微生物檢驗課件第三章

1、第三章微生物的形態(tài)和構(gòu)造本章主要內(nèi)容(2學(xué)時）概況的形態(tài)、構(gòu)造和化學(xué)組分噬菌體與實踐亞 類擬朊概述與分類（非細胞生物（真）種組分）（Eu）:至少含有核酸和蛋白兩亞類擬朊（Sub）：只含具單獨侵染性的RNA組分：只含不具單獨侵染性的RNA組分：只含蛋白質(zhì)一種組分學(xué)(virulogy)發(fā)展史十九世紀(jì)末，動植物1892年，俄過細菌濾器1898年，荷性傳染病致病因子的認(rèn)識斯基，首次發(fā)現(xiàn)煙草花葉病的因子，通，因子稱為（）1935年，斯坦萊美分離提純了TMV結(jié)晶(nobelprize)1952年，Kershey和Chase噬菌體傳物質(zhì)是DNA1955年，F(xiàn)ranenkel-conrat完成拆開實驗E.co

2、ly噬菌體1965年，Spiegelma首次在細胞外1970，Baltimore和Temin發(fā)現(xiàn)反轉(zhuǎn)錄酶11971年以后相繼發(fā)現(xiàn)了亞，朊，擬并相繼測出各類完成了幾種核酸一級結(jié)構(gòu)組的并將完成所有第一節(jié)形態(tài)與結(jié)構(gòu)ology and Structure ofMor本節(jié)主要內(nèi)容的特征的形態(tài)構(gòu)造和化學(xué)組成的種類的繁殖方式的定義（）沒有細胞結(jié)構(gòu)，但具有遺傳、變異等生命特征的一類微生物。（體積非常小、結(jié)構(gòu)極其簡單、性質(zhì)十分特殊的生命形式）是由一個或幾個核酸分子組成的組，有一層蛋白或脂蛋白保護性外殼，且可在一定宿主細胞中自我的性因子。的特征形態(tài)極其微小,必須在電鏡下才能觀察,一般都具過濾性;只含一種核酸,不是

3、DNA就是沒有細胞構(gòu)造，每一種RNA;等細胞繁殖方式;系統(tǒng)，利用宿主細胞設(shè)備進行不存在生長和二均既無產(chǎn)能酶系,也無蛋白增殖,能整合到宿主的中，誘發(fā)潛伏染，在宿主活細胞內(nèi)營專性寄生;在離體條件下,能以無生命的化學(xué)大分子狀態(tài)存在,并可行成結(jié)晶;對一般抗生素不敏感,但對于干擾素敏感.的特征（續(xù)）既無產(chǎn)能酶系,也無蛋白系統(tǒng);在宿主活細胞內(nèi)營專性寄生;在離體條件下,能以無生命的化學(xué)大分子狀態(tài)存在,并可行成結(jié)晶;對一般抗生素不敏感,但對于干擾素敏感.與其他微生物的主要區(qū)別要點微生物種類含有 DNA RNA在無生命培養(yǎng)基生長二均分裂核糖體抗生素敏感性干擾素敏感性細菌+-枝原體+-次氏體+-+-衣原體+-+D

4、NA or RNA-+宿主范圍幾乎所有的生物都可以可以分三類：動物植物相應(yīng)的。根據(jù)宿主細菌（或稱噬菌體）總數(shù)應(yīng)大大已發(fā)現(xiàn)：人類細胞生物的總數(shù)有300多種、脊椎動物有931種、昆蟲有1671種、植物有600余種、真菌有近100種、已電鏡觀察的噬菌體至少有2850種或株二.的大小絕大多數(shù)測量都能通過細菌過濾器是nm（10-9m），必大小的須通過電子顯微鏡才能觀察其形態(tài)。:細菌:真菌1:10:100各種最大的的大小差異很大。200 nm。大小近似于最：牛痘小的原核微生物（支原體）28 nm，相當(dāng)最小的：脊髓灰質(zhì)炎于最大的蛋白質(zhì)分子（血紅素蛋白質(zhì)）圖3-1的大小2.的形態(tài)各種的大小差異很大。的形態(tài)一般

5、可以分為四種：桿形、球形、磚形和蝌蚪形。植物多為桿形，絲狀，也有球狀如煙草花葉；動物如流感多為球形，卵圓形或磚形，（球形），痘（磚形）。噬菌體多為蝌蚪形a.痘苗大蚊虹色,b口瘡, c腮腺炎,d. e.T偶數(shù)噬菌體. f皰疹,. g,j.煙草花葉,i.腺.多瘤脊髓灰質(zhì)炎的大小與形態(tài)的形態(tài)采用各種電鏡技術(shù)觀察毒粒的形態(tài)結(jié)構(gòu)Ebola：埃博拉（正染技術(shù)）Vaccinia痘苗（投影技術(shù)）Orf：口瘡(接觸性膿皰皮炎)（負染技術(shù)）3. 典型粒子的構(gòu)造基本結(jié)構(gòu)的對稱性螺旋對稱的二十面體對稱復(fù)合對稱的粒子粒子粒子4. 典型粒子的基本構(gòu)造粒子(virion、particle) ：性的單個顆粒指成、結(jié)構(gòu)完整的并

6、具有。粒的基本成分：核酸與蛋白質(zhì)（Core, Genome）：由DNA或RNA衣殼（Capsid）：由許多衣殼粒蛋白包膜：由類脂或脂蛋白的構(gòu)造核酸衣殼包膜核衣殼學(xué)外殼（capsid）： 是由多個蛋白亞基組成的在組核酸外面的結(jié)構(gòu)。殼粒（capsomer）： 組成外殼的結(jié)構(gòu)亞基，并非總是均勻分布的，往往成群體，二個、三個、五個甚至六個亞基聚在一起，用負染法在電鏡下所分辨開的一個個亞基，可能并非單個結(jié)構(gòu)亞基，而是它們的群體，實際上是形態(tài)亞基稱之為殼粒。包膜（envelop）： 大多數(shù)動物，在毒粒外被有由糖蛋白，脂肪所形成的外膜，稱之為包膜。糖蛋白在膜上往往形成各種形狀的突起，包膜在識別寄主、侵入寄主

7、細胞，的抗原性方面起重要作用。5.的對稱性根據(jù)其衣殼粒的排列方式不同而表現(xiàn)出三種不同的構(gòu)型：1.螺旋對稱蛋白質(zhì)亞基沿中心軸呈螺旋排列，形成高度有序、對稱的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。（TMV）為典型代表的植物以煙草花葉2.多面體對稱體。（等軸對稱）最常見的多面體是二十面以腺為典型代表的動物。3.復(fù)合對稱此類的衣殼由兩種結(jié)構(gòu)組成，既有螺旋對稱部分，也有多面體對稱 部分，故稱復(fù)合對稱。例如蝌蚪狀的噬菌體（T-偶數(shù)噬菌體），其頭部是多面體對稱，尾部是螺旋對稱。的三種不同的構(gòu)型螺旋對稱復(fù)合對稱復(fù)合對稱的形態(tài)多面體對稱Adeno二十面體對稱殼體：對稱結(jié)構(gòu)殼體的 式是蛋白質(zhì)亞基圍繞具立方對稱的正多面體的角或邊排列，進而形成

8、一個封閉的蛋白質(zhì)的鞘。多面體對稱（二十面體對稱）若以一定數(shù)目的亞基排列成具有一定表面積的立方對稱實體，以二十面體容積為最大，能包裝酸，所以的核殼體多取二十面體對稱（icosahedral symmetry）結(jié)構(gòu)。核衣殼呈直徑為5055nm的球形，無包膜。he envelope.The nucleocapsid (arrows) can be seen withTransmisElectron Micrograof HIV-1 Stained toShow Surface Glycoproteins人類輪狀為直徑60nm80nm的球形的形態(tài)螺旋對稱Tobacco Mosaic螺旋對稱殼體：亞基有

9、規(guī)律地沿著中心軸（核酸）呈螺旋排列，進而形成高度有序、對稱的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。的形態(tài)復(fù)合對稱T4 Bacterioage具有雙對稱結(jié)構(gòu)的典型例子是有尾噬菌體（tailedage）,其殼體由頭部和尾部組成。包裝有核酸的頭部通常呈二十面體對稱，尾部呈螺旋對稱。6.的群體形態(tài)當(dāng)大量并使宿主細胞發(fā)生病變時所形成的具有一定形態(tài)、構(gòu)造并能用光學(xué)顯微鏡加以觀察和識別的特殊群體包涵體(inclu噬菌斑(plaque)空斑(plaque)body)枯斑(le)菌落群體形態(tài)的意義的分離、純化、鑒別和計數(shù)1）包涵體（inclubody）的宿主細胞內(nèi)，出現(xiàn)光定義：在某些學(xué)顯微鏡下可見的大小、形態(tài)和數(shù)量不等的小體。包涵體在細胞

10、中的形成部位：位于細胞核內(nèi)如包疹位于細胞質(zhì)內(nèi)如狂犬胞核內(nèi)胞質(zhì)都有麻疹包涵體的本質(zhì)：等大多數(shù)是少數(shù)是細胞對粒子組成的，的反應(yīng)。噬菌斑(plaque)將少量的噬菌體和大量的宿主細胞混合后，與瓊脂培養(yǎng)基在培養(yǎng)皿中混合均勻。經(jīng)一定時間培養(yǎng)后，在平板表面布滿宿主細胞的菌苔上，可用肉眼看到一個一個透亮不長菌的小圓斑。這就是噬菌斑。噬菌體稀釋液 敏感菌+上層培養(yǎng)基 噬菌斑 敏感菌菌苔下層培養(yǎng)基雙層培養(yǎng)基噬菌斑(plaque)噬斑熒光假單胞菌噬菌斑應(yīng)用：1、噬菌體定量計數(shù)2、噬菌體的鑒定3）空斑和病斑：在動物細胞培養(yǎng)物上的與噬菌斑類似的空斑,稱為病斑4）枯斑：植物體稱為枯斑。在植物葉片上形成的群7.的化學(xué)組成

11、蛋白質(zhì)：噬菌體的外殼；有的噬菌體含有少數(shù)幾種酶核酸：存在于頭部內(nèi)，是噬菌體的遺傳物質(zhì)每種噬菌體只含一種類型的核酸脂類和糖類聚胺類化合物(1)核酸的類型每種植物動物細菌中只含有一種核酸：DNA或RNA絕大多數(shù)含DNA;少數(shù)含RNA；一部分含DNA，一部分含RNA；普遍含DNA，含RNA的極少。RNA（ssRNA、dsRNA）線狀；DNA（ssDNA、dsDNA）線狀、環(huán)狀。植物一般含ssRNA；動物有些含ssRNA，有些含dsDNA；微生物的噬菌體一般含dsDNA。核酸的分子量2106108之間。核酸類型：ssDNA：大腸桿菌噬菌體X174等dsDNA：大腸桿菌T系偶數(shù)噬菌體（T2、T4、T6）

12、等ssRNA：大腸桿菌噬菌體MS2、f2等dsRDA：假單胞菌的6噬菌體DNA分子有線裝和環(huán)狀之分。核酸有正鏈（）和負鏈（）的區(qū)分：規(guī)定：將堿基序列與mRNA一致的核酸單鏈定位正 鏈，將堿基序列與mRNA互補的核酸單鏈定位負鏈。核酸鏈的單與雙以及正和負有以下6因此，就種類型：()DNA大部分DNA()RNA動物呼腸孤()DNA 大腸桿菌X174噬菌體() RNA所有單鏈RNA () DNA腺() RNA 流感大部分植物(2)的蛋白質(zhì)：的蛋白質(zhì)分子量在1000015000組成頓之間，殼體蛋白：殼體蛋白是A.殼體結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，由一條或多條多肽鏈折疊形成的蛋白質(zhì)亞基，是構(gòu)成殼體蛋白的最小功能：。的殼

13、體，保護的殼體蛋白參與的宿主嗜性，的核酸。的吸附、進入，無包膜決定是的表面抗原。能刺激機體產(chǎn)生抗體。包膜蛋白：B.包膜結(jié)構(gòu)的 膜糖蛋白和基質(zhì)蛋白兩類。功能：蛋白質(zhì)，包括包1)是的主要表面抗原，它們與細胞受體相互作用啟動入。發(fā)生，有些還介導(dǎo)的進還可能具有凝集脊椎動物紅血球細胞、細胞融合以及酶等活性。2)基質(zhì)蛋白膜脂雙層與核衣殼之間的亞膜結(jié)3)構(gòu)，具有支撐包膜、維持C.毒粒酶：毒粒酶根據(jù)功能大致分為兩類：T4噬菌體的溶菌酶參與等過程進入、逆轉(zhuǎn)錄子的逆轉(zhuǎn)錄酶參與的大分(3)的脂質(zhì)許多包膜內(nèi)存在有脂類化合物，如磷脂、脂肪酸、甘油三酸脂和膽固醇等。這些脂類幾乎都是由膜處以芽生方式粒子在細胞內(nèi)成熟，在細胞

14、，直接從寄主細胞膜上得到。關(guān)。脂類存在與的吸附和侵入有(4)的碳水化合物除的核酸中所含戊糖外，有的還含有少量的碳水化合物，為核糖或脫氧核糖和磷酸組成的核酸骨架。有包膜中碳水化合物以寡糖側(cè)鏈的形式與蛋白質(zhì)結(jié)合形成包膜糖蛋白。(5)其它組成在某些動物、植物中存在多胺類有機陽離子，包括丁二胺、亞精胺、精胺等，它們大都結(jié)合于病毒核酸，對核酸的構(gòu)型有一定影響。在某些的體中，還發(fā)現(xiàn)有其它的小分子量組份，如ATP，對噬菌體尾鞘收縮提供能量。8.的分類-噬菌體原核生物植物人類和脊椎動物昆蟲9.原核生物-噬菌體噬菌體的形態(tài)與結(jié)構(gòu)噬菌體的增殖噬菌體效價的測定一步生長曲線溶源菌9-1噬菌體的基本形態(tài)和大小噬菌體：噬

15、細菌體噬放線菌體噬藍細菌體原核生物的噬菌體的六種形態(tài)A型：dsDNA，蝌蚪狀、收縮性尾 B型：dsDNA，蝌蚪狀、非收縮性尾C型：dsDNA，非收縮性尾D型：ssDNA，球狀、 E型：ssRNA，球狀、大頂衣殼粒、小頂衣殼粒F型：ssDNA，絲狀、無頭尾T4噬菌體的結(jié)構(gòu)T-系噬菌體T-系噬菌體是的最廣泛而又深入的細菌噬菌體，按發(fā)現(xiàn)的先后順序進行從T1-T7，后來發(fā)現(xiàn)其中偶數(shù)者的形態(tài)都相同（蝌蚪形收縮性長尾），故統(tǒng)稱T偶數(shù)噬菌體。構(gòu)造頭部：正二十面體，內(nèi)裝DNA尾部：包括頸環(huán)、尾鞘、尾髓、基板、尾絲、刺突大?。═4）頭部：6590nm尾部：20110nm刺突：約20nmDNA頸環(huán)尾鞘基板大腸桿菌

16、T4噬菌體模式圖大腸桿菌噬菌體T4模式圖電鏡age T4 infecting its host E. coli cell8-2噬菌體的增殖是專性細胞內(nèi)寄生物，過程，只能在活的寄主細胞內(nèi)以并將其裝配的方式來進行增殖。粒子沒有的生長蛋白質(zhì)和核酸，噬菌體增殖的過程：1.吸附：2.侵入：3.增殖：4.裝配：5.：一、吸附（Adsorption）是指面，它是是決定需要附著于敏感細胞的表的起始期。成功與否的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。表面特異性的吸附蛋白（ VAP ，AttaentProtein）與細胞表面受體（也receptor）稱為受體，相互作用。噬菌體吸附吸附的特點和影響吸附的吸附的專一性：寄主專一性和位點專一性復(fù)數(shù)

17、（m.o.i）：每一敏感細胞所能吸附的相應(yīng)噬菌體的數(shù)量，一般可達250360影響噬菌體吸附的的干擾現(xiàn)象兩種同一種細胞或機體時，常常發(fā)生一種抑制另一種erference）。的現(xiàn)象，稱為干擾現(xiàn)象（干擾現(xiàn)象可在同種以及同株的間發(fā)生，后者如和無親緣關(guān)系的病流感的自身干擾。異種毒之間也可以干擾，且比較常見。理化對的影響1、物理溫度 大多數(shù)大多數(shù)耐冷不耐熱，6-8的范圍內(nèi)比較穩(wěn)在5.0以下或者9.0以上容易滅活。定，而在輻射 電離輻射中的射線和射線以及非電離輻射中的紫外線都能使滅活。2、化學(xué)脂溶劑： 有包膜對脂溶劑敏感。氧化劑、鹵素、醇類：素、醇類物質(zhì)敏感?？股睾椭胁菟帲簩Ω鞣N氧化劑、鹵對抗生素不敏感，

18、在分離時，用抗生素處理或在培養(yǎng)液中加入抗生素可抑制樣品中的雜菌，有利于分離。、大青葉、柴近年來的胡、大黃、表明，有些中藥如板等對某些有抑制作用。小兒麻痹癥(示表面受體)二、胞漿，開始（Penetration)指的細胞內(nèi)期核酸或性核衣殼穿過細胞進入侵入方式注射式侵入：一般為有尾噬菌體的侵入方式。通過尾部收縮將衣殼內(nèi)的DNA組注入宿主細胞內(nèi)。細胞內(nèi)吞：動物的常見侵入方式。經(jīng)細胞膜內(nèi)陷形成吞噬泡，使粒子進入細胞質(zhì)中。膜融合：有包膜侵入過程中病毒包膜與細胞膜融合。大腸桿菌T系列噬菌體侵入過程1.尾部吸附到敏感菌的表面后，將尾絲展開，通過尾部的刺突固著在細胞上2.尾部的酶水解細胞壁的肽聚糖，使菌壁產(chǎn)生一

19、小孔尾鞘收縮，將尾髓壓入細胞。頭部的DNA通過尾髓這一空管注入細菌細胞內(nèi)，而蛋白質(zhì)外殼留在胞外3.自外裂解現(xiàn)象：大量噬菌體侵入同一細胞，將使細胞壁產(chǎn)生許多小孔，在尚未進行噬菌體增殖時就可能引起細胞立即裂解輪狀的T4噬菌體的吸附和侵入過程三、(replication)核酸物質(zhì)及蛋白質(zhì)在寄主細胞內(nèi)的借助宿主細胞提供的原料、能量和場所核酸和蛋白質(zhì)，期間所需的多數(shù)酶也來自宿主細胞。在進入宿主細胞后生物階段，胞漿中無粒，稱為隱蔽期（eclipse）。顆核酸的雙鏈DNA的單鏈DNA的: ()DNA ()DNA:+DNA -DNA DNA +DNA雙鏈RNA的:RNA +RNA -RNA RNA+RNA:+

20、RNA -RNA RNA +RNA-RNA:-RNA +RNA(mRNA) Pr(RNA酶)單鏈RNA的:DNA +RNA腫瘤逆轉(zhuǎn)錄+RNA (-)DNA ()核酸的左圖：核酸入寄主核酸鏈右圖：核酸增殖過程中表達特點表達有先有后表達的順序為:早期表達;次早期表達;核;晚期表達酸前一次表達產(chǎn)物是后一次表達的mRNA 聚合酶了各種裝配蛋白(另外晚期表達的結(jié)果是還有溶菌酶)四、裝配（Assembly）與成熟（Maturity)裝配：增殖期的噬菌體的核酸和蛋白質(zhì)按一定的順序裝配成噬菌體顆粒的位置大多數(shù)DNA，在核內(nèi)DNA，在胞漿內(nèi)蛋白質(zhì)，轉(zhuǎn)入核內(nèi)裝配成熟。而痘苗及裝配均在胞漿內(nèi)完成。其全部成份RNA無

21、包膜多在胞漿內(nèi)核酸及蛋白。體，組裝成核衣殼即為成的早期蛋白，即非結(jié)分不組裝入，殘留在細胞中。(Release)五、從細胞內(nèi)轉(zhuǎn)移到細胞外的過程為。裝配成熟后的方式有：到周圍環(huán)境中，見于無包（1）宿主細胞裂解，膜，絕大多數(shù)無包膜時被的細胞崩解，出病毒顆粒，宿主細胞膜破壞，細胞迅即。如腺、脊髓灰質(zhì)炎等。大多數(shù)噬菌體都是以裂解細胞方式（2）以出芽的方式，見于有包膜。如皰疹流感 芽方式在核膜上獲得囊膜，在細胞膜上獲得囊膜而成熟，然后以出出成熟。9.3 噬菌體的類型根據(jù)噬菌體所經(jīng)歷的繁殖過程可將噬菌體分為兩種：1.烈性噬菌體(virulentage) ：凡在短時間內(nèi)能連續(xù)完成吸附、侵入、其繁殖的噬菌體。、

22、裝配和裂解這五個階段而實現(xiàn)2.溫和性噬菌體(temperateage) ：凡在吸附并侵入細胞后，噬菌體的DNA只整合在宿主的核組上并可長期隨宿主DNA的而進行同步，一般部進行增殖和引起宿主細胞裂解的噬菌體。又稱溶源性噬菌體。裂解性循環(huán)吸附侵入增殖裝配釋放次多循環(huán)同步整合自發(fā)復(fù)誘導(dǎo)制烈性噬菌體與溫和性噬菌體生活史的比較烈性噬菌體的生活史溫和性噬菌體的生活史9.4 噬菌體效價的測定噬菌體的效價：指每毫升試樣中所含有的侵染性的噬菌體的粒子數(shù)。測定方法：液體稀釋管法斑點試驗法：半定量，結(jié)果確雙層平板法：精確測定，普遍采用底層平板為2%左右的瓊脂培養(yǎng)基78ml上層平板包括上層培養(yǎng)基（1%瓊脂培養(yǎng)基3ml

23、）宿主菌懸液、噬菌體試樣單層平板法：方法簡單，但效果較差玻片快速法：快速但精確度較差測定噬菌體生長的方法高濃度敏感細菌適量噬菌體混合一定時間 (5min)除去游離噬菌體進行稀釋培養(yǎng)定時取樣測定噬菌體數(shù)9.5一步生長曲線（one-step growth curve）定量描述烈性噬菌體生長規(guī)律的實驗曲線1939年，Max Delbruck & Emory Ellis：該實驗標(biāo)志著分子學(xué)、分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的建立Max Delbruck因此榮獲1969年Nobel Prize一步生長曲線是的一個經(jīng)典試驗，最初是為研究噬菌體的中。而建立，以后推廣到動物和植物的一步生長曲線（one-step gro

24、wth curve）1、用噬菌體的稀釋液宿主細胞；2、數(shù)分鐘后，加入抗噬菌體的抗血清（中和未吸附的噬菌體）；3、將上述混合物大量稀釋，終止抗高濃度的的作用和防止新其它細胞；的噬菌體4、保溫培養(yǎng)并定期檢測培養(yǎng)物中的噬菌體效價（對噬菌體含量進行計數(shù)）；5、以時間為橫坐標(biāo)，的感特染效價為縱坐標(biāo)，繪制出征性的繁殖曲線；T4噬菌體的一步生長曲線裂解末期平均噬菌體數(shù)裂解量=潛伏期平均數(shù)一步生長曲線潛伏期指噬菌體侵入寄主細胞到寄主分為隱晦期和胞內(nèi)累積期新的噬菌體的最短時間，不同的潛伏期長短不同，噬菌體以分鐘計，動物和植物以小時或天計。裂解期從被時間平穩(wěn)期的第一個細胞裂解到最后一個細胞裂解完畢所需的的細胞全部

25、裂解，溶液中噬菌體效價達最高點后的時期裂解量= 裂解末期平均噬菌體數(shù)/潛伏期平均數(shù)=b/噬菌體的裂解量一般為幾十到上百個，植物萬個。和動物可達數(shù)百乃至上一步生長曲線中的潛伏期指噬菌體的核酸侵入宿主細胞后至第一個成熟噬菌體粒子裝配前的一段時間隱晦期：指在潛伏前期人為裂解細胞以后裂解液無侵染性的一段時間胞內(nèi)積累期：潛伏后期，在隱晦期后人為裂解液呈現(xiàn)侵染性的一段時間細胞內(nèi)已經(jīng)開始裝配噬菌體粒子進行一步生長曲線的測定，能了解噬菌體在菌體內(nèi)的最短潛伏期，和平均收獲量，還可測知理化的變化對噬菌體感噬菌體的影響。染循環(huán)的時間和對每個被噬菌體9.6 溫和性噬菌體的特點1.其核酸的類型都是dsDNA。2.具有整

26、合能力。前噬菌體(proage)：處于整合態(tài)的噬菌體的核酸。溶源菌(lysogenic bacteria)：繁殖的細菌。游離態(tài)上整合有前噬菌體并能正常生長溫和噬菌體存在形式整合態(tài)營養(yǎng)態(tài)3.具有同步能力。敏感細菌：能被噬菌體的細菌溶源性細菌(lysogenic bacteria)：含有原噬菌體的寄主細菌，能正常生長繁殖而不被裂解，與溫和噬菌體長期共存，一般不會出現(xiàn)有害影響溶源化：敏感細菌被溫和噬菌體的過程而轉(zhuǎn)變成溶源性細菌9.7溶源菌(lysogenic bacteria)的特點細菌的溶源性具有遺傳性自發(fā)裂解和誘導(dǎo)裂解：有少數(shù)噬菌體可自發(fā)或誘發(fā)裂解宿主細胞變成烈性噬菌體免疫性：溶源菌對同源噬菌體

27、具有免疫性失去前噬菌體復(fù)愈：溶源菌非溶源細胞溶源轉(zhuǎn)變：失溶源性細胞可獲得一些新的生理特性噬菌體白喉桿菌局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)白喉毒素宿主發(fā)病溫和噬菌體的溶源性反應(yīng)：細胞中含有以原噬菌體狀態(tài)存在的溫和噬菌體組的細菌稱做溶源性細菌（lysogenic bacteria）溶源性細菌經(jīng)自發(fā)裂解或誘發(fā)裂解,進入裂解循環(huán)在原噬菌體階段，噬菌體的 被抑制，宿主細胞正常地生長繁殖，而噬菌體 組與宿主細菌 同步復(fù)制，并隨細胞而傳遞給子代細胞。溶源菌的檢測方法共培養(yǎng)：少量溶原菌和大量敏感性指示菌共培養(yǎng)獨特噬菌斑的形態(tài)人與脊椎動物種類：300種：與人類健康有關(guān)900種：脊椎動物有關(guān)常見的流行病、病冒、肝炎、泡疹、流行性乙型腦炎

28、、狂犬、西尼羅河誘發(fā)腫瘤、愛博拉豬瘟、牛瘟、脊椎動物、雞瘟、雞新城疫Acquired immune deficiency syndromeHIV （Human Immunodeficiency）狂犬病與實踐 噬菌體與實踐發(fā)酵周期明顯延長碳源消耗緩慢發(fā)酵液清淡發(fā)酵產(chǎn)物形成緩慢或根本不形成噬菌體檢測會發(fā)現(xiàn)大量噬菌斑電鏡可看到噬菌體：減產(chǎn) 倒罐發(fā)酵生產(chǎn)時預(yù)防措施決不使用可疑菌種嚴(yán)格環(huán)境衛(wèi)生活菌液嚴(yán)禁排放通氣加料嚴(yán)控輪換使用生產(chǎn)菌株；設(shè)備滅菌使用抗噬菌體菌株補救方法：盡快提取產(chǎn)品加藥抑制及時更換菌種9.8噬菌體的應(yīng)用1. 用于鑒定細菌的分型；2. 分子生物學(xué)領(lǐng)域的重要實驗工具和最理想的材料；3. 用于

29、預(yù)防和治療傳染性疾??；4. 用于篩選抗癌物質(zhì)和檢測5. 測定輻射劑量；物質(zhì)；10.在工程中的應(yīng)用噬菌體作為原核生物工程的載體工程的載體工程的載體植物DNA動物DNA昆蟲DNA作為植物作為動物作為真核生物工程的載體噬菌體在工程中的應(yīng)用噬菌體可作為原核生物工程的優(yōu)良載體，將外源目的導(dǎo)入到合適的受體細胞，從而獲得具有新性狀的 “工程菌”E.coli的噬菌體包括：必需參與生命活動；不影響生命活動，可被外源DNA代替非必需載有外源遺傳因子的重組噬菌體可整合在宿主核組上，兩者以一個整體進行同步具有新性狀，使宿主鈍齒棒桿菌噬菌體鈍齒棒桿菌（T6-13）是國內(nèi)廣泛用于谷氨酸生產(chǎn)的菌 株，采用此菌及其相近菌株生

30、產(chǎn)的環(huán)境中，普遍發(fā)生噬菌體的污染。導(dǎo)致生產(chǎn)延滯或產(chǎn)酸降低，甚至倒罐，給味精生產(chǎn)造成較嚴(yán)重的損失。目前國內(nèi)分離的噬菌體在形態(tài)上相似。根據(jù)學(xué)可分成兩型：B271和B275，有四種類型的噬菌斑。為防止噬菌體的侵襲，可在了解菌株對不同噬菌體的敏感性情況下，輪換使用不同菌株，以避免生產(chǎn)被迫停頓。丁醇梭菌噬菌體（Clostridium acetobutylicumage）丁醇連續(xù)發(fā)酵的工業(yè)生產(chǎn)中，容易受到該噬菌體的侵染，危害極大。常見的異常發(fā)酵有：發(fā)酵停止，不產(chǎn)生氣泡，醪液上層澄清，呈暗黑色，出現(xiàn)睡眠癥。正常發(fā)酵12-18h，產(chǎn)量可達200mg/L.異常發(fā)酵時達到相同水平則需36-42h，丁醇量也偏低 ，醪液的蒸餾效率低于正常的10-20%。現(xiàn)分離獲得的和長尾噬菌體科。丁醇梭菌噬菌體為肌尾11.的防治原則免疫預(yù)防人工自動免疫藥物治療化學(xué)療劑1核苷類似物：唑藥物2其他類型抗干擾素及其誘生劑中草藥的抗作用erferon,IFN）是一類干擾素（性蛋白，具有廣譜抗能。、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)功根據(jù)產(chǎn)生干擾素細胞來源不同、理化性質(zhì)和生物學(xué)活性的差異，可分為-1b型干擾素、-干擾素和干擾素。-1b型干擾素，常用于治療慢性乙型、丙型和丁型肝炎。第二節(jié)亞sub凡在核酸和蛋白質(zhì)兩種成分中，只含其中之一的