【考前三個(gè)月】2015屆高考生物（人教通用）知識(shí)專題突破練：專題12

1、直擊考綱1.基因工程的誕生()。2.基因工程的原理及技術(shù)()。3.基因工程的應(yīng)用()。4.蛋白質(zhì)工程()。5.植物的組織培養(yǎng)()。6.動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆()。7.細(xì)胞融合與單克隆抗體()。8.動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過程與胚胎工程的理論基礎(chǔ)()。9.胚胎干細(xì)胞的移植()。10.胚胎工程的應(yīng)用()。11.轉(zhuǎn)基因生物的安全性()。12.生物武器對(duì)人類的威脅()。13.生物技術(shù)中的倫理問題()。14.簡述生態(tài)工程的原理()。15.生態(tài)工程的實(shí)例()?？键c(diǎn)34基因工程與蛋白質(zhì)工程判斷下列有關(guān)基因工程和蛋白質(zhì)工程的敘述(1)限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶，用前者可切割煙草花葉病毒的核

2、酸(2009浙江，3B和2010浙江，2A)()(2)每個(gè)重組質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)(2011浙江，6B)()(3)應(yīng)用DNA探針技術(shù)可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá)(2011四川，5D)()(4)自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上，屬于基因工程(2010大綱全國，5D)()(5)從某海洋動(dòng)物中獲得一基因，其表達(dá)產(chǎn)物為一種抗菌性和溶血性均較強(qiáng)的多肽P1。目前在P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物，首先要做的是依據(jù)P1氨基酸序列設(shè)計(jì)多條模擬肽(2013廣東，3C)()(6)采用蛋白質(zhì)工程進(jìn)一步改造AFB1解毒酶的基本途徑

3、是：從提高酶的活性出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(2012天津，8節(jié)選)()1掌握基因工程的主干知識(shí)圖解(1)目的基因的獲取eq blcrc (avs4alco1(從基因文庫中獲取,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增,用化學(xué)方法直接人工合成)(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建(目的基因啟動(dòng)子終止子標(biāo)記基因)(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞導(dǎo)入植物：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法導(dǎo)入動(dòng)物：顯微注射法導(dǎo)入微生物導(dǎo)入微生物細(xì)胞：感受態(tài)細(xì)胞法(用Ca2處理)(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定插入檢測(cè)：DNA分子雜交轉(zhuǎn)錄檢測(cè)：DNARNA分子雜交翻譯檢測(cè)：抗原抗體雜交個(gè)體水平檢測(cè)：抗性接種

4、實(shí)驗(yàn)2基本工具項(xiàng)目限制酶DNA連接酶載體作用切割目的基因和載體拼接DNA片段，形成重組DNA攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞作用部位兩個(gè)核苷酸的脫氧核糖與磷酸間形成的磷酸二酯鍵作用特點(diǎn)(條件)識(shí)別特定的核苷酸序列；在特定位點(diǎn)上切割EcoliDNA連接酶只能連接黏性末端；T4DNA連接酶能連接黏性末端和平末端能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制；有多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)；具有特殊的標(biāo)記基因3.基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程1(2014廣東，25)利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶(CarE)制劑的流程如圖所示，下列敘述正確的是(雙選)()A過程需使用逆轉(zhuǎn)錄酶B過程需使用解旋酶和PCR獲取目的基因C過程使用的感受態(tài)細(xì)胞可用Na

5、Cl溶液制備D過程可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細(xì)胞答案AD解析A項(xiàng)，過程是通過逆轉(zhuǎn)錄獲取DNA，逆轉(zhuǎn)錄過程需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶。B項(xiàng)，過程指的是從cDNA文庫中獲取目的基因，不需要利用PCR技術(shù)，也用不到解旋酶。C項(xiàng)，過程中使用的感受態(tài)細(xì)胞要用CaCl2溶液制備，而不是用NaCl溶液制備。D項(xiàng)，過程鑒定目的基因是否已經(jīng)導(dǎo)入受體細(xì)胞，可以用標(biāo)記的目的基因?yàn)樘结榿頇z測(cè)受體細(xì)胞中是否存在目的基因，即利用DNA分子雜交鑒定。2(2014重慶，4)下圖是利用基因工程培育抗蟲植物的示意圖。以下相關(guān)敘述，正確的是()A的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶參與B侵染植物細(xì)胞后，重組Ti質(zhì)粒整

6、合到的染色體上C的染色體上若含抗蟲基因，則就表現(xiàn)出抗蟲性狀D只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異答案D解析A項(xiàng)，為重組Ti質(zhì)粒，其構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶參與。B項(xiàng)，含重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞后，重組Ti質(zhì)粒上的目的基因整合到受體細(xì)胞()的染色體上，而并非整個(gè)重組Ti質(zhì)粒整合到的染色體上。C項(xiàng)，目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不一定能進(jìn)行表達(dá)，所以抗蟲基因?qū)胫参锛?xì)胞后，培育成的植株也不一定具有抗蟲性狀。D項(xiàng)，轉(zhuǎn)基因抗蟲植株是否培育成功，可以從個(gè)體水平上進(jìn)行檢測(cè)，即觀察植株是否具有抗蟲性狀，如果具有抗蟲性狀則說明發(fā)生了可遺傳變異(基因重組)。3(2014江蘇，23)下列關(guān)于

7、基因工程技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是(多選)()A切割質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶均特異性地識(shí)別6 個(gè)核苷酸序列BPCR反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了DNA聚合酶催化不同的反應(yīng)C載體質(zhì)粒通常采用抗生素合成基因作為篩選標(biāo)記基因D抗蟲基因即使成功地插入到植物細(xì)胞染色體上也未必能正常表達(dá)答案ABC解析A項(xiàng)，限制性核酸內(nèi)切酶大多特異性地識(shí)別6個(gè)核苷酸序列，但也有少數(shù)限制性核酸內(nèi)切酶能識(shí)別4個(gè)、5個(gè)或8個(gè)核苷酸序列。B項(xiàng)，PCR反應(yīng)中溫度周期性變化是為變性、復(fù)性和延伸創(chuàng)造條件。另外，耐高溫的DNA聚合酶只是在延伸階段發(fā)揮催化作用，變性和復(fù)性過程不需要酶的催化。C項(xiàng)，載體質(zhì)粒上的抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因，供重組DNA

8、的鑒定和選擇，而不是抗生素合成基因。D項(xiàng)，目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不一定能正常表達(dá)。4圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度(bp即堿基對(duì))和部分堿基序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列。現(xiàn)有Msp、BamH、Mbo、Sma4種限制性核酸內(nèi)切酶，它們識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為：CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。下列分析中正確的是()A若用限制酶Msp完全切割圖1中DNA片段，會(huì)破壞2個(gè)磷酸二酯鍵B若圖1所示DNA虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被TA替換，用限制酶Sma完全切割后會(huì)產(chǎn)生3種不同的DNA片段C若切割圖2中的質(zhì)粒以便拼接目的基因D應(yīng)選擇限制酶 BamH和MboD若用上述條件

9、構(gòu)建含有目的基因D的重組質(zhì)粒并成功導(dǎo)入細(xì)菌體內(nèi)，則此細(xì)菌在添加抗生素A和B的培養(yǎng)基中不能存活答案D解析由題意可知，圖1中的目的基因含有2個(gè)限制酶Msp的切割位點(diǎn)，完全切割后會(huì)破壞4個(gè)磷酸二酯鍵，故A錯(cuò)誤；若圖中堿基對(duì)被替換后，限制酶Sma的切割位點(diǎn)只有1個(gè)，完全切割后能產(chǎn)生2種不同的DNA片段，故B錯(cuò)誤；若切割圖2中的質(zhì)粒，并且不能破壞目的基因，最好選擇限制酶BamH進(jìn)行切割，故C錯(cuò)誤；由于插入目的基因后會(huì)破壞抗生素A抗性基因，但沒破壞抗生素B抗性基因，故在含有抗生素A和抗生素B的培養(yǎng)基中不能存活，D正確。5(2014新課標(biāo)，40)植物甲具有極強(qiáng)的耐旱性，其耐旱性與某個(gè)基因有關(guān)。若從該植物中獲

10、得該耐旱基因，并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性?；卮鹣铝袉栴}：(1)理論上，基因組文庫含有生物的_基因；而cDNA文庫中含有生物的_基因。(2)若要從植物甲中獲得耐旱基因，可首先建立該植物的基因組文庫，再從中_出所需的耐旱基因。(3)將耐旱基因?qū)朕r(nóng)桿菌，并通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其導(dǎo)入植物_的體細(xì)胞中，經(jīng)過一系列的過程得到再生植株。要確認(rèn)該耐旱基因是否在再生植株中正確表達(dá)，應(yīng)檢測(cè)此再生植株中該基因的_，如果檢測(cè)結(jié)果呈陽性，再在田間試驗(yàn)中檢測(cè)植株的_是否得到提高。(4)假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比為31時(shí)，則可推測(cè)該耐旱基因整合到了_(填

11、“同源染色體的一條上”或“同源染色體的兩條上”)。答案(1)全部部分(2)篩選(3)乙表達(dá)產(chǎn)物耐旱性(4)同源染色體的一條上解析(1)基因組文庫含有生物的全部基因，而cDNA文庫中含有生物的部分基因。(2)植物甲具有極強(qiáng)的耐旱性，其耐旱性與某個(gè)基因有關(guān)，若要從植物甲中獲得耐旱基因，可首先建立該植物的基因組文庫，包含該生物的所有基因，然后再從中篩選出所需的耐旱基因。(3)若從植物甲中獲得該耐旱基因，并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中，通常采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。將耐旱基因?qū)胫参镆业捏w細(xì)胞后，經(jīng)過植物組織培養(yǎng)得到再生植株。要確認(rèn)該耐旱基因是否在再生植株中正確表達(dá)，應(yīng)檢測(cè)該耐旱基因是否合成了相應(yīng)的蛋

12、白質(zhì)，即檢測(cè)此再生植株中該基因的表達(dá)產(chǎn)物，如果檢測(cè)結(jié)果呈陽性，說明已經(jīng)合成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)，這時(shí)再進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)檢測(cè)，即在田間試驗(yàn)中檢測(cè)植株的耐旱性是否得到提高。(4)假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中耐旱和不耐旱植株的數(shù)量比為31，符合基因的分離定律，說明得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株為雜合子，因此可推測(cè)該耐旱基因只整合到了同源染色體的一條上。6(2014山東，36)人組織纖溶酶原激活物(htPA)是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：(1)htPA基因與載體用_切割后，通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體。檢測(cè)目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，可采用_

13、技術(shù)。(2)為獲取更多的卵(母)細(xì)胞，要對(duì)供體母羊注射促性腺激素，使其_。采集的精子需要經(jīng)過_，才具備受精能力。(3)將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是_，為了獲得母羊，移植前需對(duì)已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行_。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的_。(4)若在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中檢測(cè)到_，說明目的基因成功表達(dá)。答案(1)同種限制性核酸內(nèi)切酶(或同種限制酶)DNA分子雜交(或核酸探針)(2)超數(shù)排卵獲能(處理)(3)顯微注射法性別鑒定全能性(4)htPA(或人組織纖溶酶原激活物)解析(1)用同種限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)目的基因和載體進(jìn)行切割，以形成相同的黏性

14、末端。檢測(cè)目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，常用DNA分子雜交技術(shù)。(2)對(duì)供體母羊注射促性腺激素可以使其超數(shù)排卵，采集的精子需要經(jīng)過獲能處理后才具備受精能力。(3)將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵(動(dòng)物細(xì)胞)常用的方法是顯微注射法。為了獲得母羊，需要對(duì)胚胎進(jìn)行性別鑒定。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，依據(jù)的原理是早期胚胎細(xì)胞的全能性。(4)目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是在轉(zhuǎn)基因母羊的羊乳中檢測(cè)到htPA，即人組織纖溶酶原激活物。7(2014海南，31)下面是將某細(xì)菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)，制備“工程菌”的示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答：(1)獲得A有兩條途徑：一是以A的mRNA為模板，在_的催化下，合

15、成互補(bǔ)的單鏈DNA，然后在_作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需基因；二是根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的_序列，推測(cè)出相應(yīng)的mRNA序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)其DNA的_序列，再通過化學(xué)方法合成所需基因。(2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)，需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物質(zhì)有_、_、4種脫氧核苷酸和耐熱性的DNA聚合酶，擴(kuò)增過程可以在PCR擴(kuò)增儀中完成。(3)由A和載體B拼接形成的C通常稱為_。(4)在基因工程中，常用Ca2處理D，其目的是_。答案(1)逆轉(zhuǎn)錄酶DNA聚合酶氨基酸脫氧核苷酸(2)引物(目的基因或A基因)模板(3)基因表達(dá)載體(4)使其成為感受態(tài)細(xì)胞，使大腸桿菌更容易吸收重組DNA分子解析(

16、1)利用逆轉(zhuǎn)錄法合成目的基因的過程是：以mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化作用下合成單鏈DNA，然后在DNA聚合酶的作用下，合成雙鏈DNA分子；根據(jù)蛋白質(zhì)工程合成目的基因的過程是：根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)相應(yīng)的mRNA序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)DNA中脫氧核苷酸的排列順序，通過化學(xué)方法合成。(2)PCR過程中需要酶、底物、模板、引物和能量等條件。(3)目的基因和載體結(jié)合，形成基因表達(dá)載體。(4)在利用大腸桿菌做受體細(xì)胞時(shí)，需要先用Ca2處理，使之成為感受態(tài)細(xì)胞，有利于其吸收重組DNA分子。考點(diǎn)35細(xì)胞工程判斷下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述(1)在“羊胎兒皮膚組織塊成纖維細(xì)胞”過程中，需

17、要用胰蛋白酶處理，在培養(yǎng)過程中，將成纖維細(xì)胞置于5%CO2的氣體環(huán)境中，CO2的作用是維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定，另外為便于清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液(2012山東，35(2)和2010福建，32(3)整合)()(2)不同種植物原生質(zhì)體融合的過程屬于植物體細(xì)胞雜交過程，該技術(shù)可克服生殖隔離的限制，培育遠(yuǎn)緣雜種(2009全國卷，4AB)()(3)培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞，克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變(2010浙江，4AB)()(4)二倍體細(xì)胞和惡性細(xì)胞系一樣傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的(2010浙江，4CD)()(5)二倍體

18、植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株，若用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子(2011江蘇，16BC)()1植物體細(xì)胞雜交與單克隆抗體制備過程比較步驟植物體細(xì)胞雜交過程單克隆抗體制備過程第一步原生質(zhì)體的制備(酶解法)正常小鼠免疫處理第二步原生質(zhì)體融合(物、化法)動(dòng)物細(xì)胞融合(物、化、生物法)第三步雜種植株的篩選與培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞篩選與培養(yǎng)第四步雜種植株的誘導(dǎo)與鑒定單克隆抗體的提純相同點(diǎn)兩技術(shù)手段培養(yǎng)過程中都進(jìn)行有絲分裂，都是無性繁殖，都可稱為克隆，都不涉及減數(shù)分裂；均為無菌操作，需要適宜的溫度、pH等條件(1)誘導(dǎo)融合的方法分別有哪些？融合的細(xì)胞類型有哪幾種？提示誘導(dǎo)植

19、物體細(xì)胞的原生質(zhì)體融合的方法主要有離心、振動(dòng)、電激或用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑。動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒(誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的特有因素)、電激等。融合的細(xì)胞類型：前者AA、BB、AB。后者瘤瘤、B瘤、BB。(2)各自的原理分別有哪些？提示前者有細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性，后者有細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞增殖。2掌握克隆動(dòng)物培育流程圖D個(gè)體的性別、性狀與哪個(gè)個(gè)體相同？提示根據(jù)發(fā)育成新個(gè)體D的重組細(xì)胞核由動(dòng)物B提供，而性別及大多數(shù)遺傳性狀是由核內(nèi)遺傳物質(zhì)決定的，故B、D兩者的性別及大多數(shù)遺傳性狀相同。1(2014浙江，3)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是()A連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞大

20、多具有二倍體核型B某些癌細(xì)胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞C由多個(gè)祖細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群為一個(gè)克隆D未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞具有相同的性狀答案B解析A項(xiàng)，連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞一般都培養(yǎng)了多次，二倍體核型發(fā)生了改變，大多數(shù)細(xì)胞具有異倍體核型。B項(xiàng)，細(xì)胞癌變是由基因突變引起的，如果癌細(xì)胞在一定條件下(如用秋水仙胺等藥物治療)，則有可能恢復(fù)成正常細(xì)胞。C項(xiàng)，細(xì)胞克隆的最基本的要求是：必須確定所建立的克隆來源于單個(gè)細(xì)胞。D項(xiàng)，未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系具有異質(zhì)性。2(2014長沙模擬)下圖表示四倍體蘭花葉片通過植物組織培養(yǎng)成植株的過程，下列相關(guān)敘述中正確的是(雙選)()A過程中發(fā)生了有絲分裂和減數(shù)分裂B階段需

21、要生長素而階段僅需要細(xì)胞分裂素C階段為脫分化過程D此蘭花的花藥離體培養(yǎng)所得的植株體細(xì)胞有兩個(gè)染色體組答案CD解析過程均發(fā)生了有絲分裂。植物組織培養(yǎng)的各個(gè)階段均需要生長素和細(xì)胞分裂素刺激。階段細(xì)胞失去分化狀態(tài)變成愈傷組織，為脫分化過程。蘭花是四倍體，花粉細(xì)胞含兩個(gè)染色體組，經(jīng)離體培養(yǎng)所得的植株體細(xì)胞含兩個(gè)染色體組。3(2014濟(jì)南5月)如圖為小白鼠的胚胎干細(xì)胞分化示意圖。請(qǐng)回答：(1)圖中分化程度最低的是_。在體外培養(yǎng)條件下，培養(yǎng)液中加入_因子，可誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化?？茖W(xué)家將小鼠已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核移入卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，培育出“克隆鼠”，這里用卵母細(xì)胞的原因是_。直到今天也

22、不能用類似_(某種植物細(xì)胞工程的技術(shù)手段)的方法直接獲得完整的動(dòng)物個(gè)體。因此，培育“克隆鼠”的過程，實(shí)際是通過_來實(shí)現(xiàn)的。(2)在培育轉(zhuǎn)基因鼠的過程中，人們將關(guān)鍵基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小白鼠的成纖維細(xì)胞，使其變成多功能干細(xì)胞。在該技術(shù)中，逆轉(zhuǎn)錄病毒是關(guān)鍵基因進(jìn)入成纖維細(xì)胞的_，它能夠攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞。(3)在制取單克隆抗體過程中，用_細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)多次篩選最終得到能分泌_的雜交瘤細(xì)胞。答案(1)胚胎干細(xì)胞分化誘導(dǎo)卵母細(xì)胞可以給它提供表達(dá)全能性的環(huán)境植物組織培養(yǎng)(動(dòng)物體細(xì)胞)核移植(2)載體(3)效應(yīng)B淋巴(漿)特異性抗體解析(1)圖中分化程度最低的是胚胎干細(xì)胞。在體外培養(yǎng)條件

23、下，培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，可誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化。科學(xué)家將小鼠已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核移入卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，培育出“克隆鼠”，這里用卵母細(xì)胞的原因是：卵母細(xì)胞可以給它提供表達(dá)全能性的環(huán)境。直到今天也不能用類似植物組織培養(yǎng)(某種植物細(xì)胞工程的技術(shù)手段)的方法直接獲得完整的動(dòng)物個(gè)體。因此，培育“克隆鼠”的過程，實(shí)際是通過(動(dòng)物體細(xì)胞)核移植來實(shí)現(xiàn)的。(2)在培育轉(zhuǎn)基因鼠的過程中，人們將關(guān)鍵基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小白鼠的成纖維細(xì)胞，使其變成多功能干細(xì)胞。在該技術(shù)中，逆轉(zhuǎn)錄病毒是關(guān)鍵基因進(jìn)入成纖維細(xì)胞的載體，它能夠攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞。(3)在制取單克隆抗體過程中，用效應(yīng)B淋巴

24、細(xì)胞(漿細(xì)胞)與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)多次篩選最終得到能分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。4(2014新課標(biāo)，40)某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù))，結(jié)果如圖所示。若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目為40條)，并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目為60條)按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞?；卮鹣铝袉栴}：(1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16 00

25、0以上，則小鼠最少需要經(jīng)過_次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是_小鼠，理由是_。(2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有_，體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是_。(3)雜交瘤細(xì)胞中有_個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是_條。(4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是_。答案(1)4YY小鼠的血清抗體效價(jià)最高(2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%(3)1100(4)不能無限增殖解析(1)據(jù)圖分析可知，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血

26、清抗體效價(jià)幾乎都達(dá)到16 000以上，小鼠Y的血清抗體的效價(jià)最高，最適合用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外，還有骨髓瘤細(xì)胞的自身融合細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的自身融合細(xì)胞。細(xì)胞的融合是隨機(jī)的，并且不可能所有細(xì)胞都融合，故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。(3)動(dòng)物細(xì)胞融合后形成的是具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞的細(xì)胞核中的染色體數(shù)目最多為4060100(條)。(4)正常細(xì)胞的分裂次數(shù)是有限的，且經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞高度分化，不能無限增殖，而是經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后逐漸衰老死亡。5科學(xué)家從某無限增殖的細(xì)胞中分離出無限增殖調(diào)控基因(prG)，該基因能激發(fā)細(xì)胞分裂

27、，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景。請(qǐng)回答下列問題：(1)利用_技術(shù)制備單克隆抗體，常用聚乙二醇、_、電激等誘導(dǎo)因素誘導(dǎo)細(xì)胞融合。再經(jīng)多次篩選和細(xì)胞培養(yǎng)獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的_細(xì)胞。(2)有人提出用核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞來生產(chǎn)單克隆抗體，請(qǐng)完成設(shè)計(jì)方案：取_細(xì)胞的細(xì)胞核，移植到去核的能夠_的細(xì)胞中，構(gòu)成重組細(xì)胞。(假定移植后細(xì)胞核中基因的表達(dá)狀態(tài)不受影響)將重組細(xì)胞在_條件下做大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠_內(nèi)增殖，以獲得大量單克隆抗體。(3)也有人提出，可以直接通過基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因(prG)來制備單克隆抗體，其思路如圖所示。酶A是指_，酶B是指_。圖中表示_，對(duì)進(jìn)行檢測(cè)與鑒定的

28、目的是_，具有的特點(diǎn)是_。答案(1)動(dòng)物細(xì)胞融合滅活的病毒雜交瘤(2)特定抗原刺激的B淋巴無限增殖體外腹腔(3)限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶目的基因(無限增殖調(diào)控基因或prG)檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入和是否表達(dá)既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體 解析(1)在利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體的過程中，常用聚乙二醇、滅活的病毒、電激等方法誘導(dǎo)細(xì)胞融合，融合后的細(xì)胞經(jīng)多次篩選和細(xì)胞培養(yǎng)，最終獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。(2)產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞應(yīng)具有兩個(gè)特點(diǎn)：能無限增殖和產(chǎn)生特定抗體。若用核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞首先取特定抗原刺激的B淋巴細(xì)胞的細(xì)胞核，移植到去核的能夠無限增殖的細(xì)胞中，構(gòu)成重組

29、細(xì)胞；然后將重組細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，以獲得大量單克隆抗體。(3)基因工程中第一步獲取目的基因；第二步用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶處理供體DNA和質(zhì)粒，獲取基因表達(dá)載體(重組質(zhì)粒)；第三步將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞；第四步檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入和表達(dá)。 6我國科學(xué)家張道遠(yuǎn)先生通過從耐旱灌木白花檉柳中克隆得到TSOD基因，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)轉(zhuǎn)化到棉花中，獲得了具備更強(qiáng)抗旱性的T4代轉(zhuǎn)基因棉花株系。下圖為轉(zhuǎn)基因抗旱棉花的培育過程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答：(1)過程表示用_擴(kuò)增目的基因的方法。過程用到的工具酶有_。步驟一般用_處理農(nóng)桿菌，使其易吸收周圍環(huán)境中的DNA分子。(2)將重組質(zhì)粒導(dǎo)

30、入棉花細(xì)胞除步驟所示的方法外，還可采用_。如果受體細(xì)胞是動(dòng)物的受精卵，則一般采用的方法是_。(3)外植體培養(yǎng)成為試管苗的過程采用了_技術(shù)，利用了_的原理，步驟表示_。(4)為了確定抗旱轉(zhuǎn)基因棉花是否培育成功，可先用放射性同位素標(biāo)記的_作探針進(jìn)行分子水平鑒定，再_進(jìn)行個(gè)體水平鑒定棉花植株的抗旱性。答案(1)PCR技術(shù)限制酶(限制性核酸內(nèi)切酶)、DNA連接酶Ca2(或CaCl2)(2)花粉管通道法(基因槍法)顯微注射法(3)植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞的全能性脫分化、再分化(4)抗旱基因(TSOD基因、目的基因)移栽到干旱土地中解析(1)過程表示用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。過程用到的工具酶有限制酶(限制性核

31、酸內(nèi)切酶)、DNA連接酶。步驟一般用Ca2(或CaCl2)處理農(nóng)桿菌，使其易吸收周圍環(huán)境中的DNA分子。(2)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入棉花細(xì)胞除步驟所示的方法外，還可采用花粉管通道法(基因槍法)。如果受體細(xì)胞是動(dòng)物的受精卵，則一般采用的方法是顯微注射法。(3)外植體培養(yǎng)成為試管苗的過程采用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，利用了植物細(xì)胞的全能性的原理，步驟表示脫分化、再分化。(4)為了確定抗旱轉(zhuǎn)基因棉花是否培育成功，可先用放射性同位素標(biāo)記的抗旱基因(TSOD基因、目的基因)作探針進(jìn)行分子水平鑒定，再移栽到干旱土地中進(jìn)行個(gè)體水平鑒定棉花植株的抗旱性?？键c(diǎn)36胚胎工程1判斷下列有關(guān)胚胎工程及其應(yīng)用的敘述(1)絕大多數(shù)精卵

32、細(xì)胞的識(shí)別具有物種特異性(2012浙江，2A)()(2)卵裂期胚胎中細(xì)胞數(shù)目和有機(jī)物總量在不斷增加(2009江蘇，8A)()(3)早期胚胎培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液通常都需加入血清(2011江蘇，18C)()(4)受精卵發(fā)育到原腸胚階段才能進(jìn)行胚胎移植(2011江蘇，18B)()(5)試管嬰兒技術(shù)主要包括體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)(2011江蘇，18D)()(6)胚胎分割時(shí)需將原腸胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割(2009江蘇，8B)()(7)利用胚胎分割技術(shù)可以獲得兩個(gè)基因型完全相同的胚胎(2010江蘇，16C)()(8)胚胎干細(xì)胞具有細(xì)胞核大、核仁小和蛋白質(zhì)合成旺盛等特點(diǎn)(2009江蘇，8C

33、)()2(2013江蘇，13)軟骨發(fā)育不全為常染色體顯性遺傳病，基因型為HH的個(gè)體早期死亡。一對(duì)夫妻均為該病患者，希望通過胚胎工程技術(shù)輔助生育一個(gè)健康的孩子。下列做法錯(cuò)誤的是()A首先經(jīng)超排卵處理后進(jìn)行體外受精B從囊胚中分離細(xì)胞，培養(yǎng)后檢測(cè)基因型C根據(jù)檢測(cè)結(jié)果篩選基因型為hh的胚胎D將胚胎培養(yǎng)至原腸胚期后移植到子宮答案D解析胚胎移植的時(shí)期是桑椹胚或囊胚，D錯(cuò)誤。3(2013山東，35節(jié)選)科學(xué)家通過誘導(dǎo)黑鼠體細(xì)胞去分化獲得誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(iPS)，繼而利用iPS細(xì)胞培育出與黑鼠遺傳特性相同的克隆鼠，流程如下：(1)圖中2細(xì)胞胚胎可用人工方法從灰鼠輸卵管內(nèi)獲得，該過程稱為_；也可以從灰鼠體內(nèi)取

34、出卵子， 通過_后進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)獲得。(2)圖中重組囊胚通過_技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育，暫不移入的胚胎可使用_方法保存。(3)小鼠胚胎干細(xì)胞(ES)可由囊胚的_分離培養(yǎng)獲得。iPS與ES細(xì)胞同樣具有發(fā)育全能性，有望在對(duì)人類iPS細(xì)胞進(jìn)行定向_后用于疾病的細(xì)胞治療。答案(1)沖卵體外受精(2)胚胎移植冷凍(或低溫)(3)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)誘導(dǎo)分化解析細(xì)胞胚胎可從灰鼠輸卵管內(nèi)沖卵獲得；重組囊胚通過胚胎移植技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi)，暫不進(jìn)行胚胎移植的胚胎可放入196 的液氮中冷凍保存；胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞，是由早期胚胎或原始性腺分離出來的一類細(xì)胞。內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胎兒的各種組織，可以作為干細(xì)胞的來源，

35、iPS與ES細(xì)胞一樣，可通過誘導(dǎo)定向分化修補(bǔ)某些功能異常的細(xì)胞來治療疾病。1早期胚胎發(fā)育過程的流程分析2胚胎工程操作流程分析(以牛為例)(1)上述圖示中幾次用到了激素？分別是什么作用？提示兩次。第一次用促性腺激素對(duì)供體做超數(shù)排卵處理；第二次用激素對(duì)受體和供體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理。(2)胚胎移植過程進(jìn)行哪兩次檢查？提示第一次是對(duì)收集的胚胎進(jìn)行檢查；第二次是對(duì)受體母畜是否妊娠進(jìn)行檢查。(3)胚胎移植所用胚胎是有性生殖還是無性生殖產(chǎn)生的？提示是有性生殖還是無性生殖，取決于胚胎是由受精卵形成，還是通過核移植技術(shù)形成重組細(xì)胞發(fā)育而成或胚胎分割形成。其中通過核移植技術(shù)和胚胎分割形成的胚胎是無性生殖產(chǎn)生的。

36、(4)胚胎移植(胚胎能夠移入受體、胚胎收集、胚胎在受體能夠存活、胚胎能夠正常生長發(fā)育)的生理學(xué)基礎(chǔ)是什么？提示哺乳動(dòng)物排卵后，同種供受體生殖器官的生理變化是相同的，這是胚胎能夠移入受體的生理基礎(chǔ)。早期胚胎形成后，未與母體子宮建立聯(lián)系，而是處于游離狀態(tài)，這是胚胎收集的生理基礎(chǔ)。受體對(duì)移入子宮的外來胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這是胚胎在受體內(nèi)能夠存活的生理基礎(chǔ)。供體胚胎可與受體子宮建立聯(lián)系，且不影響供體胚胎的遺傳特性，這是供體胚胎正常發(fā)育的生理基礎(chǔ)。3胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)流程1(2014江蘇，2)下列關(guān)于蛙胚胎發(fā)育過程的敘述，正確的是()A通過細(xì)胞分裂不斷增加細(xì)胞數(shù)量，并在一定時(shí)期發(fā)生細(xì)胞分化B胚胎發(fā)

37、育過程中細(xì)胞不斷分裂，但不發(fā)生凋亡C隨著細(xì)胞分裂次數(shù)的增加，蛙胚的有機(jī)物總量不斷增加D發(fā)育過程中蛙胚從環(huán)境中獲得的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)逐漸增加答案A解析A項(xiàng)，在蛙的胚胎發(fā)育過程中，通過細(xì)胞分裂增加細(xì)胞數(shù)量，在囊胚期細(xì)胞開始分化。B項(xiàng)，胚胎發(fā)育過程中，既有細(xì)胞的分裂和分化，也有細(xì)胞的衰老和凋亡。C項(xiàng)，在蛙胚胎發(fā)育的過程中，由于細(xì)胞呼吸的消耗，有機(jī)物的總量不斷減少。D項(xiàng)，蛙胚胎發(fā)育過程中需要從環(huán)境中獲得氧氣，但利用的營養(yǎng)物質(zhì)是受精卵自身含有的。2(2014江蘇，19)杜泊羊以其生長速度快、肉質(zhì)好等優(yōu)點(diǎn)，被稱為“鉆石級(jí)”肉用綿羊。 科研工作者通過胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下圖所示，相關(guān)敘述正確的是()

38、A為了獲得更多的卵母細(xì)胞，需用雌激素對(duì)雌性杜泊羊進(jìn)行處理B從卵巢中采集的卵母細(xì)胞可直接與獲能的精子進(jìn)行體外受精C為避免代孕綿羊?qū)χ踩肱咛ギa(chǎn)生排斥反應(yīng)，應(yīng)注射免疫抑制劑D為了進(jìn)一步擴(kuò)大繁殖規(guī)模，可通過胚胎分割技術(shù)獲得同卵雙胎答案D解析A項(xiàng)，超數(shù)排卵時(shí)使用的是促性腺激素，而不是雌激素。B項(xiàng)，從卵巢中采集的卵母細(xì)胞未發(fā)育成熟，需要經(jīng)過體外人工培養(yǎng)成熟后才能與獲能的精子受精。C項(xiàng)，受體對(duì)移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，故不需要注射免疫抑制劑。D項(xiàng)，為了進(jìn)一步擴(kuò)大繁殖規(guī)模，可通過胚胎分割技術(shù)獲得基因型相同的同卵雙胎或多胎個(gè)體。3轉(zhuǎn)基因克隆豬已經(jīng)在我國培育成功。研究組首先從豬胎兒皮膚中分離出纖

39、維細(xì)胞，進(jìn)行體外培育。通過電穿孔的方法將構(gòu)建好的基因表達(dá)載體轉(zhuǎn)入纖維細(xì)胞，經(jīng)篩選后將基因纖維細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞克隆。接著，將重組胚胎移入代孕母豬體內(nèi)，最終獲得轉(zhuǎn)基因克隆豬。請(qǐng)回答：(1)在對(duì)纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，需要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的_，以防止培養(yǎng)過程的污染，此外，應(yīng)定期更換_，防止_對(duì)細(xì)胞自身造成危害。(2)篩選轉(zhuǎn)基因細(xì)胞時(shí)，需要利用基因表達(dá)載體中_的作用。(3)在進(jìn)行體細(xì)胞克隆前，先要從屠宰場(chǎng)收集豬卵巢，采集_，并在體外培養(yǎng)成熟。然后將轉(zhuǎn)基因纖維細(xì)胞注入到_中，再經(jīng)過一系列過程獲得含有目的基因的重組胚胎。(4)為了_，可以對(duì)處于_階段的胚胎進(jìn)行均等分割。將重組胚胎移入到受體子宮中，由于受

40、體子宮不會(huì)對(duì)外來胚胎發(fā)生_，并能與之建立正常的生理和組織上的聯(lián)系，因此，重組胚胎能在受體子宮中繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因克隆豬。答案(1)抗生素培養(yǎng)液細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累(2)標(biāo)記基因(3)卵母細(xì)胞去核卵母細(xì)胞(4)提高重組胚胎的利用率桑椹胚或囊胚免疫排斥反應(yīng)解析在對(duì)纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，需要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防止培養(yǎng)過程的污染，此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。篩選轉(zhuǎn)基因細(xì)胞時(shí)，需要利用基因表達(dá)載體中標(biāo)記基因的作用。通過對(duì)囊胚或桑椹胚時(shí)期的胚胎進(jìn)行胚胎分割，可提高對(duì)重組胚胎的利用率。由于受體子宮不會(huì)對(duì)外來胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，并能與之建立正常的生理和組織上的聯(lián)

41、系，因次，重組胚胎能在受體子宮中繼續(xù)發(fā)育。4根據(jù)下列有關(guān)胚胎工程的示意圖，分析回答：(1)為使A羊超數(shù)排卵，向其注射_激素，選擇_期的卵母細(xì)胞進(jìn)行體外受精；體外受精前要對(duì)B細(xì)胞進(jìn)行_處理，常用的方法是_法。(2)將早期胚胎注入D羊子宮內(nèi)的技術(shù)叫_，D羊被稱為_(填“供體”或“受體”)；為使D羊的生理狀況更適合完成該技術(shù)操作，要對(duì)D羊進(jìn)行_處理以提高成功率。(3)從早期胚胎分離出的ES細(xì)胞可誘導(dǎo)分化出不同的組織細(xì)胞，這是因?yàn)閺墓δ苌螮S細(xì)胞具有_；若取囊胚階段的胚胎進(jìn)行胚胎分割，要注意將_均等分割；早期胚胎培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中除營養(yǎng)成分外，還需加入_。答案(1)促性腺M(fèi)獲能化學(xué)誘導(dǎo)(2)胚胎移植受體

42、同期發(fā)情(3)發(fā)育的全能性內(nèi)細(xì)胞團(tuán)血清解析本題考查胚胎工程。(1)注射促性腺激素能夠使A羊超數(shù)排卵，發(fā)育到減數(shù)第二次分裂中期的次級(jí)卵母細(xì)胞能夠進(jìn)行受精作用；精子受精作用前需經(jīng)過獲能處理，常用的方法是化學(xué)誘導(dǎo)法。(2)將早期胚胎注入D羊子宮內(nèi)的技術(shù)叫做胚胎移植，D羊是受體；為了提高成功率，要對(duì)D羊進(jìn)行同期發(fā)情處理。(3)ES細(xì)胞具有發(fā)育的全能性；胚胎分割時(shí)要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割；培養(yǎng)早期胚胎時(shí)培養(yǎng)液中需要加入動(dòng)物血清。5下圖為綠色熒光小鼠制備流程圖，Gfp是綠色熒光蛋白基因，請(qǐng)分析回答：(1)構(gòu)建表達(dá)載體需要的酶是：_，表達(dá)載體包含綠色熒光蛋白基因Gfp、_、_、終止子和復(fù)制原點(diǎn)等。(2)圖中

43、載體上的Neo基因是一種抗生素抗性基因，圖中步驟所用的G418是一種抗生素(對(duì)細(xì)胞有毒害作用)，添加G418的目的是_。(3)圖中所用的胚胎干細(xì)胞來自于_。(4)圖中步驟要將細(xì)胞注射入圖中囊胚的_位置，圖中步驟胚胎移植前要對(duì)代孕母鼠用激素進(jìn)行_處理。(5)可以使用_方法在蛋白質(zhì)水平上鑒定小鼠是否存在綠色熒光蛋白。答案(1)限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶標(biāo)記基因啟動(dòng)子(2)篩選出導(dǎo)入目的基因的胚胎干細(xì)胞(3)早期胚胎或原始性腺(4)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)同期發(fā)情(5)抗原抗體雜交解析(1)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。完整的基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、標(biāo)記基因、終止子等。(2)

44、添加G418可以將不抗該抗生素的細(xì)胞殺死，從而選擇出導(dǎo)入目的基因的胚胎干細(xì)胞。(3)胚胎干細(xì)胞是由原始性腺或早期胚胎中分離出來的一類細(xì)胞。(4)步驟是通過顯微注射技術(shù)將這些胚胎干細(xì)胞注入囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。胚胎移植前要對(duì)受體母鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理。(5)鑒定目的基因是否在受體細(xì)胞中表達(dá)可采用抗原抗體雜交技術(shù)。6供體器官的短缺和排斥反應(yīng)是制約器官移植的兩個(gè)重要問題。如何利用現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)解決這一難題成為熱點(diǎn)問題。如圖是治療性克隆的過程圖解，回答下列問題：(1)自體移植供受體為同一個(gè)體，最大的優(yōu)點(diǎn)是_，但移植器官種類受限。利用細(xì)胞工程技術(shù)的治療性克隆，重組細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)除了保證無菌、無毒環(huán)境，還需豐富的營

45、養(yǎng)，通常會(huì)在培養(yǎng)液中加入 _等天然成分。核移植的胚胎干細(xì)胞通常只分裂不分化，所以需在培養(yǎng)液中加入_誘導(dǎo)形成相應(yīng)的組織、器官后用于移植。(2)重組細(xì)胞發(fā)育的過程中，細(xì)胞開始分化發(fā)生在_期，若想獲得基因型完全相同的兩個(gè)胚胎，采用_技術(shù)，并且要注意對(duì)_進(jìn)行均等分割。與試管嬰兒不同的是該技術(shù)屬于_(有性/無性)生殖。(3)目前臨床器官移植多為同種異體移植，患者需要長期服用_預(yù)防免疫排斥反應(yīng)。為了擴(kuò)大器官供體的來源，人們嘗試異種移植，試圖利用基因工程手段_抗原決定基因，再利用克隆技術(shù)培育出沒有免疫排斥反應(yīng)的豬器官，從而解決供體短缺問題。獲得該轉(zhuǎn)基因豬的核心步驟是_。答案(1)不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)血清分化誘

46、導(dǎo)因子(2)囊胚胚胎分割內(nèi)細(xì)胞團(tuán)無性(3)免疫抑制藥物抑制(或除去)基因表達(dá)載體的構(gòu)建解析(1)自體移植不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要加入血清，以滿足動(dòng)物細(xì)胞生命活動(dòng)的需要；培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞時(shí)加入分化誘導(dǎo)因子可以誘導(dǎo)形成相應(yīng)的組織、器官后用于移植。(2)重組細(xì)胞發(fā)育與受精發(fā)育過程相同，在囊胚時(shí)期開始發(fā)生細(xì)胞的分化；若要獲得基因型完全相同的兩個(gè)胚胎，可以采用胚胎分割技術(shù)，并且要注意對(duì)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行均等分割。與試管嬰兒不同的是該技術(shù)屬于無性生殖。(3)預(yù)防免疫排斥反應(yīng)需要服用免疫抑制藥物；利用基因工程手段可以除去抗原決定基因，再利用克隆技術(shù)培育出沒有免疫排斥反應(yīng)的豬器官；培育轉(zhuǎn)基因豬的核心步驟

47、是基因表達(dá)載體的構(gòu)建。7下圖表示利用胚胎干細(xì)胞獲得轉(zhuǎn)基因小鼠的流程。請(qǐng)回答下列問題：(1)過程所培養(yǎng)的細(xì)胞應(yīng)取自囊胚的_。(2)過程中，提取的DNA在水浴加熱的條件下需用_試劑鑒定，基因轉(zhuǎn)入前需要先構(gòu)建_，其目的是_。(3)過程稱為_。由于動(dòng)物細(xì)胞生活的內(nèi)環(huán)境還有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入_。(4)過程所使用的是_技術(shù)，進(jìn)行該操作前需要對(duì)受體雌鼠進(jìn)行_。答案(1)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(2)二苯胺基因表達(dá)載體使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并表達(dá)(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(早期胚胎培養(yǎng))動(dòng)物血清(4)胚胎移植同期發(fā)情處理解析(1)胚胎干細(xì)胞是從早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞，如囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。(2)D

48、NA分子在水浴加熱條件下需用二苯胺試劑鑒定，基因轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞前需先構(gòu)建基因表達(dá)載體，其目的是使基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并表達(dá)。(3)過程是少量單個(gè)細(xì)胞經(jīng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(或早期胚胎培養(yǎng))形成早期胚胎的過程；由于動(dòng)物細(xì)胞生活的內(nèi)環(huán)境還有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入動(dòng)物血清。(4)過程表示胚胎移植，在該操作前為使二者生理環(huán)境相同，需對(duì)受體雌鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理。考點(diǎn)37生物技術(shù)的安全性和倫理問題1判斷下列有關(guān)生物技術(shù)的安全性和倫理問題的敘述(2012江蘇，13和2010江蘇，18)(1)種植轉(zhuǎn)基因作物應(yīng)與傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)種植區(qū)隔離()(2)轉(zhuǎn)基因作物被動(dòng)物食用后，目的基因會(huì)轉(zhuǎn)入動(dòng)物體細(xì)胞中()(3)種植轉(zhuǎn)

49、基因植物有可能因基因擴(kuò)散而影響野生植物的遺傳(基因)多樣性()(4)轉(zhuǎn)入到油菜的抗除草劑基因，可能通過花粉傳入環(huán)境中()(5)轉(zhuǎn)抗蟲基因的植物，不會(huì)導(dǎo)致昆蟲群體抗性基因頻率增加()(6)動(dòng)物的生長激素基因轉(zhuǎn)入植物后不能表達(dá)()(7)如轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來源于自然界，則不存在安全性問題()2(2013江蘇，15)下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物安全性的敘述中，錯(cuò)誤的是()A我國已經(jīng)對(duì)轉(zhuǎn)基因食品和轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品強(qiáng)制實(shí)施了產(chǎn)品標(biāo)識(shí)制度B國際上大多數(shù)國家都在轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)簽上警示性注明可能的危害C開展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、預(yù)警跟蹤和風(fēng)險(xiǎn)管理是保障轉(zhuǎn)基因生物安全的前提D目前對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭論主要集中在食用安全性和環(huán)境安全性上

50、答案B解析本題用直選法。對(duì)轉(zhuǎn)基因食品只是要求標(biāo)注“轉(zhuǎn)基因*”等字樣，并沒有在轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)簽上警示性注明可能的危害，故B錯(cuò)誤。1轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題(1)食品安全方面：可能合成毒蛋白、出現(xiàn)新的過敏原、改變食物的營養(yǎng)成分等。(2)生物安全方面：有可能造成“基因污染”，危害生物的多樣性。(3)環(huán)境安全方面：有可能打破物種界限，改變生態(tài)系統(tǒng)的能量流動(dòng)和物質(zhì)循環(huán)；造成二次污染或產(chǎn)生危害動(dòng)植物和人類的生物或產(chǎn)物。2生物技術(shù)引發(fā)的倫理問題(1)克隆人技術(shù)違反人類倫理道德。沖擊現(xiàn)有的婚姻、家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)倫理道德觀念。人為地制造在心理上和社會(huì)地位上都不健全的人。(2)設(shè)計(jì)試管嬰兒把試管嬰兒當(dāng)作人體零配件

51、工廠，是對(duì)生命的不尊重。拋棄或殺死配型不合適的多余胚胎，無異于“謀殺”。(3)基因檢測(cè)對(duì)個(gè)人隱私權(quán)提出挑戰(zhàn)。制造基因歧視。3正確看待生物技術(shù)(1)正視轉(zhuǎn)基因技術(shù)可能帶來的安全性問題，要趨利避害，不能因噎廢食。(2)我國政府支持治療性克隆，反對(duì)任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)。1供體器官的短缺和排斥反應(yīng)是制約器官移植的兩個(gè)重要問題，而治療性克隆能最終解決這些問題。如圖所示為人類“治療性克隆”的大概過程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：(1)過程A表示_，是目前實(shí)現(xiàn)體細(xì)胞克隆的關(guān)鍵技術(shù)，該技術(shù)的主要操作是應(yīng)用患者的體細(xì)胞作為核供體，由_細(xì)胞提供細(xì)胞質(zhì)，進(jìn)行人工重組，由此產(chǎn)生的重組細(xì)胞的遺傳物質(zhì)主要來自圖中的_。(2)過程

52、B表示的生物技術(shù)是_，C表示定向誘導(dǎo)技術(shù)，其誘導(dǎo)的對(duì)象是_細(xì)胞。(3)“治療性克隆”的結(jié)果說明高度分化的體細(xì)胞的_。相同的胚胎干細(xì)胞，“克隆”的結(jié)果多種多樣，如有的是神經(jīng)細(xì)胞，有的是血細(xì)胞，有的是肌肉細(xì)胞，究其本質(zhì)原因是_。(4)中國政府對(duì)“克隆人”的觀點(diǎn)是_。“有一男子患有白血病，經(jīng)醫(yī)生利用其出生時(shí)保留的臍帶血進(jìn)行治療后康復(fù)”，你認(rèn)為這種做法符合倫理道德嗎？為什么？_。答案(1)細(xì)胞核移植(次級(jí))卵母供體乙(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(胚胎干)(3)細(xì)胞核具有全能性基因的選擇性表達(dá)(4)禁止生殖性克隆人，不反對(duì)治療性克隆符合，因?yàn)槟殠а皇莵碜耘咛ィ渲械脑煅杉?xì)胞屬于成體干細(xì)胞解析(1)從圖

53、中可以看出，過程A是細(xì)胞核移植的過程，其遺傳物質(zhì)主要來自供體乙，其中由(次級(jí))卵母細(xì)胞提供細(xì)胞質(zhì)。(2)過程B是重組細(xì)胞經(jīng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)育成胚胎的過程，過程C是將從囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中獲得的胚胎干細(xì)胞誘導(dǎo)分化形成不同組織、器官的過程，即治療性克隆過程。(3)在現(xiàn)有的條件下，動(dòng)物細(xì)胞的全能性不能得到表達(dá)，但是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性可以表達(dá)出來；在分化成各種細(xì)胞的過程中，基因進(jìn)行了選擇性表達(dá)。(4)中國政府對(duì)“克隆人”的觀點(diǎn)是禁止生殖性克隆人，不反對(duì)治療性克隆。臍帶血不是來自胚胎，其中的造血干細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞，所以符合倫理道德。2治療性克隆是指把患者體細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞中構(gòu)建形成重組胚胎，體外培養(yǎng)到

54、一定時(shí)期分離出ES細(xì)胞，獲得的ES細(xì)胞定向分化成所需的特定類型細(xì)胞(如神經(jīng)細(xì)胞、肌肉細(xì)胞和血細(xì)胞)，用于治療。請(qǐng)回答下列問題：(1)治療性克隆采用的技術(shù)有_、早期胚胎培養(yǎng)和_。將患者體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞后用物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞，使其完成_和發(fā)育進(jìn)程。(2)為治療遺傳性糖尿病，可將胰島素基因?qū)隕S細(xì)胞中，再將此重組細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化后，篩選得到能_的胰島樣細(xì)胞，并擴(kuò)增培養(yǎng)后輸入患者體內(nèi)，這種治療方法稱為_。(3)中國政府不反對(duì)治療性克隆，但禁止_。(4)若想提取ES細(xì)胞中的DNA，可利用DNA不溶于_溶液，但細(xì)胞中的脂質(zhì)和某些蛋白質(zhì)易溶于此溶液的原理進(jìn)一步分離。答案(1)體細(xì)胞核移植胚胎

55、干細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞分裂(2)分泌胰島素體外基因治療(3)生殖性克隆(4)酒精(冷酒精)解析(1)由題干可知，治療性克隆應(yīng)用了體細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。(2)在體外完成基因轉(zhuǎn)移，從而達(dá)到治療疾病的目的，屬于體外基因治療。(3)中國政府禁止生殖性克隆，但不反對(duì)治療性克隆。(4)利用DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精的原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步地分離?？键c(diǎn)38生態(tài)工程的原理1(2011新課標(biāo)全國，40)現(xiàn)有一生活污水凈化處理系統(tǒng)，處理流程為“厭氧沉淀池曝氣池兼氧池植物池”，其中植物池中生活著水生植物、昆蟲、魚類、蛙類等生物。污水經(jīng)凈化處理后，可用于澆灌綠地

56、?；卮饐栴}：(1)污水流經(jīng)厭氧沉淀池、曝氣池和兼氧池后得到初步凈化。在這個(gè)過程中，微生物通過_呼吸將有機(jī)物分解。(2)植物池中，水生植物、昆蟲、魚類、蛙類和底泥中的微生物共同組成了_(生態(tài)系統(tǒng)、群落、種群)。在植物池的食物網(wǎng)中，植物位于第_營養(yǎng)級(jí)。植物池中所有蛙類獲得的能量最終來源于_所固定的_能。(3)生態(tài)工程所遵循的基本原理有整體性、協(xié)調(diào)與平衡、_和_等原理。(4)一般來說，生態(tài)工程的主要任務(wù)是對(duì)_進(jìn)行修復(fù)，對(duì)造成環(huán)境污染和破壞的生產(chǎn)方式進(jìn)行改善，并提高生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)力。答案(1)無氧和有氧(或細(xì)胞)(2)群落一生產(chǎn)者太陽(3)物質(zhì)循環(huán)再生物種多樣性(4)已被破壞的生態(tài)環(huán)境(或受損的生態(tài)系

57、統(tǒng))解析(1)厭氧沉淀池主要是無氧呼吸，曝氣池為有氧呼吸，兼氧池兩種方式均有。(2)生物群落是指生活在一定區(qū)域內(nèi)所有生物個(gè)體的總稱，生態(tài)系統(tǒng)還包括無機(jī)環(huán)境。(3)生態(tài)工程的原理包括：整體性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理、物質(zhì)循環(huán)再生原理、物種多樣性原理、系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理。2(2011江蘇，29)池塘養(yǎng)殖普遍存在由于餌料、魚類排泄物、換水不及時(shí)等引起的水體污染現(xiàn)象，研究者設(shè)計(jì)了一種循環(huán)水池塘養(yǎng)殖系統(tǒng)(如圖)。請(qǐng)回答下列問題：(1)與自然池塘相比，人工養(yǎng)殖池塘生態(tài)系統(tǒng)恢復(fù)力穩(wěn)定性_。人工養(yǎng)殖池塘水體的N、P含量容易升高，會(huì)引起水體的富營養(yǎng)化；藻類等浮游生物大量繁殖、加之死亡后被微生物分解，引起水體的溶氧量

58、下降，造成魚類等死亡，進(jìn)一步破壞了生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)態(tài)，這種調(diào)節(jié)方式稱為_。(2)與傳統(tǒng)養(yǎng)殖池塘相比，該養(yǎng)殖系統(tǒng)增加的生態(tài)工程設(shè)施有_。可以通過在這些設(shè)施內(nèi)栽植水生植物、放養(yǎng)濾食動(dòng)物等措施，起到對(duì)水體的_，有效減少水體中的N、P等含量。(3)該養(yǎng)殖系統(tǒng)設(shè)計(jì)為前一池塘上層水流入后一池塘底部，實(shí)現(xiàn)水層交換，其目的有_、_。(4)該養(yǎng)殖系統(tǒng)中串聯(lián)的池塘不宜過多，因?yàn)開。(5)保持池塘水體中適當(dāng)?shù)腘、P含量是必要的，該養(yǎng)殖系統(tǒng)可以通過_、_進(jìn)行調(diào)控。答案(1)高正反饋(2)生態(tài)塘和潛流濕地凈化作用(3)增加水的溶氧量提高餌料的利用率(4)后面池塘水體中的N和P含量(濃度)越來越高(5)補(bǔ)水和排水水泵控制水的流

59、量(循環(huán)頻次)解析(1)與自然池塘相比，人工養(yǎng)殖池塘生態(tài)系統(tǒng)中的組分較少，營養(yǎng)結(jié)構(gòu)簡單，抵抗力穩(wěn)定性較低，恢復(fù)力穩(wěn)定性較高。生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的維持是正反饋調(diào)節(jié)和負(fù)反饋調(diào)節(jié)共同作用的結(jié)果，正反饋調(diào)節(jié)使生態(tài)系統(tǒng)遠(yuǎn)離平衡狀態(tài)，負(fù)反饋調(diào)節(jié)使生態(tài)系統(tǒng)維持在相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)。(2)該生態(tài)系統(tǒng)屬于人工設(shè)計(jì)的生態(tài)工程，與傳統(tǒng)養(yǎng)殖池塘相比，增加了生態(tài)塘和潛流濕地等設(shè)施。生態(tài)塘和潛流濕地中的水生植物和濾食動(dòng)物能夠有效減少水體中N、P等的含量，起到凈化水體的作用。(3)通過設(shè)備將前一池塘上層水導(dǎo)入下一個(gè)池塘的底部，可以實(shí)現(xiàn)上、下水層的交換，增加水中溶氧量和提高餌料利用率。(4)隨著養(yǎng)殖塘中生物體排放的有機(jī)污水的積累，越

60、靠后的養(yǎng)殖塘中微生物分解有機(jī)物產(chǎn)生的N、P含量會(huì)越高，從而造成水體富營養(yǎng)化，故該養(yǎng)殖系統(tǒng)中串聯(lián)的池塘不宜過多。(5)為保持池塘水體中適當(dāng)?shù)腘、P含量，可以通過不間斷地補(bǔ)水和排水來實(shí)現(xiàn)，或者是通過水泵控制水的流量來實(shí)現(xiàn)。生態(tài)工程的原理比較項(xiàng)目理論基礎(chǔ)意義實(shí)例物質(zhì)循環(huán)再生原理物質(zhì)循環(huán)可避免環(huán)境污染及其對(duì)系統(tǒng)穩(wěn)定和發(fā)展的影響無廢棄物農(nóng)業(yè)物種多樣性原理生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性生物多樣性程度高，可提高系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性，提高系統(tǒng)的生產(chǎn)力“三北防護(hù)林”建設(shè)中的單純林問題，珊瑚礁生態(tài)系統(tǒng)的生物多樣性問題協(xié)調(diào)與平衡原理生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡生物的數(shù)量不超過環(huán)境承載力，可避免系統(tǒng)的失衡和破壞太湖富營養(yǎng)化問題、過度放牧等