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文檔簡介
1、課題1 菊花的組織培養(yǎng)1在人工培養(yǎng)基上,離體培養(yǎng)植物的器官、組織、細胞和原生質體,并使其生長、增殖、分化以及再生植株的技術。 組織培養(yǎng)1.植物組織培養(yǎng)的原理是什么?植物細胞具有全能性,即生物體的細胞,具有使后代細胞形成完整個體的能力。思考:2離體的植物器官、組織、細胞(外植體)脫分化愈傷組織再分化根芽植物體2.植物組織培養(yǎng)過程33.植物組織培養(yǎng)條件離體狀態(tài)含有全部營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基(包括植物激素)一定的溫度、空氣、無菌環(huán)境、適合的PH、適時光照等 不同的植物組織,培養(yǎng)的難易程度差別很大.菊花的組培,一般選擇未開花植株的莖上部新萌生的側枝.44.實驗操作(視頻) (一)制備MS固體培養(yǎng)基 (二)外
2、植體消毒 (三)接種 (四)培養(yǎng) (五)移栽 (六)栽培51.下圖是植物組織培養(yǎng)的簡略表示。據(jù)此回答:(1)表示_,它能被培養(yǎng)成為的根本原因是_。(2)表示_,它與相比分化程度_,全能性_。答案:(1)離體的植物組織或器官 植物細胞具有全能性 (2)愈傷組織 低 高 脫分化再分化62.你能說出MS培養(yǎng)基中各種營養(yǎng)物質的作用嗎?同專題2中微生物培養(yǎng)基的配方相比,MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同? 提示:微量元素和大量元素提供植物細胞生活所必需的無機鹽;蔗糖提供碳源,同時能夠維持細胞的滲透壓;甘氨酸、維生素等物質主要是為了滿足離體植物細胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求。微生物培養(yǎng)
3、基以有機營養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同,MS培養(yǎng)基則需提供大量無機營養(yǎng),無機鹽混合物包括植物生長必須的大量元素和微量元素兩大類。73基因型為AaBb的水稻(24條染色體)的花藥通過無菌操作,接入試管后,在一定條件下培養(yǎng)形成試管苗。(1)愈傷組織是花粉細胞不斷分裂后形成的不規(guī)則的細胞團,愈傷組織形成中,必須從培養(yǎng)基中獲得 和小分子有機物等營養(yǎng)物質。(2)要促進花粉細胞分裂生長,培養(yǎng)基中應有 和 兩種激素。(3)愈傷組織分化是指愈傷組織形成芽和根,再由芽發(fā)育成葉和莖。這一過程必須給予光照,其原因是 。(4)試管苗的細胞核中含有 條脫氧核苷酸鏈。(5)培育成的試管苗可能出現(xiàn)的基因型有 。答案:(1)水
4、、無機鹽 (2)細胞分裂素 生長素 (3)葉綠素的形成需要光 試管苗的生長發(fā)育所需營養(yǎng)來自葉綠體利用光能制造的有機物(4)24 (5)AB、Ab、Ab、ab89(一)被子植物的花粉發(fā)育雄蕊:花絲花藥:囊狀結構,內有很多花粉?;ǚ凼切℃咦幽讣毎?jīng)過減數(shù)分裂而形成的,因此,花粉是單倍體的生殖細胞?;ǚ鄣陌l(fā)育要經(jīng)歷:四分體時期、單核期、雙核期10114個小孢子減數(shù)分裂有絲分裂4個花粉管細胞核4個生殖細胞核有絲分裂8個精子1花粉母細胞花粉的發(fā)育12(二)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑原因是什么?花藥中的花粉花藥中的花粉胚狀體愈傷組織叢芽叢芽生根移栽花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑這兩種途徑的區(qū)別主要取決于培養(yǎng)基
5、中 激素 的種類及其 濃度 的配比。13(三)影響花藥培養(yǎng)的因素1、材料的選擇不同植物同一植物的不同生理狀況(花期早期初花期)合適的花粉發(fā)育期(單核居中期與靠邊期之間)此外,植株生長條件、材料低溫預處理、接種密度等.2、培養(yǎng)基的組成14(四)實驗操作(視頻)1.材料的選取染色鏡檢2.材料的消毒酒精、氯化汞、次氯酸鈣3.接種和培養(yǎng)(五)結果分析與評價15植物組織培養(yǎng)技術與花藥培養(yǎng)技術的異同點離體的植物組織經(jīng)脫分化形成愈傷組織,再分化成叢芽,誘導出根,然后進行移栽。外植體為體細胞,染色體數(shù)無需加倍。取材為花藥,培養(yǎng)的為單倍體幼苗,植株弱小,高度不育,必須用秋水仙素處理,使染色體數(shù)目加倍,恢復正常植
6、株的染色體數(shù),而且為純種。16材料的選擇: 花期早期時的花藥比后期的更容易產(chǎn)生花粉植株。一般,月季的花藥培養(yǎng)時間選在五月初到五月中旬,即月季的初花期。 選擇合適的花粉發(fā)育時期也是提高誘導成功率的重要因素。一般來說,在單核期,細胞核由中央移向細胞一側的時期,花藥培養(yǎng)成功率最高。 為了挑選到單核期的花藥,通常選擇完全未開放的花蕾。17(一)材料的選取 選擇花藥時,一般通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。 最常用的方法有醋酸洋紅法。但是,某些植物的花粉細胞核不易著色,需采用焙花青-鉻礬法,這種方法能將花粉細胞核染成藍黑色。18. 現(xiàn)有甲、乙兩個煙草品種(2N=48),其基因型分別為aaBB
7、和Aabb,這兩對基因位于非同源染色體上,且在光照強度大于800勒克斯時,都不能生長,這是由于它們中的一對隱性純合基因(aa或bb)作用的結果。取甲乙兩品種的花粉分別培養(yǎng)成植株,將它們的葉肉細胞制成原生質體,并將二者相混,使之融合,誘導產(chǎn)生細胞團。然后,放到大于800勒克斯光照下培養(yǎng),結果有的細胞團不能分化,有的能分化發(fā)育成植株。請回答下列問題:(1)甲、乙兩煙草品種的花粉的基因型分別為 和 。(2)將葉肉細胞制成原生質體時,使用 破除細胞壁。(3)在細胞融合技術中,常用的促融劑是 。(4)細胞融合后誘導產(chǎn)生的細胞團叫 。(5)在大于800勒克斯光照下培養(yǎng),有 種細胞團不能分化;能分化的細胞團
8、是由 的原生質體融合來的(只考慮2個原生質體的相互融合)。由該細胞團分化發(fā)育成的植株,其染色體數(shù)是 ,基因型是 。該植株自交后代中,在大于800勒克斯光照下,出現(xiàn)不能生長的植株的概率是 。答案:(1) aB Ab (2)纖維素酶 (3)聚乙二醇 (4)愈傷組織(5)2 甲、乙兩煙草品種的花粉 48 AaBb 7/1619專題知識歸納原理:細胞的全能性概念:基礎:條件:植物組織培養(yǎng)的基本過程:外植體愈傷組織胚狀體幼苗脫分化再分化影響植物組織培養(yǎng)的因素:外植體的選擇營養(yǎng)、環(huán)境等植物激素的用法溫度、pH、光照等實驗操作:制備MS培養(yǎng)基外植體消毒培養(yǎng)接種移栽栽培植物組織培養(yǎng)菊花的組織培養(yǎng)月季的花藥培養(yǎng)被子植物花粉的發(fā)育:花粉母細胞減數(shù)分裂小孢子母細胞四分體時期單核期雙核期精子產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑:花藥中的花粉花藥中的花粉胚狀體 叢芽叢芽愈傷組織 誘導生根
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