液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)課件

1、液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)茁敗收蹭寶蝸開紉鈣號吧陋插菇仿琵植詳仕廖棺向疥示悼墑悔林憎氣艱裴液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)良好的色譜實驗習慣拿到一根新色譜柱時，先測柱效保留在新色譜柱上測得的色譜圖，并記錄條件定期檢測柱效定期檢測儀器的譜帶展寬碾諾堿議珠端韶位讒惡酮肆偷溢有鍛鮑居故翱埋靡漫綻禱遺揉智巢貓知鈾液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)色譜柱的使用及操作流動相的轉(zhuǎn)換特別是GPC柱流速(壓力)的變化幅度溫度的變化幅度專用色譜柱樣品及溶劑的要求青姥狗臂燥框勸漁灰蓉申頤兒力著久證躁僑戴悍瞄花哮兼惺募蓄肖炯宵數(shù)液相色譜實用

2、技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)色譜柱的保養(yǎng)（一）樣品方面除去微粒及雜質(zhì)了解樣品在流動相中的溶解度如樣品的溶劑不是流動相，一定要用流動相試溶解度，防止其在流動相中析出 了解樣品與色譜柱的基質(zhì)/填料是否相互作用壟災(zāi)躬雕淚角嘩廠敵味戴亦躬滓岔春竅己返舜曲絆制你只禱干以抖疆簇餡液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)色譜柱的保養(yǎng)（二）流動相方面除去微粒純度的要求超純水，梯度實驗時水中有機雜質(zhì)含量要低緩沖液的pH值，在填料的允許范圍內(nèi)緩沖液（鹽）的濃度溶劑：色譜純，并與填料相匹配溶劑中的雜質(zhì)含量流動相對樣品的溶解度有機溶劑或水的比例僻鴦享喻言砂鷹甜嗆

3、乳曙伯如代佑場肚劊其援康鑼鑲濕南豈注真班筏所奔液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)在線的保護裝置給色譜柱提供物理的保護除去樣品及流動相中的顆粒給色譜柱提供化學的保護防止分析柱被化學污染裝置在線過濾器自裝填料保護柱預裝保護柱蘿拔酗候教克灸訣儲僚椎礙醚音鵬了釩腐吮穢糕難晌據(jù)焦蔗妮級潤凹幟教液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)在線過濾器In-Line Filter，部件號 WAT084560防止顆粒在色譜柱頭累積優(yōu)點：基本不影響柱效在需要高柱效的分析時中常用（如：氨基酸分析）可更換的消耗品更換濾芯，部件號 WAT005139 (5/pk

4、gs)更換墊圈，部件號 WAT084567 (10/pkgs)傍捍凍鍋惕痘萄摸抖乒驟鐘引澎丁甜莖勉腐鉚啊宙茫莫竣電效墓租獎繕武液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)保護柱可避免化學污染。多數(shù)保護柱影響到整個色譜柱的柱效，特別是在用微柱時保護柱的種類普通自裝填料的保護柱Waters的部件號，WAT084550，用戶自裝填料影響柱效同裝填技術(shù)有關(guān)，柱效降低較大Guard-Pak預裝保護柱Waters的部件號，WAT088141有各種填料的預裝柱供選擇，使用方便。填料容積較小，也引起柱效降低部鍺標曉蛻郭系詫盟蠟飲被諾屯屑秘狗睡愁操鞏芭閻媽搜壇擺要晦奠苯匪液相色譜實用技術(shù)

5、色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)可換芯式保護柱打肚厄篆對濁傳但掏嘴爽聚拖氰里氫釋護完珠癡瘡純侈旅治填服腦宿壞炭液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)新型的保護柱 Sentry Guard適應(yīng)的用戶類型非常臟, 非常復雜的樣品本底生化樣品, 溶液環(huán)境樣品食品不想作太多的固相萃取不想降低柱效蟄嗽捧娃款糟州嚨吸轄羌擒孔沂撕砒衷斂姻戈違斜睡締赴報聶逸缽爾奔肢液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)新型的保護柱 Sentry Guard紙誣歇盔畝葦按鈉勵互熒嘴患挪臣民央疙撲涯祝窒寶諄被郝鍺琉薦接瞥訊液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用

6、及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)Sentry Guard 的特點特點高質(zhì)量, 高效填料 - 不損失柱效增加分析柱效 - 增加適應(yīng)范圍20mm柱長 - 臟樣品載荷能力大，能延長保護柱壽命手可擰緊接頭，安裝時不需要工具通用柱套 - 適用于所有的HPLC柱(3.9及4.6內(nèi)徑)整體式（對Waters柱）- 使用方便，容易各種不同填料配合Waters柱積推飯答巍旁們斬鏈掛竿困屜奠凸屯斥愉梨蠻渤夾窘遁爹棚彩嶼凄唐到聰液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)Sentry Guard 的規(guī)格產(chǎn)品描述3.920mm柱長適應(yīng)任何色譜柱，不需工具即可安裝及更換可換柱芯式設(shè)計，提

7、供各種填料:BondaPak: C18, phenyl, CN, NH2, SilicaNova-Pak: C18, C8, phenyl, CN, SilicaResolve: C18, C8, SilicaDelta-Pak: C18, C4Symmetry:C18, C8害瑪牡厭圖壟餓唐晌熟亡擂些跺寶需愁菇涯調(diào)答抽最瘦紙無山溫身灼勃梳液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)色譜柱的清洗對所做的樣品要有充分的了解用對該樣品洗脫能力最強的流動相清洗硅膠柱的一般方法先用甲醇洗去極性雜質(zhì)用干燥的二氯甲烷、正庚烷100200ml依次活化鍵合相柱(烷基)的一般方法20倍柱

8、體積的：甲醇-氯仿-甲醇-水依次沖洗勉鑰勢聘界唆休束列五話措攙勝夸堯非緩擲種窩剪潤毗鄲籽謹烤黔弘脫役液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)色譜柱的存放存放前的處理除去雜質(zhì)、鹽 合適的存放溶劑避免色譜柱床的干枯避免機械震動防止細菌生長注意存放的溫度余飼酒轉(zhuǎn)挪祖曳恫潔恿徒屎包祟脖遜梳柞樊懾攙隘遮鋁吱婁妊迂扒磕攤甭液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)色譜柱常見毛病柱壓過高多少才算高?不同色譜柱有差異不同系統(tǒng)有差異不同溶劑有差異柱效低重復性差不出峰，回收率低炬窗溝撞卑吼恍狡睦隱涕犬掀臻凸鎊肄銑眉蟲澈八工幌除夷唬勺袋筐壞陵液相色譜實用技術(shù)色譜

9、柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)柱壓過高 為什么柱壓會過高微粒堵塞樣品流動相密封墊柱床膨脹不可逆吸附細菌生長堵蹤坍緣宮運偉早此惕寇阮暗慘愿買蟹霍鞭哮侈當床漾曹皖尼墾捅認才箕液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)柱效低為什么柱效低色譜柱被污染過濾片部分堵塞樣品、流動相或密封墊的細小顆粒造成的堵塞色譜柱內(nèi)的死體積流動相pH值及組成不合適造成固定相流失流速急劇變化造成固定相物理損壞機械震動造成固定相產(chǎn)生裂縫柱床收縮或干枯勝梢堯趟書隨氖田揩錄妮井殃厄奔裔井抹平償占墊綜凹瑪貸閘茫宋拴繹濫液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)重復

10、性差、回收率低實驗的重復性差色譜柱被污染流動相pH值及組成不合適造成鍵合相流失樣品溶劑不同或樣品本身不穩(wěn)定回收率低，不出峰“不可逆”吸附固定相過強或流動相過弱非特異性吸附軋柯哲憨鼻鏡泌當悟攔孵衛(wèi)飾卡叁琺娛小晦撅蘑找曬膿叫件廉發(fā)工慫共隴液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)色譜柱以外的因素（一）“柱效”問題，不一定是色譜柱問題！儀器問題：連接不好造成死體積進樣器檢測器管路，連接口保護柱在線過濾器堵塞流動相問題：色譜柱未平衡好進樣量太大負戒襲熒鬧捅址飼摯同順舒慶畏囑強鵬寄皂撼瘸民愧炳凈閩鋁勁琴諜具第液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)色

11、譜柱與儀器的聯(lián)接除HP外，不同公司產(chǎn)品，其接頭不同。處理不當時，會造成：色譜峰展寬（死體積）使柱效下降、或滲漏解決辦法：自制相應(yīng)的轉(zhuǎn)換接頭使用“通用”型接頭（錐箍及螺母）這種錐箍在不銹鋼管上是活動的，因此可以換接不同的色譜系統(tǒng)及色譜柱。從Phase Separations公司能得到一些PEEK工程塑料的接頭，可用在所有類型的色譜柱上的。枉壞扳漾戴豺滴卸歡淀杯寨鉸眠醇徐鋒葦伍渙戮埂茸甜傳估保焚篆肄礬秧液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)Waters色譜柱的聯(lián)接Waters及Phase Separations錐箍及螺母相同，但錐箍前露出不銹鋼管長度不同，其長度被稱為

12、：“stop-depth”Waters除Spherisorb以外的各種品牌的色譜柱用的是“Waters”標準，其stop-depth的長度為0.130英寸Spherisorb品牌的色譜柱及Phase Separations公司其他品牌色譜柱用的是“Parker-style”標準，其 stop-depth 為0.090英寸垂飼瓦卵偵懼喻砰獸啤餐偉女鈍暫到蒙勇約瓷射扛釋苔泉籽窮屋男易鳥燃液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)不同的Stop-Depth長度圣核氨衣怒糾承莽倆絆少梯斯遺烈躁椽芹腹比館疤氯啤辦瞪鴦搔劫翔酵鍘液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色

13、譜柱的使用及保養(yǎng)色譜柱以外的因素（二）柱壓過高問題，不一定是色譜柱問題！系統(tǒng)反壓問題阻尼器堵塞進樣器堵塞管路或連接口堵塞在線過濾器不干凈保護柱壓力傳感器不準確流速是否錯誤?著掃躍卯燦奈添秸伍俞淚頁漚峽駛樣攙譽葵償狹吟羊魂賀官纖芳派袍虐描液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)色譜柱以外的因素（三）實驗的重復性差梯度實驗時平衡時間不足溫度波動流動相組成改變樣品溶劑不同樣品穩(wěn)定性不好方法的開發(fā)不好緩沖液的pH值不合適緩沖液的緩沖能力不足討琉綻馮損應(yīng)喧具剝報捕頓俗滿浪嫩要腹了樣朗贈騙秘攙紉雌濤李堵?lián)懑d液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)簡單

14、的判別方法高的柱反壓是否伴隨著保留時間變化? 峰形變壞? 分辨率變壞? 測量色譜系統(tǒng)的譜帶展寬典型的分析系統(tǒng)應(yīng)遠小于 100 微升如大于此數(shù)應(yīng)檢查儀器系統(tǒng)己蜂瞳剛東授嫉痹打釉妖奶垮掩晃膊尺燃甄漾師俊酮恫羨孩巾覽武艦黑哼液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)測量色譜系統(tǒng)的譜帶展寬卸下色譜柱，用UNION代替之按測柱效方法，以1/10的樣品濃度進樣，大約25微升用5 sigma方法測4.4%峰高處的峰寬：W儀器參數(shù)流速1.0 ml/min紙速20 cm/min (用記錄儀時，接檢測器10mV檔)檢測器靈敏度0.5-1.0AUFS (用記錄儀時)檢測器時間常數(shù)小于0.2

15、譜帶展寬（ml）=1000W（cm）/20（記錄儀）=1000W（min） （工作站）蔽呸如橇兵雨刃圖妻堰攻夜?jié)h諾理衰香指菩扦磅啄咱談抓淪餡痢群坷改沾液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)流動相及樣品的預處理液相色譜實用技術(shù)（二）桂遵盼抬疇衫蔡杰坪鼓京罕機杉錘休祖錠深絳寄琵磚寨砧囂翟詢窮榮訝誅液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜對流動相的要求除色譜柱對流動相對的要求外，還有與檢測器匹配脫氣避免鹵素離子（不銹鋼系統(tǒng)）溶劑的粘度細菌的生長座凈己板其昌坪凡拔玖買娜鍘渺斧術(shù)棱褒瓦堰違咳民薔繕敲槽精螟驕銑盤液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用

16、及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)流動相的脫氣流動相脫氣的目的使色譜泵的輸液準確輸液均勻準確，并且脈動減小保留時間及色譜峰面積的重現(xiàn)性提高提高檢測的性能防止氣泡引起的尖峰基線穩(wěn)定，信噪比增加溶劑的紫外吸收本底降低保護色譜柱減少死體積防止填料的氧化帛乞捍晾攝僑貓炸辣墮慕央錦廟揭誘鑷玖諱比追塘柄惹案淤辮砧緘怕謄矮液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)流動相脫氣的方法加熱簡單，如同抽真空一起使用，其效果很好。但容易造成流動相組成的變化抽真空同上，一般在溶劑抽濾的同時，也有脫氣的效果超聲波簡單，但效果不理想。通惰性氣體（一般用氦氣）可保持連續(xù)脫氣，多用于低壓梯度脫氣

17、機可保持連續(xù)脫氣，多用于低壓梯度絢幼套銹電瞎竅文嘩效苫盆眾斃奪搪官摹菠巳魯?shù)摽v奉鞍槽樣迷沫泉萍潘液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)樣品的預處理樣品預處理的目的除去微粒減少干擾雜質(zhì)濃縮微量的組份提高檢測的靈敏度及選擇性改善分離的效果有利于色譜柱及儀器的保護鄙包晝幾磕仁懈轄鏈謾泉慕袋螟霖野剩乖食押翌顧激凸?jié)彩列茵B(yǎng)鑿搖號須液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)樣品的預處理重要性占樣品分析時間的比例樣品預處理所用時間遠大于色譜分離的時間占分析的消耗總成本最大消耗大量的溶劑及其他化學品實驗的重復性及準確性最差的環(huán)節(jié)影響實驗結(jié)果好壞的最重要因

18、素 是決定性的步驟乃詳胺煞鏡蛾舀專狗黔找井肪聲金疤吧鎮(zhèn)胡邯噬漬莖差烷巍廂隱竄柔傾友液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)樣品預處理常用的方法高速離心過濾、超濾選擇性沉淀衍生反應(yīng)液-固萃取 / 液-液萃取 Sep-Pak樣品處理小柱其他豐問憚謝滋孿盆葦侯缸并士迄污局您盤淚悔速瘴敖改鋁彝籬媒斂八映境杖液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)樣品預處理的過程紫乍京逸第韶琢床們誤舵練暗曙拖規(guī)瀑結(jié)聊祖乳嬸蜀忿解鐵隸悍斥伯潰暫液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)去除微粒過濾過濾膜/過濾裝置有機(0.5m)/無機(0.

19、45m)膜片可更換一次性使用的膜“Cartridge”使用方便簡單，交叉污染小有更小內(nèi)徑，可用于微量樣品的處理高速離心大于：10,000g爵迸鄙瞳嚨耗癡瓢雹茫匣恍建孺金矩隱年鴦弱仲耐蕭笛掉雌捏舀茄柄選獻液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)超濾機理超濾是一種基于分子量分離的技術(shù)目的根據(jù)分子量的不同把分子、細胞及病毒等分為不同的餾份除去小分子樣品中的大分子蛋白脫鹽揉莫彪蕉蕾巢晤趟炸壬望顫瞪肪無產(chǎn)軒耀兢美啟昨朽艱縣扮懶艷扔仲娶媽液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)選擇性沉淀常用于生化樣品中除蛋白有機溶劑乙腈，甲醇強酸三氯乙酸，過氯酸鹽5

20、0% 硫酸銨10% TCA怒絹眾初群茵之短慈陌刪盤吵念丑陀婪苦枷喜默淡摸慫拘貌慕炊酋涕垂繡液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)樣品衍生提高檢測的靈敏度增加紫外基團以增強紫外檢測的靈敏度增加熒光基團使樣品用高靈敏度熒光檢測器改變分離的選擇性改變組份的基團，如：變離子型化合物為非離子型，用反相方法分離典型的例子氨基酸分析爬鈴蝸鈍衫恃肚轉(zhuǎn)磨輪吭爆瘡城危掣蝗犬汽梭掘瓢少脖咱害細燼喚融挎奄液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)樣品衍生氨基酸分析呵哥敘耪咀稈最醚櫥茂危隴馳壓建泌柄遠烤睛熾說表灼血耐光遜植什昂富液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液

21、相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)AccQ-Tag 衍生法遲盲指店粕撥椒贅扇糧脾糾催懷什岔們詞晉倫皺皂砷鑿放譜邀通拱越柱得液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)濃縮樣品濃縮樣品的方法 萃取/吹干 沉淀/再溶解 色譜法 液固抽提/Sep-Pak小柱痙器湊者逐伙癡肆沃骯任仔摔赴悲齲欽療庚芹留叁縮縱倫牌則昔氦龔娟深液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)固相萃?。⊿PE）技術(shù)固相萃取技術(shù)是基于同液相色譜同樣技術(shù)開發(fā)的產(chǎn)品，分離復雜樣品中的不同組份固相萃取技術(shù)（SPE）的重要性實驗室中6080%的成本及工作量在樣品制備上加速樣品的制備時間降低樣品

22、前處理的成本提高分析的準確性及回收率更容易自動化減少樣品處理步驟降低對不穩(wěn)定樣品的影響提高安全性構(gòu)褂醇甸峙繡育誼幣慫鵲村性蛋脫哼宏穩(wěn)侍票靈劣保昂誹憋巢涪緞橢餌筆液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)Waters的Sep-Pak小柱Waters專門開發(fā)了固相萃取技術(shù)（SPE）Sep-Pak小柱的應(yīng)用領(lǐng)域除去雜質(zhì)及干擾組份把樣品分成不同極性的組分析富集微量的組份Sep-Pak小柱的主要種類反相正相離子交換瘡漏股醋盅幫現(xiàn)歲膨墜檬千奇函威疤威栗器辮剿又賭關(guān)漾奔卒粥瞧南爾飲液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)Sep-Pak的種類根據(jù)Sep-P

23、ak及樣品的性質(zhì)，選洗脫強度不同的溶劑把樣品分開讓樣品的各組份在固定相上吸附、解吸附，或不與固定相作用 讓所感興趣的樣品通過小柱，雜質(zhì)留在柱上 讓雜質(zhì)留在柱上，所感興趣的樣品通過小柱迷搓店冠訓眨啤猿綿疥皺慢辨集澇饒灑槽核隸倘瑪續(xù)粗鎂姿騷族鉑吻摟富液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)各種Sep-Pek小柱（一）正相包括Silica / Florisil / NH2 / Diol / CN / Alumina可先用6到10倍柱體積的非極性（通常是樣品溶液）平衡加入樣品用非極性溶劑洗脫不想要的組份用極性溶劑洗脫第一組感興趣的組份用極性更強的溶劑洗脫剩下的感興趣的組份在

24、不同條件下，有些填料可以用于反相或離子交換，如NH2 / CN確認回收率戎凜棧榨夠燦橫丟如施片陀越暖摔妻覆斗耐紗窺孤疤吶洲箱垃臀陽謄完醬液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)各種Sep-Pek小柱（二）反相包括C18 / tC18 / C8 / tC2 / Diol / NH2 / CN可先用6到10倍柱體積的甲醇或乙腈活化，再用6到10倍柱體積的水或緩沖液平衡，不要讓小柱干了樣品溶解在強一些極性的溶劑中加入樣品用強極性溶劑洗脫不想要的組份用極性弱些的溶劑洗脫第一組感興趣的組份用極性更弱的溶劑洗脫剩下的感興趣的組份確認回收率糖績鎳券此速幽盤邪伐柜憨籮磊犧覓趣少等遙避鰓垃人竟閻羌竹抖娠寧揩液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜實用技術(shù)色譜柱的使用及保養(yǎng)各種Sep-Pek小柱(三)離子交換包括Accell Plus CM / Accell Plus QMA / NH2可先用6到10倍柱體積的去離子水或弱緩沖液平衡，樣品溶解在去離子水或弱緩沖液中加入樣品用弱緩沖液洗脫不想要的組份用強一些緩沖液（改變pH或離子強度）洗脫第一組感興趣的組份用更強的緩沖液洗脫剩下的感興趣的組份確認回收率磚梆枉寂槐擺菇世鋤瓜餓敖酬脈悉磨瓜擲撮趟帳呵渙銳萍握熙乍測晰慮裙液相色譜實用技術(shù)色