海南霉素補(bǔ)料工藝的探討3100字_第1頁(yè)
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1、海南霉素補(bǔ)料工藝的討論3100字 摘要:通過(guò)對(duì)海南霉素發(fā)酵代謝在線(xiàn)實(shí)時(shí)曲線(xiàn), 以及發(fā)酵過(guò)程中總糖、復(fù)原糖、氨基氮、pH、菌濃、菌絲形態(tài)、發(fā)酵單位等理化指標(biāo)的分析研究,發(fā)現(xiàn)通過(guò)補(bǔ)料來(lái)補(bǔ)充碳源和氮源可以彌補(bǔ)發(fā)酵后期因碳氮比例失調(diào)而導(dǎo)致菌絲體斷裂、自溶、從而導(dǎo)致產(chǎn)物合成才能衰退。補(bǔ)料可以延長(zhǎng)到達(dá)發(fā)酵終點(diǎn)1的時(shí)間,到達(dá)增產(chǎn)增效的目的。 /關(guān)鍵詞:海南霉素、碳源、氮源、補(bǔ)料工藝 海南霉素是一種新型的聚醚類(lèi)抗生素,是從稠李鏈霉菌,8東方變種培養(yǎng)物中提取獲得的中國(guó)自主開(kāi)發(fā)的抗生素獸藥,它是一種新型的消化促進(jìn)劑,主要用來(lái)防治雞球蟲(chóng)病2和家畜的飼料添加劑,是迄今為止我國(guó)唯一批準(zhǔn)上市的屬一類(lèi)新藥的抗球蟲(chóng)藥3具有活

2、性高、無(wú)殘留、無(wú)抗性等特點(diǎn),其抗菌活性分別為鹽霉素、莫能菌素的10倍和20倍。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)增加補(bǔ)料工藝來(lái)控制碳氮比例平衡以到達(dá)進(jìn)步海南霉素發(fā)酵單位的目的。1 材料與方法:1.1 實(shí)驗(yàn)中所用FCD- F2- 0801008 菌種為實(shí)驗(yàn)室自技術(shù)轉(zhuǎn)讓方提供的砂土管保存菌種自然分純、傳代得到的F2 代斜面, 搖瓶發(fā)酵單位3500ug/ mL。1.2 分別采用50L和250L 種子罐作為一二級(jí)種子罐,種子罐配方為:玉米淀粉1.5%,葡萄糖:1.0%,黃豆餅粉:1.0%,硫酸鎂:0.05%,磷酸氫二鉀0.05%,氯化鈉:0.5%。1.2.1 種子罐工藝一級(jí)種子: 28. 5,通風(fēng)比1:0.8, ,150 轉(zhuǎn)

3、/ 分,周期25-27小時(shí)二級(jí)種子: 28. 5,通風(fēng)比1:1, ,200 轉(zhuǎn)/ 分,周期18-20小時(shí)1.2.2 發(fā)酵采用6.0m3罐,按3.5 m3計(jì)料,消后3.0 m3,發(fā)酵罐配方為:?玉米淀粉:8.0%,葡萄糖:1.0%,黃豆餅粉:1.0%,蛋白胨:0.5%,硫酸鎂:0.05%,磷酸氫二鉀0.05%,氯化鈉:0.5%,酵母粉:0.5%,淀粉酶:0.02%。 作文 / 1.2.3 發(fā)酵工藝溫度: 28 ; 罐壓: 0.05MPa ;通風(fēng)比:1:1;溶解氧: 30- 60%;2、補(bǔ)料采用流加的方式,總補(bǔ)料量為發(fā)酵總體積的15%,補(bǔ)料時(shí)間通過(guò)不同時(shí)間的理化指標(biāo)及效價(jià)結(jié)果確定。2.1.1補(bǔ)料配

4、方:玉米淀粉:1.5%,a-淀粉酶:0.2%,黃豆餅粉:0.5%,泡敵:0.2%。2.1.2 原材料的滅菌采用200L罐,按30%比例先將玉米淀粉、黃豆餅粉、泡敵投入罐內(nèi),回調(diào)p至7.5左右,通蒸汽加熱至50時(shí)參加淀粉酶,升溫至80恒溫糊化15 min,然后升溫至120-121,消毒30min,降溫至28-30.從非補(bǔ)料工藝的理化指標(biāo)分析來(lái)看,024小時(shí)為菌體生長(zhǎng)階段,其代謝變化為碳源和氮源等進(jìn)展分解代謝,菌體進(jìn)展合成代謝,從而使新菌體不斷被合成,菌濃明顯增加,菌體生長(zhǎng)恒定后生長(zhǎng)階段完畢,24小時(shí)之后菌體由菌絲生長(zhǎng)轉(zhuǎn)為次級(jí)代謝,代謝產(chǎn)物為海南霉素。海南霉素發(fā)酵過(guò)程中, 初級(jí)代謝利用葡萄糖時(shí)間較

5、長(zhǎng), 造成前期菌體生長(zhǎng)過(guò)盛; 而轉(zhuǎn)入次級(jí)代謝后,碳氮比例偏小, 導(dǎo)致碳源物質(zhì)缺乏, 因碳氮比例逐步減小,引起菌體過(guò)早衰老, 發(fā)酵單位增幅緩慢, 后勁缺乏,最終放罐效價(jià)偏低。當(dāng)總糖和復(fù)原糖比值約為1時(shí),根本到達(dá)發(fā)酵終點(diǎn),出現(xiàn)氨基氮上升,p反彈,鏡檢發(fā)現(xiàn)菌絲有自溶現(xiàn)象5,視野里散落菌絲增多,終點(diǎn)總糖和復(fù)原糖明顯低于工藝要求,影響產(chǎn)素4才能,周期延 長(zhǎng)20小時(shí)生化檢測(cè)效價(jià)降低7。4、補(bǔ)料實(shí)驗(yàn)方案:分別將補(bǔ)料開(kāi)場(chǎng)時(shí)間設(shè)定為48hr、60hr,補(bǔ)料截止時(shí)間均為90hr,跟蹤各個(gè)實(shí)驗(yàn)的代謝過(guò)程。 48hr 開(kāi)場(chǎng)補(bǔ)料的發(fā)酵不同時(shí)間點(diǎn)的參數(shù)變化時(shí)間h 0,24,48,72,96,120,140,總糖g/100

6、ml 8.80,7.35,6.88,4.53,3.42,3.00,2.35氨基氮mg/100ml25.6,20.38,18.28,19.96,20.35,20.90,25.78 菌濃% 9,24,30,34,34,35,35p 7.08,7.02,6.89,6.83,6.85,7.16,7.60效價(jià)ug/ml - , - , 790,2800,3550,4388,480048hr開(kāi)場(chǎng)補(bǔ)料的代謝特點(diǎn):總糖和復(fù)原糖的量一直比擬穩(wěn)定,補(bǔ)料量根本與糖耗速度相符,發(fā)酵過(guò)程碳氮比例適中,發(fā)酵終點(diǎn)特征明顯,p細(xì)微反彈,氨氮略有上升,鏡檢未見(jiàn)大量散落菌絲,菌絲空胞增多,效價(jià)漲幅較好。 60hr 開(kāi)場(chǎng)補(bǔ)料的發(fā)酵

7、不同時(shí)間點(diǎn)的參數(shù)變化 時(shí)間h 0,24,48,60,96,120,140 總糖g/100ml 9.00,7.56,6.60,5.70,4.20,3.20,2.16氨基氮(mg/100ml 26.10,21.18,18.20,19.20,18.30,24.50,28.70菌濃% 10,24,30,32,34,33,35p 7.13,6.80,6.87,6.80,6.70,7.56,7.90效價(jià)ug/ml - , - ,850 ,1400,3700,4200,4440hr 補(bǔ)料的代謝特征:前期菌濃生長(zhǎng)緩慢,菌體生長(zhǎng)期延長(zhǎng),補(bǔ)料后總糖偏高,碳氮比例發(fā)生變化,終點(diǎn)特征明顯,菌絲體出現(xiàn)細(xì)微自溶現(xiàn)象,后期

8、效價(jià)漲幅放緩。綜上實(shí)驗(yàn)分析:微生物所處的環(huán)境在發(fā)酵過(guò)程中不斷的變化,其物理、化學(xué)和生物參數(shù)都隨時(shí)間而變化,是個(gè)動(dòng)態(tài)的過(guò)程。在產(chǎn)物合成階段,菌體物質(zhì)的物質(zhì)合成仍未停頓,菌體重量有所增加但根本不繁殖。這個(gè)階段的代謝變化是利用碳源和氮源來(lái)合成產(chǎn)物,基質(zhì)濃度的變化很容易影響這個(gè)階段的代謝,碳源和氮源的濃度必須控制在一個(gè)最正確的范圍內(nèi),才能促進(jìn)產(chǎn)物不斷的被合成。假如這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)過(guò)多,菌體就會(huì)進(jìn)展生長(zhǎng)代謝從而抑制產(chǎn)物合成。假如較少,菌體就會(huì)過(guò)早衰老從而合成才能下降。所以假如補(bǔ)料開(kāi)場(chǎng)時(shí)間過(guò)早發(fā)酵前期總糖和復(fù)原糖較高,菌濃生長(zhǎng)較為緩慢,生長(zhǎng)期就會(huì)延長(zhǎng),補(bǔ)料速度大于菌絲體的糖耗速度,總糖偏高,菌絲革蘭氏染色較重

9、,菌絲生長(zhǎng)較為旺盛,延緩產(chǎn)物合成。通過(guò)圖表可以看出48小時(shí)開(kāi)場(chǎng)補(bǔ)料使得發(fā)酵代謝發(fā)生了明顯的變化,在菌體生長(zhǎng)期完成后,補(bǔ)料使菌體酶體系處于最利于產(chǎn)物合成的狀態(tài)。雖然發(fā)酵周期延長(zhǎng)了20小時(shí),由于補(bǔ)充了碳源和氮源,總糖和復(fù)原糖并沒(méi)有發(fā)生太大的變化,最終碳氮比例沒(méi)有失調(diào)。鏡檢未見(jiàn)大量斷裂菌絲及菌絲體自溶現(xiàn)象,同時(shí)p反彈及氨氮上升也沒(méi)有正常工藝明顯。從發(fā)酵產(chǎn)物6積累上來(lái)看,非補(bǔ)料工藝和補(bǔ)料工藝小時(shí)效價(jià)根本相當(dāng),但采用流加補(bǔ)料在極少增加原料及動(dòng)力消耗的情況下效價(jià)到達(dá)了穩(wěn)步增長(zhǎng),效價(jià)20小時(shí)增長(zhǎng)了412ug/ml.進(jìn)步了9.1%,可見(jiàn)采用補(bǔ)料工藝均比正常工藝進(jìn)步了放罐效價(jià),到達(dá)了延長(zhǎng)周期進(jìn)步發(fā)酵程度的目的。 / 參考文獻(xiàn):1曲音波.微生物技術(shù)開(kāi)發(fā)原理.北京化學(xué)工業(yè)出版社,20222張延榮,宋玉芹,宋春陽(yáng),等.海南霉素在飼料中的毒性研究.萊陽(yáng)農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào),2022,21:18-193陳志萍,劉學(xué)武,等。復(fù)方海南霉素的藥效實(shí)驗(yàn)。中國(guó)獸醫(yī)寄生蟲(chóng)病,2002,10:494黃幸纖,陳星假設(shè).環(huán)境化學(xué)物致突變、致癌實(shí)驗(yàn)方法。浙江科技出版社,19855王菊凝。當(dāng)前對(duì)化學(xué)物的致癌性、誘變性挑選性短測(cè)的組合。國(guó)外醫(yī)學(xué)衛(wèi)生學(xué)分冊(cè),1990,1:1

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