不同活性炭對(duì)羅漢果快繁生根的影響

1、不同活性炭對(duì)羅漢果快繁生根的影響劉健暉1，陸靜1，曹麗敏1，王志新1，肖國輝2，李志清2（1.衡陽師范學(xué)院生命科學(xué)與環(huán)境學(xué)院/生物資源保護(hù)與利用衡陽市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 湖南 衡陽 421008；2.湖南省百富農(nóng)業(yè)科技開發(fā)有限公司， 湖南 衡陽 421008）摘 要 本試驗(yàn)研究不同培養(yǎng)基B5、1/2 B5、MS、1/2 MS以及不同類型、不同濃度活性炭對(duì)羅漢果快繁生根的影響。結(jié)果表明：不添加活性炭的情況下，四種不同培養(yǎng)基中生根率最高的培養(yǎng)基為B5培養(yǎng)基，生根率為70%，且生根數(shù)最多，平均根長最長；粗、細(xì)兩種活性炭均對(duì)羅漢果生根有促進(jìn)作用，但細(xì)活性炭培養(yǎng)基誘導(dǎo)的根更長。在不同類型以及不同濃度活性炭的培

2、養(yǎng)基中生根率最高的為細(xì)活性炭1.0 g/L的B5培養(yǎng)基和粗活性炭1.0 g/L的B5培養(yǎng)基，但細(xì)活性炭1.0 g/L的B5培養(yǎng)基生根數(shù)量和平均根長顯著高于（P0.05）后者。因此，較為適宜的生根培養(yǎng)基配方為：細(xì)活性炭1.0g/L，培養(yǎng)基為B5。關(guān)鍵詞 羅漢果；培養(yǎng)基；活性炭；生根Effects of Different Acticarbon Culture Medium on Rooting of Tissue Culture Seedling of Siraitia grosvenorii Liu Jian-hui1, Lu Jing1, Cao Li-min1, Wang Zhi-xin1

3、, Xiao Guo-hui2, Li Zhi-qing2（1College of Life Sciences and Environment, Hengyang Normal University, Hengyang 421008, Hunan, China; 2Hunan Bai Fu agricultural science and Technology Development Co., Ltd. Hengyang 421008, Hunan, China）Abstract The effects of different mediums and different types of a

4、cticarbon on rooting of Siraitia grosvenorii were investigated. The Results showed that the highest rooting rate of four different medium was B5, without activated carbon and the coarse and the rooting rate was 70%, the root number was the most, the average root length was the longest. the two kinds

5、 of activated carbon were allcapableofpromotingthegrowthofnewrootsof Siraitia grosvenorii. The root of fine activated carbon was longer. The highest rooting rate was B5 with fine activated carbon 1 g/L or 1 g/L coarse activated carbon. But the number of rooting and the average root length of B5 medi

6、um with fine activated carbon 1 g/L were significantly higher than that of the latter (P活性炭NAA蔗糖7。然而，對(duì)于研究不同活性炭種類和濃度對(duì)羅漢果快繁生根的影響較少。因此，本試驗(yàn)探究羅漢果快繁生根的最佳培養(yǎng)基，以及不同類型和濃度的活性炭對(duì)羅漢果快繁生根的影響；對(duì)比羅漢果根的分化時(shí)間、平均根長、生根率等指標(biāo)，確定最合理的羅漢果快繁生根的處理方法。收稿日期：2018-04-23；修回日期： 基金項(xiàng)目：衡陽師范學(xué)院自然科學(xué)產(chǎn)學(xué)研合作類項(xiàng)目(14CXYY04)；國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（31470008）；功能金屬

7、有機(jī)材料湖南省普通高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放基金資助項(xiàng)目（13K08）。通訊作者簡介：劉健暉（1979- ），男，碩士，研究方向?yàn)闊釒啛釒Ч麡溥z傳育種與生理。E-mail：269736361 材料與方法1.1 試驗(yàn)材料本試驗(yàn)以羅漢果無根試管苗為培養(yǎng)材料，苗均高為2.5 cm左右，發(fā)育狀況良好，均帶一個(gè)節(jié)，葉色正常。培養(yǎng)基為青島高科園海博生物技術(shù)有限公司所生產(chǎn)的B5培養(yǎng)基，北京康倍斯科技有限公司的MS培養(yǎng)基。1.2 無菌苗的獲得將羅漢果的幼莖先用流動(dòng)的自來水沖洗30 mins，將洗凈的羅漢果幼莖拿到超凈工作臺(tái)上進(jìn)行消毒接種。將幼莖放到消毒過的大燒杯中，加入75%的酒精消毒10 s并不斷攪動(dòng)，將酒精倒掉

8、，再加入0.1%升汞溶液消毒10 mins且不斷攪動(dòng)，然后用無菌水沖洗3次后將幼莖取出。在接種盤上將其剪切成僅帶一個(gè)節(jié)，約2.5 cm的莖段，接種入含MS+IBA 0.5 mg/L+ 6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L的培養(yǎng)基上，每個(gè)培養(yǎng)瓶接3個(gè)幼莖段，培養(yǎng)三周左右?？色@得長有5-6片真葉的羅漢果無菌苗，以新長出的幼莖作為供試材料8。1.3 誘導(dǎo)分化生根培養(yǎng)基的配制和培養(yǎng)本試驗(yàn)使用的誘導(dǎo)生根基礎(chǔ)培養(yǎng)基為MS、1/2 MS、B5、1/2 B5，添加IBA 0.5 mg/L，6-BA 1.0 mg/L，NAA 1.0 mg/L，蔗糖30 g/L，瓊脂5 g/L，粗顆?；钚蕴恐睆綖?/p>

9、2.0 mm左右（0 g/L、0.5 g/L、1.0 g/L、1.5 g/L）或粉末狀細(xì)活性炭（0 g/L、0.5 g/L、1.0 g/L、1.5 g/L），PH值為5.8-6.0，分裝在培養(yǎng)瓶中，每個(gè)培養(yǎng)瓶50 mL培養(yǎng)基然后在高壓蒸汽滅菌，再將預(yù)處理的幼莖分別接入不同的培養(yǎng)基中，每瓶接2個(gè)莖段，不同變量5個(gè)重復(fù)，即每個(gè)變量的植株共10株。在溫度為27 ，光照強(qiáng)度為2500 Lx，12 h/d條件下培養(yǎng)30 d6。1.4 觀察記錄每天觀察不同處理羅漢果無菌苗生根情況，以眼可辨認(rèn)的根為準(zhǔn)，并且記錄最早生根時(shí)間、生根數(shù)量。30 d后，測定根長，并且最終計(jì)算生根率（生根植株數(shù)總植株數(shù)），平均根長=

10、（所有根長度和/生根數(shù)）9。1.5 數(shù)據(jù)分析 利用DPS數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行LSD差異性分析。2 結(jié)果與分析2.1 不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基對(duì)羅漢果莖段生根的影響 不加活性炭的情況下，MS、1/2 MS、B5、1/2 B5各培養(yǎng)基的羅漢果生根情況，在培養(yǎng)30 d以后如表1所示。最早生根的為1/2 MS培養(yǎng)基，在接種后5天就開始生根，但生根率不高，最終為50%；B5培養(yǎng)基中生根率最高，達(dá)到60%，且生根數(shù)量也最多，平均根長最長（P0.05）。因此，不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基對(duì)羅漢果莖段生根最有利的為B5培養(yǎng)基。表1不加活性炭的情況下MS、1/2 MS、B5、1/2 B5各培養(yǎng)基的羅漢果生根情況不同培養(yǎng)生根率/%最早生根時(shí)

11、間/d生根數(shù)量/根平均根長/mmMS40b10a5b6c1/2MS50ab5bc16a9bB560a7b17a13a1/2B530b10a5b7c注：表中同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示差異顯著（P0.05）。下同。2.2 添加不同濃度粗活性炭對(duì)羅漢果莖段生根的影響分別添加不同濃度粗活性炭后，不同培養(yǎng)基對(duì)羅漢果生根的影響如表2和圖1所示。添加0.5 g/L粗活性炭，不同培養(yǎng)基中羅漢果生根率均有提高；其中生根率最高的為B5培養(yǎng)基，生根率為90%，且生根率和生根數(shù)量與沒有添加活性炭差異極顯著（P0.01）。在培養(yǎng)基中添加1.0 g/L粗活性炭，生根率最高的為B5培養(yǎng)基，最終生根率為100%，生根數(shù)量為2

12、4根，顯著（P0.05）高于其他培養(yǎng)基。添加1.5 g/L粗活性炭，四種培養(yǎng)基中生根率都出現(xiàn)了下降的趨勢，可能高濃度的活性炭限制了植株對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，但B5培養(yǎng)基中生根率顯著（P0.05）。與其他的處理比較而言，在B5培養(yǎng)基中添加1.0 g/L粗活性炭適宜作為羅漢果莖段生根培養(yǎng)基。表2不同濃度粗活性炭的情況下MS、1/2 MS、B5、1/2B5培養(yǎng)基的羅漢果生根的影響添加不同濃度活性炭（粗）g/L生根率/%生根總數(shù)/根平均根長/mm00.51.0 1.5 00.5 1.0 1.5 00.5 1.0 1.5 MS培養(yǎng)基40b50b70b50b5b15b12b9b6b8ab12a7b1/2 MS

13、培養(yǎng)基50ab60b50b40b16a16b18b14a9b11a7ab17aB5培養(yǎng)基60a90a100a90a17a22a24a17a13a10a10a15a1/2 B5培養(yǎng)基30b40b90ab60b5b7c16b15a7b10a9a13a 圖1 不同濃度粗活性炭條件下MS、1/ 2MS、B5、1/2 B5培養(yǎng)基對(duì)羅漢果生根的影響圖2 不同濃度細(xì)活性炭條件下MS、1/2 MS、B5、1/2 B5培養(yǎng)基對(duì)羅漢果生根的影響2.3 添加不同濃度細(xì)活性炭對(duì)羅漢果莖段生根的影響分別添加不同濃度細(xì)活性炭后，不同培養(yǎng)基對(duì)羅漢果生根的影響如表3和圖2所示。結(jié)果表明，添加0.5 g/L細(xì)活性炭后，MS、1

14、/2 MS、B5、1/2 B5四種培養(yǎng)基中生根率都有提高，與沒有添加活性炭有顯著差異（P0.05），但平均根長增加明顯；生根率最高的仍為B5培養(yǎng)基，最終生根率為100%，生根數(shù)量為26根，平均根長為20mm。添加1.5 g/L細(xì)活性炭后，根率最高的為MS培養(yǎng)基，最終生根率為80%，生根數(shù)量為23根，平均根長為23 mm；生根數(shù)量和平均根長與1/2 MS培養(yǎng)基和B5培養(yǎng)基無顯著差異（P0.05）。綜合比較來看，培養(yǎng)基中添加1.0 g/L細(xì)活性炭后，B5培養(yǎng)基適宜作為羅漢果莖段生根培養(yǎng)基。表3不同濃度細(xì)活性炭的情況下MS、1/2MS、B5、1/2B5培養(yǎng)基的羅漢果生根的影響添加不同濃度活性炭（細(xì)）

15、g/L生根率/%生根總數(shù)/根平均根長/mm00.51.0 1.5 00.5 1.0 1.5 00.5 1.0 1.5 MS培養(yǎng)基40b70ab70b80a5b17b12c23b6b9ab17ab23a1/2MS培養(yǎng)基50ab70ab60b70a16a21ab10c21b9ab13a23a21aB5培養(yǎng)基60a90a100a60ab17a29a26a20b13a12a20a22a1/2B5培養(yǎng)基30b80ab90a70a5b26a18b27a7b11a12b14b3 結(jié)論通過試驗(yàn)得出，粗活性炭，細(xì)活性炭均對(duì)羅漢果生根均有促進(jìn)作用，但添加粗活性炭的培養(yǎng)基中較添加細(xì)活性炭所誘導(dǎo)的根更粗，添加細(xì)活性炭

16、的培養(yǎng)基誘導(dǎo)的根較粗活性炭更長，根盤更大。生根率最高的培養(yǎng)基為細(xì)活性炭1.0 g/L的B5培養(yǎng)基和粗活性炭1.0 g/L的B5培養(yǎng)基，其最終生根率均為100%；生根數(shù)量最多的為細(xì)活性炭0.5 g/L的B5培養(yǎng)基，10顆植株最終生根總數(shù)量為29根，細(xì)活性炭1.0 g/L的B5培養(yǎng)基，10顆植株最終生根總數(shù)量為26根，兩者差異不明顯（P0.05）；最終平均根長最長的為細(xì)活性炭1.5g/L的MS培養(yǎng)基和細(xì)活性炭1.0g/L的1/2MS培養(yǎng)基均為23mm，第二長的為細(xì)活性炭1.0g/L的B5培養(yǎng)基為22 mm，三者差異不明顯（P0.05）。綜合以上試驗(yàn)數(shù)據(jù)得出適宜的生根培養(yǎng)基配方為IBA 0.5 mg

17、/L，6-BA1.0 mg/L，NAA 1.0 mg/L，蔗糖30 g/L，瓊脂5 g/L，細(xì)活性炭1.0 g/L，培養(yǎng)基為B5。 國內(nèi)對(duì)于植物的組織培養(yǎng)技術(shù)方面的研究已較為全面，從原材料的選擇到各種培養(yǎng)基的配方均有較為詳細(xì)的研究1-2，對(duì)羅漢果組織培養(yǎng)的研究大部分是對(duì)羅漢果培養(yǎng)基的整體把握，深入研究羅漢果快繁生根培養(yǎng)基的較少。通過實(shí)驗(yàn)研究，比較不同培養(yǎng)基與不同活性炭濃度配比對(duì)羅漢果生根的影響，找出適宜的培養(yǎng)基條件，為羅漢果的生根培養(yǎng)基朝著更合理更科學(xué)的配方方向更進(jìn)一步的發(fā)展提供了一定的理論依據(jù)。參 考 文 獻(xiàn)1 黃春梅, 吳金壽, 賴鐘雄. 羅漢果組織培養(yǎng)與快繁研究進(jìn)展J. 亞熱帶農(nóng)業(yè)研究, 2006, 2(04): 298-303.2 譚穎, 馬少妹, 韋冬萍, 等. 羅漢果種植業(yè)發(fā)展存在的問題及對(duì)策J. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué), 2013(5): 130-132.3 李典鵬, 張厚瑞. 廣西特產(chǎn)植物羅漢果的研究與應(yīng)用J. 廣西植物, 2000, 20(03): 270-276. 4 蔣水元, 蔣劍剛, 李鋒, 等. 羅漢果組培繁殖的技術(shù)要點(diǎn)J. 廣西植物, 2008, 28(06): 827-831.5 王小敏, 葉曉霞, 龍海桂. 羅漢果莖段快繁技術(shù)研究J. 岳陽職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào), 201