大黃素的介紹

1、大黃素1大黃素的理化性質(zhì) 為橙色針狀結(jié)晶(乙醇或12毫米下減壓升華),熔點256257。具有蒽醌的特殊反應。幾乎不溶于水，溶于乙醇及堿溶液，溶解度25(g/100ml飽和液)：乙醚0.140、氯仿0.071、苯0.041、四氯化碳0.01。溶于苛性堿水溶液、碳酸鈉水溶液，氨溶液中顯櫻紅色。 2一、微乳液相色譜法 方 法：采用微乳液相色譜法 。以 微 乳為 流動 相，通 過 對影 響分 離度 和保 留 時間的因素進 行考 察，優(yōu)化最佳微乳體系 組 成為 2.5（W/V）十二 烷基 硫酸鈉 -0.1（V/V）正 辛烷-8.0（V/V）正丁醇 -0.5（V/V）三 乙胺（磷 酸調(diào) pH 值至 3.0

2、）；色 譜柱為 Hypersil ODS2（250 mm4.6 mm，5m），柱溫 為 28 ，流速為 1 mLmin ，檢測波長為 254 nm。 3實驗步驟1混合對照品溶液制備 取蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚對照品各適量，精密稱定，置于50mL容量瓶中，加適量甲醇超聲溶解，再加甲醇至刻度，搖勻，即得混合對照品溶液。臨用前用0.45m濾膜過濾，取續(xù)濾液進樣。2供試品溶液制備 取干燥后的各大黃藥材粉末（過四號篩），精密稱定，置具塞燒瓶中，精密加入甲醇25mL，稱定重量，加熱回流1h，放冷，再稱定重量，用甲醇補足失重，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液5mL，置燒瓶中，揮去溶劑，加8鹽

3、酸溶液10mL，超聲使溶解，再加氯仿10mL，加熱回流1h，放冷，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用少量氯仿分次洗滌燒瓶，洗液并入分液，分取氯仿層，酸液再用氯仿提取3次，每次10mL，合并氯仿液，揮去溶劑，殘渣加少量甲醇使溶解，定量轉(zhuǎn)移至10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得供試品溶液。臨用前用0.45m濾膜過濾，取續(xù)濾液進樣。 43 微乳流動相的制備 將SDS、正丁醇、正辛烷及含0.5三乙胺的水溶液按順序，超聲15min，即得透明穩(wěn)定的微乳，用磷酸調(diào)pH值至3.0，經(jīng)0.45m濾膜過濾，備用。4 色譜條件 色譜 柱：Hypersil ODS2（250 mm4.6 mm，5 m）；流速：1mLmin ；

4、柱溫：28 ；檢測波長：254 nm；流動相：2.5W/V）SDS-0.1（V/V）正辛 烷-8.0（V/V）正丁 醇-0.5（V/V）三乙 胺（磷酸調(diào) pH值至 3.0）；進樣量：15 L。色譜見圖 1。 0 5 10 15 20 25 30 35 min -微乳液相色譜法同時測定大黃中5種蒽醌類衍生物的含量實驗步驟5微乳液相色譜法的特點 微乳液相色譜（MELC）法是一項液相色譜新 技術(shù) ，它 不僅存 在常規(guī) 色譜的分 離機制 ，還存在 微乳液滴內(nèi) 外相 之 間的 分配 。 其與 常規(guī) 高 效液 相色 譜（HPLC）法相比 ，具有分 離效率高和分離速度快的優(yōu)越性，可用于復雜樣品的分離；血 清

5、、尿液經(jīng) 過簡單的稀釋 后便可以直 進樣分析，無需預處理；在梯度洗脫和低紫外波 長（190 nm）檢測 方面也有一 定的優(yōu)勢對于 MELC法的應 用，主 要涉及化學藥品中 多種成 分、藥物制 劑以及 生物樣 品的分析，而用于中藥成 分的分析 較少。筆 者采用 MELC法同 時測定了 大黃中 5種蒽 醌類 衍生 物的 含量 ，方法 簡便 、準確 、可靠 ，取得 了滿 意結(jié)果。67方法：采用MDS-8型多通量密閉微波化學工作站，以甲醇為溶劑，160微波萃取制備供試品溶液；UPLC分析條件為WatersAcquityHClassUPLC系統(tǒng)，BEHC 色譜柱（2.1mm100mm，1.7 m）乙腈水

6、為流動相梯度洗脫 流速0.5mLmin1, 柱溫30, 檢測波長226nm 。二、 微波萃取-UPLC 法8 1混合對照品儲備溶液的制備 分別取虎杖苷、白藜蘆醇、蒽苷B、大黃素和大黃素甲醚對照品適量，精密稱定置于同一10mL量瓶中，加甲醇溶解并定容，混勻，制成質(zhì)量濃度分別為0.444，0.240，0.180，0.403，0.044gL1的溶液 作為混合對照品儲備液。2供試品溶液的制備 取本品粉末（過3號篩）0.1g，精密稱定置50mL微波萃取罐中，精密加入25mL甲醇，160微波萃取10min，放冷，用甲醇補足失重，濾過，取續(xù)濾液用微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得。3標準曲線：將混合對照品儲備液分

7、別用甲醇稀釋至2，4，8，16，32，64倍，精密吸取上述稀釋6份，每份約0.1g，精密稱定，分別照供試品溶液制液及儲備液各1L進樣，測定。分別以峰面積A為縱坐標，以進樣濃度X（gL ）為橫坐標繪制工作曲線，計算回歸方程。 _微波萃取-UPLC 同時測定虎杖中 5 種主要活性成分的含量實驗步驟9本研究的UPLC測定數(shù)據(jù)與文獻中對此5種活性成分的HPLC含量測定結(jié)果 比較基本一致，但 分析時間從62min以上縮短到12min以內(nèi)大大提高了工作效率；研究中對不同提取方式進行了比較,按上述色譜條件及樣品制備方法， 發(fā)現(xiàn)微波萃取10min對各成分的提取率明顯高于超聲30min，進一步提高了分析效率。因

8、此, 建立的虎杖多成分同時測定的微波萃取特別適用于中藥復雜體系的成分分析。微波萃取-UPLC的特點10三、高效毛細管電泳法建立高 效毛細管電泳（ HPCE） 法對三黃油擦劑中 的有效成分大黃素和大黃酚進行 含量測定。方 法： 采 用石英毛細管柱（ 65 cm 55 m，有效長度 50 cm） ，緩沖體系為 10 mmolL 硼砂 30 mmolL SDS 10% 乙醇，pH 值為 9 8，分離電壓 30 kV，檢 測波 長 254 nm。結(jié) 果： 大黃 素和 大黃 酚在 20 min 內(nèi)得 到很 好的 分離，分 別在 0 124 2 470 g L 、0 104 2 080 gL 線性關(guān) 系良好，平均回收 率分別為 99 2% 、98 6% 。11高 效 毛 細 管 電 泳 法 特 點高效液相色譜法用于測定 蒽