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1、在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,為了觀察藥物對(duì)機(jī)能功能、代謝及形態(tài)引起的變化,常需將藥物注入動(dòng)物體內(nèi)。給藥的途徑和方法是多種多樣的,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)動(dòng)物種類和藥物劑型等情況確定。 (一)皮下注射注射時(shí)以左手拇指和食指提起皮膚,將連有5(1/2)號(hào)針頭的注射器刺入皮下。皮下注射部位一般狗、貓多在大腿外側(cè),豚鼠在后大腿的內(nèi)側(cè)或小腹部;大白鼠可在側(cè)下腹部。兔在背部或耳根部注射。蛙可在脊背部淋巴腔注射。(二)皮內(nèi)注射皮內(nèi)注射時(shí)需將注射的局部脫去被毛,消毒后,用左手拇指和食指按住皮膚并使之繃緊,在兩指之間,用結(jié)核菌素注射器連4(1/2)細(xì)針頭,緊貼皮膚表層刺入皮內(nèi),然后再向上挑起并再稍刺入,即可注射藥液,此時(shí)可見皮膚
2、表面鼓起一白色小皮丘。(三)肌肉注射肌肉注射應(yīng)選肌肉發(fā)達(dá),無大血管通過的部位,一般多選臀部。注射時(shí)垂直迅速刺入肌肉,回抽針?biāo)ㄈ鐭o回血,即可進(jìn)行注射。給小白鼠、大白鼠等小動(dòng)物作肌肉注射時(shí),用左手抓住鼠兩耳和頭部皮膚,右手取連有5(1/2)針頭的注射器,將針頭刺入大腿外側(cè)肌肉,將藥液注入。(四)腹腔注射用大、小白鼠做實(shí)驗(yàn)時(shí),以左手抓住動(dòng)物,使腹部向上,右手將注射針頭于左(或右)下腹部刺入皮下,使針頭向前推0.51.0cm,再以45度角穿過腹肌,固定針頭,緩緩注入藥液(圖1),為避免傷及內(nèi)臟,可使動(dòng)物處于頭低位,使內(nèi)臟移向上腹。若實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為家兔,進(jìn)針部位為下腹部的腹白線離開1cm處。圖1小鼠腹腔注射
3、方法 (五)靜脈注射1兔:兔耳部血管分布清晰。兔耳中央為動(dòng)物,耳外緣為靜脈。內(nèi)緣靜脈深不易固定,故不用。外緣靜脈表淺易固定,常用。先拔去注射部位的被毛,用手指彈動(dòng)或輕揉兔耳,使靜脈充盈,左手食指和中指夾住靜脈的近端,拇指繃緊靜脈的遠(yuǎn)端,無名指及小指墊在下面,右手持注射器連6號(hào)針頭盡量從靜脈的遠(yuǎn)端刺入,移動(dòng)拇指于針頭上以固定針頭,放開食指和中指,將藥液注入(圖2),然后拔出針頭,用手壓迫針眼片刻。圖2家兔耳緣靜脈注射方法 2小白鼠和大白鼠:一般采用尾靜脈注射,鼠尾靜脈有三根,左右兩側(cè)及背側(cè)各一根,左右兩側(cè)尾靜脈比較容易固定,多采用,背側(cè)一根也可采用,但位置容易固定。操作時(shí)先將動(dòng)物固定在鼠筒內(nèi)或扣
4、在燒杯中,使尾巴露出,尾部用4550的溫水浸潤(rùn)半分鐘或用酒精擦拭使血管擴(kuò)張,并可使表皮角質(zhì)軟化,以左手拇指和食指捏住鼠尾兩側(cè),使靜脈充盈,用中指從下面托起尾巴,以無名指和小指夾住尾巴的末梢,右手持注射器連4(1/2)號(hào)細(xì)針頭,使針頭與靜脈平行(小于30),從尾下四分之一處(約距尾尖2-3厘米)處進(jìn)針,此處皮薄易于刺入,先緩注少量藥液,如無阻力,表示針頭已進(jìn)入靜脈,可繼續(xù)注入。注射完畢后把尾部向注射側(cè)彎曲以止血。如需反復(fù)注射,應(yīng)盡可能從末端開始,以后向尾根部方向移動(dòng)注射(圖3)。圖3小鼠尾靜脈注射方法 3狗:狗靜脈注射多選前肢內(nèi)側(cè)皮下頭靜脈(圖4)或后肢小隱靜脈(圖5)注射。注射前由助手將動(dòng)物側(cè)
5、臥,剪去注射部位的被毛,用膠皮帶扎緊(或用手抓緊)靜脈近端,使血管充盈,從靜脈的遠(yuǎn)端將注射針頭平行刺入血管,待有回血后,松開綁帶(或兩手),緩緩注入藥液。圖4 狗前肢頭靜脈注射圖5狗后肢小隱靜脈注射4蛙(或蟾蜍):將蛙或蟾蜍腦脊髓破壞后,仰臥固定于蛙板上,沿腹中線稍左剪開腹肌,可見到腹靜脈貼著腹壁肌肉下行,將注射針頭沿血管平行方向刺入即可(圖6)。圖6 蛙腹壁靜靜注射 幾種常用的動(dòng)物不同給藥途徑的注射量可參考表1。 表1幾種動(dòng)物不同給藥途徑的常用注射量(毫升)注射途徑小鼠大鼠豚鼠兔狗腹腔1-32-55-105-15肌肉2-5靜脈1-21-53-105-15皮下0.5-23-10(六)淋巴囊注射
6、蛙類常采用此法,因其皮下有數(shù)個(gè)淋巴囊,注入藥物甚易吸收。腹部淋巴囊和頭背淋巴囊常作為蛙類給藥途徑。一般多選用腹部淋巴囊給藥。注射時(shí)將針頭從蛙大腿上端刺入,經(jīng)大腿肌層入腹壁肌層,再進(jìn)入腹壁皮下,即進(jìn)入淋巴囊,然后注入藥液。有時(shí)也可采用胸淋巴囊給藥。方法是將針頭刺入口腔,使穿過下頜肌層入胸淋巴囊內(nèi)注入藥液,一次最大注射量為1毫升。蛙全身分布為咽、胸、背、腹側(cè)、腹、大腿和腳等七個(gè)淋巴囊(圖7)。圖7 蛙全身淋巴囊分布(七)經(jīng)口給藥在急性試驗(yàn)中,經(jīng)口給藥多用灌胃法,此法劑量準(zhǔn)確,適用于小白鼠、大白鼠、家兔等動(dòng)物。1小鼠、大鼠(或豚鼠)用輸血針頭或小號(hào)腰穿針頭,將其尖端斜面磨劑,用焊錫在針尖周圍焊一圓頭
7、,注意勿堵塞針孔,即成灌胃針;亦可用燒成圓頭的硬質(zhì)玻璃毛細(xì)管或特制的塑料毛細(xì)秋,作為導(dǎo)管。灌胃時(shí)將針按在注射器上,吸入藥液。左手抓住鼠背部及頸部皮膚將動(dòng)物固定,右手持注射器,將灌胃針插入動(dòng)物口中,沿咽后壁徐徐插入食道。動(dòng)物應(yīng)固定成垂直體位,針插入時(shí)應(yīng)無阻力。若感到阻力或動(dòng)物掙扎時(shí),應(yīng)立即停止進(jìn)針或?qū)⑨槹纬?,以兔損傷或穿破食道以及誤入氣管。一般當(dāng)灌胃針插入小鼠34cm,大鼠或豚鼠4-6cm后可將藥物注入。常用的灌胃量小鼠為0.2-1ml,大鼠1-4ml,豚鼠為1-5ml。2狗、兔、貓、猴灌胃時(shí),先將動(dòng)物固定,再將特制的擴(kuò)口器放入動(dòng)物口中,擴(kuò)口器之寬度可視動(dòng)物口腔大小而定,如狗的擴(kuò)口器可用木料制成
8、長(zhǎng)方形,長(zhǎng)約10-15cm,粗細(xì)應(yīng)適合狗嘴,約2-3cm,中間粘一小孔,孔的直途為5-10cm。灌胃時(shí)將擴(kuò)口器放于上述動(dòng)物上下門牙之后,并用繩將它固定于嘴部,將帶有彈性的橡皮導(dǎo)管(如導(dǎo)尿管),經(jīng)擴(kuò)口器上的小圓孔插入,沿咽后壁而進(jìn)入食道,此時(shí)應(yīng)檢查導(dǎo)管是否正確插入食道,可將導(dǎo)管外口置于一盛水的燒杯中,如不發(fā)生氣泡,即認(rèn)為此導(dǎo)管是在食道中,未誤入氣管,即可將藥液灌入。 圖8狗灌胃方法經(jīng)我們大量實(shí)驗(yàn),給狗、兔等動(dòng)物灌胃時(shí),可不用擴(kuò)口器也能順利將藥液灌入胃內(nèi),狗灌胃時(shí),用12號(hào)灌胃管,左手抓住狗嘴,右手中指由右嘴角插入,摸到最后一對(duì)臼齒后的天然空隙,胃管由此空隙順食管方向不斷插入約20cm,可達(dá)胃內(nèi),
9、將胃管另一端插入水中,如不出氣泡,表示確已進(jìn)入胃,而沒誤入氣管內(nèi),即可灌入。兔灌胃時(shí),將兔固定在木制固定盒內(nèi)左手虎口卡住并固定好兔嘴,右手取14號(hào)細(xì)導(dǎo)尿管,由右側(cè)唇裂避開門齒,將導(dǎo)管慢慢插入,如插管順利,動(dòng)物不掙扎,插入約15cm時(shí),即表示插入胃內(nèi),將藥液注入。各種動(dòng)物一次灌胃能耐受的最大容積小鼠為0.5-1.0ml,大鼠4-7ml,豚鼠為4-7ml,家兔為80-150ml,狗為200-500ml。(八)其它途徑給藥1呼吸道給藥呈粉塵、氣體及蒸氣或霧等癥狀存在藥物或毒氣,均需要通過動(dòng)物呼吸道給藥。如一般實(shí)驗(yàn)時(shí)給動(dòng)物乙醚作吸入麻醉,給動(dòng)物吸一定量的氨氣、二氧化碳等觀察呼吸、循環(huán)等變化;給動(dòng)物定期
10、吸入一定量的SO2。鋸末煙霧等可造成慢性氣管炎動(dòng)物模型等;特別在毒物學(xué)實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用更為廣泛。2皮膚給藥為了鑒定藥物或毒物經(jīng)皮膚的吸收作用、局部作用、致敏作用和光感作用等,均需采用經(jīng)皮膚給藥方法。如家兔和豚鼠常采用背部一定面積的皮膚脫毛后,將一定藥液涂在皮膚上,藥液經(jīng)皮膚吸收。3脊髓腔內(nèi)給藥此法主要用于椎管麻醉或抽取腦脊液。家兔椎管內(nèi)注射方法:將家兔作自然俯臥式,盡量使其尾向腹側(cè)屈曲,用粗剪將第七腰椎周圍背毛剪去,用3%碘酊消毒,干后再用79%酒精將碘酒擦去。在兔背部髕骨脊連線之中點(diǎn)稍下方摸動(dòng)第七腰椎間隙(第七腰椎與第一骶骨椎之間),插入腰椎穿刺針頭。當(dāng)針到達(dá)椎管內(nèi)時(shí)(珠網(wǎng)膜下腔),可見到兔的后肢
11、跳動(dòng),即證明穿刺針頭已進(jìn)入椎管。這時(shí)不要再向下刺,以兔損傷脊髓。固定好針頭,即可將藥物注入。4小腦延髓池給藥此種給藥都是在動(dòng)物麻醉情況下進(jìn)行的。而且常采用大動(dòng)物如狗等,小動(dòng)物很少采用。將狗麻醉后,使狗頭盡量向胸部屈曲,用左手摸到其第一頸椎上方的凹陷(枕骨大孔),固定位置,右手取7號(hào)鈍針頭(將針頭尖端麻鈍),由此凹陷的正中線上,順平行狗的方向,小心地刺入小腦延髓池。當(dāng)針頭正確刺入小腦延髓池時(shí),注射者會(huì)感到針頭再向前穿時(shí)無阻力,同時(shí)可以聽到很輕的“咔嚓”一聲,即表示針頭已穿過硬腦膜進(jìn)入小腦延髓池,而且可抽出清亮的腦脊液,注射藥物前,先抽出一些腦脊液,抽取量根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要注入多少藥液決定,即注入多少抽
12、取多少,以保持原來腦脊髓腔里的壓力(圖9)。圖9狗小腦延髓池給藥 5腦內(nèi)給藥此法常用于微生物學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),將病原體等接種于被檢動(dòng)物腦內(nèi),然后觀察接種后的各種變化。小鼠腦內(nèi)給藥時(shí),選套有塑料管、針尖露出2mm深的5(1/2)針頭,由鼠正中額部刺入腦內(nèi),注入藥物或接種物。給豚鼠、兔、狗等進(jìn)行腦內(nèi)注射時(shí),須先用穿顱鋼針穿透顱骨,再用注射器針頭刺入腦部,再徐徐注入被檢物。注射速度一定要慢,避免引起顱內(nèi)壓急驟升高。6直腸內(nèi)給藥此種給藥方法常用于動(dòng)物麻醉。家兔直腸內(nèi)給藥時(shí),取灌腸用的膠皮管或用14號(hào)導(dǎo)尿管代替。在膠皮管或?qū)蚬茴^上涂上凡士林,由助手使兔蹲臥于桌上,以左臂及左腋輕輕按住兔頭及前肢,以左手拉住兔
13、尾,露出肛門,并用右手輕握后肢,實(shí)驗(yàn)者將橡皮管插入家兔肛門內(nèi),濃度約79cm,如為雌性動(dòng)物,注意勿誤插入陰道(肛門緊接尾根)。橡皮管插好后,將注射器與橡皮管套緊,即可灌注藥液。7關(guān)節(jié)腔內(nèi)給藥此種方法常用于關(guān)節(jié)炎的動(dòng)物模型復(fù)制。兔給藥時(shí),將兔仰臥固定于兔固定臺(tái)上,剪去關(guān)節(jié)部被毛,用碘酒或酒精消毒,然后用手從下方和兩旁將關(guān)節(jié)固定,把皮膚稍移向一側(cè),在臏韌帶附著點(diǎn)處上方約0.5厘米處進(jìn)針。針頭從上前方向下后方傾斜刺進(jìn),直至針頭遇阻力變小,然后針頭稍后退,以垂直方向推到關(guān)節(jié)腔中。針頭進(jìn)入關(guān)節(jié)腔時(shí),通常可有好象刺破薄膜的感覺,表示針頭已進(jìn)入膝關(guān)節(jié)腔內(nèi),即可注入藥液。動(dòng)物最大給藥量可參考表2。表2常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的最大給藥量和使用針頭規(guī)格動(dòng)物名稱項(xiàng)目灌胃皮下注射肌肉注射腹腔注射靜脈注射小白鼠最大給藥量 使用針頭1ml 9(鈍頭)0.4ml 5(1/2)0.4ml 5(1/2)1ml 5(1/2)0.8ml
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