康美膚燒傷膏對(duì)燙傷創(chuàng)面ＩＬ－６、ＩＬ－８表達(dá)的影響及療效觀察

1、康美膚燒傷膏對(duì)燙傷創(chuàng)面、表達(dá)的影響及療效觀察 摘要 目的：觀察康美膚燒傷膏對(duì)燙傷創(chuàng)面的療效及IL-6、IL-8的表達(dá)情況。方法：用免疫組織化學(xué)方法分析在燙傷后第1、3、5、7、14天創(chuàng)面組織白細(xì)胞介素表達(dá)水平的變化。結(jié)果：IL-6、IL-8在康美膚燒傷膏治療組和對(duì)照組于傷后的表達(dá)均有高峰，對(duì)照組和治療組的表達(dá)高峰時(shí)間均為傷后第3天，峰值低于對(duì)照組。結(jié)論：康美膚燒傷膏對(duì)創(chuàng)面具有一定療效，與IL-6、IL-8的表達(dá)有關(guān)。關(guān)鍵詞 康美膚燒傷膏；白細(xì)胞介素6；白細(xì)胞介素8Abstract Objective：To treat the burned wounds with Kangmeifu Burns

2、 Ointment and observe the expression levels of Interleukin in the process of wound healing. Methods：Immunohistochemistry analysis methods were conducted to examine the expressions of Interleukin in both groups at 1,3,5,7,14 days after scalding Results：IL-6、IL-8 had one peaks respectively in both gro

3、ups. The peaks in the blank control group and Kangmeifu Burns Ointment treated occurred at the 3 days,and the peak value was a little lower than that in the blank control group Conclusion：Kangmeifu Burns Ointment can inhibit the process of wound tissue healing through enhancing IL-6、IL-8 expressionK

4、ey word Kangmeifu Burns Ointment；IL-6；IL-8康美膚燒傷膏是根據(jù)閩南名醫(yī)黃金鋼驗(yàn)方，由福建地產(chǎn)藥材九龍?zhí)?、金線蓮、冰片等組成的中藥外用軟膏劑，臨床上主治各種度燒傷，對(duì)淺度、深度和殘余創(chuàng)面愈合均有一定的作用1。在創(chuàng)面愈合過程中，白細(xì)胞介素（IL-6、IL-8）等細(xì)胞因子參與多方面和多層次的調(diào)控2。為探討其在促進(jìn)創(chuàng)面愈合過程中的分子機(jī)制，本文進(jìn)行了下述實(shí)驗(yàn)，以探討康美膚燒傷膏對(duì)燙傷創(chuàng)面愈合中IL-6、IL-8表達(dá)的影響。1材料與方法1.1材料、試劑與動(dòng)物康美膚燒傷膏（自制）；白細(xì)胞介素(IL-6、IL-8)試劑盒(武漢博士德生物工程有限公司)；SD大鼠，體重1

5、80220 g，雌雄各半，由福建醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心提供。合格證號(hào)：SGXK（閩2004-0002號(hào))。1.2模型建立造模前24 h，大鼠用8%硫化鈉脫毛，面積約30 cm2，用戊巴比妥鈉(30 mg/kg)腹腔麻醉，浸入100水浴槽孔(面積約30 cm2)內(nèi)持續(xù)燙15 s，造成面積約30 cm2的圓形深度創(chuàng)面，病理切片證實(shí)。將大鼠隨機(jī)分成2組，各只。治療組：傷后創(chuàng)面用康美膚燒傷膏均勻涂抹，1次/d；對(duì)照組：傷后創(chuàng)面不用藥，用清水清洗，1次/d。分別于傷后1、3、5、7、14 d取創(chuàng)面組織標(biāo)本，用4甲醛固定，石蠟包埋，備用。1.3觀察指標(biāo)1.3.1大體及組織學(xué)觀察觀察大鼠兩組創(chuàng)面愈合時(shí)間、分泌物、

6、結(jié)痂及感染情況；燙傷后不同時(shí)間兩組創(chuàng)面的病理組織學(xué)觀察。1.3.2免疫組織化學(xué)染色分析創(chuàng)傷后第1、3、5、7、14天，取部分創(chuàng)基及少許周圍正常皮膚，置液氮中保存?zhèn)溆?。?chuàng)面組織經(jīng)4甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋。4 m厚連續(xù)切片，免疫組化染色按相應(yīng)試劑盒說明進(jìn)行，苯胺顯色，蘇木精伊紅復(fù)染，脫水透明，中性樹膠封片。將IL-6和IL-8的表達(dá)情況分為三個(gè)等級(jí)：陰性（）胞漿或胞膜未見著色；陽性（+）胞漿內(nèi)顆粒較細(xì)，顯色高于背景；強(qiáng)陽性（+）胞漿內(nèi)陽性顆粒粗而多，顯色明顯。2結(jié)果2.1大體及組織學(xué)觀察大鼠燙傷后2 d創(chuàng)面干燥結(jié)痂，痂皮呈淡黃色，質(zhì)地較軟，無異常分泌物及感染等。治療組第14天創(chuàng)面愈合率為(43.8

7、36.42)，明顯高于對(duì)照組的(33.085.34)(P0.05)。組織學(xué)觀察可見治療組創(chuàng)面炎性滲出及水腫程度均較對(duì)照組輕（圖1）。圖1大鼠度燙傷皮膚創(chuàng)面組織學(xué)觀察正常皮膚；燙傷創(chuàng)面；康美膚燒傷膏組創(chuàng)面組織炎癥反應(yīng)輕；自然愈合組創(chuàng)面組織炎癥滲出明顯 2.2免疫組織化學(xué)結(jié)果結(jié)果見表1。由表可知，IL-6呈高水平表達(dá)，兩組創(chuàng)面均于傷后第1天開始，在中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞中表達(dá)IL-6，第3天達(dá)高峰，第5天起表達(dá)水平逐漸下降。但用藥組的IL-6峰值較對(duì)照組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。IL-8呈高水表1 兩組創(chuàng)面不同時(shí)相點(diǎn)IL-6、IL-8表達(dá)的比較（只）與對(duì)照組比較，*P0.05平表達(dá)，用藥組

8、與對(duì)照組在傷后第l天，均可見淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞IL-8的表達(dá)；第3天成纖維細(xì)胞中亦有明顯表達(dá)，第5天起表達(dá)水平緩慢下降；但對(duì)照組明顯低于用藥組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。見表l。3討論研究表明，IL-6能誘導(dǎo)B細(xì)胞的終末分化，刺激漿細(xì)胞瘤和雜交瘤的生長，誘導(dǎo)肝細(xì)胞產(chǎn)生急性期蛋白質(zhì)，刺激造血干細(xì)胞，刺激T細(xì)胞和胸腺細(xì)胞3。IL-8能趨化和激活中性粒細(xì)胞，趨化嗜堿性粒細(xì)胞和釋放組胺，促進(jìn)T淋巴細(xì)胞參與免疫應(yīng)答作用，增加內(nèi)皮細(xì)胞的通透能力4。IL-6、IL-8是介導(dǎo)應(yīng)激、炎癥、免疫反應(yīng)等急性期反應(yīng)重要的介質(zhì)之一5-7，在燒傷早期和膿毒癥等兩者顯著升高，其變化與動(dòng)物燒傷后臟器功能衰竭的發(fā)

9、生、預(yù)后有密切關(guān)系。由本實(shí)驗(yàn)可知，在燙傷創(chuàng)面組織IL-6表達(dá)中，治療組和對(duì)照組兩組創(chuàng)面均于傷后第1天開始，在中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞中表達(dá)，第3天達(dá)高峰，第5天起表達(dá)水平逐漸下降。但治療組的創(chuàng)面愈合中，第14天創(chuàng)面愈合率明顯大于對(duì)照組的(P0.05)；同時(shí)，IL-6的表達(dá)峰值明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在IL-8表達(dá)中，傷后第l天用藥組和對(duì)照組創(chuàng)面淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞中均有表達(dá)，傷后第3天在成纖維細(xì)胞中亦有大量表達(dá)，而后隨著炎癥的消退表達(dá)逐漸減弱。表明IL-8作為一種促炎性細(xì)胞因子，參與了創(chuàng)面修復(fù)的病理生理發(fā)展過程。傷后第3天，用藥組IL-8的表達(dá)明顯低于對(duì)照組，此現(xiàn)象一直維持到實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)束。

10、實(shí)驗(yàn)表明康美膚燒傷膏對(duì)創(chuàng)面愈合具有一定療效，與IL-6、IL-8的表達(dá)有關(guān)，也提示了IL-6、IL-8的表達(dá)水平可作為燒燙傷治療過程創(chuàng)面愈合的指標(biāo)參考。參考文獻(xiàn)1徐偉,洪振豐,王瑞國.康美膚燒傷膏制備工藝的研究J.福建中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2007,17(1):24-25.2Deveci M，Eski M，Sengezer K， et a1Effects of cerium nitrate bathing and promp bum wound excision on IL-6 and TNF-q levels in burned ratsJBurns，2000，26(6)：41-45.3王德昌,吳秋合.嚴(yán)重?zé)齻颊哐獫{IL-6、IL-8水平及其與感染的關(guān)系J.中華燒傷雜志,2000,16(3)：185-186.4Baggiolini MChemokines in pathology and medicineJJ Intern Med，2001，250(6)：91-92.5張紅金,陳德昌,湯大明,等.燙傷對(duì)小鼠皮膚內(nèi)炎性細(xì)胞因子基因表達(dá)的影響J.中國急救醫(yī)學(xué),2003,23(3):147-148.6Xue H,McCauley RL,Zheng W,Martini DX.Alter