4.16.4.4.1細(xì)胞病理學(xué)技術(shù)制作規(guī)范及質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)-供參考

1、細(xì)胞病理學(xué)技術(shù)制作規(guī)范及質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)一、細(xì)胞學(xué)標(biāo)本的接收1.細(xì)胞學(xué)申請(qǐng)單和標(biāo)本的驗(yàn)收（1）細(xì)胞病理學(xué)室應(yīng)有專人負(fù)責(zé)細(xì)胞病理學(xué)標(biāo)本及申請(qǐng)單的驗(yàn)收，并嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)本驗(yàn)收簽名責(zé)任制。驗(yàn)收工作包括以下內(nèi)容。認(rèn)真核對(duì)每例送檢標(biāo)本和申請(qǐng)單，確保標(biāo)本和申請(qǐng)單一致。發(fā)現(xiàn)疑問應(yīng)及時(shí)與送檢科室聯(lián)系并在申請(qǐng)單上注明情況。認(rèn)真檢查送檢標(biāo)本及內(nèi)容物是否完整，盛具是否潔凈干燥，識(shí)別的標(biāo)簽是否牢附于容器上。申請(qǐng)單是否注明送檢標(biāo)本的目的和要求（包括特殊檢查要求，如免疫細(xì)胞化學(xué)染色、分子病理學(xué)檢測(cè)等）。仔細(xì)查閱申請(qǐng)單上各項(xiàng)是否按要求填寫清楚：包括患者的基本情況、送檢單位、送檢日期、送檢標(biāo)本類別、患者的臨床資料、化驗(yàn)室及影像學(xué)檢查

2、結(jié)果、既往細(xì)胞病理學(xué)檢查情況和臨床診斷等。申請(qǐng)單上要詳細(xì)記錄患者或家屬的明確聯(lián)系方式，以便必要時(shí)與患者或家屬聯(lián)絡(luò)。（2）用于細(xì)胞病理學(xué)檢查的標(biāo)本必須新鮮，力求有足夠數(shù)量，臨床取材后應(yīng)盡快送達(dá)細(xì)胞病理學(xué)室。（3）申請(qǐng)單中由臨床醫(yī)師填寫的各項(xiàng)內(nèi)容不得擅自進(jìn)行改動(dòng)。（4）下列情況者，標(biāo)本不予接收。申請(qǐng)單與相關(guān)標(biāo)本未同時(shí)送達(dá)細(xì)胞病理學(xué)室。申請(qǐng)單中填寫的內(nèi)容與送檢標(biāo)本不符。標(biāo)本上無患者姓名、科室等標(biāo)志。申請(qǐng)單上填寫的內(nèi)容自己潦草難以辨認(rèn)。申請(qǐng)單中漏填重要項(xiàng)目。沒有按照規(guī)范的方法進(jìn)行采集、運(yùn)送或保存的標(biāo)本。出現(xiàn)泄漏、損壞、碎裂，液體標(biāo)本干涸等不符合送檢要求的標(biāo)本。（5）細(xì)胞病理學(xué)室對(duì)不能接收的標(biāo)本及申請(qǐng)單

3、一律當(dāng)即退還送檢人，不予存放。2.申請(qǐng)單和標(biāo)本的編號(hào)、登記（1）驗(yàn)收標(biāo)本的人員應(yīng)在已驗(yàn)收的申請(qǐng)單上注明收到標(biāo)本的日期，及時(shí)準(zhǔn)確地進(jìn)行細(xì)胞病理學(xué)編號(hào)，并逐項(xiàng)錄入登記薄或計(jì)算機(jī)。（2）細(xì)胞病理學(xué)標(biāo)本、申請(qǐng)單、涂片、標(biāo)本登記薄或計(jì)算機(jī)內(nèi)的編號(hào)必須完全一致。二、細(xì)胞病理學(xué)基本技術(shù)操作1.取材和制片標(biāo)本一定要新鮮，接收標(biāo)本后應(yīng)立即涂片、固定和染色。不能立即涂片時(shí)，應(yīng)將標(biāo)本置于低溫或加入適量95%乙醇，短時(shí)間保存。目前采用的制片方法如下。（1）傳統(tǒng)涂片法 將標(biāo)本直接涂片于載玻片上，涂片面積易占玻片的1/2或2/3。（2）液基細(xì)胞學(xué)制片技術(shù) 目前主要有離心沉降式和過濾膜式液基細(xì)胞學(xué)制片技術(shù)，該項(xiàng)技術(shù)是將標(biāo)本

4、放入特定液體，在相關(guān)儀器上制片，可去除黏液、血液、炎細(xì)胞，使背景清晰，易于觀察。2.涂片的染色在宮頸細(xì)胞病理學(xué)檢查中首選染色方法是巴氏染色，非宮頸細(xì)胞病理學(xué)及穿刺細(xì)胞學(xué)涂片多選用蘇木素-伊紅染色（HE染色）或巴氏染色，酌情加做一些特殊染色（如抗酸染色等）和免疫細(xì)胞化學(xué)染色。3.細(xì)胞學(xué)印片細(xì)胞學(xué)印片除了可與術(shù)中冰凍切片或快速石蠟切片等并用、互補(bǔ)外，也可應(yīng)用于無冰凍切片機(jī)的基層醫(yī)院。印片的主要步驟如下。（1）以銳刀切開新鮮組織（碎小的組織根據(jù)情況可不比切開）。（2）用清潔的載玻片輕壓于組織剖面處，垂直適當(dāng)用力蘸取細(xì)胞，避免平行拖拉。（3）印片應(yīng)及時(shí)固定。4.細(xì)胞學(xué)新技術(shù)細(xì)胞病理學(xué)的制片技術(shù)除了傳統(tǒng)

5、的手工涂片、液基細(xì)胞學(xué)制片、細(xì)胞學(xué)印片等技術(shù)外。還可應(yīng)用以下技術(shù)。（1）雜交捕獲技術(shù)。（2）核酸原位雜交技術(shù)。（3）多聚酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)。（4）即時(shí)熒光定量PCR技術(shù)。（5）流式細(xì)胞術(shù)。（6）細(xì)胞學(xué)自動(dòng)閱片系統(tǒng)。（7）全自動(dòng)細(xì)胞DNA定量分析系統(tǒng)等。三、細(xì)針吸取細(xì)胞學(xué)技術(shù)操作1.適應(yīng)癥細(xì)針吸取細(xì)胞學(xué)的適應(yīng)癥廣泛，任何部位的腫物均可采用，尤其適用于因各種原因難以手術(shù)切除或活檢的病例，包括體表可觸及的病灶及在影像學(xué)等的引導(dǎo)下，對(duì)顱腦、胸腔、腹腔、盆腔等各深部臟器病變的穿刺。2.禁忌癥（1）有嚴(yán)重出血傾向或嚴(yán)重出血性疾病的患者（如血友病、血小板極度減少癥）及長期應(yīng)用抗凝血藥物的患者。（2）可疑

6、為動(dòng)靜脈畸形、頸動(dòng)脈體瘤、嗜鉻細(xì)胞瘤等患者。（3）肝包囊蟲病的患者，穿刺可以引起嚴(yán)重的過敏反應(yīng)，甚至休克致死，應(yīng)屬于禁忌癥。（4）重度肺功能不全，例如肺氣腫、肺動(dòng)脈高壓性心臟病、嚴(yán)重低氧血癥患者，以及劇烈咳嗽難以控制的患者。（5）不能配合、過分敏感及顧慮深重的患者慎用。3.穿刺前的準(zhǔn)備（1）簽署知情同意書 閱讀和在知情同意書上簽字是患者在穿刺檢查前必須履行的重要手續(xù)。在履行此項(xiàng)手續(xù)時(shí)，細(xì)胞病理醫(yī)師或臨床醫(yī)師可以通過知情同意書向患者解釋細(xì)針穿刺的操作過程、所達(dá)到的目的及診斷的準(zhǔn)確度，可以對(duì)患者提出的問題進(jìn)行恰當(dāng)?shù)慕獯穑换颊咭部梢粤私獯┐滩僮鬟^程中可能發(fā)生的意外，配合醫(yī)師防止穿刺操作過程中的意外發(fā)

7、生。（2）了解并記錄患者的家庭住址、電話號(hào)碼等聯(lián)系方式，便于隨訪。（3）穩(wěn)定患者情緒，解除恐懼心理和顧慮，了解有無呼吸、循環(huán)、神經(jīng)、造血系統(tǒng)等嚴(yán)重疾病。（4）了解病變大小、深度、表面是否光滑或粗糙。捫及腫塊質(zhì)地情況，如柔軟性、硬度、有無彈性等質(zhì)感、腫塊能否被壓縮、有無波動(dòng)感及體位移動(dòng)試驗(yàn)狀況、是否多個(gè)腫塊融合、腫塊活動(dòng)度與固定狀況、與周圍組織位置關(guān)系等。4.細(xì)針穿刺操作程序（1）選擇合適的體位及穿刺點(diǎn) 坐位適用于頭顱部、肩部、軀干等體表腫塊。臥位適用于軀干體表或深部器官、四肢病變與重癥患者等。胸膝臥位適用于會(huì)陰部、直腸內(nèi)與前列腺病變。穿刺點(diǎn)盡量避開疼痛敏感區(qū)域、大血管、神經(jīng)及易損傷的組織器官。

8、同時(shí)有原發(fā)灶與轉(zhuǎn)移灶的病變應(yīng)首選轉(zhuǎn)移灶實(shí)施穿刺。（2）腫物的固定 用左手拇指與食指（中指）捏起腫物，右手持針刺入腫塊。或用左手拇指或食指壓住腫物，使其固定于皮下或被推向一邊而不滑動(dòng)，針頭在指尖上方刺入腫塊。也可用拇指與食指捏住，或用食指與中指夾壓固定腫塊，手指盡可能靠近腫物，使皮膚繃緊，腫物突起，利于針刺。（3）消毒 局部皮膚常規(guī)消毒可分別選用3%碘酒與75%乙醇溶液。（4）進(jìn)針與標(biāo)本采集 固定腫塊，繃緊皮膚，手持穿刺器迅速刺入病變內(nèi)，拉針?biāo)óa(chǎn)生并保持負(fù)壓，朝不同方向提插針數(shù)次同時(shí)注意針頭柄部吸取物的出現(xiàn)。然后拔出穿刺針，壓迫局部針刺點(diǎn)數(shù)分鐘，直至無滲血，然后覆蓋創(chuàng)可貼或其他消毒敷料。（5）標(biāo)

9、本的移出與涂片 拔針后，迅速將吸取物噴射至平放的載玻片上。涂片時(shí)標(biāo)本應(yīng)涂抹于載玻片的一端，一般不超過2/3，避免在標(biāo)本原位置上來回涂抹，以免致細(xì)胞變形或破碎。涂片厚薄應(yīng)均勻，涂片太薄時(shí)細(xì)胞太少，太厚則細(xì)胞重疊，均會(huì)影像鏡下觀察。標(biāo)本涂片后，立即固定，常規(guī)進(jìn)行HE染色或巴氏染色。5.常見合并癥及處理（1）出血及血腫 表現(xiàn)為針眼處出血或青紫變硬。應(yīng)繼續(xù)用棉簽壓迫穿刺點(diǎn)510分鐘。（2）虛脫 表現(xiàn)為頭暈、惡心、嘔吐、甲床和口唇蒼白、意識(shí)恍惚、血壓下降、脈搏細(xì)速，虛汗，甚至?xí)炟?。此時(shí)應(yīng)予以安撫，并使患者取仰臥頭低位，雙腿墊高?；颊咄ǔＰ菹?020分鐘后即可緩解和恢復(fù)。如經(jīng)以上處理不緩解者，應(yīng)立即采取相

10、應(yīng)的急救措施。（3）氣胸 表現(xiàn)為輕微氣促，12小時(shí)可自行緩解，嚴(yán)重時(shí)應(yīng)予以相應(yīng)治療。（4）誤入氣管 表現(xiàn)為咳嗽及痰中帶血。囑咐患者咳嗽以排凈血痰。（5）感染 極為少見，對(duì)此操作者應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作并積極預(yù)防。一旦出現(xiàn)應(yīng)積極采取抗感染治療措施。（6）對(duì)嚴(yán)重合并癥的應(yīng)對(duì)措施 如發(fā)生大出血、休克、呼吸意外、心血管及腦血管意外時(shí)，應(yīng)積極采取搶救措施，同時(shí)與急診科聯(lián)系，迅速進(jìn)行臨床救治。6.操作記錄細(xì)針穿刺操作應(yīng)記錄在就診手冊(cè)或病歷中。敘述應(yīng)當(dāng)簡明扼要，內(nèi)容如下。（1）穿刺的具體時(shí)間。（2）穿刺體位及穿刺部位。（3）穿刺部位的肉眼特點(diǎn)描述，如腫塊的大小、形狀、質(zhì)地、與周圍境界、皮膚改變和有無紅腫熱痛等。

11、（4）局部消毒及使用器械，包括穿刺針。（5）穿刺經(jīng)過 包括進(jìn)針深度、提插針次數(shù)、穿刺針感、獲取標(biāo)本特點(diǎn)。（6）穿刺小結(jié) 通常應(yīng)記錄穿刺過程是否順利；有無意外發(fā)生，如出現(xiàn)意外，應(yīng)記錄處理方式及效果。四、細(xì)胞病理學(xué)室的基本設(shè)施及安全管理（1）細(xì)胞病理學(xué)室建筑及設(shè)施應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求、微生物和生物醫(yī)學(xué)病理科生物安全通用準(zhǔn)則和醫(yī)療技術(shù)規(guī)范病理學(xué)分冊(cè)中的規(guī)定。（2）應(yīng)包括細(xì)胞病理診斷室、細(xì)胞學(xué)標(biāo)本處理室、細(xì)胞學(xué)涂片技術(shù)室和細(xì)針穿刺室，有條件的醫(yī)療機(jī)構(gòu)可設(shè)立免疫細(xì)胞化學(xué)室和分子細(xì)胞病理室等。（3）應(yīng)保持工作場(chǎng)所的衛(wèi)生和整潔，有保證通風(fēng)、環(huán)境溫度和濕度的設(shè)施，持續(xù)的第三方監(jiān)控并記錄環(huán)境條件，如苯、

12、甲醛濃度，必須定期檢測(cè)，符合國家有關(guān)職業(yè)病防護(hù)的規(guī)定。有安全防護(hù)與急救設(shè)施及相關(guān)工作安全標(biāo)識(shí)。（4）生活區(qū)應(yīng)配備適宜的生活設(shè)施，包括衛(wèi)生、休息、更衣等場(chǎng)所和設(shè)施。休息區(qū)域工作區(qū)應(yīng)相對(duì)對(duì)立。（5）對(duì)于易燃、易爆、劇毒和有腐蝕性的危險(xiǎn)品，應(yīng)有安全可靠的存放場(chǎng)所。（6）各種標(biāo)本、污水和污液屬法定的醫(yī)療廢物，其處理設(shè)施須符合國家的有關(guān)規(guī)定。（7）儀器、設(shè)備的配置應(yīng)能滿足細(xì)胞病理學(xué)工作的需要，使用的儀器、設(shè)備應(yīng)符合國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，儀器、設(shè)備生產(chǎn)商和供應(yīng)商應(yīng)具有國家法律、法規(guī)所規(guī)定的相應(yīng)資質(zhì)。并應(yīng)能夠從市場(chǎng)上得到充足的儀器、設(shè)備所需耗材。（8）建立和實(shí)施細(xì)胞病理試劑與實(shí)驗(yàn)材料管理程序，包括試劑與材料的生產(chǎn)商

13、和供應(yīng)商資質(zhì)評(píng)估，試劑與材料的評(píng)估、選購、確認(rèn)、保存、使用、監(jiān)控以及庫存管理。試劑與材料的生產(chǎn)商和供應(yīng)商應(yīng)具有國家法律、法規(guī)所規(guī)定的資質(zhì)。選用的試劑與材料應(yīng)符合國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，有充分的外部供給和質(zhì)量保證服務(wù)，并對(duì)外部服務(wù)質(zhì)量進(jìn)行定期評(píng)審。建立試劑的確認(rèn)程序，包括實(shí)施確認(rèn)的人員、方法、質(zhì)量控制方法、接收標(biāo)準(zhǔn)。每批試劑投入使用前應(yīng)進(jìn)行確認(rèn)。建立試劑的庫存管理程序，包括試劑的儲(chǔ)存條件和庫存量的監(jiān)控。試劑應(yīng)在有效期內(nèi)使用。（9）應(yīng)遵守病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例、實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求和微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則中的規(guī)定。建立和實(shí)施細(xì)胞病理學(xué)工作中安全與衛(wèi)生管理程序，覆蓋從標(biāo)本接收到報(bào)告

14、發(fā)出整個(gè)過程。（10）建立和使用細(xì)胞病理學(xué)的計(jì)算機(jī)信息管理系統(tǒng)，對(duì)從標(biāo)本接收到報(bào)告發(fā)出整個(gè)過程實(shí)行計(jì)算機(jī)程序管理。必須采取措施保證數(shù)據(jù)安全，嚴(yán)禁非授權(quán)人員進(jìn)入計(jì)算機(jī)管理系統(tǒng)非法查詢、錄入和更改數(shù)據(jù)或程序。計(jì)算機(jī)管理軟件供應(yīng)商應(yīng)具備國家規(guī)定的資質(zhì)，并負(fù)責(zé)安裝、使用、維護(hù)方面的培訓(xùn)，提供計(jì)算機(jī)管理系統(tǒng)的操作和維護(hù)說明書。五、細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告的發(fā)送（1）細(xì)胞病理學(xué)室自接受送檢標(biāo)本至簽發(fā)細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書的時(shí)間一般為3個(gè)工作日。（2）因某種病因（特染、免疫細(xì)胞化學(xué)染色、疑難病例會(huì)診等）不能按期簽發(fā)的報(bào)告，應(yīng)以書面形式（遲發(fā)報(bào)告單）告知臨床醫(yī)師或患者。（3）細(xì)胞病理學(xué)室應(yīng)有專人發(fā)送細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告

15、書。住院患者的報(bào)告書發(fā)送至相關(guān)臨床科室，門診和外院患者的報(bào)告由各醫(yī)院自行定制。（4）細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書的經(jīng)收人員必須履行簽收手續(xù)。（5）已發(fā)出的細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書若被遺失，一般不予補(bǔ)發(fā)；必要時(shí)經(jīng)病理科主任同意方可補(bǔ)發(fā)。六、細(xì)胞病理學(xué)資料管理（1）細(xì)胞病理學(xué)檢查的文字資料、非文字資料以及其他相關(guān)資料均為有價(jià)值的醫(yī)學(xué)資料，均應(yīng)按照規(guī)定妥為保存。（2）必須設(shè)立細(xì)胞病理學(xué)檔案資料室，制定檔案資料管理制度（包括資料的歸檔、借用和歸還手續(xù)等），由專人管理。并應(yīng)積極實(shí)行資料的計(jì)算機(jī)管理化。（3）文字資料裝訂成冊(cè)保存至少15年。（4）找到惡性細(xì)胞或可疑惡性細(xì)胞的涂片應(yīng)保存至少15年，陰性涂片保存至診斷報(bào)告書發(fā)出后1年。（5）標(biāo)本原