《儀器法血細(xì)胞檢查》教學(xué)課件PPT

1、儀器法血細(xì)胞檢查授課內(nèi)容概述儀器法測(cè)定原理方法學(xué)評(píng)價(jià)分析儀應(yīng)用進(jìn)展先進(jìn)技術(shù)預(yù)覽概 述1.手工法： 原理簡(jiǎn)單、方便實(shí)用，但是比較費(fèi)時(shí)費(fèi)力、影響因素較多。2.儀器法： 靈敏度高、技術(shù) 先進(jìn)、信息含量大、容易標(biāo)準(zhǔn)化，規(guī)范化。 1)電阻式 2)光學(xué)式 3)離心式 儀器法測(cè)定原理 電阻式儀器法測(cè)定原理及臨床意義 光學(xué)式儀器法測(cè)定原理 離心式儀器法測(cè)定原理電阻式儀器法測(cè)定原理及意義一白細(xì)胞分析原理二紅細(xì)胞分析原理三血小板分析原理四分析儀檢測(cè)參數(shù)及臨床意義 （一）細(xì)胞直方圖的應(yīng)用 （二）RDW的臨床意義 （三）血小板參數(shù)的臨床意義1電阻抗法血細(xì)胞分析儀基本結(jié)構(gòu)示意圖2W.H.Coulter原理: 根據(jù)血細(xì)胞

2、非傳導(dǎo)的性質(zhì),以電解質(zhì)溶液中懸浮的白細(xì)胞，在通過計(jì)數(shù)小孔時(shí)引起的電阻變化，而進(jìn)行血細(xì)胞的計(jì)數(shù)和體積測(cè)定。3根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目的不同設(shè)定小孔直徑的不同。4根據(jù)細(xì)胞大小的不同，所形成的脈沖信號(hào)強(qiáng)弱不同。 白細(xì)胞體積的大小經(jīng)過溶血?jiǎng)┑奶幚砗?，形成大小不等的顆粒。小細(xì)胞區(qū)主要是淋巴細(xì)胞；中間細(xì)胞區(qū)主要是M、E、B等；大細(xì)胞區(qū)主要是中性粒細(xì)胞。WBC Analyzer5血細(xì)胞的脈沖信號(hào)經(jīng)過放大、甄別、整形后，送入計(jì)數(shù)系統(tǒng)，得出計(jì)數(shù)結(jié)果。（細(xì)胞分布直方圖）圖1-2 白細(xì)胞體積分布直方圖小細(xì)胞中間細(xì)胞大細(xì)胞flRELNOR1R2R3R4WBC1紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）和紅細(xì)胞比積（Hct） 1）RBC原理（脈沖數(shù)的多

3、少） 2）Hct/PCV原理（脈沖的高度與疊加） 3）白細(xì)胞數(shù)的干擾 4）紅細(xì)胞體積分布直方圖2血紅蛋白（Hb）含量測(cè)定 1）原理： 血液稀釋劑溶血?jiǎng)?Hb溶血?jiǎng)┭t蛋白衍生物（HiCN,SLS-Hb） Hb檢測(cè)系統(tǒng) 2）溶血?jiǎng)┡浞讲煌纬傻腍b衍生物也不同 3）ICSH推薦HiCN法為儀器校正的標(biāo)準(zhǔn)方法 4）HiCN最大吸收在540nm，含毒性。100 200 flRBCRBC溶解RBC Analyzer3各項(xiàng)紅細(xì)胞指數(shù)檢測(cè)原理 1）MCV,MCH,MCHC計(jì)算原理同手工法 2）RDW(紅細(xì)胞體積分布寬度） RDW反映外周血液紅細(xì)胞體積異質(zhì)性的參數(shù)，或是反映外周血紅細(xì)胞體積大小不等的客觀指

4、標(biāo)。 3）RDW的表示方法 RDW-CV RDW-SDL1L2X軸上的68.28%(可信區(qū)間)RDW-CV100%20%RDW-SD1與RBC共一系統(tǒng)，不同的域值（230fl）為PLT 1）脈沖多少PLT 2）脈沖大小MPV2 專門設(shè)置：鞘流技術(shù)、浮動(dòng)界標(biāo)、擬合曲線等血 小板 準(zhǔn)確性技術(shù)。102030flPLTPLT Analyzer（一）細(xì)胞直方圖的應(yīng)用 1WBC直方圖/及“分類”計(jì)數(shù) 1）初步估計(jì)細(xì)胞群體的變化 2）技術(shù)因素或病理變化100 200 300 400 flfl100 200 300 400 2RBC體積直方圖 要注意觀察圖形峰的位置、峰底的寬度、峰頂?shù)男螤罴坝袩o雙峰現(xiàn)象。 1

5、）缺鐵性貧血 2）輕型Hb合成障礙 3）鐵粒幼細(xì)胞性貧血 4）葉酸缺乏的巨幼細(xì)胞性貧血 5）其他100200fl3血小板直方圖 當(dāng)血小板計(jì)數(shù)和血小板體積直方圖呈現(xiàn)異?，F(xiàn)象時(shí)，均應(yīng)檢查血液是否有血小板凝聚和微小血塊，必要時(shí)作血涂片檢查，觀察是否有小紅細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片或大血小板增多現(xiàn)象。10 20 30 fl（二）RDW的臨床意義 1鑒別缺鐵性貧血和-珠蛋白生成障礙性貧血 1）共同點(diǎn)：小細(xì)胞性貧 血，峰左移。 2）鑒別點(diǎn)： aRDW增高，峰底寬 bRDW正常，峰底窄 2診斷缺鐵性貧血 為小細(xì)胞低色素性貧血，伴有RDW異常增高者（RDW正?？膳懦?3進(jìn)行貧血的新的形態(tài)學(xué)分類（MCV/RDW）a大細(xì)

6、胞不均一性正細(xì)胞不均一性小細(xì)胞不均一性異常大細(xì)胞均一性正細(xì)胞均一性小細(xì)胞均一性正常RDW增 高正 常減 低MCVbNfl100 200 1PLT 正常參考范圍（100300）109 /L 2MPV的變化： 1）鑒別血小板減少 PLT而MPV：Pt破壞增多（如DIC、ITP等） PLT而MPV：M增生不良、AIDS、M纖維化、 再障、M瘤、白血病化療、敗血癥等 2）鑒別血小板增高 PLT而MPV：反應(yīng)性Pt增多癥，失血等。 PLT而MPV正常：M增生性疾病，如PLT增多癥。 3）其他 PLT正常而MPV ：慢性M性白血病、脾切等 因MPV先于PLT變化，MPV可用于觀察病情變化， 如MPV 表示

7、BM恢復(fù)，局部炎癥MPV正常，敗血癥MPV 升高。 對(duì)于出血傾向評(píng)估：MPV與出血傾向呈負(fù)相關(guān)。（三）血小板參數(shù)的臨床意義光學(xué)式儀器法測(cè)定原理 根據(jù)每個(gè)細(xì)胞所產(chǎn)生的散射角度判斷細(xì)胞的體積和形態(tài)特征進(jìn)行白細(xì)胞分類。一原理示意圖：二原理： 1又稱光散射式計(jì)數(shù)法。由細(xì)胞懸液中的血細(xì)胞通過流通檢測(cè)器阻斷一次光束，細(xì)胞不斷阻斷光束使檢測(cè)器在單位時(shí)間內(nèi)檢出光束阻斷的次數(shù)，從而計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。離心式儀器法測(cè)定原理一原理： （干式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀）血液AC熒光染色劑 離心 紅細(xì)胞、粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、血小板、血漿二細(xì)胞著色的特點(diǎn) 1紅細(xì)胞不著色，為暗紅色。2粒細(xì)胞呈桔黃色。3淋巴細(xì)胞呈綠色。4血小板呈淡黃色。5血漿為透

8、明的淺黃色。 細(xì)胞著色方法學(xué)評(píng)價(jià)一WBC計(jì)數(shù)及分類計(jì)數(shù) 1手工法：用顯微鏡目視計(jì)數(shù)是基礎(chǔ)方法，但是存在固有誤差（計(jì)數(shù)板、吸管等系統(tǒng)誤差）、技術(shù)誤差（重復(fù)性、準(zhǔn)確性相對(duì)較差）。 2儀器法：可標(biāo)準(zhǔn)化，便于質(zhì)控。精密度、準(zhǔn)確性較高（需經(jīng)嚴(yán)格校正后）二儀器法分類計(jì)數(shù)為大致的分群不是真正的分類，不能完全代替手工法 1人員培訓(xùn) 1）儀器原理、操作規(guī)程、注意事項(xiàng)、異常報(bào)警的含義。 2）運(yùn)用質(zhì)控圖的變化進(jìn)行儀器的調(diào)試。 2儀器的鑒定 包括總變異、攜帶污染率、線性范圍、可比性和準(zhǔn)確性。 3儀器的校正：隨機(jī)的標(biāo)準(zhǔn)品、或者嚴(yán)格的手工法。 4標(biāo)本的采集和運(yùn)送 1）要求用抗凝的靜脈血 2）抗凝血在室溫下，WBC、RBC

9、、PLT可以穩(wěn)定24h，血小板不適合在低溫下保存。 5注意分析中的幾個(gè)問題 1）最適宜溫度為1822 2）溶血?jiǎng)┯昧考叭苎獣r(shí)間 3）儀器的半堵孔現(xiàn)象 6分析后的注意事項(xiàng)三儀器法的應(yīng)用必須全面實(shí)行質(zhì)量管理分析儀應(yīng)用進(jìn)展一儀器測(cè)試原理的改進(jìn)。 1容量、電導(dǎo)、光散射白細(xì)胞分類法 2阻抗與射頻技術(shù)聯(lián)合的白細(xì)胞分類法 3光散射與細(xì)胞化學(xué)技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用于白細(xì)胞分類法 4多角度偏振光散射白細(xì)胞分類技術(shù)二儀器自動(dòng)化水平的提高。三各種特殊技術(shù)的應(yīng)用。先進(jìn)技術(shù)預(yù)覽圖1半自動(dòng)分析儀 這是一個(gè)容易操作的系統(tǒng)。接通電源后，儀器處于正常的操作待機(jī)狀態(tài)時(shí)，只要把20l 血液樣品在機(jī)外稀釋，混勻后放在樣品架上，按下計(jì)數(shù)鍵它就可以對(duì)15種血液指標(biāo)和3個(gè)細(xì)胞直方圖進(jìn)行一次分析。測(cè)定完成后結(jié)果會(huì)立即在LCD上顯示并將結(jié)果打印出來。圖2全自動(dòng)分析儀 這是一臺(tái)用于臨床實(shí)驗(yàn)室體外診斷的全自動(dòng)血液分析儀，能為血液異常病人提供準(zhǔn)確的篩選結(jié)果，并提示其需作進(jìn)一步檢查。能每小時(shí)分析80份樣品，打印出18份參數(shù)和3種細(xì)胞分布曲線圖。操作簡(jiǎn)便，快速。圖3CD-3500 血球計(jì)數(shù)分析儀30個(gè)參數(shù)，10項(xiàng)白細(xì)胞分類，7個(gè)分布圖，7個(gè)散射表示圖可以做網(wǎng)織紅細(xì)胞分析，以及