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文檔簡介
1、第13核酸代謝主要內容核酸的合成代謝 核苷酸的生物合成,核酸的生物合成核酸的分解代謝核酸的分解,核苷酸的降解代謝遺傳工程 DNA的限制酶圖譜,基因載體, DNA重組技術第一節(jié) 核酸的合成代謝核苷酸的生物合成核酸的生物合成一、核苷酸的生物合成(一)嘌呤核苷酸的生物合成(二) 嘧啶核苷酸的生物合成(三)脫氧核糖核苷酸的合成(一)嘌呤核苷酸的生物合成 1、反應式2、嘌呤中原子的來源 3、嘌呤核苷酸合成過程(AMP, GMP) (二) 嘧啶核苷酸的生物合成 1、嘧啶環(huán)的各個原子的來源2、嘧啶核苷酸的合成途徑(UMP)(三) 脫氧核糖核苷酸的合成二、核酸的生物合成中心法則 (一) DNA的生物合成1、D
2、NA復制 基本概念 半保留復制 復制叉 岡崎片段DNA合成酶系復 制 叉DAN合成過程2、DNA的逆向轉錄 (二) RNA的生物合成 1、轉錄 2、RNA的復制有些生物中,核糖核酸還可以是遺傳信息的基本攜帶者,如某些RNA病毒侵入寄主細胞后,能以RNA作模板,在有四種核苷三磷酸和鎂離子存在時合成出與模板性質相同的RNA。 第二節(jié) 核酸的分解代謝核酸的分解核苷酸的降解代謝一、核酸的分解分解核酸的酶1、核酸外切酶:核酸外切酶作用于核酸鏈的末端,逐個水解下核苷酸。 2、核酸內切酶:核酸內切酶催化水解多核苷酸鏈內部的磷酸二酯鍵。二、核苷酸的降解代謝1、核苷酸的降解 2、嘌呤的降解3、嘧啶的降解尿素和乙
3、醛酸尿囊酸 尿囊素和CO2尿酸黃嘌呤嘌呤NH3、CO2和-丙氨酸-脲基丙酸 二氫胸腺嘧啶二氫尿嘧啶胞嘧啶尿嘧啶胸腺嘧啶-脲基異丁酸NH3,CO2和-氨基異丁酸第三節(jié) 遺傳工程基本概念DNA的限制酶圖譜基因載體DNA重組技術一、基本概念遺傳工程:也叫基因工程,是指將不同的DNA片段(如基因等)按人們的設計方案定向地連接起來,并在特定的受體細胞中與載體一起得到復制與表達,使受體細胞獲得新的遺傳特性?;蚬こ痰挠猛?. 利用DNA重組技術大量生產一些在正常細胞代謝中產量很低的物質,如酶類;2. 定向地改造生物基因組結構,使其某些具有經濟價值的功能得以顯著提高;3. 將DNA重組技術應用于基礎研究。二
4、、DNA的限制酶圖譜1、限制性內切酶限制性內切酶主要在細菌中產生,具有極高的專一性,識別雙鏈DNA上特定的位點,將兩條鏈都切斷,形成粘性末端或平末端。其生物功能在于降解外面侵入的DNA,但不降解自身細胞中的DNA,因為在自身DNA的酶切位點上經甲基化修飾而受到保護。限制性內切酶2、DNA的限制酶圖譜將用分子克隆法從單一克隆中擴增而制備的純化DNA,用不同的限制酶切割,進行凝膠電泳分析。對環(huán)形DNA則找出一個對該DNA只有一個切位點的酶,以此點作為參考點,根據測量凝膠電泳圖上各酶切片段的長度,就可以決定各切點的位置。將各限制酶的切點位置標在DNA分子圖的相應位置上,即制成DNA的限制圖譜。三、基因載體載體將外源DNA片段帶入受體細胞并在其中一起進行復制與表達的運載工具稱為載體。常用載體細菌和酵母的質粒,噬菌體(如-噬菌體,M13)和病毒。四、DNA重組技術 DNA重組技術包括三個步驟 :1. 把所需要的DNA片斷(基因)和基因載體取出,使之進行基因的體外重組; 2.
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