槐米中蘆丁的提取和精制()實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1、實(shí)驗(yàn)一、槐米中蘆丁的提取、精制和鑒定歐陽(yáng)引擎（2021.01.01）（-）實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?制備蘆丁，供藥用。2通過(guò)蘆丁的制備，掌握黃酮類化合物的提取分離的原理和操作。3熟悉重結(jié)晶技氏。4. 了解和掌握黃酮類化合物的一些主要性質(zhì)和鑒定方法。（二）實(shí)驗(yàn)的基本原理1蘆丁的提取原理利用蘆丁結(jié)構(gòu)中含有多個(gè)酚輕基，呈酚酸性，能在堿水中溶 解的性質(zhì)，可用堿性溶劑進(jìn)行提取，提取液加酸后可沉淀析出 （堿溶酸沉法）。也可利用蘆丁在冷水中溶解度小，在熱水中 溶解度大的性質(zhì)逬行提取。蘆丁的分離原理利用蘆丁結(jié)構(gòu)在冷乙醇中溶解度小，在熱乙醇中溶解度 大，以及在熱水中溶解度大，在冷水中溶解度小的性質(zhì)分離。 蘆丁用溶劑加熱溶解

2、后，趁熱抽濾，濾液放冷后能析出而達(dá)到 分離的目的（如不純可再重復(fù)操作進(jìn)行分離）。也可采用醇溶 水沉法進(jìn)行精制。蘆丁的鑒定原理（1）利用吸附薄層色譜的分離原理，蘆丁與蘆丁對(duì)照品在 同一條件下逬行展開，顯色，以達(dá)到鑒定蘆丁的目的。（2）通過(guò)專屬的化學(xué)顯色反應(yīng)（如三氯化鋁顯色反應(yīng)），確 定蘆丁的成分類型（黃酮類）。（三）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1 用堿提法、水提法、醇提法提取槐米中蘆丁。用酸沉法和冷卻過(guò)飽和法分離蘆丁。溶劑重結(jié)晶精制蘆丁。薄層色譜法和顯色反應(yīng)鑒定蘆丁（四）實(shí)驗(yàn)藥材儀器與試劑實(shí)驗(yàn)藥材槐米20g。儀器：磁力加熱攪拌器、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀.粉碎機(jī)、500ml 燒杯，1000ml燒杯，50ml燒杯，250ml園底燒

3、瓶、500ml園底 燒瓶、100ml量筒、50ml量筒、100ml錐形瓶、50ml錐形瓶、 研缽、移液管、減壓過(guò)濾裝置，布氏漏斗，抽濾瓶、層析缸 等。試劑：硼砂、氧化鈣、HCI、三氯化鋁、甲醇、乙醇、乙瞇、丙酮、甲酸、濾紙、PH試紙等。（五）實(shí)驗(yàn)步驟1 提取(水提取法)稱取槐米粗粉20g,在研缽中研碎后放入500ml燒瓶中，加 水200ml,用磁力加熱攪拌器加熱煮沸30min,趁熱過(guò)濾。殘?jiān)?同法操作一次，合并兩次濾液，放置冰箱中析晶，待全部析出 后，減壓抽濾，用少量蒸憎水洗滌蘆丁結(jié)晶，抽干，得粗制蘆 丁，干燥，稱重，計(jì)算得率。精制(醇-水重結(jié)晶法)取粗制蘆丁 lg,置于250ml園底燒瓶中，

4、加80%乙醇30ml 加熱回流15分鐘，趁熱抽濾。濾液置250ml燒杯中，向?yàn)V液中 加蒸憎水(約34倍量)至溶液呈明顯混濁，室溫放置，抽濾 得精致蘆丁。用少量蒸徭水洗滌蘆丁結(jié)晶，晾干，稱重。過(guò)程與現(xiàn)象記錄Day 1 (2011-05-07) 提取稱取研碎的粗槐米20.02&組裝儀器。原料放入500mL燒瓶中加水200mL (1-2) f磁力攪拌加 熱。燒瓶中為咖啡色懸浮液,有甘苦氣味,沸騰前不斷產(chǎn)生小 氣泡上,、夜體中有明顯漩泯! (1-3) o 102 C沸騰,產(chǎn)生大量氣 泡,藥渣翻滾,漩渦被氣泡遮蓋(1-4) o加熱過(guò)程中時(shí)常停止 沸騰,續(xù)略升溫23匕。隨著時(shí)間的延長(zhǎng),液體顏色加深。煮沸規(guī)

5、程中應(yīng)控制液量,過(guò)少難以提出藥品,過(guò)多容易噴出瓶最初用抽濾法分離殘?jiān)?1-5),但是溶液很稠且含糖 分較多,難以流下(1-6),并且易阻塞和沖破濾紙,還漸漸冷 卻。后改用離心法,5000rJ5min(J-7),效果略好,但是溶液還 杲冷卻,溶解的提取物較少。濾液為深黃色色,粘稠,氣味濃 厚甘甜。再次將濾渣至于放入500mL燒瓶中加水200mL磁力攪 拌加熱30Mn,液體顏色略比第一次深。將兩次得到的浸液(約300mL)收集放入冰箱備用。Day 2 (2011-05-08)2.精制L將粗提物抽濾(1-7) (1-8) (1-9),干燥得粗制蘆丁 (1-10) o2.取粗制蘆丁 1.008&,置于

6、250ml園底燒瓶中,加80%乙醇 30mlf加熱回流15分鐘(1-11),加熱前沒(méi)有充分分散固體粗 提物,趁熱抽濾(1-12),得到黃色濁狀液體(1-13) o2.啟旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)粗提物的濾液(1-14),沒(méi)有產(chǎn)物。Day 3 (2011-05-14)3鑒定點(diǎn)滴顯色反應(yīng) 從放置一周的粗提物中取蘆丁的甲酹溶 液(供試液)分別點(diǎn)在濾紙上,揮去溶劑,紫外照射,光吸收 明顯(1-15),然后分別添加供試液蘆丁的甲醇溶液和顯色劑 2%三氯化鋁乙醇溶液,顯黃色(1-16),在紫外燈下久365nm 觀察有明顯亮斑(1-17) o薄層色譜鑒定吸附劑：硅膠GF254薄層板(5.0cm X 10.0cm)。樣品：自制

7、蘆丁(用甲醇溶解，濃度約lmg/ml)對(duì)照品：蘆丁對(duì)照品的甲醇溶液。展開劑：三氯甲烷甲醇甲酸(7： 3： 0.5)顯色：a.先在可見光下觀察,然后在紫外光下觀察, 有明顯紫外吸收。(365nm紫外燈下觀察)b.遮擋硅膠板左側(cè)噴三氯化鋁試劑(1-18) , 365訕 紫外燈下觀察,右側(cè)有顯色劑呈黃色,左側(cè)有明顯紫外吸收 (1-19)。注意事項(xiàng)(1)硼砂因能與蘆丁中的鄰二酚輕基結(jié)合，起保護(hù)鄰二酚輕 基，不被氧化破壞的作用。實(shí)驗(yàn)證明，提取時(shí)加入硼砂，產(chǎn)品 的質(zhì)量會(huì)好些。石灰乳既能達(dá)到堿溶解提取蘆丁的目的，還可以除去槐 米中大量的粘液質(zhì)和酸性樹脂(形成鈣鹽沉淀)，但PH不能過(guò) 高和長(zhǎng)時(shí)間煮沸，因?yàn)闀?huì)導(dǎo)致蘆丁的水解而開環(huán)和形成鈣鰲合 物，影響產(chǎn)品的質(zhì)量和產(chǎn)率。PH過(guò)低(酸性太強(qiáng))合使蘆丁形成洋鹽而收率降低。稱量蘆丁時(shí)，先將帶濾紙的漏斗稱重，再將盛樣品的帶 濾紙的漏斗稱重，差重即為樣品的重量。結(jié)果計(jì)算及分析產(chǎn)率小漏斗+濾紙重29.69g抽濾后小漏斗+濾紙七樣品重30.20g樣品凈重0.51 g產(chǎn)率 =(0.51/1.008) xl00%=50.60%比移值 Rf=3/5.75=0.522分析:人水提法不能充分溶解蘆丁;2、精制時(shí)粗提物聚集成固體顆粒,沒(méi)有充分溶解;3、抽濾、轉(zhuǎn)移等過(guò)程的損失。(A)心得體會(huì)第一次做這