華桑種質(zhì)桑葉總黃酮含量的分析

1、華桑種質(zhì)資源桑葉總黃酮含量的闡發(fā)【摘要】目的闡發(fā)差異華桑種質(zhì)資源桑葉總黃酮含量的差異，為桑葉資源的使用提供科學(xué)根據(jù)。要領(lǐng)接納甲醇提取，分光光度法測定。效果測定的10份華桑種質(zhì)資源中，保靖4號桑葉總黃酮含量最高，為71.672.96g/g；德江15號桑葉總黃酮含量最低，為44.561.66g/g。結(jié)論華桑桑葉總黃酮含量較高，同屬華桑的差異桑種質(zhì)桑葉總黃酮含量差異極明顯，但同一原生境的種質(zhì)桑葉總黃酮含量相近?！娟P(guān)鍵詞】桑葉總黃酮含量分光光度法Keyrds：Fliuri；Ttalflavnidntent；Spetrphtetry桑葉為?？苧aeae桑屬rusL.植物的葉，中國大部門地域均有種植消費(fèi)，

2、以南邊蠶桑主產(chǎn)區(qū)產(chǎn)量最多，如江蘇、浙江、安徽、四川等，現(xiàn)天下桑樹栽植面積約80萬ha。桑葉不但是家蠶的唯一飼料，而且也是緊張的傳統(tǒng)中藥，桑葉入藥首見于?神農(nóng)本草經(jīng)?，被列為中品1。作為一種發(fā)散風(fēng)熱藥，桑葉在中國及別的一些國度被普及應(yīng)用。桑葉苦、甘、寒，歸肺、肝經(jīng)，常用于治療風(fēng)熱傷風(fēng)、溫病初起，肺熱燥咳，喉痧、咽喉紅腫、牙痛，目赤腫痛、風(fēng)眼下淚，肝陽眩暈、眼目昏花，出血，自汗、冷汗，風(fēng)痧等癥2。桑葉具有落糖落脂3，4、抗氧化5、抗腫瘤等6多種活性。比年來對桑葉化學(xué)身分的研究表白，桑葉中含有黃酮類、生物堿類、苯丙素類、有機(jī)酸類、甾體及三萜類等多種化合物。黃酮類化合物是桑葉的緊張活性身分之一。中國的

3、桑屬植物有15個(gè)種4個(gè)變種7，此中入藥者多為白桑rusalba1，8。筆者通過對差異桑種桑葉總黃酮的含量的測定闡發(fā)，創(chuàng)造華桑rusathayanaHesl.，長穗桑rusittiruHand-azz.等野生種質(zhì)資源的桑葉總黃酮含量較高，進(jìn)一步拔取差異原生境的10份華桑種質(zhì)資源，接納分光光度法測定了桑葉總黃酮含量，為野生資源的公正使用提供科學(xué)根據(jù)。1儀器與質(zhì)料1.1儀器TherSpetrniHeis紫外可見分光光度計(jì)，索氏提取器，電熱恒溫水浴鍋，電熱恒溫枯燥箱，電子天平。1.2試劑石油醚6090、甲醇均為闡發(fā)純。5%亞硝酸鈉溶液、10%硝酸鋁溶液、1l/L氫氧化鈉溶液接納闡發(fā)純試劑自配。蘆丁尺度

4、品購自中國醫(yī)藥上?；瘜W(xué)試劑公司。1.3質(zhì)料桑葉質(zhì)料采自國度種質(zhì)鎮(zhèn)江桑樹圃，共計(jì)10份質(zhì)料，均屬于華桑rusathayanaHensl.，經(jīng)中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)研究所潘一樂研究員斷定。2要領(lǐng)與效果2.1尺度品溶液制備細(xì)密稱取120常壓枯燥至恒重的蘆丁30g，以少量甲醇溶解，置100l量瓶中，用甲醇定容至100l，搖勻靜置，配成含蘆丁0.3g/l的尺度溶液。2.2供試品溶液制備枯燥桑葉，揉碎，稱取5g，置索氏提取器中，加甲醇100l，于恒溫水浴鍋上90提取3h，過濾定容于100l量瓶中，得供試品溶液。2.3測定液制備取供試液1l，置于25l量瓶中，加水至6l，加5%亞硝酸鈉溶液1l，混勻，安排6in

5、；加10%硝酸鋁溶液1l，混勻，安排6in；加1l/L氫氧化鈉溶液10l，以甲醇定容至25l，混勻，安排15in，得測定液。2.5測定波長選擇取尺度溶液和供試液各1l，別離置于25l量瓶中，按“2.3項(xiàng)的要領(lǐng)平行制備尺度溶液及供試液的測定液。以不加尺度溶液或供試液的相應(yīng)溶液為空缺，在200800n波長范疇內(nèi)舉行不竭縮小范疇的重復(fù)一連波長掃瞄，效果表白尺度液及供試液均在505n有最大汲取，而且不受桑葉中色素等脂溶性身分的影響，應(yīng)選擇505n為測定波長。2.6提取溶劑及提取要領(lǐng)選擇別離以乙醇、甲醇為提取溶劑，又別離用石油醚脫脂、不脫脂，舉行了提取溶劑及提取要領(lǐng)的選擇。效果表白，先用石油醚脫脂，再用

6、溶劑提取，并不克不及進(jìn)步桑葉總黃酮的得率；別離用乙醇和甲醇作提取溶劑，總黃酮的提取服從相稱。因此，擬以甲醇提取，用硝酸鋁顯色法，在505n測定桑葉總黃酮的含量。2.7重復(fù)性實(shí)行稱取5份枯燥桑葉樣品，別離按“2.2及“2.3項(xiàng)下的要領(lǐng)制成5份供試液及硝酸鋁顯色測定液，以不加供試液的相應(yīng)溶液為空缺，在波長505n處測定吸光度值，并盤算總黃酮含量及RSD值。效果見表1。表1重復(fù)性實(shí)行效果略2.8不變性實(shí)行稱取枯燥桑葉5g，按“2.2及“2.3項(xiàng)下的要領(lǐng)制成供試液和測定液，初次測定后，每隔10in測定1次，紀(jì)錄吸光度值，觀察其顯色后的不變性。效果見表2。表2不變性實(shí)行效果略為了觀察供試液的不變性，別離

7、于提取1d及5d后，將提取液供試液中參加顯色劑，測定其吸光度值。效果如表3。表3不變性實(shí)行效果略說明提取液不參加顯色劑時(shí)不變較好，而參加顯色劑后不變性較差，須在30in內(nèi)盡快測定為宜。2.9細(xì)密度實(shí)行稱取枯燥桑葉5g，按“2.2及“2.3項(xiàng)下的要領(lǐng)制備5份測定液，測定吸光度值，并盤算總黃酮含量及RSD值。效果見表4。表4細(xì)密度實(shí)行效果略2.10接納率實(shí)行取細(xì)密度實(shí)行的供試液各1l，別離置于5只25l量瓶中，別離參加尺度液1l，再按“2.3項(xiàng)的要領(lǐng)制成測定液，測定吸光度值，盤算測定液總黃酮濃度、接納率及RSD，效果見表5。以上重復(fù)性實(shí)行、細(xì)密度實(shí)行、接納率實(shí)行表白，以甲醇提娶硝酸鋁顯色、505n

8、測定的分光光度法實(shí)用于桑葉總黃酮含量的測定，該要領(lǐng)操縱輕便、效果可靠、重現(xiàn)性好。而不變性實(shí)行表白，提取液不變性較好，但參加硝酸鋁顯色后不變性較差，宜在30in內(nèi)盡早測定。表5接納率實(shí)行效果略2.11華桑種質(zhì)資源桑葉樣品測定上標(biāo)字母雷同表現(xiàn)SSR法多重比力差異不明顯；*=0.01測定效果表白，華桑種質(zhì)資源桑葉總黃酮含量總體較高，均勻到達(dá)55.38g/g。差異華桑種質(zhì)資源桑葉總黃酮含量相差較大，含量最高的保靖4號達(dá)71.672.96g/g，含量最低的德江15號為44.561.66g/g。為進(jìn)一步明白差異種質(zhì)資源總黃酮含量差異明顯性，舉行了方差闡發(fā)和多重比力，除保靖4號含量特殊高以外，別的種質(zhì)總黃酮

9、含量差異都不懸殊。從這些種質(zhì)的原產(chǎn)地來看，同一原產(chǎn)地的種質(zhì)桑葉總黃酮含量相近。原產(chǎn)于湖南的保靖4號及保靖8號含量最高，原產(chǎn)于四川的雅安3號、雅安9號含量相近，原產(chǎn)于安徽的皮桑及皖皮桑2號含量相仿，原產(chǎn)于貴州的德江巖桑、道真巖桑及德江15號含量也近似。3討論通過甲醇提娶硝酸鋁顯色、分光光度法測定，闡發(fā)了華桑種質(zhì)資源桑葉總黃酮含量。該要領(lǐng)操縱輕便、效果可靠、重復(fù)性好，相宜于桑葉總黃酮含量測定。實(shí)行效果表白，華桑桑葉總黃酮含量較高，同屬華桑的差異種質(zhì)資源總黃酮含量有明顯差異，此中原產(chǎn)于湖南的保靖4號桑葉總黃酮含量最高。?中國藥典?部2000年版紀(jì)錄：桑葉為桑科植物桑rusalbaL.的枯燥葉8；?當(dāng)

10、代中藥學(xué)大辭典?紀(jì)錄的桑也是指的rusalbaL.1。在對差異桑種桑葉總黃酮含量開端闡發(fā)的底子上，對含量較高的華桑舉行了進(jìn)一步的闡發(fā)測定，確證了華桑黃酮含量較高，提示在桑葉藥源的拓展上，應(yīng)該器重華桑等野生種的使用和開拓。進(jìn)一步闡發(fā)這些華桑種質(zhì)資源創(chuàng)造，原生境雷同的種質(zhì)資源，桑葉總黃酮含量相近。【參考文獻(xiàn)】1宋立人，洪恂，丁緒亮，等.當(dāng)代中藥學(xué)大辭典.北京：人民衛(wèi)生出書社，2001：1821.2高學(xué)敏.中藥學(xué).北京：人民衛(wèi)生出書社，2000：309.3AndalluB,SuryakanthaV,LakshiSrikanthiB,etal.Effetfulberry(rusindiaL.)ther

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