盤7flA日期時間1代碼1用戶名BJ*fiA1子甫區(qū)HM|WM1代碼1帕戶名S.i亠-王消息-I-1LJ1T決行累婿卷豪C2554t作說明廠悄論-mm呻If軻分忻（儀匚尸AC0S5.0arjl：-9-OTL|jdJj*iQW0.0050.0F,b5o.or.AJF-kf.B腓來連kf，tllfa30cft.A85C單元ICMktrolluo.cooTonu枷BLC*olvtiK：D5

10、e另序方法文件為)“rPLC矣時分析!S)-AiBin)-IftK采條-XHffl文件*(z)viB(x)方?jīng)躋)仗黑a)采湊a)rso)iAa)vi口a)簾助a)他方捲文件QI)打開方浪文件Q)天閉方法文件o奇Mv番n目動進佯ilttIQL)ow6oUioobozoobaiqooo*oobosoolwiol7ooboeooboioobiioiioolijoooioaiisqoIic侵序方法文件CS)另序方法文件為aar皿方法夕數(shù)9)打開3陽數(shù)瘵文件Q)關(guān)創(chuàng)尸夠胡E文件M1(25|x|冊19LC:未連接PDA:未連接量犬舷0UPS泵34豹刮揑制88X9柱4B-BB仗MOliRiSl)50l旦儀

11、畛謝視的STulw閱S|uc時個&序目動捋氣I時司的LdfibWiWloi咬用千廝IT采集時何0)I禎式|二j&KStttS三|StdlQ).PMOSibwa).fols22.535.0大SC0Lc口隔垮朋1果撫D*iSttCM-20AR泵A1-2OAT笄茶BLC-20AT苕目如tTHSIL-20A3卷週HHA.KP-10AXLXM荘2.52SJ2Z5fftfc2*?63age602?rzJ子消且口HI|rtrffl1代碼|用戶名初&化連授A煩.200AM1019420 x240dAil5W分忻jTMEKifi息飲緇C：25StiBFr：*iLC-20ATfi斷食9t瞧作氓明6StH*糧相工U

12、H*egZl鈿分祈(-.勺悼I1020c、4、如果選擇蒸發(fā)光檢測器，將色譜柱連接蒸發(fā)光散射檢測器。打開Varian-380電源開關(guān)，打開VarianELSDControl軟件方法編輯器單擊Method，出來一對話框，Usemyowninstrumentsett，則可以改變參數(shù)，設(shè)置新的方法。也可以不打勾，直接選擇已經(jīng)設(shè)置好的方法。儀器開啟時即處于STANDBY模式，加熱塊關(guān)閉，霧化氣流速設(shè)定為較低的1.2SLM。Standby模式下用戶可設(shè)定儀器參數(shù)（霧化氣流速，霧化溫度，蒸發(fā)溫度），然后將模式切換至RUN。Run模式是正常工作模式，儀器處于完全設(shè)定控制狀態(tài)。在加熱或降冷卻程中，儀器會顯示“N

13、OTREADY”，表明儀器未達設(shè)定條件。當(dāng)儀器平衡完畢，會顯示“READY”。方法使用打開機器后，選擇合適的方法。將工作模式設(shè)定為RUN,使儀器加熱平衡。打開LCsolution軟件，自動配置選擇AD2，即選擇了蒸發(fā)光檢測器。其它設(shè)置同PDA檢測器。儀器平衡后檢察基線。在洗脫液未接入時噪音應(yīng)低于0.2mv，這表明霧化氣潔凈干燥?；€毛刺一般是由霧化氣中的粒子或水分造成的。引入洗脫液并待其平衡15min。再次檢查基線，應(yīng)不超過lmv,如是為純水應(yīng)不超過0.25mv,純有機溶劑也應(yīng)不超過lmv。緩沖體系和穩(wěn)定劑可顯著增加噪音。然后進行樣品分析。:ftS3-Adin)少文侔綁iq）n（x）方法儀na

14、）采集4）敎冤）工具x）口1）柄肋EM-|g|x|GU.丄TDLC:未連接LC000/000inADi.OaV0MPaI*J10CG-皿旦儀畛#hu閔CTawl|1目動拎氣|7妙1LdfihWW應(yīng)用千所有采集時侶。）|P曲複式|二元皿*wr二|ABtq)SKHQ).|o000“”bws).%0014203040用于分ff的fit塊（JD儀ISG訊設(shè)置1察炮5制CMF2OA累A:LC-2OATB.LC-2OAI口介巖通麗口Mffiffi田田SS子洎且日m嘛同|代碼|用尸名HfJ無法初血化與IX丟炮的謹(jǐn)繪.2009-7-e1043W0238Abi.l3W分尿無法初始牝號LC察的15接.2009-7

15、-1044410 x23*8AkinLC軻分析無旅初能化與1易坡的連熱.20(-7-10452S0238Aditin1賣時分折三口満n.k日志文件/-1彳2TC25SGB斤r.llL卩開始C003LC-2OATi!離缶議紀(jì)計瞎fE說舅6血*融相工低站1察集停:）目opr*lion_auiutl霽LCJW分析(fit廠呂來名-畫圖u1108|4、運行a、單次運行單擊單次運行，出現(xiàn)對話框，選擇已經(jīng)編輯的方法，輸入文件名，輸入樣品瓶，樣品架和樣品的體積，單擊確定可以進行樣品的分析。點擊輔助欄停止或者停止的快捷鍵，可以將分析停止。b、批處理運行單擊批處理，打開二級菜單，單擊向?qū)?，可以新建，也可以附加?/p>

16、個批處理文件。選擇方法文件，輸入開始樣品瓶，樣品架，進樣體積。下一步。輸入樣品組數(shù)，選擇標(biāo)準(zhǔn)品和未知。下一步。輸入標(biāo)準(zhǔn)品名字，ID,校準(zhǔn)級別，數(shù)據(jù)文件名。下一步。輸入未知品名字，ID,數(shù)據(jù)文件名。下一步。下一步，完成。出現(xiàn)批處理文件。另存批處理文件。單擊批處理開始，開始分析樣品。-畫JMl用戶名|代瑪|OxlTZbAteio0 x2291Abi0LT24AorlcSa*l132009062?102156lcbC091CVLaSlvtMsorkSMlma2OO9W271O215aicb用1實打分析（儀.H件夾C3SoZaMlFrjellUS!.9tS1實時分析1荽時分箝KA90讎魏勰晉鶉黑胡B0

17、mn司.便用方?jīng)苤叙Фㄊ录Q行目動測r.分贛|押卑1|禪品累名尊|禪品名|祥品n祥品尖空分荷類空方旅文件MK文件IU9J廠3E世檢査撫集）目動進g廠幵對悍品HI#駅A尺u.uNPn慕B圧00NF*轟A少-92icfk-92kfi泉E朋未運:田ILIK400C16:24S5-aCDSIt處理&異-標(biāo)能虹批處JTff恰說明開3懣打.可刁満息人日志文件/皿樣曲中授有放冒樣曲i.結(jié)雯步運行.申文作tfHiQ）s（r）儀號x）批處躍Q）TMQ）口a）feqpDfH営PX室曠匚口W夷-扌町R；=丿弗3M為芻”/屜方箍文件緋品累名林I祥品名丨V&11I律品類屋分祈類憂nACVLakSl*cVorkXS32O

18、O9O627IQ2IS0lcb0091CVLOS41vaLiDl?rjcll子韻且ir王時勺折1實時卻析1工時分析IAQVQC祁品廠棲用分關(guān)中的相同IT呂麗匕禪序列中的標(biāo)確位匸枠品鉗魁：上-步）|下-步a）|取悄|幫肋|境冃100L/鍛度B00*sMmJcrsteMMgwaesaBsS6Jtaau)seoa-口qEFJL唱鬥歸口心甬呷吏IFt皺3國豎叵人區(qū)1甘豐*:厶1.0。10=$|=丫：$|一5一lx畫一m-mllnIB一一ikhm一耳第-agIM對-tan一awsw-y-Im一|善-ITSI一ng一一0】tssl-alM一HsPDAMMrniK那弘Am圳泊豐、aKLOSs.:$5-1ro

19、r5sMlu!a2an06mR一selcb1【009二CVL*ks2iMl5-lorksMl&wd2009062nQ2gleb1x32009-6-272009-4,27_o:lt502255-023R_lalJE0JL72bAs-10 x2291A9-iox-sdArillIfflT*IXQfswIX*卑牟戢K料BT&tFn25SCI?seH8sea_eH凰-K甘衣cU-Absoym:$:=岸口|HID31鐲爐sIL中一lxis-fi-:-istm-MnJF.I?LF_gsqii?rIi=s7Eap-f4laNRD3A.S覧latrBO988-ssmillmafasfia41餐喬象!3S*nr

20、owsTl血，區(qū)p皿蓉聲基ns_d_dIL1!*艮iwilwl_IJiTn冊矍1;?上醪1o5ITsT-g,1-ll-.T一注舶一!口OSS.SIfflTer3掙MssHltr*F#s:=onlum*l孑R3R*wffl5、關(guān)機樣品分析完畢，按照色譜柱的沖洗要求進行沖洗。沖洗完后，儀器參數(shù)視圖，將總流速設(shè)為0，下載。然后單擊儀器開關(guān)，關(guān)閉軟件，最后將電源關(guān)掉，關(guān)閉UPS。6、積分單擊再解析，打開已經(jīng)完成的數(shù)據(jù)，會看到數(shù)據(jù)、方法、報告格式、批處理、全部文件形式。點擊分析圖標(biāo)，選擇多色譜，提取所要波長下的峰。在積分頁面，選擇通道，半峰寬，斜率，最小峰面積，一般選擇面積選項。識別頁面，利用時間窗或時

21、間帶限制峰。也可以選擇積分頁面的程序，進行手動積分。如果不了解方法，可以單擊幫助。點擊確定，分析完成。結(jié)果在視圖，峰表內(nèi)查看。吩】IX再析（Adn）-PDAMftOi樣Al.led丈件*（!）狽S（y）方；）比110布局gTMO）口a）Bb）腫二4mx幀文件名修改日期nnlttTu祥徉徉徉薦徉徉徉存nnnnntt-5-255-235-23Y-a-29-25公公公公XX邊SH5-295-295r29x0909090909090960900-(-09-09-CCCCCCCCCUOCCCCCCCCC2|21212|2(2|2|2|2|2|212|22|2(2|212|2|2|fm0.01.0zoC0

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31、t&8QaSofiafiaSaSaBaSaSaSa8牡SLISttJi卑|#!4灶|牡ttfitft用聞何苗儷的苗聞也也聞閔苗ErILOk9、報告編輯單擊報告模板，拖動到報告模板中即可，然后另存為報告格式文件顯示報告，將數(shù)據(jù)拖動到報告模板中即顯示報告。Vlix兩歸析(A-I.-*!I,-fri*一ffi*-f:Flj*-f:l.-i*三：I.y13I陽口期20O9-Z20O9-S-2!.12009-&-r20O9-S-22009-5-2!2CCT-W!20O-5-220O9-5-22009-5-2!2009-$20O9-Z：，：，:：.Id-：r20O9-2120O9-S-2*200-5-2!

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33、動泵而造成柱塞桿的干磨。每天使用后應(yīng)將整個系統(tǒng)管路中的緩沖液體沖洗干凈，防止鹽沉積，整個管路要浸在無緩沖的溶液或有機溶劑中。長期不用也要定期開泵沖洗整個管路。要用HPLC級試劑。輸液管前端要用燒結(jié)不銹鋼沉子過濾流動相。要注意防止管路阻塞造成壓力過高而損壞儀器。壓力下限應(yīng)設(shè)置在0.5IMPa，以防止儲液器中的流動相被抽干或嚴(yán)重滲漏而引起柱塞的干磨。2、流動相的使用：必須使用HPLC級或相當(dāng)于該級別的流動相，并先經(jīng)0.45pm薄膜過濾。過濾后的流動相必須經(jīng)過充分脫氣，以除去其中溶解的氣體O2等，如不脫氣易產(chǎn)生氣泡、基線噪聲增加、靈敏度下降，甚至無法分析。如果管路中使用peek樹脂部件，不可使用濃硫

34、酸、濃硝酸、二氯乙酸、丙酮、四氫呋喃、二氯甲烷、氯仿和二甲基亞砜等試劑。特別注意HPLC使用過后的系統(tǒng)清洗：含有緩沖溶液流動相的清洗方法：a、先用100%的純水沖洗，打開排放閥，用35ml/min的流量，洗20min左右后停泵，主要是針對吸液系統(tǒng)、泵頭、進出口單向閥等體積較大的空間的清洗。b、再用95/5的甲醇/水清洗整個系統(tǒng)，關(guān)閉排放閥，用1ml/min的流量，洗3060min后停泵，主要是用水清洗整個系統(tǒng)中的鹽，用5%的甲醇主要是為了保護色譜柱。c、最后用100%的甲醇清洗整個系統(tǒng)，用1ml/min的流量，洗2min左右，然后關(guān)機。如果流動相中不含鹽，則只使用上述第三步清洗即可。3、更換流動相：在分析過程中，有時需要更換流動相進行分析。一定要注意前一種使用的流動相和所更換的流動相是不是能夠相溶。如果前一種使用的流動相和所更換的流動相不能夠相溶，要采用一種與這二種需更換的流動相都能相溶的流動相進行過濾、清洗。較為常用的過濾流動相為異丙醇，但實際操作中要看具體情況而定，原則就是采用與這二種需更換的流動相都能相溶的流動相。一般清洗時間為3040分鐘，直至系統(tǒng)完全穩(wěn)定。更換流動相時，要用100ml的燒杯，放入需要更換的流動相，將慮頭放入燒杯中，上下反復(fù)沖洗，然后將排液閥逆時針180度，purge。然后將排液閥順時針180度。儲液器的注意事項：保持