食品安全性評價課件

1、1第六章 食品安全性的評價第1頁，共48頁。2【目的要求】掌握食品安全性評價的相關(guān)概念掌握食品安全性毒理學(xué)評價的階段和試驗(yàn)內(nèi)容第2頁，共48頁。3食品安全性評價：是指對食品中任何組分可能引起的危害進(jìn)行科學(xué)測試，得出結(jié)論，以確定該組分究竟能否為社會或消費(fèi)者接受，據(jù)此制定相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)的過程。第3頁，共48頁。4目的：闡明某種食品是否可以安全食用，食品中有關(guān)危害成分或物質(zhì)的毒性及其風(fēng)險(xiǎn)大小，利用毒理學(xué)資料確認(rèn)該物質(zhì)的安全劑量，以便通過風(fēng)險(xiǎn)評估進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)控制。第4頁，共48頁。5對象：用于食品生產(chǎn)、加工和保藏的化學(xué)和生物物質(zhì)食品在生產(chǎn)、加工、運(yùn)輸、銷售和保藏過程中產(chǎn)生和污染的物質(zhì)新技術(shù)、新工藝和新資源及加

2、工食品等第5頁，共48頁。66.1 食品安全性評價原理一、毒理學(xué)基本概念毒理學(xué)是研究化學(xué)性、物理性、生物性等有害因素對生物體特別是對人體產(chǎn)生的危害作用及機(jī)制的科學(xué)。通過對危害的研究評價提出對各種危害因素的管理措施，保障人民健康。食品毒理學(xué)是一門研究存在或可能存在于食品中稱為毒物的小分子物質(zhì)的種類、含量、分布范圍、毒性及其毒性反應(yīng)機(jī)理的科學(xué)。第6頁，共48頁。7毒物 在一定條件下，較小劑量即對機(jī)體造成損害作用或使機(jī)體出現(xiàn)異常反應(yīng)的外源化學(xué)物。 Paracelsus經(jīng)典之言：所有物質(zhì)都是毒物，沒有物質(zhì)不是毒物，唯一的區(qū)別是它們的劑量。第7頁，共48頁。8外源化合物： 存在與人類生活的外界環(huán)境中，可

3、能與機(jī)體接觸并進(jìn)入機(jī)體，在體內(nèi)呈現(xiàn)一定的生物學(xué)作用的化學(xué)物質(zhì)，又稱“外源生物活性物質(zhì)”，包括人工合成和自然界存在的外源物。內(nèi)源化合物： 是指機(jī)體內(nèi)原已存在的和代謝中所形成的產(chǎn)物或中間產(chǎn)物。第8頁，共48頁。9毒性 指外源化學(xué)物與機(jī)體接觸或進(jìn)入機(jī)體后，對機(jī)體引起損害作用的相對能力。毒性大小與機(jī)體接觸毒物的條件有關(guān)，如接觸劑量、途徑和頻度等。甲基汞具有親脂性，對大腦內(nèi)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生毒性，但其濃度遠(yuǎn)低于肝臟和腎臟。第9頁，共48頁。10二、常用毒性指標(biāo) 致死劑量（lethal dose） 是指某種外源化學(xué)物能引起機(jī)體死亡的劑量。絕對致死劑量（LD100）：指外源化學(xué)物引起一群受試動物全部死亡的最

4、低劑量最小致死劑量（LD01）：指外源化學(xué)物使受試動物群體中僅引起個別發(fā)生死亡的劑量半數(shù)致死劑量（LD50）：指外源化學(xué)物能引起一群動物50%死亡的劑量或濃度最大耐受劑量（LD0）：指藥物在除急性毒性動物實(shí)驗(yàn)外的實(shí)驗(yàn)(短期重復(fù)實(shí)驗(yàn)、亞慢性毒性實(shí)驗(yàn)、慢性毒性實(shí)驗(yàn))中不引起實(shí)驗(yàn)動物死亡的最大劑量或濃度。第10頁，共48頁。11表1 化學(xué)物質(zhì)的毒性分級第11頁，共48頁。12最小有作用劑量 又稱中毒閾值或中毒閾劑量，指在一定時間內(nèi)，一種外源化學(xué)物按一定方式或途徑與機(jī)體接觸，并使某項(xiàng)靈敏的觀察指標(biāo)開始出現(xiàn)異常變化或機(jī)體開始出現(xiàn)損害作用的最低劑量。 嚴(yán)格地講，最小有作用劑量不應(yīng)該叫做“有作用”劑量，而應(yīng)

5、該是“觀察到作用”的劑量。因此，最小有作用劑量的確切概念為觀察到最低作用劑量或觀察到最低有害作用劑量。第12頁，共48頁。13最大無作用劑量 指某種外源化學(xué)物在一定時間內(nèi)按一定方式或途徑與機(jī)體接觸后，根據(jù)目前的認(rèn)識水平，用最靈敏的試驗(yàn)方法和觀察指標(biāo)，未能觀察對機(jī)體造成任何損害作用或使機(jī)體出現(xiàn)異常反應(yīng)的最高劑量。 最大無作用劑量又稱為未觀察到作用的劑量或未觀察到損害作用的劑量。第13頁，共48頁。14每日容許攝入量(ADI) ：指人類終生每日隨同食物、飲水和空氣攝入的某一外源化學(xué)物，對健康不致引起任何可觀察到損害作用的劑量。ADI=NOEL（最大無作用劑量）/SF（安全因子）SF一般取100，2

6、00根據(jù)ADI，再計(jì)算每種食品中安全添加劑量，保證隨著食品進(jìn)入人體的物質(zhì)總量低于ADI第14頁，共48頁。15三、劑量-反應(yīng)關(guān)系（一）劑量與反應(yīng)劑量 給予機(jī)體的數(shù)量或與機(jī)體接觸的數(shù)量常以mg/kg體重、mg/m3空氣、mg/L水為其劑量單位第15頁，共48頁。16效應(yīng)（effect）：指一定劑量外源化學(xué)物與機(jī)體接觸后所引起的生物學(xué)改變反應(yīng)（response）：指一定劑量外源化學(xué)物與機(jī)體接觸后，呈現(xiàn)某種效應(yīng)并達(dá)到一定程度的比率，或者產(chǎn)生效應(yīng)的個體數(shù)在某一群體中所占的比率。第16頁，共48頁。17劑量-反應(yīng)關(guān)系 毒理學(xué)的重要概念，如果要確定機(jī)體的某種損害作用是由某種外源化學(xué)物所引起，除過敏反應(yīng)外，

7、一般應(yīng)存在劑量-反應(yīng)關(guān)系。第17頁，共48頁。18劑量-反應(yīng)關(guān)系類型量反應(yīng)（graded reponse）有強(qiáng)度和性質(zhì)的差別變化的程度可用計(jì)量單位表示，效應(yīng)的觀察結(jié)果為計(jì)量資料，如血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶改變多少單位質(zhì)反應(yīng)（quantal reponse）沒有強(qiáng)度的差別效應(yīng)的觀察結(jié)果為計(jì)數(shù)資料，不能用具體的定量數(shù)值表示只能用“陰性或陽性”、“有或無”來表示，如死亡或存活第18頁，共48頁。19劑量-反應(yīng)曲線 劑量-反應(yīng)關(guān)系可以用曲線表示，以劑量為橫坐標(biāo)，以表示量反應(yīng)強(qiáng)度的計(jì)量單位或表示質(zhì)反應(yīng)的百分比為縱坐標(biāo)，建立曲線 基本類型：直線S形曲線拋物線第19頁，共48頁。20直線型化學(xué)物劑量的變化與效應(yīng)強(qiáng)度或

8、反應(yīng)率的改變呈正比見于某些體外試驗(yàn)中的一定劑量范圍內(nèi)，在生物體內(nèi)較少見第20頁，共48頁。21拋物線型曲線先陡峭后平緩，最初隨劑量增加，曲線增高急速，隨后變得緩慢，呈拋物線型。如將劑量換為對數(shù)值，則拋物線型曲線呈一直線常見于劑量-反應(yīng)曲線第21頁，共48頁。22形曲線型 曲線先平緩、后陡峭，最后趨于平緩，呈“”狀，表明在低劑量范圍內(nèi)，隨著劑量增加，反應(yīng)或效應(yīng)強(qiáng)度增高較為緩慢，劑量較高時，反應(yīng)或效應(yīng)強(qiáng)度也隨之急速增加，劑量繼續(xù)增加時，反應(yīng)或效應(yīng)強(qiáng)度增高又趨于緩慢 多見于劑量-反應(yīng)關(guān)系中第22頁，共48頁。23四、毒物在體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)運(yùn)與轉(zhuǎn)化生物轉(zhuǎn)運(yùn)：毒物在體內(nèi)的吸收、分布及排泄。生物轉(zhuǎn)化：代謝過程

9、消除過程：由于代謝和排泄過程通常是不可逆的，故合稱為消除過程。第23頁，共48頁。24 （一）生物膜與生物轉(zhuǎn)運(yùn)1 細(xì)胞膜由流動的雙脂層和嵌在其中的蛋白 質(zhì)組成。2 磷脂分子以疏水性尾部相對，極性頭部朝向水相組成生物膜骨架3 蛋白質(zhì)或嵌在雙脂層表面，或嵌在其內(nèi)部，或橫跨整個雙脂層，表現(xiàn)出分布的不對稱性。生物膜流動鑲嵌模型第24頁，共48頁。25生物轉(zhuǎn)運(yùn)的方式 簡單擴(kuò)散 被動轉(zhuǎn)運(yùn) 生物轉(zhuǎn)運(yùn) 濾過 主動轉(zhuǎn)運(yùn) 特殊轉(zhuǎn)運(yùn) 促進(jìn)擴(kuò)散 胞飲 其它特殊轉(zhuǎn)運(yùn) 吞噬 第25頁，共48頁。26（二）食品毒物的吸收吸收：化學(xué)物經(jīng)各種途徑透過細(xì)胞膜進(jìn)入血液的過程，稱為吸收。吸收的主要途徑：胃腸道、呼吸道、皮膚1、消化系

10、統(tǒng)吸收胃腸道吸收胃腸道是毒物吸收的最重要途徑之一，毒物在胃腸道中的吸收可在任何部位進(jìn)行，但主要在小腸。吸收的方式主要通過簡單擴(kuò)散，還可通過濾過，胞飲或吞噬和主動轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)第26頁，共48頁。272、經(jīng)呼吸道吸收 肺是呼吸道中主要的吸收器官，經(jīng)肺吸收的毒物主要是氣態(tài)、揮發(fā)性液體以及氣溶膠。經(jīng)肺吸收的毒物不經(jīng)肝臟的生物轉(zhuǎn)化，直接進(jìn)入體循環(huán)而分布到全身。氣體、蒸汽與氣溶膠的吸收不同 第27頁，共48頁。283、經(jīng)皮膚吸收 皮膚不具有高度通透性 經(jīng)皮膚吸收的毒物有芥子氣、路易式毒氣、沙林等化學(xué)武器以及許多農(nóng)藥（有機(jī)磷農(nóng)藥），如氧化樂果、磷胺等 第28頁，共48頁。29（三）食品毒物的分布與蓄積1、分布（

11、1）食品中毒物的轉(zhuǎn)移和分布 是指在消化道被吸收的毒物，通過各種生理屏障經(jīng)血液循環(huán)分布于全身各組織器官的過程。（2）影響毒物在體內(nèi)分相的因素 各組織器官的血流量毒物與血漿蛋白的結(jié)合率、毒物與組織的親和力、血腦屏障以及體液pH和毒物的理化性質(zhì) 第29頁，共48頁。302、蓄積（1）蓄積作用包括兩種方式： 物質(zhì)蓄積和功能蓄積（2）儲存庫： 血漿蛋白儲存庫；肝，腎儲存庫 脂肪儲存庫；骨骼儲存庫第30頁，共48頁。31（四） 有毒物質(zhì)的生物轉(zhuǎn)化生物轉(zhuǎn)化：系指毒物在體內(nèi)發(fā)生的化學(xué)變化。對于大多數(shù)毒物來說，在體內(nèi)經(jīng)生物轉(zhuǎn)化后失去毒理活性，并被酶轉(zhuǎn)化為極性高的水溶性代謝物而利于排出體外。生物轉(zhuǎn)化部位：主要在肝

12、臟。 第31頁，共48頁。32（五）食品毒物的排泄1 排泄：是指化學(xué)物及其代謝產(chǎn)物向機(jī)體外轉(zhuǎn)運(yùn)的過程。2 排泄的途徑 經(jīng)腎臟排出（毒物的主要排泄器官） 經(jīng)肝臟排泄（主要的生物轉(zhuǎn)化器官） 經(jīng)肺排出（主要排泄揮發(fā)性物質(zhì)） 其他排泄途徑（消化系統(tǒng)、乳汁、腦脊液、頭發(fā)、指甲、汗腺、唾液）第32頁，共48頁。336.2食品安全性毒理學(xué)評價程序安全性毒理學(xué)評價：通過動物實(shí)驗(yàn)和對人群的觀察，闡明待評物質(zhì)的毒性及潛在的危害，決定其能否進(jìn)入市場或闡明安全使用的條件，以達(dá)到最大限度的減小其危害作用、保護(hù)人民身體健康的目的第33頁，共48頁。34食品安全性評價原則凡屬我國仿制的化學(xué)物質(zhì)，如多數(shù)國家已允許使用，并有安

13、全性證據(jù)，或WHO已訂有ADI，同時又能證明我國產(chǎn)品與國外產(chǎn)品一致，一般進(jìn)行第1、2階段后，即可進(jìn)行評價，并允許用于食品，制訂使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。凡我國創(chuàng)造的新化學(xué)物質(zhì)4個階段試驗(yàn)凡屬與已知物質(zhì)（指經(jīng)過安全評價并允許使用）的化學(xué)結(jié)構(gòu)基本相同的衍生物前3個階段試驗(yàn)決定第4階段試驗(yàn)采用分階段的原則，即各種毒性試驗(yàn)按一定順序進(jìn)行。第34頁，共48頁。35食品安全性毒理學(xué)評價程序一、參照標(biāo)準(zhǔn)：食品安全性毒理學(xué)評價程序和方法GB15193-2003二、分四階段試驗(yàn)：第一階段：急性毒性試驗(yàn)第二階段：遺傳毒性試驗(yàn)（蓄積毒性、致突變試驗(yàn)）第三階段：亞慢性毒性和代謝試驗(yàn)第四階段：慢性毒性試驗(yàn)（包括致癌試驗(yàn)）第35頁，

14、共48頁。36第一階段 急性毒性階段目的：了解受試物毒性強(qiáng)度、性質(zhì)和可能的靶器官，為選擇進(jìn)一步毒性試驗(yàn)的劑量和毒性判定指標(biāo)提供依據(jù)項(xiàng)目：測定經(jīng)口LD50結(jié)果判定：當(dāng)LD5010倍人的可能攝入量時：應(yīng)放棄當(dāng)LD5010倍人的可能攝入量時：進(jìn)入下一階段毒理學(xué)試驗(yàn)當(dāng)LD50為人的可能攝入量10倍左右時：應(yīng)進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)，或用另一方法驗(yàn)證 第36頁，共48頁。37 急性毒性：指人或動物一次或24 h之內(nèi)多次接觸外源化學(xué)物后，在短期內(nèi)所發(fā)生的毒性效應(yīng)，包括致死效應(yīng) 試驗(yàn)設(shè)計(jì)要點(diǎn)動物選擇劑量分組染毒途徑試驗(yàn)期限觀察指標(biāo)第37頁，共48頁。38第二階段 遺傳毒性試驗(yàn)?zāi)康模簩κ茉囄镞z傳毒性和是否具有潛在的致癌性

15、進(jìn)行篩選項(xiàng)目： Ames試驗(yàn)為首選小鼠骨髓微核試驗(yàn)或骨髓細(xì)胞染色體畸變分析小鼠精子畸形試驗(yàn)睪丸染色體畸變分析或顯性致死試驗(yàn)第38頁，共48頁。39結(jié)果判定3項(xiàng)為陽性：可能具有遺傳毒性和致癌性，應(yīng)放棄2項(xiàng)為陽性：且短期喂養(yǎng)試驗(yàn)有顯著毒性作用， 應(yīng)放棄；如短期喂養(yǎng)試驗(yàn)有可疑毒性作用，則根據(jù)重要性和可能攝入量 權(quán)衡利弊1項(xiàng)為陽性：從備選遺傳毒性試驗(yàn)中選擇2項(xiàng)試驗(yàn) 所選2項(xiàng)均為陽性，應(yīng)放棄 1項(xiàng)為陽性， 短期喂養(yǎng)試驗(yàn)和傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)未見明顯毒性和致畸性時，進(jìn)入第三階段4項(xiàng)均為陰性：進(jìn)入第三階段第39頁，共48頁。40主要致突變試驗(yàn)Ames試驗(yàn)微核試藥哺乳動物細(xì)胞基因突變試驗(yàn)顯性致死試驗(yàn)染色體畸變試驗(yàn)姐妹

16、染色單體交換試驗(yàn)程序外DNA合成試驗(yàn)果蠅伴性隱性致死試驗(yàn)單細(xì)胞凝膠電泳試驗(yàn)小鼠淋巴瘤試驗(yàn)第40頁，共48頁。41第三階段 亞慢性毒性試驗(yàn)?zāi)康模河^察較長時間以不同劑量水平喂養(yǎng)后的毒性作用性質(zhì)和靶器官；初步確定NOEL；為慢性毒性和致癌試驗(yàn)的劑量選擇提供依據(jù)；了解受試物對動物繁殖及對子代的致畸作用項(xiàng)目：90d喂養(yǎng)試驗(yàn)和繁殖試驗(yàn)結(jié)果判定：NOEL100倍人的可能攝入量：表示毒性較強(qiáng)，應(yīng)放棄100倍 NOEL 300倍：進(jìn)行慢性毒性試NOEL300倍：進(jìn)行安全性評價第41頁，共48頁。42第三階段 代謝試驗(yàn)?zāi)康模毫私馐茉囄镌隗w內(nèi)的吸收、分布和排泄的速度及蓄積性了解有無毒性代謝產(chǎn)物形成尋找可能的靶器官為

17、選擇慢性毒性試驗(yàn)的動物種系提供依據(jù)第42頁，共48頁。43第四階段 慢性毒性試驗(yàn)（包括致癌試驗(yàn)）目的：了解長期接觸受試物后的毒性作用，尤其是進(jìn)行性或不可逆的毒性作用了解是否有致癌作用確定NOEL，為最終評價受試物能否用于食品提供依據(jù)結(jié)果判定：NOEL50倍人的可能攝入量：表明毒性較強(qiáng)，應(yīng)放棄50倍 NOEL 100倍：經(jīng)安全性評價后再作決定NOEL100倍：可考慮用于食品第43頁，共48頁。44致癌試驗(yàn)一、短期試驗(yàn)（篩選作用）1、致突變試驗(yàn) Ames試驗(yàn)姐妹染色體交換試驗(yàn)小鼠淋巴瘤試驗(yàn)2、細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn) 觀察細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞生長能力、生化表型等變化，以及移植于動物體內(nèi)能形成腫瘤的能力 第44頁，共48頁。453、哺乳動物短期致癌試驗(yàn)小鼠肺腫瘤誘發(fā)試驗(yàn)大鼠肝轉(zhuǎn)變灶誘發(fā)試驗(yàn)小鼠皮膚腫瘤誘發(fā)試驗(yàn) 雌性SD大鼠乳腺癌誘發(fā)試驗(yàn)二、哺乳動物長期致癌試驗(yàn)第45頁，共48頁。46目前，各國都在積極探索更合適的食品風(fēng)險(xiǎn)評估方法，這也是食品安全研究新的領(lǐng)域。評價食品的安全不能用危害的有無，而應(yīng)該是風(fēng)險(xiǎn)的高低，將風(fēng)險(xiǎn)盡可能的降低致可接受的水平第46頁，共48頁。練習(xí)題1、體對化學(xué)毒物的處置可簡單的分成相互有關(guān)的吸收、分布、代謝及排泄四個過程。屬于生物轉(zhuǎn)化的是哪個過程？（ ）A吸收B分布 C代謝D排泄2、機(jī)體解毒可以有幾種不同的途徑