植物組織培養(yǎng)論文 月季

1、植物組織培養(yǎng)論文一月季組織培養(yǎng)技術(shù)植物組織培養(yǎng)論文植物組織培養(yǎng)是一門專業(yè)性、操作性和實(shí)踐性很強(qiáng)的技術(shù)類課程，近年來國 內(nèi)各農(nóng)林院校的農(nóng)學(xué)、園藝、林學(xué)和綜合性院校、師范院校的生物和生物技術(shù)等 本、?？茖I(yè)都相繼開設(shè)了植物組織培養(yǎng)課程。實(shí)驗(yàn)教學(xué)是植物組織培養(yǎng)課 程教學(xué)的中心和關(guān)鍵環(huán)節(jié)。本文從五方面就河池學(xué)院近幾年植物組織培養(yǎng)實(shí) 驗(yàn)課程教學(xué)改革模式進(jìn)行了探討和總結(jié)。隨著生物技術(shù)的迅猛發(fā)展，植物組織培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)等現(xiàn)代生物技術(shù)得到普 遍重視和應(yīng)用，為月季的快繁和新品種的選育提供了新的途徑，在月季的改良上 顯示了很大的應(yīng)用潛力。以月季為試材進(jìn)行組培試驗(yàn)，綜述了月季組織培養(yǎng)、快 繁的研究技術(shù)及進(jìn)展，并對月

2、季組培的最優(yōu)條件進(jìn)行了總結(jié)。本研究探索出的月 季組培快速繁殖技術(shù)，在試管苗單芽誘導(dǎo)叢生苗、利用代用品培養(yǎng)降低組培成本、 試管苗管外打插生根、試管苗微型化長途運(yùn)輸?shù)确矫妫^前人有所改進(jìn)。月季為薔薇科薔薇屬木本植物，其花姿優(yōu)美，花型豐富，花色齊備，樹型易 修剪，栽培難度小;其花型大，美麗，幽雅，高貴。月季通常采用打插、嫁接 和壓條繁殖，但是一些名貴品種打插不易生根，主要靠芽接繁殖，而芽接速度 慢，因而造成優(yōu)良品種的月季苗供不應(yīng)求。.月季組織培養(yǎng)的研究進(jìn)展月季是世界栽培種類較多的多年生木本花卉之一。別名長春花、月月紅、 斗雪紅、瘦客等，薔薇科薔薇屬植物，其花姿優(yōu)美，花型豐富，花色齊備，樹 型易修剪，

3、栽培難度小。其花型大，美麗，幽雅，高貴。在鮮花應(yīng)用中，月季 花的地位和比重與日俱增，是世界上著名的四大切花之一。月季的花色可編制 成完美的連續(xù)色譜。月季是重要的花卉，世界的銷售額多年來穩(wěn)居各類花）卉的 第一或第二。月季的一大優(yōu)點(diǎn)是分布極廣，適應(yīng)性良好，栽培容易。月季是四 季常青花卉，花期長，花色多，芳香馥郁，由于其特殊的情感內(nèi)涵和商品價(jià)值， 被廣泛應(yīng)用于園林、庭院裝飾，并可制成月季盆景，作切花、花籃、花束等。 此外，月季花可提取香料，根、葉、花均可人藥，具有活血消腫、消炎解毒 等功效。當(dāng)前，月季育種是花卉育種中最活躍的領(lǐng)域之一。月季通常采用打插、 嫁接和壓條繁殖，但是一些名貴品種打插不易生根，

4、主要靠芽接繁殖，而芽接 速度慢，因而造成優(yōu)良品種的月季苗供不應(yīng)求。隨著生物技術(shù)的迅猛發(fā)展， 植物組織培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)等現(xiàn)代生物技術(shù)得到普遍重視和應(yīng)用，為月季的快繁和 新品種的選育提供了新的途徑，在月季的改良上顯示了很大的應(yīng)用潛力。同時(shí)， 月季組培和遺傳轉(zhuǎn)化系統(tǒng)的建立也是體細(xì)胞克隆變異育種和基因工程育種的重 要前期工作。月季原產(chǎn)我國，早在漢代就有歷史記載。2 0 0年前，月季植入西方和各國 的薔薇結(jié)緣，繁育出成千上萬新月季品種，現(xiàn)代月季（分為茶香月季HT、聚花 月季F、壯花月季Gr|、攀緣月季CI、微型月季Mi n、以及中國月季Ch等9 大系。）也隨之推廣到除熱帶和寒帶外的世界各地。目前世界各地廣

5、為栽培的 月季，是以中國月季為主要親本，經(jīng)以長期雜交育種而選育成功的。月季在觀 賞植物中的地位是很高的，全世界各國人民都普遍喜愛月季，月季的銷售額多年 來穩(wěn)居各類花木的前茅。月季的用途很廣（如用藤本月季布置長廊、拱門；樹 狀月季裝飾主十道等）。國外月季花卉工廠化育苗開展較早，在某些國家和地區(qū)已成為獲得巨額外匯 的支柱產(chǎn)業(yè)。我們國家的組織培養(yǎng)技術(shù)與國外相比差距不大，但是產(chǎn)業(yè)化起步 較晚。在加快科學(xué)技術(shù)轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)力的今天，植物組培技術(shù)廣泛應(yīng)用于月季花卉 的繁殖育種.必將取得巨大的經(jīng)濟(jì)效益、社會效益和生態(tài)效益。月季生長繁殖速 度較慢，應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)可大大縮短它的增殖周期，快速繁殖優(yōu)良品種。在短 期

6、內(nèi)繁殖出數(shù)以萬計(jì)的苗木，這些苗木的遺傳特性和表型特性與母株完全相同， 完全保持了母株的優(yōu)良特性。月季花組培繁殖可以周年生產(chǎn)，不受季節(jié)限制，并 且耐貯藏不易爛苗，可脫離培養(yǎng)基長途運(yùn)輸，實(shí)現(xiàn)了苗木運(yùn)輸“微型化”。二.月季組織培養(yǎng)技術(shù)（一）.外殖體的選擇、消毒及接種外殖體一般選取生長健壯的當(dāng)年生枝條的飽滿而未萌發(fā)的側(cè)芽。取回枝條用 自來水沖洗干凈，無菌條件下用70 %酒精表面消毒304 0 S，再用0.1 % H g C 1溶液滅菌51 0min，最后用無菌水沖洗35次。芽的快速繁殖 與供試材料的基因型有關(guān)，同時(shí)還與外殖體的取材部位有關(guān)，來源于枝條中部的 側(cè)芽的繁殖速率最快。李青等分別選取一年生枝條

7、的冬芽和當(dāng)年生枝條的腋芽 作為外殖體，相同條件下培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)越冬芽的成活率較高，且從接種到萌動時(shí)間 較短，生長快，在后代繁殖中植株健壯。于冰沁在外殖體的接種中采用了垂直接 種，斜向上4 5度接種，水平接種和反轉(zhuǎn)接種4種方式，發(fā)現(xiàn)垂直接種和斜向 上45度接種是最佳的接種方式，腋芽再生芽數(shù)多，且生長健壯，這可能與植物 的生長極性有關(guān)。誘導(dǎo)培養(yǎng)基以MS為基本培養(yǎng)基，附加適量的細(xì)胞分裂素6 一芐氨基嘌吟（6 -BA）和生長素萘乙D 6 7 B 0 2）酸（NAA）。NAA增加至0.1 m g / L時(shí)， 6 一 BA濃度的高與低已對增殖系數(shù)不產(chǎn)生明顯影響。最適的側(cè)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基 為 MS + 6 一 B A

8、 0.5 3.0 m g / L + N AA 0.0 l 1. 0 mg / L , 且培養(yǎng)基中添加蔗糖有增加叢生芽數(shù)量的作用。（二）.繼代培養(yǎng)將誘導(dǎo)培養(yǎng)基上已經(jīng)萌發(fā)的嫩芽轉(zhuǎn)入附加6 一 B A、NAA等激素的MS培養(yǎng) 基中，進(jìn)行增殖繼代。K T, I A A等激素作用效果較差，協(xié)同作用不明顯6。 低濃度的6 BA有利于不定芽的增殖，濃度過高則抑制不定芽增殖，適量NAA 有利于芽和葉生長，但濃度過高誘導(dǎo)產(chǎn)生大量愈傷組織，不利于側(cè)芽的直接 分化和生長。在NAA濃度相同而B A濃度不同的培養(yǎng)基中，隨B A濃度的升 高，芽苗的增殖系數(shù)也相應(yīng)提高。在BA濃度相同而NAA濃度不同的培養(yǎng)基中， 隨NAA

9、濃度升高，小芽生長速度加快，繼代所需時(shí)問對增殖系數(shù)也有一定的影 響9。此外，增殖系數(shù)還與品種有關(guān)。從增殖倍數(shù)、葉片數(shù)、再生芽長 勢等綜合因子來 看，MS + B A 0.52.0 mg / L + NAA 0.O10.05 mg / L是最適的不定芽增殖培養(yǎng)基（表1 ）。表1增殖培養(yǎng)基（ MS ）中不同激素對芽的影響（m g / L ）激素組成增殖苗生長情況NAA 0.01 + B A0.5增殖系數(shù)較高，健壯NAA 0.l + B A1.0增殖系數(shù)較高，健壯NAA 0.01 + B A2.0增殖系數(shù)較高， 健壯NAA 0.05 + B A1.0增殖系數(shù)較高，健壯NAA 0.05 + B A2.

10、0增殖系數(shù)較高， 健壯NAA 0.05 + B A3.0增殖系數(shù)高，苗發(fā)黃，細(xì)弱NAA 0.1 + B A(0.5， 1.0， 2.0，3.0）增殖系數(shù)低，苗細(xì)弱，玻璃化NAA 0.2 + B A(1.0，2.0 ）芽基部長有愈傷組織（三）.生根培養(yǎng)無菌芽苗在繼代培養(yǎng)基中只誘導(dǎo)地上部分生長。待培養(yǎng)一段時(shí)間后，轉(zhuǎn)入生 根培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)生根。多數(shù)試驗(yàn)采用的培養(yǎng)基為1 / 2 MS 6-9（大量元素減 半）。Skirvin等”在用“ Frever yours ”月季做生根試驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)，采 用1 / 4 MS培養(yǎng)基，不加生長素即可以促進(jìn)生根。在無菌苗的生根誘導(dǎo)過 程中，生長素的種類和濃度起決定性作用。李

11、青等分濃度NAA、IBA、I AA對藤本月季進(jìn)行生根培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)3種生長素的生根效果不同，且濃度的 影響較大。李海燕等發(fā)現(xiàn)低濃度的生長素有利于根的形成，適當(dāng)濃度的I B A、NAA對生根率有顯著影響，濃度過高會抑制根的形成，NAA濃度為 0.50mg / L時(shí)效果最佳（表2）。生根階段加人活性炭（AC）后，有助于提 高生根率和生根質(zhì)量11。李青等利用1 / 2 MS + I B A 0.2 mg / L+ 活性炭誘導(dǎo)生根，生根率最高為9 0 %，且隨著活性炭百分比的加大，生根率 逐漸下降?；钚蕴康募尤肽茱@著促進(jìn)生根量和根的長勢，但僅含活性碳的培養(yǎng) 基只見較少發(fā)根，且根細(xì)弱，說明植物激素對于生根是

12、必不可少的9Hyndm an等”用改良煙火月季品種進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，MS培養(yǎng)基中鹽濃度過高，特別是氮素含量過高會導(dǎo)致生根不適應(yīng)，所以需減少無機(jī)鹽用量。（表2）表2生根培養(yǎng)基（1 / 2 MS ）組成對生根的影響（m g / L ）激素組成生根情況NAA 0.1生根多，健壯NAA 0.1 + 活性炭 O.3生根多，生根快NAA 0.5生根較多， 健壯IBA 0.1生根率低IBA 0.2生根完全，生根快IBA 0.5生根數(shù)多，生根快（四）.馴化與移栽小苗接到生根培養(yǎng)基上后，1 4 d可見基部分化出根點(diǎn)，2 0 d則長出 許多白根。此時(shí)組培階段結(jié)束，進(jìn)入試管苗移栽成活階段。所有試管苗移栽 前都應(yīng)先將生根苗移至室溫進(jìn)行移栽前的鍛煉。鍛煉時(shí)問與移栽成活率有關(guān)，練 苗7 d以上，成活率達(dá)到9 5 %6。影響移栽成活率的主要因素有3個：濕 度、溫度 以及基質(zhì)種類和帶菌量a*。考慮到這3個因素，移栽時(shí)應(yīng)保持90 % 以