土鱉蟲提取液對人胃低分化腺癌細胞BGC

1、土鱉蟲提取液對人胃低分化腺癌細胞BGC鄒璽，劉寶瑞，錢曉萍，禹立霞【關(guān)鍵詞】土鱉蟲；,BG摘要：目的研究土鱉蟲體外對人胃低分化腺癌BG823細胞抗腫瘤活性。要領(lǐng)接納TT法測定了土鱉蟲水提物和醇提物對人胃低分化腺癌BG823細胞增殖的按捺作用，接納生長曲線測定法檢測土鱉蟲醇提物對體外造就腫瘤細胞的細胞毒作用。效果土鱉蟲水提物不克不及按捺體外造就的腫瘤細胞，而醇提物能明顯按捺人胃低分化腺癌BG823細胞增殖,藥物作用48h時按捺率最高，并有較好的劑量依靠干系。結(jié)論體外土鱉蟲水提物沒有抗腫瘤活性，醇提物有較強的抗腫瘤作用，值得進一步研究其按捺機理。關(guān)鍵詞：土鱉蟲；BG823細胞株；抗腫瘤活性TheS

2、uppressinEffetfExtratfEuplyphaganHuanGastriL-differentiatinAdenarinaellLineBG-823invitrKeyrds：Euplyphaga；BG823；Antineplasiativity?中國藥典?收載土鱉蟲正品藥材為鱉蠊科昆蟲地鱉Euplyphagasinensisalker或冀地鱉Stelephageplanyi(Bleny)的雌蟲枯燥體，性寒，味咸，有小毒。如今治療消化道腫瘤的中醫(yī)處方中土鱉蟲的應(yīng)用非常普及，大多入中藥復(fù)方煎取，以為其有抗腫瘤活性。然而，土鱉蟲的抗腫瘤作用及其抗腫瘤身分未見有明白的實行室研究報道。筆者

3、對此舉行了研究。1質(zhì)料與要領(lǐng)1.1質(zhì)料泉源實行細胞株：人胃低分化腺癌BG823細胞株為本實行室通例造就，生長于含10%新生牛血清的RPI1640完全造就液中，37恒溫，5%2，飽和濕度造就箱中生長。取對數(shù)生恒久細胞用于實行。土鱉蟲：購自六安市國泰藥業(yè)有限責任公司，批號：20221201試劑：RPI1640造就液(GIB公司產(chǎn)物)；TT(siga公司產(chǎn)物，以超純水配制成5g/l濃度)；二甲基亞砜DS，上海凌峰公司產(chǎn)物，闡發(fā)純。1.2藥物制備1.3要領(lǐng)與步調(diào)1.4腫瘤細胞抑瘤率盤算公式抑瘤率=1-(D實行組-D空缺組)/(D實行比較組-D空缺組)100%2效果2.1土鱉蟲醇提液和水提液的按捺細胞作

4、用比力水提液各組按捺率均為負數(shù)。而醇提液組10g/l組按捺率為91.87，5g/l組按捺率為72.56，2.5g/l組按捺率為24.57，1.25g/l組按捺率為3.23，而1濃度的乙醇的按捺率為-4.68。效果見圖1。圖1土鱉蟲醇提液和水提液的按捺細胞作用比力略2.2差異濃度土鱉蟲醇提液按捺細胞作用比力加藥后造就24h時按捺率自低濃度到高濃度漸漸上升，12g/l時，沒有顯著的抗腫瘤作用，5g/l開始，抑瘤率處于較高的程度，8g/l的藥物濃度抑瘤率最高。I50為34g/l。效果見表1，圖2。表1土鱉蟲醇提液對體外造就腫瘤細胞的細胞毒作用略2.3差異時間土鱉蟲醇提液按捺細胞作用比力從圖中可以看出

5、：加藥后造就8h，即有顯著的抗腫瘤作用，而且隨著劑量的增長，按捺率漸漸上升，48h時按捺率處于最高的程度，72h與48h并無顯著差異。效果見圖2。圖2差異濃度差異時間土鱉蟲醇提物的作用曲線略3討論土鱉蟲入肝、心、脾三經(jīng)，專理血癥，具有散血淤、消堅結(jié)、解凝活血、接骨續(xù)筋、消腫止痛、下乳通經(jīng)等成果。婦科常用于逐淤通結(jié)，內(nèi)科常用于散結(jié)消癥，傷科常用于續(xù)骨療傷。其性中和，破而不峻，能行能和，大哥體虛者均可用之，是中醫(yī)臨床中血淤證的常用藥。始載于?神農(nóng)本草經(jīng)?，主“心腹寒熱灑灑，血積瘕，破堅，下血閉。?金要略?、?本草綱目?等歷代醫(yī)藥著作中均有記述。?金要略?中該藥入方四次，此中三次以丸散入藥，在治療腹

6、中瘕的大黃庶蟲丸和鱉甲煎丸中均研末為丸，而非水提液。僅鄙人淤血湯中入湯劑，治療經(jīng)水倒霉。近十余年有幾篇文獻都提到了土鱉蟲具有抗腫瘤作用，但研究并不深化。比力公認的一點是土鱉蟲在體外對白血病細胞有按捺作用3，4。別的有人推測土鱉蟲中谷甾醇身分5和以油酸為主的不飽和脂肪酸6很有大概有抗癌作用。關(guān)于土鱉蟲抗腫瘤細胞的機制的研究就比力少，田代華3以為土鱉蟲具有抗突變及抗腫瘤作用，可按捺體外肝癌、胃癌細胞的呼吸，但其理論按照不詳。如今治療腫瘤的中藥湯劑中土鱉蟲的應(yīng)用非常普及。按照我們研究的效果，土鱉蟲水提液對付胃癌BG823和肝癌HePG2細胞并沒有按捺作用，相反，有促進腫瘤細胞增長的作用。由此，我們是

7、否可以推想：臨床上應(yīng)用時，如取其抗腫瘤作用，應(yīng)當改變劑型？本研究接納TT法對差異濃度土鱉蟲醇提物作用下細胞72h的生長環(huán)境舉行了不雅察，效果表白土鱉蟲醇提物對細胞生長的按捺成必然濃度的依靠性:當藥物濃度較低時，細胞吸光度值無顯著變革。最正確藥物濃度在8g/l，對胃低分化腺癌有顯著的殺傷作用，其抑瘤率到達98.06%。本研究還表現(xiàn)土鱉蟲醇提物對細胞生長的按捺成一按時間的依靠性:土鱉蟲醇提物對細胞作用4872h按捺作用最強。我們正進一步提取分散其有用部位并研究其按捺作用的機理。參考文獻：1sannT.Rapidlrietriassayfrellulargrthandsurvival:AppliatintprliferatinandyttxiityassaysJ.JIunlethds,1983,65(1-2):55.2ShiyaaY,KubtaT,atanabe,etal.PreditabilityfinvivhesensitivitybyinvitrTTassayithreferenetthelngeniassayJ.JSurgnl.1989ay;41(1):12.3田代華.有用中藥辭典.北京：人民衛(wèi)生出書社，2002：2209.4傅桂香，徐永珍，芮和愷，等.地