GMP培訓(xùn)資料無菌附錄ppt課件(PPT 164頁)

1、藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(2010年修訂）無菌藥品附錄培訓(xùn)1第1頁，共164頁。培訓(xùn)內(nèi)容簡(jiǎn)介一、無菌藥品（第一章范圍）二、無菌藥品（第二章原則）三、無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）四、無菌藥品（第四章隔離操作技術(shù)）五、無菌藥品（第五章吹灌封技術(shù)）六、無菌藥品（第六章人員）七、無菌藥品（第七章廠房）第2頁，共164頁。八、無菌藥品（第八章設(shè)備）九、無菌藥品（第九章消毒）十、無菌藥品（第十章生產(chǎn)管理）十一、無菌藥品（第十一章滅菌工藝）十二、無菌藥品（第十二章滅菌方法）十三、無菌藥品（第十三章滅菌藥品的最終處理）十四、無菌藥品（第十四章質(zhì)量控制）培訓(xùn)內(nèi)容簡(jiǎn)介第3頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第一章范

2、圍）第一章范圍第4頁，共164頁。條款解讀：第一條 無菌藥品是指法定藥品標(biāo)準(zhǔn)中列有無菌檢查項(xiàng)目的制劑和原料藥，包括無菌制劑和無菌原料藥。1、明確無菌藥品的概念及涵蓋的范圍。無菌藥品是指法定藥品標(biāo)準(zhǔn)中列有無菌檢查項(xiàng)目的制劑和原料藥。2、無菌：是指沒有活的微生物的存在。3、無菌制劑包括注射劑、眼用制劑、無菌軟膏劑、無菌混懸劑等。4、所謂原料藥,是指專門供給藥品制劑生產(chǎn)所用的化學(xué)物質(zhì)。原料藥作為藥品制劑企業(yè)的上游產(chǎn)品，原料藥據(jù)其制成藥劑需求可分非無菌原料藥與無菌原料藥兩大類，其中無菌原料藥指其中不含任何活性的微生物如霉菌、細(xì)菌、病毒等；反之，對(duì)此沒有嚴(yán)格要求就是非無菌原料藥。附錄1無菌藥品（第一章范

3、圍）第5頁，共164頁。第二條 本附錄適用于無菌制劑生產(chǎn)全過程以及無菌原料藥的滅菌和無菌生產(chǎn)過程。 1、明確無菌藥品附錄的涵蓋范圍。附錄1無菌藥品（第一章范圍）第6頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第二章原則）第二章原則第7頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第二章原則）第三條 無菌藥品的生產(chǎn)須滿足其質(zhì)量和預(yù)定用途的要求，應(yīng)當(dāng)最大限度降低微生物、各種微粒和熱原的污染。生產(chǎn)人員的技能、所接受的培訓(xùn)及其工作態(tài)度是達(dá)到上述目標(biāo)的關(guān)鍵因素，無菌藥品的生產(chǎn)必須嚴(yán)格按照精心設(shè)計(jì)并經(jīng)驗(yàn)證的方法及規(guī)程進(jìn)行，產(chǎn)品的無菌或其它質(zhì)量特性絕不能只依賴于任何形式的最終處理或成品檢驗(yàn)（包括無菌檢查）。1、無菌藥品生產(chǎn)應(yīng)滿足質(zhì)量

4、要求和預(yù)訂用途的要求，質(zhì)量要求是指滿足包括每種無菌藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，并且保證藥品能夠起到相應(yīng)的療效。2、無菌藥品的生產(chǎn)過程應(yīng)對(duì)可能引起微粒、微生物和內(nèi)毒素的潛在污染進(jìn)行嚴(yán)格控制，無菌工藝的本質(zhì)就是減少或者消除這些潛在污染源。3、影響無菌藥品的最為關(guān)鍵的因素就是人員，生產(chǎn)人員的技能、所接受的培訓(xùn)及工作態(tài)度是人員因素的核心內(nèi)容。第8頁，共164頁。4、評(píng)價(jià)無菌保證工藝是否有效曾一度主要通過對(duì)終產(chǎn)品抽樣進(jìn)行無菌檢驗(yàn)來判斷，由于微生物在產(chǎn)品中的分布是不均勻的，且抽檢樣品的數(shù)量有限，故抽檢的結(jié)果不能代表整批產(chǎn)品的無菌狀態(tài)。國(guó)際上更為注重?zé)o菌保證工藝的設(shè)計(jì)是否合理，所用的設(shè)備與工藝是否經(jīng)過充分驗(yàn)證，在此基礎(chǔ)

5、上是否嚴(yán)格按照驗(yàn)證后的工藝進(jìn)行生產(chǎn)，這樣才能保證無菌的可靠性。 在業(yè)界常用無菌保證水平（Sterility Assurance Level，SAL）概念來評(píng)價(jià)滅菌（無菌）工藝的效果，SAL定義為產(chǎn)品經(jīng)滅菌或除菌后微生物殘存的概率。該值越小證明產(chǎn)品中微生物存在的概率越小。為了保證注射劑的無菌安全性，國(guó)際上一致規(guī)定，采用濕熱滅菌法的SAL不得大于10-6，即滅菌后微生物存活的概率不得大于百萬分之一；而采用無菌生產(chǎn)工藝生產(chǎn)的產(chǎn)品，其SAL只能達(dá)到10-3，故僅限于臨床必須注射給藥而確實(shí)無法耐受最終滅菌的產(chǎn)品，無菌生產(chǎn)工藝只是用于粉針劑和部分小容量注射劑。附錄1無菌藥品（第二章原則）第9頁，共164頁

6、。附錄1無菌藥品（第二章原則）5、熱原（pyrogen）：指由微生物產(chǎn)生的能引起恒溫動(dòng)物體溫異常升高的致熱物質(zhì)。它包括細(xì)菌性熱原、內(nèi)源性高分子熱原、內(nèi)源性低分子熱原及化學(xué)熱原等。這里所指的“熱原”，主要是指細(xì)菌性熱原，是某些細(xì)菌的代謝產(chǎn)物、細(xì)菌尸體及內(nèi)毒素。致熱能力最強(qiáng)的是革蘭氏陰性桿菌的產(chǎn)物，其次是革蘭陽性桿菌類，革蘭陽性球菌則較弱，霉菌、酵母菌、甚至病毒也能產(chǎn)生熱原。熱原通常是磷脂多醇與蛋白質(zhì)結(jié)合而成的復(fù)合物。磷脂多醇是復(fù)合物的活性中心，致熱作用最強(qiáng)。其化學(xué)組成因菌種不同而有所差異。6、熱原反應(yīng)：注入人體的注射劑中含有熱原量達(dá)1g/kg就可引起不良反應(yīng)，發(fā)熱反應(yīng)通常在注入1小時(shí)后出現(xiàn)，可使

7、人體產(chǎn)生發(fā)冷、寒顫、發(fā)熱、出汗、惡心、嘔吐等癥狀，有時(shí)體溫可升至40以上，嚴(yán)重者甚至昏迷、虛脫，如不及時(shí)搶救，可危及生命。該現(xiàn)象稱為“熱原反應(yīng)”。 10第10頁，共164頁。7、細(xì)菌內(nèi)毒素：藥品中的熱原主要是細(xì)菌內(nèi)毒素。一般可以認(rèn)為：細(xì)菌內(nèi)毒素就是熱原，但是熱原不等于細(xì)菌內(nèi)毒素。8、 中國(guó)藥典2005年版規(guī)定熱原檢查采用家兔法，細(xì)菌內(nèi)毒素檢查采用鱟試劑法。細(xì)菌內(nèi)毒素檢查包括凝膠法和光度測(cè)定法兩種方法，前者利用鱟試劑與細(xì)菌內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的原理來檢測(cè)或半定量?jī)?nèi)毒素，后者包括濁度法和顯色基質(zhì)法，系分別利用鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過程中的濁度變化及產(chǎn)生的凝固酶使特定底物釋放出呈色團(tuán)的多少來測(cè)定內(nèi)毒素。

8、鱟試劑法檢查內(nèi)毒素的靈敏度為0.0001g/ml,比家兔法靈敏10倍，操作簡(jiǎn)單易行，試驗(yàn)費(fèi)用低，結(jié)果迅速可靠，適用于注射劑生產(chǎn)過程中的熱原控制和家兔法不能檢測(cè)的某些細(xì)胞毒性藥物制劑，但其對(duì)革蘭陰性菌以外的內(nèi)毒素不靈敏，目前尚不能完全代替家兔法。附錄1無菌藥品（第二章原則）11第11頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第二章原則）9、鱟（hu），屬節(jié)肢動(dòng)物門，肢口綱， 劍尾目鱟科，鱟屬。俗稱三刺鱟、兩公婆、海怪，因其長(zhǎng)相既像蝦又像蟹，因此人們又稱之為“馬蹄蟹”,是一種棲生于海洋的低等無脊椎動(dòng)物并且是一類與三葉蟲 (現(xiàn)在只有化石)一樣古老的動(dòng)物。鱟的祖先出現(xiàn)在地質(zhì)歷史時(shí)期古生代的泥盆紀(jì)，泥盆紀(jì)常被稱為

9、“魚類時(shí)代”。當(dāng)時(shí)恐龍尚未崛起，原始魚類剛剛問世，隨著時(shí)間的推移，與它同時(shí)代的動(dòng)物或者進(jìn)化、或者滅絕，而惟獨(dú)只有鱟從4 億多年前問世至今仍保留其原始而古老的相貌，所以鱟有“活化石”之稱。現(xiàn)存于世的鱟有三屬四種，常見的有兩種美洲鱟和東方鱟。12第12頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第二章原則）第四條 無菌藥品按生產(chǎn)工藝可分為兩類：采用最終滅菌工藝的為最終滅菌產(chǎn)品；部分或全部工序采用無菌生產(chǎn)工藝的為非最終滅菌產(chǎn)品。1、 最終滅菌工藝：在控制微生物污染量的基礎(chǔ)上，在藥品灌封后，通過濕熱滅菌方式除菌。一般來說本方法成本低，無菌保證水平高，適用于大容量注射劑及小容量注射劑的滅菌。2、 無菌生產(chǎn)工藝：在無

10、菌系統(tǒng)環(huán)境下，通過除菌過濾法及無菌操作法，以防止過程污染為目的，消除導(dǎo)致污染的各種可能性來保證無菌水平。一般來說，由于本工藝對(duì)環(huán)境系統(tǒng)要求高，且影響無菌操作的因素多而使得無菌保證水平比終端滅菌水平低。適用于粉針劑，亦可適用于臨床需要但是不能進(jìn)行終端滅菌的小容量注射劑。13第13頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第二章原則）第五條 無菌藥品生產(chǎn)的人員、設(shè)備和物料應(yīng)通過氣鎖間進(jìn)入潔凈區(qū)，采用機(jī)械連續(xù)傳輸物料的，應(yīng)當(dāng)用正壓氣流保護(hù)并監(jiān)測(cè)壓差。1、 明確無菌生產(chǎn)的人員、設(shè)備及物料必須通過氣閘間才能進(jìn)行潔凈區(qū)。2、氣閘間：歐盟：也可以叫氣鎖（Air-lock）,設(shè)置于兩個(gè)或數(shù)個(gè)房間之間（如不同潔凈級(jí)別的房

11、間之間）的具有兩扇或多扇門的隔離空間。設(shè)置氣鎖的目的是在人員或物料出入該房間時(shí)，對(duì)氣流進(jìn)行控制。氣閘間有人員和物料之分。FDA：氣閘 帶連鎖門的小房間，用于保持臨近房間之間的氣壓控制(通常所述臨近房間的潔凈級(jí)別不同)。無菌工藝氣閘的目的是排除從較低級(jí)別區(qū)域的塵埃粒子和微生物污染侵入。14第14頁，共164頁。3、 明確機(jī)械方式傳輸物料，應(yīng)確保高級(jí)別區(qū)域?qū)Φ图?jí)別區(qū)域的相對(duì)正壓，并且應(yīng)監(jiān)測(cè)壓差。目前采用機(jī)械傳輸物料主要是西林瓶清洗后通過滅菌隧道傳輸至A級(jí)區(qū)進(jìn)行無菌灌裝。附錄1無菌藥品（第二章原則）15第15頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第二章原則）第六條 物料準(zhǔn)備、產(chǎn)品配制和灌裝或分裝等操作必須

12、在潔凈區(qū)內(nèi)分區(qū)域（室）進(jìn)行。1、 明確物料準(zhǔn)備、配制和灌裝首先必須在潔凈區(qū)內(nèi)進(jìn)行，并且必須在不同的功能區(qū)域或房間進(jìn)行，物料準(zhǔn)備、產(chǎn)品配制劑灌裝的一系列過程無菌要求是逐級(jí)提高的，目的是避免交叉污染。2、灌裝主要是指裝入內(nèi)包裝材料的物料的狀態(tài)為液體。16第16頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第二章原則）第七條 應(yīng)當(dāng)根據(jù)產(chǎn)品特性、工藝和設(shè)備等因素，確定無菌藥品生產(chǎn)用潔凈區(qū)的級(jí)別。每一步生產(chǎn)操作的環(huán)境都應(yīng)當(dāng)達(dá)到適當(dāng)?shù)膭?dòng)態(tài)潔凈度標(biāo)準(zhǔn)，盡可能降低產(chǎn)品或所處理的物料被微?；蛭⑸镂廴镜娘L(fēng)險(xiǎn)。1、 明確無菌藥品生產(chǎn)的不同區(qū)域（房間）的潔凈級(jí)別的確定原則。2、明確不同的潔凈級(jí)別均應(yīng)當(dāng)達(dá)到相應(yīng)的動(dòng)態(tài)潔凈度標(biāo)準(zhǔn)，在

13、98版GMP中只要求達(dá)到靜態(tài)潔凈度要求。并且在設(shè)計(jì)相應(yīng)的無菌工藝操作時(shí)應(yīng)盡可能降低物料及產(chǎn)品被污染的風(fēng)險(xiǎn)。3、微生物（microbe）：個(gè)體微小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，通常要用光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡才能看清楚的生物，統(tǒng)稱為微生物。 微生物包括細(xì)菌、病毒、霉菌、酵母菌等。（但有些微生物是可以看見的，像屬于真菌的蘑菇、靈芝等。）4、微粒（particle）：懸浮在空氣中的、固態(tài)的或液態(tài)的、活性的或非活性的物質(zhì)，其粒徑在10nm100m的范圍。17第17頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)18第18頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）第八條 潔凈區(qū)的

14、設(shè)計(jì)必須符合相應(yīng)的潔凈度要求，包括達(dá)到“靜態(tài)”和“動(dòng)態(tài)”的標(biāo)準(zhǔn)。1、 潔凈區(qū)潔凈室(Clean Room)，亦稱為無塵室或清凈室，是指將一定空間范圍內(nèi)之空氣中的微粒子、有害空氣、細(xì)菌等污染物排除，并將室內(nèi)的溫度、潔凈度、室內(nèi)壓力、氣流速度與氣流分布、噪音振動(dòng)及照明、靜電控制在某一需求范圍內(nèi)，而所給予特別設(shè)計(jì)的房間。亦即是不論外在之空氣條件如何變化，其室內(nèi)均能具有維持原先所設(shè)定要求的潔凈度、溫濕度及壓力等性能的特性。 2、潔凈度：潔凈度指潔凈空氣中空氣含塵（包括微生物）量多少的程度。3、靜態(tài)：指所有生產(chǎn)設(shè)備均已安裝就緒，但沒有生產(chǎn)活動(dòng)且無操作人員在場(chǎng)的狀態(tài)。4、動(dòng)態(tài)：指生產(chǎn)設(shè)備按預(yù)定的工藝模式運(yùn)

15、行并有規(guī)定數(shù)量的操作人員在現(xiàn)場(chǎng)操作的狀態(tài)。5、空態(tài)：條件下測(cè)試是指系統(tǒng)(潔凈室)已處于正常運(yùn)行狀態(tài)，但工藝設(shè)備、生產(chǎn)人員還未進(jìn)入情況下測(cè)試的。19第19頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）第九條 無菌藥品生產(chǎn)所需的潔凈區(qū)可分為以下4個(gè)級(jí)別：A級(jí)：高風(fēng)險(xiǎn)操作區(qū)，如灌裝區(qū)、放置膠塞桶和與無菌制劑直接接觸的敞口包裝容器的區(qū)域及無菌裝配或連接操作的區(qū)域，應(yīng)當(dāng)用單向流操作臺(tái)（罩）維持該區(qū)的環(huán)境狀態(tài)。單向流系統(tǒng)在其工作區(qū)域必須均勻送風(fēng)，風(fēng)速為0.36-0.54m/s（指導(dǎo)值）。應(yīng)當(dāng)有數(shù)據(jù)證明單向流的狀態(tài)并經(jīng)過驗(yàn)證。在密閉的隔離操作器或手套箱內(nèi)，可使用較低的風(fēng)速。B級(jí)：指無菌配制和灌裝等

16、高風(fēng)險(xiǎn)操作A級(jí)潔凈區(qū)所處的背景區(qū)域。C級(jí)和D級(jí)：指無菌藥品生產(chǎn)過程中重要程度較低操作步驟的潔凈區(qū)。 20第20頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）1、 單向流潔凈室：由方向單一、流線平行并且速度均勻穩(wěn)定的單向流流過房間工作區(qū)整個(gè)截面的潔凈室。單向流可以是一個(gè)房間、一個(gè)房間的局部或、超凈工作臺(tái)、生物安全柜或隔離倉等。21第21頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）2、單向流潔凈室的風(fēng)速必須均勻，指導(dǎo)值為0.360.54m/s，即0.45m/s20%，按照法定的方法進(jìn)行風(fēng)速檢測(cè)，并采用煙霧試驗(yàn)證明單向流潔凈室（或區(qū)域）的氣體流型。22第22頁，共164頁。附錄

17、1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）以上各級(jí)別空氣懸浮粒子的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定如下表：潔凈度級(jí)別懸浮粒子最大允許數(shù)/立方米靜態(tài)動(dòng)態(tài)(3)0.5m5.0m(2)0.5m5.0mA級(jí)(1)352020352020B級(jí)3520293520002900C級(jí)3520002900352000029000D級(jí)352000029000不作規(guī)定不作規(guī)定23第23頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）注：（1）為確認(rèn)A級(jí)潔凈區(qū)的級(jí)別，每個(gè)采樣點(diǎn)的采樣量不得少于1立方米。A級(jí)潔凈區(qū)空氣懸浮粒子的級(jí)別為ISO4.8，以5.0m的懸浮粒子為限度標(biāo)準(zhǔn)。B級(jí)潔凈區(qū)（靜態(tài)）的空氣懸浮粒子的級(jí)別為ISO5，同時(shí)包括表中

18、兩種粒徑的懸浮粒子。對(duì)于C級(jí)潔凈區(qū)（靜態(tài)和動(dòng)態(tài)）而言，空氣懸浮粒子的級(jí)別分別為ISO7和ISO8。對(duì)于D級(jí)潔凈區(qū)（靜態(tài)）空氣懸浮粒子的級(jí)別為ISO8。測(cè)試方法可參照ISO14644-1。（2）在確認(rèn)級(jí)別時(shí)，應(yīng)當(dāng)使用采樣管較短的便攜式塵埃粒子計(jì)數(shù)器，避免5.0m懸浮粒子在遠(yuǎn)程采樣系統(tǒng)的長(zhǎng)采樣管中沉降。在單向流系統(tǒng)中，應(yīng)當(dāng)采用等動(dòng)力學(xué)的取樣頭。（3）動(dòng)態(tài)測(cè)試可在常規(guī)操作、培養(yǎng)基模擬灌裝過程中進(jìn)行，證明達(dá)到動(dòng)態(tài)的潔凈度級(jí)別，但培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)要求在“最差狀況”下進(jìn)行動(dòng)態(tài)測(cè)試。 24第24頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）1、ISO潔凈度等級(jí)、傳統(tǒng)分級(jí)及GMP規(guī)定的潔凈度 19

19、63年，美國(guó)潔凈室標(biāo)準(zhǔn)FED-STD-209中，按每立方英尺中0.5mm粉塵數(shù)量的最高允許濃度，將潔凈室分成若干等級(jí)，如100級(jí)、10,000級(jí)、100,000級(jí)。世界上許多國(guó)家都加以效仿。1999年，國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織ISO頒布了一項(xiàng)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)ISO14644-1 潔凈室與受控潔凈環(huán)境第一部分：空氣潔凈度分級(jí)。標(biāo)準(zhǔn)中采用了新的分級(jí)。2001年，中國(guó)新頒布的潔凈室設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)中采用了ISO分級(jí)。25第25頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）ISO 14644EU GMP & 2010版GMPCN GMP 98 0.5m 5mRO 0.5m 5mR 0.5m 5m12433543525

20、352029A & BA352020（B29）百級(jí)3500063520029373520002930CB3520002900萬級(jí)35000020008352000029300DC352000029000十萬級(jí)350000020000935200000293000三十萬級(jí)105000006000026第26頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）2、粒子最大允許濃度:Cn:大于或等于被考慮粒徑的粒子最大允許濃度 n : ISO等級(jí)級(jí)別，最大不超過9D :以微米（m）計(jì)的被選粒徑0.1:為一常數(shù)，表示以微米（m）計(jì)的量綱例如：ISO 8級(jí)(D級(jí))C8=108(0.1/ 0.5)2.

21、08 = 3516757 35200027第27頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）3、采樣點(diǎn)：1、根據(jù)ISO14644-1.2015標(biāo)準(zhǔn)，表A.1有關(guān)潔凈室區(qū)域的取樣點(diǎn)2、取樣點(diǎn)的定位a) 使用表格A.1里的取樣點(diǎn)最小數(shù)量NL；b) 然后將整個(gè)潔凈室或潔凈區(qū)劃分為NL個(gè)等面積區(qū)塊；c) 每個(gè)區(qū)塊都選定一個(gè)可代表該區(qū)塊特征的取樣點(diǎn)；d) 在每個(gè)取樣點(diǎn)，將粒子計(jì)數(shù)器采樣探頭置于工作活動(dòng)的平面或另一個(gè)指定點(diǎn)。 28第28頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）4、采樣量：采樣點(diǎn)的每次采樣量：每個(gè)采樣點(diǎn)的采樣量至少為2L，采樣時(shí)間最少為1 min。為確認(rèn)A級(jí)潔凈區(qū)

22、的級(jí)別，每個(gè)采樣點(diǎn)的采樣量不得少于1立方米。VS：每個(gè)采樣點(diǎn)每次最少采樣量（L）Cn,m：為相關(guān)等級(jí)規(guī)定的最大被考慮粒徑之等級(jí)限值20：當(dāng)粒子濃度處于該等級(jí)限值時(shí)，可被檢測(cè)到的粒子數(shù)。 29第29頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）5、結(jié)果計(jì)算：各取樣點(diǎn)的平均粒子濃度：當(dāng)一個(gè)取樣點(diǎn)發(fā)生兩次或多次取樣，根據(jù)公式(A.3)， 以單份樣品粒子濃度的每個(gè)被考慮粒徑來計(jì)算和記錄每個(gè)點(diǎn)的平均粒子數(shù)量。其中： 代表在取樣點(diǎn)i的平均粒子數(shù)，i可代表任何取樣點(diǎn)；xi.1到xi.n代表單份樣品的粒子數(shù)量；n代表在取樣點(diǎn)i的取樣次數(shù)。30第30頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)

23、測(cè)）每立方米的濃度計(jì)算其中：Ci代表每立方米的粒子濃度； 代表在取樣點(diǎn)i的平均粒子數(shù)，i可代表任何取樣點(diǎn)；Vt代表被選擇的單次取樣量（升）如果各取樣點(diǎn)測(cè)量的平均粒子濃度（每立方米的粒子數(shù)）不超過ISO14644-1.2015表格1里規(guī)定的濃度限值，潔凈室或潔凈區(qū)被視為已達(dá)到規(guī)定的空氣潔凈度分級(jí)要求。最低取樣量的設(shè)定是基于以上所示的最低取樣量計(jì)算，也決定了粒子計(jì)數(shù)器運(yùn)行1分鐘得到的取樣量。每個(gè)取樣點(diǎn)的取樣必須至少進(jìn)行1分鐘；在運(yùn)行1分鐘的情況下， 如果計(jì)算出來的最低取樣量令人滿意，取樣過程可在1分鐘結(jié)束時(shí)停止。在運(yùn)行1分鐘和儀器處于某流量的情況下，如果不能獲得計(jì)算的最低取樣量，取樣必須持續(xù)更長(zhǎng)時(shí)

24、間直到獲得至少最低取樣量。當(dāng)判定所需取樣時(shí)間時(shí)，需同時(shí)滿足1分鐘要求和計(jì)算的最低取樣量這兩個(gè)條件，用戶需明確將要使用的規(guī)定儀器的流量，因?yàn)榱Ｗ佑?jì)數(shù)器有幾種可能的流量。 31第31頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）臺(tái)式懸浮粒子計(jì)數(shù)器32第32頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）8、培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)：（Media Fill Test，縮寫：MFT） 培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)用于無菌產(chǎn)品的生產(chǎn)過程在確定的環(huán)境、人員、工藝、物料、設(shè)備和監(jiān)控條件下，是否能有效地防止微生物污染，保證所提供產(chǎn)品的無菌可靠性的一種方法。 培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)是無菌生產(chǎn)工藝的驗(yàn)證手段，是任何

25、非最終滅菌的無菌藥品必須進(jìn)行的一項(xiàng)驗(yàn)證。 在培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)，工藝條件的選擇應(yīng)該選取合理的“最差條件”，用最差條件對(duì)工藝流程、設(shè)備和整個(gè)體系進(jìn)行挑戰(zhàn)。如果在最差條件下能夠獲得好的結(jié)果，這說明在比最差條件情況要好的實(shí)際生產(chǎn)中，無菌保證的可靠性更有保證。最差條件例如：33第33頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）在準(zhǔn)備階段將物料、灌裝部件和待灌裝的容器按照工藝要求在無菌條件下保存到被允許的最長(zhǎng)時(shí)間。灌裝時(shí)在關(guān)鍵區(qū)域保留最多的人員。 最差條件并不僅僅是上述列出的幾點(diǎn)。最差條件是指在工藝允許范圍內(nèi)正常生產(chǎn)時(shí)可能遇到的最差情況，并不包括由于偏差引起的超出工藝要求的特殊情況。3

26、4第34頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）第十條 應(yīng)當(dāng)按以下要求對(duì)潔凈區(qū)的懸浮粒子進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)：（一）根據(jù)潔凈度級(jí)別和空氣凈化系統(tǒng)確認(rèn)的結(jié)果及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，確定取樣點(diǎn)的位置并進(jìn)行日常動(dòng)態(tài)監(jiān)控。1、潔凈區(qū)的潔凈級(jí)別確認(rèn)是設(shè)備設(shè)施驗(yàn)證的一部分，并需要進(jìn)行定期再確認(rèn)。潔凈級(jí)別確認(rèn)和潔凈區(qū)監(jiān)測(cè)是兩個(gè)環(huán)節(jié)，應(yīng)該明確予以區(qū)分并分別管理。2、取樣點(diǎn)的位置根據(jù)確認(rèn)的結(jié)果及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估來確定，例如：在哪些點(diǎn)最有可能造成污染，對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量造成不良影響？3、取樣點(diǎn)的確定還應(yīng)注意下列問題：取樣點(diǎn)一般布置在距離地面0.81.5m之間或操作平臺(tái)的高度。盡量避免在回風(fēng)口附近取樣，而且測(cè)試人員應(yīng)站在取樣口的下風(fēng)側(cè)

27、。35第35頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）（二）在關(guān)鍵操作的全過程中，包括設(shè)備組裝操作，應(yīng)當(dāng)對(duì)A級(jí)潔凈區(qū)進(jìn)行懸浮粒子監(jiān)測(cè)。生產(chǎn)過程中的污染（如活生物）可能損壞塵埃粒子計(jì)數(shù)器時(shí)，應(yīng)當(dāng)在設(shè)備調(diào)試操作和模擬操作期間進(jìn)行測(cè)試。A級(jí)潔凈區(qū)監(jiān)測(cè)的頻率及取樣量，應(yīng)能及時(shí)發(fā)現(xiàn)所有人為干預(yù)、偶發(fā)事件及任何系統(tǒng)的損壞。灌裝時(shí)，由于產(chǎn)品本身產(chǎn)生粒子或液滴，允許灌裝點(diǎn)5.0m的懸浮粒子出現(xiàn)不符合標(biāo)準(zhǔn)的情況。1、明確要求對(duì)A級(jí)區(qū)的關(guān)鍵操作的全過程包括設(shè)備組裝操作進(jìn)行懸浮粒子監(jiān)測(cè)。2、明確提出了A級(jí)潔凈區(qū)監(jiān)測(cè)的頻率及取樣量的確定原則。3、灌裝點(diǎn)位在監(jiān)測(cè)過程中很有可能出現(xiàn)5.0m的懸浮粒子超標(biāo)的情

28、況，但是這種超標(biāo)情況是允許的。36第36頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）4、為避免監(jiān)測(cè)過程對(duì)正常生產(chǎn)過程的干擾，一般采用在線懸浮粒子監(jiān)測(cè)系統(tǒng)。37第37頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）38第38頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）（三）在B級(jí)潔凈區(qū)可采用與A級(jí)潔凈區(qū)相似的監(jiān)測(cè)系統(tǒng)?？筛鶕?jù)B級(jí)潔凈區(qū)對(duì)相鄰A級(jí)潔凈區(qū)的影響程度，調(diào)整采樣頻率和采樣量。（四）懸浮粒子的監(jiān)測(cè)系統(tǒng)應(yīng)當(dāng)考慮采樣管的長(zhǎng)度和彎管的半徑對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響。 （五）日常監(jiān)測(cè)的采樣量可與潔凈度級(jí)別和空氣凈化系統(tǒng)確認(rèn)時(shí)的空氣采樣量不同。 （六）在A級(jí)潔凈區(qū)和B級(jí)潔凈區(qū)，

29、連續(xù)或有規(guī)律地出現(xiàn)少量5.0 m的懸浮粒子時(shí)，應(yīng)當(dāng)進(jìn)行調(diào)查。 39第39頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）（七）生產(chǎn)操作全部結(jié)束、操作人員撤出生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)并經(jīng)1520分鐘（指導(dǎo)值）自凈后，潔凈區(qū)的懸浮粒子應(yīng)當(dāng)達(dá)到表中的“靜態(tài)”標(biāo)準(zhǔn)。1、一個(gè)房間的潔凈度與三個(gè)因素有關(guān)，進(jìn)入房間的空氣質(zhì)量和風(fēng)量；潔凈空氣在房間中混合均勻的程度以及房間的體積。因此，簡(jiǎn)單的用換氣次數(shù)來要求房間的潔凈度是不全面的。比如說，換氣次數(shù)很高，但流型很差的房間（進(jìn)風(fēng)吹到地板，然后返回天花板，其余部分空氣懸停），其自凈能力自然也很差，所以現(xiàn)在評(píng)價(jià)潔凈室自凈能力用恢復(fù)時(shí)間來衡量，也即一個(gè)潔凈室從動(dòng)態(tài)恢復(fù)至靜態(tài)所需

30、要的時(shí)間。這個(gè)指標(biāo)綜合了換氣次數(shù)，流型等因素，更能評(píng)價(jià)一個(gè)潔凈室自凈能力的大小。因此EUGMP及新版GMP取消了關(guān)于換氣次數(shù)的規(guī)定。但是按照ISPE新的HVAC系統(tǒng)指南，建議換氣次數(shù)如下:D級(jí)：620次/小時(shí)；C級(jí)：2040次/小時(shí)；B級(jí)：4060次/小時(shí)。40第40頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）（八）應(yīng)當(dāng)按照質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理的原則對(duì)C級(jí)潔凈區(qū)和D級(jí)潔凈區(qū)（必要時(shí)）進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。監(jiān)控要求以及警戒限度和糾偏限度可根據(jù)操作的性質(zhì)確定，但自凈時(shí)間應(yīng)當(dāng)達(dá)到規(guī)定要求。1、對(duì)于C級(jí)潔凈區(qū)和D級(jí)潔凈區(qū)進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)前首先根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)管理的原則確定取樣點(diǎn)、取樣量及取樣頻次。2、警戒限度和糾偏限

31、度的確定：可以根據(jù)歷史數(shù)據(jù)，結(jié)合不同潔凈區(qū)域的標(biāo)準(zhǔn)制訂，如采用數(shù)理統(tǒng)計(jì)（正態(tài)分布法）的方法，一般可以將平均值加上2倍的標(biāo)準(zhǔn)差作為警戒限度，加上3倍的標(biāo)準(zhǔn)差作為糾偏限度。糾偏限度不得高于相應(yīng)潔凈級(jí)別的參照性限度標(biāo)準(zhǔn)。41第41頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）42第42頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）（九）應(yīng)當(dāng)根據(jù)產(chǎn)品及操作的性質(zhì)制定溫度、相對(duì)濕度等參數(shù)，這些參數(shù)不應(yīng)對(duì)規(guī)定的潔凈度造成不良影響。1、新版GMP中取消了對(duì)于溫濕度的規(guī)定，決定潔凈室溫濕度的因素包括：操作者的舒適、減少微生物生長(zhǎng)、靜電污染、工藝的需要、節(jié)能和降耗。2、從人的角度分析，人是潔

32、凈室內(nèi)主要的發(fā)塵源，作業(yè)人員進(jìn)入潔凈區(qū)必須穿戴與潔凈室的空氣潔凈度等級(jí)相適應(yīng)的工作服、口罩等，由于潔凈工作服的透氣性較差，為了保證作業(yè)人員的工作環(huán)境，提高勞動(dòng)生產(chǎn)率，在潔凈室生產(chǎn)工藝對(duì)環(huán)境的溫濕度沒有特殊要求時(shí)，潔凈室內(nèi)的溫濕度主要是考慮作業(yè)人員的舒適程度。從生產(chǎn)工藝的角度分析，每個(gè)生產(chǎn)線應(yīng)有不同的控制參數(shù)要求，例如，口服固體制劑生產(chǎn)線，主要生產(chǎn)顆粒劑、片劑，其濕度低一些對(duì)生產(chǎn)是有利的；從衛(wèi)生學(xué)角度分析，濕度高容易使細(xì)菌特別是霉菌滋生繁殖，溫濕度越低越能抑制細(xì)菌的繁殖，雖然濕度低易起塵，使細(xì)菌擴(kuò)散，但綜合分析，濕度偏低些還是有利的。43第43頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)

33、測(cè)）第十一條 應(yīng)當(dāng)對(duì)微生物進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，評(píng)估無菌生產(chǎn)的微生物狀況。監(jiān)測(cè)方法有沉降菌法、定量空氣浮游菌采樣法和表面取樣法（如棉簽擦拭法和接觸碟法）等。動(dòng)態(tài)取樣應(yīng)當(dāng)避免對(duì)潔凈區(qū)造成不良影響。成品批記錄的審核應(yīng)當(dāng)包括環(huán)境監(jiān)測(cè)的結(jié)果。對(duì)表面和操作人員的監(jiān)測(cè)，應(yīng)當(dāng)在關(guān)鍵操作完成后進(jìn)行。在正常的生產(chǎn)操作監(jiān)測(cè)外，可在系統(tǒng)驗(yàn)證、清潔或消毒等操作完成后增加微生物監(jiān)測(cè)。潔凈區(qū)微生物監(jiān)測(cè)的動(dòng)態(tài)標(biāo)準(zhǔn)(1)如下： 潔凈度級(jí)別浮游菌cfu/m3沉降菌（）cfu /4小時(shí)(2)表面微生物接觸（）cfu /碟5指手套cfu /手套A級(jí)1111B級(jí)10555C級(jí)1005025D級(jí)20010050注：（1）表中各數(shù)值均為平均值。

34、（2）單個(gè)沉降碟的暴露時(shí)間可以少于4小時(shí)，同一位置可使用多個(gè)沉降碟連續(xù)進(jìn)行監(jiān)測(cè)并累積計(jì)數(shù)。 44第44頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）1、雖然粒子取樣可以用來評(píng)價(jià)空氣的質(zhì)量，但是微生物的污染是生產(chǎn)環(huán)境最重要因素，它與最終產(chǎn)品的微生物負(fù)荷控制相關(guān)。雖然在所有生產(chǎn)的最終產(chǎn)品都要求控制微生物污染，但是對(duì)于無菌生產(chǎn)過程顯得尤為重要。2、本條款明確在無菌生產(chǎn)過程中應(yīng)對(duì)微生物進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，微生物監(jiān)測(cè)的方法包括沉降菌法、浮游菌法和表面取樣法。并且環(huán)境微生物的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)結(jié)果必須納入批記錄中作為產(chǎn)品的放行依據(jù)之一。45第45頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）3、沉降菌

35、法：作為被動(dòng)式取樣的沉降碟（平皿直徑一般為90mm），用于環(huán)境中沉降菌監(jiān)測(cè)。沉降碟以其價(jià)廉、輕便、對(duì)空氣環(huán)境破壞較小等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于潔凈區(qū)的環(huán)境監(jiān)測(cè)。不足之處在于它只能作為定性測(cè)試，所獲得數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性較差。但是在層流區(qū)域，沉降碟不會(huì)干擾氣流方向，不失為一種比較好的方法。為了盡可能地獲得可靠數(shù)據(jù)，沉降菌碟放置時(shí)間不宜過短，至少為半小時(shí)。一般情況下，將沉降菌碟暴露于被測(cè)環(huán)境中4小時(shí)。應(yīng)對(duì)沉降碟的暴露時(shí)間進(jìn)行確認(rèn)，以保證暴露后的培養(yǎng)基不會(huì)因失水等原因而影響微生物的正常生長(zhǎng)。46第46頁，共164頁。4、定量空氣浮游菌采樣法：也叫空氣浮游菌測(cè)試，目前常規(guī)監(jiān)測(cè)空氣浮游菌的設(shè)備有很多類型，有些還有其他

36、功能比如微生物大小分類，在生產(chǎn)車間中使用空氣浮游菌取樣來監(jiān)測(cè)浮游菌污染水平是有意義的，浮游菌采樣儀可以測(cè)量已知體積的空氣，使空氣中污染物的量轉(zhuǎn)化為單位體積的量。目前應(yīng)用最廣泛的是固體培養(yǎng)基撞擊式浮游菌采樣儀。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）47第47頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）5、表面取樣法：表面微生物監(jiān)測(cè)用來監(jiān)測(cè)生產(chǎn)區(qū)域表面以及設(shè)備和與產(chǎn)品接觸表面的微生物量，這種監(jiān)測(cè)方法必須要考慮取樣的準(zhǔn)確性和代表性，基本的取樣方法包括：接觸碟、擦拭法以及表面沖洗法。每種方法所得的結(jié)果均可以用于產(chǎn)品質(zhì)量評(píng)價(jià)，測(cè)試方法可以定性和定量。而且取樣的準(zhǔn)確性受手機(jī)和處理樣品的過程影

37、響，所以必須對(duì)取樣進(jìn)行培訓(xùn)和驗(yàn)證。接觸碟：容易操作而且可以定量。因此被廣泛使用，適用于憑證的規(guī)則性表面進(jìn)行取樣監(jiān)測(cè)，通常碟子的直徑是50mm的，培養(yǎng)基充滿碟子形成圓頂，取樣面積一般為25cm2。取樣時(shí)打開碟蓋，使無菌培養(yǎng)基表面與取樣面直接接觸，均勻按壓接觸碟底板，確保全部瓊脂表面與取樣點(diǎn)表面均勻接觸10秒鐘左右，再蓋上菌碟。取樣后應(yīng)使用蘸有70%乙醇溶液的無菌擦拭布擦拭被取樣表面，以除去瓊脂殘留。缺點(diǎn)：不適用于非常規(guī)表面并且如果培養(yǎng)基太過濕潤(rùn)，菌落會(huì)連片生長(zhǎng)導(dǎo)致不易計(jì)數(shù)。人員衛(wèi)生監(jiān)測(cè)的方法與接觸菌碟法相同。48第48頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）擦拭法：該方法通常用于

38、不規(guī)則表面（尤其是設(shè)備內(nèi)表面）進(jìn)行取樣。拭子通常為一根棒狀物，其頂端由吸水性材料制成，拭子頭在取樣前應(yīng)先行浸濕，取樣時(shí)手握拭子柄，以30角與取樣表面接觸，緩慢并充分擦拭，取樣面積約25cm2左右（可用特定的無菌模板確定擦拭面積），然后將取樣頭折斷放入上述溶液中（無菌生理鹽水或0.1%的蛋白胨溶液約5ml），充分振蕩，再用平皿涂布法或鋪平板法技術(shù)。缺點(diǎn)：取樣和轉(zhuǎn)移技術(shù)可能會(huì)影響結(jié)果；樣品處理后才能培養(yǎng)。49第49頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）表面沖洗法：該法適用于監(jiān)測(cè)大面積區(qū)域內(nèi)表面的微生物含量，包括設(shè)備軌道、儲(chǔ)水罐等。用定量的無菌水沖洗表面，收集淋洗水，用膜過濾法來計(jì)

39、算微生物的數(shù)量。缺點(diǎn)：適用性不廣，需要額外的操作，取樣和處理過程可能會(huì)影響結(jié)果。50第50頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）6、取樣點(diǎn)的選擇：常規(guī)監(jiān)測(cè)取樣點(diǎn)位選擇主要考慮以下幾點(diǎn)：-在哪些點(diǎn)最有可能造成微生物污染，對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量造成不良影響？ 在生產(chǎn)過程中，什么地點(diǎn)最有可能性發(fā)生最嚴(yán)重的微生物繁殖？ 取樣點(diǎn)選擇是否需要基于網(wǎng)格法?在常規(guī)監(jiān)測(cè)中，一些取樣點(diǎn)是否需要更換？哪些取樣點(diǎn)代表了清潔、消毒或滅菌時(shí)最不能覆蓋到的地方？在某一點(diǎn)位的太多取樣是否會(huì)引起收集的數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確或污染產(chǎn)品？對(duì)于反應(yīng)產(chǎn)品的微生物含量有代表性的取樣點(diǎn)必須取樣和進(jìn)行環(huán)境監(jiān)測(cè)。還應(yīng)考慮環(huán)境監(jiān)測(cè)是否會(huì)增加產(chǎn)品的污染

40、，例如生產(chǎn)過程中污染的幾率很小，關(guān)鍵區(qū)域的取樣就不需要。 潔凈區(qū)監(jiān)測(cè)的取樣點(diǎn)和取樣量可以比潔凈級(jí)別確認(rèn)時(shí)的取樣點(diǎn)和取樣量少，應(yīng)該通過風(fēng)險(xiǎn)分析研究和對(duì)監(jiān)測(cè)結(jié)果的分析（至少6個(gè)月以上的數(shù)據(jù)）來確定監(jiān)測(cè)頻次和限度。51第51頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）7、取樣要求：沉降菌：-除受潔凈區(qū)的設(shè)備限制外，取樣點(diǎn)應(yīng)在整個(gè)潔凈區(qū)均勻布置。那些與產(chǎn)品相鄰近的區(qū)域，以及可能與產(chǎn)品直接接觸的空氣及設(shè)備附近均應(yīng)考慮增加取樣點(diǎn)和取樣頻次。人員活動(dòng)頻繁或人員較集中的區(qū)域也應(yīng)考慮增加取樣點(diǎn)和取樣頻次。 取樣點(diǎn)一般布置在距離地面0.81.5m之間或操作平臺(tái)的高度。盡量避免在回風(fēng)口附近取樣，而且測(cè)試

41、人員應(yīng)站在取樣口的下風(fēng)側(cè)。進(jìn)行動(dòng)態(tài)測(cè)試時(shí)，單向流區(qū)內(nèi)應(yīng)以沉降菌測(cè)試為主，單向流區(qū)域外非單向流區(qū)域以浮游菌測(cè)試為主。52第52頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）浮游菌：-除受潔凈區(qū)的設(shè)備限制外，取樣點(diǎn)應(yīng)在整個(gè)潔凈區(qū)均勻布置。那些與產(chǎn)品相鄰近的區(qū)域，以及可能與產(chǎn)品直接接觸的空氣及設(shè)備附近均應(yīng)考慮增加取樣點(diǎn)和取樣頻次。人員活動(dòng)頻繁或人員較集中的區(qū)域也應(yīng)考慮增加取樣點(diǎn)和取樣頻次。 取樣點(diǎn)一般布置在距離地面0.81.5m之間或操作平臺(tái)的高度。盡量避免在回風(fēng)口附近取樣（距離1m以上），而且測(cè)試人員應(yīng)站在取樣口的下風(fēng)側(cè)。應(yīng)根據(jù)被測(cè)區(qū)域的浮游菌控制限度和取樣方式為決定取樣量，通常每點(diǎn)只需

42、取樣一次，在C級(jí)以上區(qū)域取樣量不得少于500L/次，在D級(jí)（包括D級(jí)）取樣量不得少于100L/次。53第53頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）表面微生物取樣：-表面微生物取樣點(diǎn)數(shù)的確定以考慮潔凈區(qū)的大小、設(shè)備管路的復(fù)雜程度、生產(chǎn)活動(dòng)的重要性及易污染的部位等。應(yīng)至少包括如下部位：每扇門、每個(gè)門把手、地面、墻壁、公用介質(zhì)的管路、生產(chǎn)設(shè)備的關(guān)鍵性部位（如灌裝針、易于人員接觸的隔簾、膠塞桶、傳輸帶等）。即使確定了取樣點(diǎn)，也不宜每次均固定在同一點(diǎn)取樣，而應(yīng)考慮在取樣點(diǎn)附近不同位置取樣，這樣使測(cè)試結(jié)果更具代表性。為避免干擾最好在生產(chǎn)活動(dòng)結(jié)束后取樣。 54第54頁，共164頁。附錄1無

43、菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）人員監(jiān)測(cè)：-對(duì)無菌生產(chǎn)區(qū)的每位工作人員進(jìn)行每班測(cè)試，甚至要對(duì)每次更衣進(jìn)行監(jiān)測(cè)。取樣部位包括手套、操作服的易遭污染部位、鞋套、確認(rèn)時(shí)還應(yīng)包括頭罩及口罩。手套和操作服表面的微生物監(jiān)測(cè)是人員衛(wèi)生監(jiān)測(cè)的關(guān)鍵。手套監(jiān)測(cè)時(shí)還應(yīng)包括雙手的手指和手掌，操作服表面取樣主要是前臂的袖管、肩前下部等，鞋套的取樣最好在套筒的上面。人員衛(wèi)生監(jiān)測(cè)時(shí)每點(diǎn)取樣面積最好控制在25cm2左右。為避免干擾，最好在生產(chǎn)活動(dòng)結(jié)束時(shí)取樣（人員離開無菌生產(chǎn)區(qū)前取樣）。55第55頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）第十二條 應(yīng)當(dāng)制定適當(dāng)?shù)膽腋×Ｗ雍臀⑸锉O(jiān)測(cè)警戒限度和糾偏限度。操作規(guī)程中應(yīng)

44、當(dāng)詳細(xì)說明結(jié)果超標(biāo)時(shí)需采取的糾偏措施。1、如果發(fā)生偏差時(shí)，數(shù)據(jù)可能會(huì)高于設(shè)定限度，必須調(diào)查發(fā)生偏差的原因并制定措施如何防止再次發(fā)生，針對(duì)環(huán)境監(jiān)測(cè)結(jié)果超標(biāo)的偏差調(diào)查其目的就是找到導(dǎo)致環(huán)境超標(biāo)的最大可能原因（如污染來源）。2、必須建立系統(tǒng)的處理偏差的方法，必須預(yù)先制定調(diào)查和糾偏措施的步驟。對(duì)于連續(xù)或多個(gè)超標(biāo)情況要比單一或單獨(dú)的超標(biāo)采取更進(jìn)一步的調(diào)查/糾偏措施。3、在進(jìn)行偏差調(diào)查前首先應(yīng)排除實(shí)驗(yàn)室或取樣因素。56第56頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）Environmental Monitoring Systems 無菌室環(huán)境監(jiān)測(cè)系統(tǒng)示意圖ENODEReal-Time Stat

45、ion實(shí)時(shí)工作站Central vacuum system中央真空采集泵Particle sensor 激光粒子傳感器Ethernet Switch網(wǎng)絡(luò)交換機(jī)Alarms報(bào)警器Server服務(wù)器T/RH, DP, etc 溫濕度信號(hào) Cleanroom HMI 無菌室操作站Site LAN局域網(wǎng)Network Stations網(wǎng)絡(luò)工作站Portable particle counter 便攜式激光粒子計(jì)數(shù)器Microbial sampler 微生物采樣器Microbial control (valve)微生物控制閥Control & Automation 自動(dòng)控制信號(hào)Microbial mon

46、itoring(flow meter) 微生物監(jiān)測(cè)流量計(jì)Portable microbial sampler便攜式微生物采集器57第57頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）潔凈度級(jí)別最終滅菌產(chǎn)品生產(chǎn)操作示例C級(jí)背景下的局部A級(jí)高污染風(fēng)險(xiǎn)(1)的產(chǎn)品灌裝（或灌封）C級(jí)1.產(chǎn)品灌裝（或灌封）；2.高污染風(fēng)險(xiǎn)(2)產(chǎn)品的配制和過濾；3.眼用制劑、無菌軟膏劑、無菌混懸劑等的配制、灌裝（或灌封）；4.直接接觸藥品的包裝材料和器具最終清洗后的處理。D級(jí)1.灌裝前物料的準(zhǔn)備；2.產(chǎn)品配制（指濃配或采用密閉系統(tǒng)的配制）和過濾直接接觸藥品的包裝材料和器具的最終清洗。第十三條 無菌藥品的生產(chǎn)操

47、作環(huán)境可參照表格中的示例進(jìn)行選擇。58第58頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第三章潔凈度級(jí)別及監(jiān)測(cè)）注：（1）此處的高污染風(fēng)險(xiǎn)是指產(chǎn)品容易長(zhǎng)菌、灌裝速度慢、灌裝用容器為廣口瓶、容器須暴露數(shù)秒后方可密封等狀況；（2）此處的高污染風(fēng)險(xiǎn)是指產(chǎn)品容易長(zhǎng)菌、配制后需等待較長(zhǎng)時(shí)間方可滅菌或不在密閉系統(tǒng)中配制等狀況。 59第59頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第四章隔離操作技術(shù)）第四章隔離操作技術(shù)60第60頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第四章隔離操作技術(shù)）第十四條 高污染風(fēng)險(xiǎn)的操作宜在隔離操作器中完成。隔離操作器及其所處環(huán)境的設(shè)計(jì)，應(yīng)當(dāng)能夠保證相應(yīng)區(qū)域空氣的質(zhì)量達(dá)到設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)。傳輸裝置可設(shè)計(jì)成單門或雙門，也

48、可是同滅菌設(shè)備相連的全密封系統(tǒng)。物品進(jìn)出隔離操作器應(yīng)當(dāng)特別注意防止污染。隔離操作器所處環(huán)境取決于其設(shè)計(jì)及應(yīng)用，無菌生產(chǎn)的隔離操作器所處的環(huán)境至少應(yīng)為D級(jí)潔凈區(qū)。 1、隔離：采用物理屏障的手段將受控空間與外部環(huán)境相互隔絕的技術(shù)，是一種絕對(duì)隔離，它源于第二次世界大戰(zhàn)。隔離技術(shù)的應(yīng)用主要有3方面的考慮：保護(hù)無菌藥品在生產(chǎn)過程中不受交叉污染或外部環(huán)境的影響；保護(hù)人員遠(yuǎn)離高活性、高致敏性和毒性物質(zhì)的侵害(例如：青霉素類、細(xì)胞毒素類、激素類、抗腫瘤類、放射性藥物等藥品)；保護(hù)環(huán)境免受高活性、高致敏性和毒性物質(zhì)在無控制的條件下傳播。61第61頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第四章隔離操作技術(shù)）62第62頁，

49、共164頁。附錄1無菌藥品（第四章隔離操作技術(shù)）2、現(xiàn)代隔離/屏障技術(shù)主要分為三類：簡(jiǎn)單屏障或分區(qū)；限制進(jìn)入屏障系統(tǒng)（RABS）；隔離式屏障系統(tǒng)（ISOLATOR）。作為隔離器，必須是完全密封的，這樣才便于控制、并處理成無菌狀態(tài)。一個(gè)完整的操作過程可能需要若干個(gè)隔離器組成的系統(tǒng)來完成，從而將整個(gè)流程與可能的污染源（如：周圍的設(shè)備和操作者）徹底分開。生產(chǎn)環(huán)境下的隔離，不外乎兩個(gè)原因：保護(hù)工藝流程或者保護(hù)環(huán)境（操作人員）。為了達(dá)到不同的目的，調(diào)節(jié)隔離器內(nèi)的壓力水平以符合要求，這就是一個(gè)關(guān)鍵因素。如果需要保護(hù)環(huán)境及工作人員，則隔離器內(nèi)應(yīng)一直保持負(fù)壓狀態(tài)，這樣即便隔離器出現(xiàn)微小的泄露，有害物質(zhì)也不會(huì)泄

50、出；而保護(hù)工藝流程時(shí)，隔離器應(yīng)當(dāng)保持正壓狀態(tài)。63第63頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第四章隔離操作技術(shù)） 隔離器是一個(gè)完全密閉的環(huán)境，可對(duì)潛在的污染源進(jìn)行控制（通過高效過濾器、傳遞裝置等），也同時(shí)對(duì)人員進(jìn)行了隔離。為了達(dá)到這個(gè)目的，通過使用強(qiáng)制通風(fēng)系統(tǒng)來維持隔離器艙內(nèi)艙外的壓差（根據(jù)需要來進(jìn)行調(diào)節(jié)為正壓或者負(fù)壓），氣流保持湍流就足以維持無菌或者安全的狀態(tài)或者環(huán)境。（非單向流及單向流）特定情況下，單向流（產(chǎn)生和維持成本很高）的用處很大，可以保證重點(diǎn)區(qū)域中的顆粒被快速清除（一個(gè)方向上），例如，在隔離器內(nèi)的操作者需使用一些材料或者機(jī)械性工具，而這些材料或工具在使用過程中可能會(huì)產(chǎn)生顆粒，從而污染操

51、作過程。64第64頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第四章隔離操作技術(shù)）項(xiàng)目傳統(tǒng)潔凈室無菌隔離技術(shù)消毒/滅菌方法消毒劑擦拭熏蒸紫外線照射方法，受空間等諸多因素影響，效果難以驗(yàn)證。自動(dòng)氣體滅菌器滅菌,省時(shí)省力，氣體分布均勻，效果較好容易驗(yàn)證。潔凈環(huán)境的控制易受人員物料等諸多因素影響，易受污染難以控制。與外界完全隔離，僅通過HEPA進(jìn)行氣體交換，并可恒定艙內(nèi)壓力以阻絕外界污染。物料傳遞易造成環(huán)境污染直接和滅菌器連接對(duì)操作人員的防護(hù)取決于操作人員自身安全人員進(jìn)出需要復(fù)雜的換鞋更衣程序僅通過戴手套穿半身工作服即可運(yùn)行所需能耗高低誤操作導(dǎo)致的無菌污染的風(fēng)險(xiǎn)大可能性極小操作和維護(hù)成本高低3、無菌隔離技術(shù)與傳

52、統(tǒng)潔凈室的對(duì)比：65第65頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第四章隔離操作技術(shù)）第十五條 隔離操作器只有經(jīng)過適當(dāng)?shù)拇_認(rèn)后方可投入使用。確認(rèn)時(shí)應(yīng)當(dāng)考慮隔離技術(shù)的所有關(guān)鍵因素，如隔離系統(tǒng)內(nèi)部和外部所處環(huán)境的空氣質(zhì)量、隔離操作器的消毒、傳遞操作以及隔離系統(tǒng)的完整性。1、隔離系統(tǒng)用于無菌生產(chǎn)和試驗(yàn)之前必須得到驗(yàn)證。目前歐洲和美國(guó)藥典的無菌檢查法均已收載隔離系統(tǒng)及其驗(yàn)證方法，中國(guó)藥典自2005版無菌檢查法也已經(jīng)收載了無菌隔離系統(tǒng)。2、確認(rèn)隔離系統(tǒng)以及所有相關(guān)設(shè)備是否使用的驗(yàn)證分為三個(gè)階段進(jìn)行：安裝確認(rèn)（IQ）、運(yùn)行確認(rèn)（OQ）和性能確認(rèn)（PQ）。66第66頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第四章隔離操作技術(shù)

53、）67第67頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第四章隔離操作技術(shù)）第十六條 隔離操作器和隔離用袖管或手套系統(tǒng)應(yīng)當(dāng)進(jìn)行常規(guī)監(jiān)測(cè)，包括經(jīng)常進(jìn)行必要的檢漏試驗(yàn)。1、手套和袖管是隔離器完整性測(cè)試中的一個(gè)重要部分，因?yàn)槭痔资俏ㄒ豢赡芙佑|到無菌容器和物料的部分，然而在使用過程中有時(shí)即使使用壓降試驗(yàn)合格，手套上也有可能存在難以發(fā)現(xiàn)的極微小的破洞，這樣就有必要定期專門檢查手套的完整性，現(xiàn)在國(guó)外有專門手套測(cè)漏儀，操作人員應(yīng)確保在最接近實(shí)際使用情況的條件下用測(cè)漏儀監(jiān)測(cè)手套。68第68頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第五章吹灌封技術(shù)）第五章吹灌封技術(shù)69第69頁，共164頁。第十七條 用于生產(chǎn)非最終滅菌產(chǎn)品的吹灌封設(shè)

54、備自身應(yīng)裝有A級(jí)空氣風(fēng)淋裝置，人員著裝應(yīng)當(dāng)符合A/B級(jí)潔凈區(qū)的式樣，該設(shè)備至少應(yīng)當(dāng)安裝在C級(jí)潔凈區(qū)環(huán)境中。在靜態(tài)條件下，此環(huán)境的懸浮粒子和微生物均應(yīng)當(dāng)達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，在動(dòng)態(tài)條件下，此環(huán)境的微生物應(yīng)當(dāng)達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)。用于生產(chǎn)最終滅菌產(chǎn)品的吹灌封設(shè)備至少應(yīng)當(dāng)安裝在D級(jí)潔凈區(qū)環(huán)境中。 1、什么是BFS？應(yīng)用于醫(yī)藥行業(yè)的吹灌封三合一(BFS)技術(shù)(BlowFillSeal)是一種無菌包裝技術(shù)是一套專用的機(jī)械設(shè)備，連續(xù)操作，從一個(gè)熱塑顆粒吹制成容器至灌裝和密封，整個(gè)過程由一臺(tái)前自動(dòng)設(shè)備完成。用于無菌生產(chǎn)的吹灌封設(shè)備本身裝有A級(jí)風(fēng)淋裝置，在操作人員按A/B級(jí)區(qū)要求著裝的條件下，該設(shè)備可安裝在C級(jí)環(huán)境中。靜態(tài)條件下，此

55、環(huán)境微粒和微生物均應(yīng)達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，在動(dòng)態(tài)條件下，此環(huán)境的微生物應(yīng)達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，用于生產(chǎn)最終滅菌產(chǎn)品的吹灌封設(shè)備至少應(yīng)當(dāng)安裝在D級(jí)潔凈區(qū)環(huán)境中。附錄1無菌藥品（第五章吹灌封技術(shù)）70第70頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第五章吹灌封技術(shù)）2、吹灌封設(shè)備可全自動(dòng)運(yùn)行，縮短了停機(jī)時(shí)間，整臺(tái)設(shè)備的運(yùn)行理念是盡可能地減少人員操作，從而減少管理成本，提高設(shè)備運(yùn)行穩(wěn)定性。每臺(tái)設(shè)備一般都將在線清洗（CIP）和在線滅菌（SIP）整合在系統(tǒng)中，大大增加了設(shè)備的生產(chǎn)工作時(shí)間，提高了機(jī)器運(yùn)轉(zhuǎn)效率。71第71頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第五章吹灌封技術(shù)）第十八條 因吹灌封技術(shù)的特殊性，應(yīng)當(dāng)特別注意設(shè)備的設(shè)計(jì)和確認(rèn)、在線清潔

56、和在線滅菌的驗(yàn)證及結(jié)果的重現(xiàn)性、設(shè)備所處的潔凈區(qū)環(huán)境、操作人員的培訓(xùn)和著裝，以及設(shè)備關(guān)鍵區(qū)域內(nèi)的操作，包括灌裝開始前設(shè)備的無菌裝配。1、對(duì)吹灌封技術(shù)的驗(yàn)證要求，這里不再詳細(xì)說明。72第72頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第六章人員）第六章人員73第73頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第六章人員）第十九條 潔凈區(qū)內(nèi)的人數(shù)應(yīng)當(dāng)嚴(yán)加控制，檢查和監(jiān)督應(yīng)當(dāng)盡可能在無菌生產(chǎn)的潔凈區(qū)外進(jìn)行。1、人員是最大的污染源，控制無菌生產(chǎn)區(qū)的人數(shù)非常關(guān)鍵，盡量減少進(jìn)入無菌區(qū)（甚至包括整體潔凈區(qū)）的人數(shù)，這個(gè)數(shù)量應(yīng)能保持工作需要的最低人數(shù)，檢查和控制工作盡可能在潔凈區(qū)外面進(jìn)行，輔助工作人員盡量靠單向流區(qū)域的外側(cè)，生產(chǎn)無關(guān)

57、的人員盡量不進(jìn)入潔凈區(qū)，進(jìn)入無菌區(qū)的人數(shù)應(yīng)通過驗(yàn)證來確定。74第74頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第六章人員）第二十條 凡在潔凈區(qū)工作的人員（包括清潔工和設(shè)備維修工）應(yīng)當(dāng)定期培訓(xùn)，使無菌藥品的操作符合要求。培訓(xùn)的內(nèi)容應(yīng)當(dāng)包括衛(wèi)生和微生物方面的基礎(chǔ)知識(shí)。未受培訓(xùn)的外部人員（如外部施工人員或維修人員）在生產(chǎn)期間需進(jìn)入潔凈區(qū)時(shí)，應(yīng)當(dāng)對(duì)他們進(jìn)行特別詳細(xì)的指導(dǎo)和監(jiān)督。1、所有無菌藥品生產(chǎn)應(yīng)該由經(jīng)培訓(xùn)的人員操作。無菌藥品生產(chǎn)的管理者應(yīng)有相關(guān)的知識(shí)，在無菌藥品的制備中有實(shí)際經(jīng)驗(yàn)和理論知識(shí)，在微生物學(xué)方面經(jīng)過適當(dāng)?shù)呐嘤?xùn)。2、所有與無菌藥品生產(chǎn)的相關(guān)人員都應(yīng)該完全意識(shí)到偏離了驗(yàn)證規(guī)程可能對(duì)產(chǎn)品和病人帶來的風(fēng)險(xiǎn)

58、。3、無菌分裝崗位的操作人員的無菌操作技能，無菌生產(chǎn)過程可能發(fā)生的停機(jī)故障處理方法（維修和清潔）應(yīng)通過無菌工藝模擬試驗(yàn)來進(jìn)行確認(rèn)。75第75頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第六章人員）4、無菌生產(chǎn)直接相關(guān)人員的培訓(xùn)內(nèi)容應(yīng)包括但不限于：藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GMP）；無菌操作技術(shù)；潔凈室行為；微生物學(xué)；衛(wèi)生學(xué)；穿潔凈衣的技術(shù)；接觸法取樣；無菌生產(chǎn)過程污染控制；受微生物污染的藥物對(duì)病人安全的危害；關(guān)鍵工藝特性；無菌生產(chǎn)過程的相關(guān)工藝規(guī)程和SOP；76第76頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第六章人員）5、對(duì)于進(jìn)入無菌關(guān)鍵區(qū)域的人員必須接受嚴(yán)格的培訓(xùn)，培訓(xùn)包括理論知識(shí)和現(xiàn)場(chǎng)實(shí)踐。培訓(xùn)可以從實(shí)施非關(guān)鍵操

59、作開始，所從事的非關(guān)鍵操作同樣必須在授權(quán)人員的監(jiān)督之下，經(jīng)過一段時(shí)間的實(shí)踐后，通過無菌模擬試驗(yàn)對(duì)這些人員進(jìn)行關(guān)鍵技術(shù)確認(rèn)和無菌考核，考核通過這些人員才能被允許在關(guān)鍵區(qū)域獨(dú)立進(jìn)行關(guān)鍵操作。6、無菌生產(chǎn)部門的管理人員應(yīng)該對(duì)潔凈區(qū)和潔凈區(qū)設(shè)施的相關(guān)內(nèi)容有所理解，對(duì)部門所屬的特殊設(shè)計(jì)如凈化空調(diào)系統(tǒng)、HEPA過濾器的位置和級(jí)別、工作臺(tái)類型、隔離器設(shè)計(jì)等有詳盡的知識(shí)。7、只有經(jīng)過批準(zhǔn)，經(jīng)過專門培訓(xùn)的人員方可進(jìn)入無菌生產(chǎn)區(qū)內(nèi)，無論何時(shí)均應(yīng)遵守這個(gè)原則，例如非無菌操作區(qū)的人員或外來參觀者需進(jìn)入操作區(qū)時(shí)，必須經(jīng)過有關(guān)部門的批準(zhǔn)，并由無菌區(qū)的經(jīng)培訓(xùn)的操作人員指導(dǎo)并監(jiān)督其著裝是否合適，是否按照相關(guān)規(guī)定執(zhí)行，生產(chǎn)期盡

60、量避免外來人員進(jìn)入無菌生產(chǎn)區(qū)。77第77頁，共164頁。附錄1無菌藥品（第六章人員）8、進(jìn)入無菌區(qū)所有人員應(yīng)具備良好的行為規(guī)范以最大限度降低污染發(fā)生的可能，包括：盡量減少進(jìn)入潔凈區(qū)的人數(shù)和次數(shù)。人員在進(jìn)入無菌區(qū)前應(yīng)用無菌的消毒劑消毒雙手，待消毒劑揮發(fā)干后方可進(jìn)入無菌區(qū)。 僅用無菌工具接觸物料。 緩慢和小心移動(dòng)?？焖僖苿?dòng)會(huì)在關(guān)鍵區(qū)域產(chǎn)生紊流，從而破壞單向流，緩慢和小心移動(dòng)是在無菌區(qū)工作始終遵循的基本原則。動(dòng)作應(yīng)盡量平緩，盡量避免下蹲動(dòng)作，更不應(yīng)該躺在地面或坐在地面上。如果因?yàn)榫S修不可避免這些動(dòng)作時(shí)，維修后應(yīng)立即更換潔凈服避免交叉污染。保持整個(gè)身體在單向流通道外，以避免破壞單向流造成產(chǎn)品污染。78