口蹄疫診斷和防控技術(shù)

1、口蹄疫診斷和防控技術(shù)鐘映梅黑龍江省動物衛(wèi)生監(jiān)督所二O一O年六月1口蹄疫概況口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒引起的一種急性、熱性、高度接觸傳染性和可快速遠距離傳播的動物疫病。侵染對象是豬、牛、羊等主要畜種及其它家養(yǎng)和野生偶蹄動物，易感動物多達70余種。 國際動物衛(wèi)生組織(OIE)將FMD列在15個A類動物疫病名單之首。我國將FMD排在14個一類動物傳染病的第一位 。2當前疫情形勢國際：韓國連續(xù)發(fā)生多起口蹄疫疫情，涉及奶牛、羊、豬。日本宮崎縣牛場發(fā)生口蹄疫疫情。越南、臺灣、香港、緬甸均有疫情發(fā)生。國內(nèi)：全國多個省區(qū)發(fā)生口蹄疫疫情（18起為緬甸98譜系O型口蹄疫）。3疫情發(fā)生的基本原因1、對豬的致病力

2、強，傳播速度快，群體發(fā)病率較高。2、檢疫監(jiān)管不到位，使疫情擴大。3、防控工作存在薄弱環(huán)節(jié)。4、環(huán)境條件差，消毒不到位。4口蹄疫病毒粒子三維結(jié)構(gòu)口蹄疫病毒X射線晶體衍射結(jié)構(gòu)圖56臨床癥狀主要是口、鼻、蹄、乳頭等部位出現(xiàn)水泡。發(fā)泡初期，牛有流涎癥狀，豬、羊表現(xiàn)跛行。78910111213 羊羊的潛伏期為28天。癥狀輕微，不易被察覺?？谇徽衬?、舌上時有水泡，但較小，有米粒至豆粒大小。 蹄部病變和牛相似，發(fā)生水泡時表現(xiàn)跛行。 1415口蹄疫病料采集運送 檢驗樣品：水泡皮（液）、O/P液、血液樣品水泡皮采集：選采新鮮、成熟、未破裂或剛破不久的水泡皮，陳舊、結(jié)痂或腐敗變質(zhì)的殘破水泡皮不好用，甚至不能用。

3、牛樣應采取舌表面的水泡皮，在水泡尚未破潰或剛破潰時，牛的口中少量流涎或不流涎，這是采集病料的最佳時機。 豬樣應采取蹄叉部、蹄冠部或鼻鏡部的水泡皮，不要采取蹄踵部角質(zhì)化表皮。羊的水泡材料較難采集，水泡通常小而分散，需要仔細尋找。 16采取水泡皮時應盡量保持無菌，用消毒剪子剪下水泡皮后，置入無菌小瓶中，加入由等量甘油和0.04molL磷酸鹽緩沖液( PH7.27.6)配制成的運輸液中，可加入適量抗生素。加蓋及用膠帶封口，帖上標簽， -20下保存。水泡皮樣品每份至少1-2g。水泡液采集：用消毒過的注射器從未破潰水泡中吸出水泡液，水泡液應清亮透明，裝入滅菌瓶中，(可加入適量的抗生素，如青霉素1000I

4、Uml，鏈霉素1mgm1)，加蓋后用膠帶封口，貼上標簽，冷藏保存。17O/P液的采集O/P液是動物食道/咽部刮取的粘膜樣品。 用于查明牛、羊等反芻動物感染FMD及持續(xù)帶毒狀況。18注意事項采樣前禁食12小時（可飲水）。食道探杯使用前用2%NaOH溶液浸泡消毒3-5分鐘，再用清水沖洗后使用。采到的樣品應立即冷凍保存。19樣品保存液在0.04mol/LPBS 緩沖液中按每升加1%酚紅2ml樣品保存液PH值一定要在7.27.6之間。20采集過程2122232425O/P液與樣品保存液混合后變色26 血清樣品 無菌采取動物血液10-15ml，分離血清(每頭動物不少于2m1)，分裝入兩個滅菌的離心管里。

5、加蓋、封口并貼上標簽，編號，置于4保存或凍結(jié)保存，但不能反復凍融，否則抗體效價下降。包裝：與水泡皮水泡液樣品的方法相同。 27診斷方法及免疫監(jiān)測口蹄疫的實驗室診斷主要是病原學診斷和抗體檢測兩個方面。病原學檢測方法包括 ： 1、補體結(jié)合試驗 2、RT-PCR 試驗 3、反向間接血凝試驗 4、間接夾心ELISA28抗體檢測方法包括： 1、病毒中和試驗 2、正向間接血凝試驗 3、 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA) (1)液相阻斷LB-ELISA：用于檢測動物血清的抗體 (2)非結(jié)構(gòu)蛋白抗體間接ELISA：鑒別診斷感染動物與注苗動物 4、 VIA抗原瓊脂擴散試驗 5、免疫膠體金試驗29 應急響應臨時處置

6、在疑似疫情報告同時，對發(fā)病場（戶）實施隔離、監(jiān)控，禁止家畜及畜產(chǎn)品、飼料及有關(guān)物品移動，進行嚴格消毒。對可能存在的傳染源，以及在疫情潛伏期和發(fā)病期間售出的動物及其產(chǎn)品、對被污染或可疑污染物(包括糞便、墊料、飼料)，立即開展追蹤調(diào)查，并按規(guī)定進行徹底消毒等無害化處理。必要時采取封鎖、撲殺等措施。30由疫區(qū)邊緣向外延伸10公里疫區(qū)受威脅區(qū)疫點向外延伸3公里應考慮：天然屏障（如河流、山脈等）、人工屏障（道路、圍欄等）、野生動物棲息地存在情況，以及疫情溯源及跟蹤調(diào)查結(jié)果。歐盟：疫區(qū)3公里、受威脅區(qū)10公里 危險接觸場31撲殺并銷毀所有染疫動物，無害化處理；對排泄物、被污染或可能污染飼料和墊料、污水等按

7、規(guī)定進行無害化處理；被污染的物品、交通工具、用具、圈舍、場地進行嚴格徹底消毒。出入人員、車輛和相關(guān)設施要按規(guī)定進行消毒。禁止易感動物及其產(chǎn)品出入。疫點內(nèi)應采取的措施32疫區(qū)內(nèi)應采取的措施在疫區(qū)周圍設立警示標志，在出入疫區(qū)的交通路口設置臨時動物檢疫消毒站，執(zhí)行監(jiān)督檢查任務，對出入的人員和車輛進行消毒。撲殺疫區(qū)內(nèi)所有易感動物，并按國家規(guī)定標準進行無害化處理。采取措施禁止易感動物及其產(chǎn)品出入。關(guān)閉動物交易市場。對圈舍、用具及場地消毒。33受威脅區(qū)應采取的措施加強檢疫監(jiān)管，禁止易感動物出入，相關(guān)制品調(diào)運必須進行嚴格檢疫。加強對養(yǎng)殖場、屠宰場、交易市場的監(jiān)測，及時掌握疫情動態(tài)。3.及時接種疫苗： 牛羊注射口蹄疫O型-亞I型雙價疫苗， 奶牛還需注射口蹄疫A型疫苗