海南霉素補(bǔ)料工藝的探討3100字

1、海南霉素補(bǔ)料工藝的討論3100字 摘要：通過(guò)對(duì)海南霉素發(fā)酵代謝在線(xiàn)實(shí)時(shí)曲線(xiàn), 以及發(fā)酵過(guò)程中總糖、復(fù)原糖、氨基氮、pH、菌濃、菌絲形態(tài)、發(fā)酵單位等理化指標(biāo)的分析研究，發(fā)現(xiàn)通過(guò)補(bǔ)料來(lái)補(bǔ)充碳源和氮源可以彌補(bǔ)發(fā)酵后期因碳氮比例失調(diào)而導(dǎo)致菌絲體斷裂、自溶、從而導(dǎo)致產(chǎn)物合成才能衰退。補(bǔ)料可以延長(zhǎng)到達(dá)發(fā)酵終點(diǎn)1的時(shí)間，到達(dá)增產(chǎn)增效的目的。 /關(guān)鍵詞：海南霉素、碳源、氮源、補(bǔ)料工藝 海南霉素是一種新型的聚醚類(lèi)抗生素，是從稠李鏈霉菌,8東方變種培養(yǎng)物中提取獲得的中國(guó)自主開(kāi)發(fā)的抗生素獸藥，它是一種新型的消化促進(jìn)劑，主要用來(lái)防治雞球蟲(chóng)病2和家畜的飼料添加劑，是迄今為止我國(guó)唯一批準(zhǔn)上市的屬一類(lèi)新藥的抗球蟲(chóng)藥3具有活

2、性高、無(wú)殘留、無(wú)抗性等特點(diǎn),其抗菌活性分別為鹽霉素、莫能菌素的10倍和20倍。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)增加補(bǔ)料工藝來(lái)控制碳氮比例平衡以到達(dá)進(jìn)步海南霉素發(fā)酵單位的目的。1 材料與方法：1.1 實(shí)驗(yàn)中所用FCD- F2- 0801008 菌種為實(shí)驗(yàn)室自技術(shù)轉(zhuǎn)讓方提供的砂土管保存菌種自然分純、傳代得到的F2 代斜面, 搖瓶發(fā)酵單位3500ug/ mL。1.2 分別采用50L和250L 種子罐作為一二級(jí)種子罐，種子罐配方為：玉米淀粉1.5%，葡萄糖：1.0%，黃豆餅粉：1.0%，硫酸鎂：0.05%，磷酸氫二鉀0.05%，氯化鈉：0.5%。1.2.1 種子罐工藝一級(jí)種子: 28. 5，通風(fēng)比1:0.8， ,150 轉(zhuǎn)

3、/ 分,周期25-27小時(shí)二級(jí)種子: 28. 5，通風(fēng)比1:1， ,200 轉(zhuǎn)/ 分,周期18-20小時(shí)1.2.2 發(fā)酵采用6.0m3罐，按3.5 m3計(jì)料，消后3.0 m3，發(fā)酵罐配方為：?玉米淀粉：8.0%，葡萄糖：1.0%，黃豆餅粉：1.0%，蛋白胨：0.5%，硫酸鎂：0.05%，磷酸氫二鉀0.05%，氯化鈉：0.5%，酵母粉：0.5%,淀粉酶：0.02%。 作文 / 1.2.3 發(fā)酵工藝溫度: 28 ; 罐壓: 0.05MPa ;通風(fēng)比：1：1；溶解氧: 30- 60%;2、補(bǔ)料采用流加的方式，總補(bǔ)料量為發(fā)酵總體積的15%，補(bǔ)料時(shí)間通過(guò)不同時(shí)間的理化指標(biāo)及效價(jià)結(jié)果確定。2.1.1補(bǔ)料配

4、方：玉米淀粉：1.5%，a-淀粉酶：0.2%，黃豆餅粉：0.5%，泡敵：0.2%。2.1.2 原材料的滅菌采用200L罐，按30%比例先將玉米淀粉、黃豆餅粉、泡敵投入罐內(nèi)，回調(diào)p至7.5左右，通蒸汽加熱至50時(shí)參加淀粉酶，升溫至80恒溫糊化15 min，然后升溫至120-121，消毒30min,降溫至28-30.從非補(bǔ)料工藝的理化指標(biāo)分析來(lái)看，024小時(shí)為菌體生長(zhǎng)階段，其代謝變化為碳源和氮源等進(jìn)展分解代謝，菌體進(jìn)展合成代謝，從而使新菌體不斷被合成，菌濃明顯增加，菌體生長(zhǎng)恒定后生長(zhǎng)階段完畢，24小時(shí)之后菌體由菌絲生長(zhǎng)轉(zhuǎn)為次級(jí)代謝，代謝產(chǎn)物為海南霉素。海南霉素發(fā)酵過(guò)程中, 初級(jí)代謝利用葡萄糖時(shí)間較

5、長(zhǎng), 造成前期菌體生長(zhǎng)過(guò)盛; 而轉(zhuǎn)入次級(jí)代謝后,碳氮比例偏小, 導(dǎo)致碳源物質(zhì)缺乏, 因碳氮比例逐步減小,引起菌體過(guò)早衰老， 發(fā)酵單位增幅緩慢, 后勁缺乏，最終放罐效價(jià)偏低。當(dāng)總糖和復(fù)原糖比值約為1時(shí)，根本到達(dá)發(fā)酵終點(diǎn)，出現(xiàn)氨基氮上升，p反彈，鏡檢發(fā)現(xiàn)菌絲有自溶現(xiàn)象5，視野里散落菌絲增多，終點(diǎn)總糖和復(fù)原糖明顯低于工藝要求，影響產(chǎn)素4才能，周期延 長(zhǎng)20小時(shí)生化檢測(cè)效價(jià)降低7。4、補(bǔ)料實(shí)驗(yàn)方案：分別將補(bǔ)料開(kāi)場(chǎng)時(shí)間設(shè)定為48hr、60hr，補(bǔ)料截止時(shí)間均為90hr,跟蹤各個(gè)實(shí)驗(yàn)的代謝過(guò)程。 48hr 開(kāi)場(chǎng)補(bǔ)料的發(fā)酵不同時(shí)間點(diǎn)的參數(shù)變化時(shí)間h 0,24,48,72,96,120,140,總糖g/100

6、ml 8.80，7.35，6.88，4.53，3.42，3.00，2.35氨基氮mg/100ml25.6，20.38，18.28，19.96，20.35，20.90，25.78 菌濃% 9，24，30，34，34，35，35p 7.08，7.02，6.89，6.83，6.85，7.16，7.60效價(jià)ug/ml - ， - ， 790，2800，3550，4388,480048hr開(kāi)場(chǎng)補(bǔ)料的代謝特點(diǎn)：總糖和復(fù)原糖的量一直比擬穩(wěn)定，補(bǔ)料量根本與糖耗速度相符，發(fā)酵過(guò)程碳氮比例適中，發(fā)酵終點(diǎn)特征明顯，p細(xì)微反彈，氨氮略有上升，鏡檢未見(jiàn)大量散落菌絲，菌絲空胞增多，效價(jià)漲幅較好。 60hr 開(kāi)場(chǎng)補(bǔ)料的發(fā)酵

7、不同時(shí)間點(diǎn)的參數(shù)變化 時(shí)間h 0,24,48,60,96,120,140 總糖g/100ml 9.00，7.56，6.60，5.70，4.20，3.20，2.16氨基氮(mg/100ml 26.10，21.18，18.20，19.20，18.30，24.50，28.70菌濃% 10，24，30，32，34，33，35p 7.13，6.80，6.87，6.80，6.70，7.56，7.90效價(jià)ug/ml - ， - ，850 ，1400，3700，4200，4440hr 補(bǔ)料的代謝特征：前期菌濃生長(zhǎng)緩慢，菌體生長(zhǎng)期延長(zhǎng)，補(bǔ)料后總糖偏高，碳氮比例發(fā)生變化，終點(diǎn)特征明顯，菌絲體出現(xiàn)細(xì)微自溶現(xiàn)象，后期

8、效價(jià)漲幅放緩。綜上實(shí)驗(yàn)分析：微生物所處的環(huán)境在發(fā)酵過(guò)程中不斷的變化，其物理、化學(xué)和生物參數(shù)都隨時(shí)間而變化，是個(gè)動(dòng)態(tài)的過(guò)程。在產(chǎn)物合成階段，菌體物質(zhì)的物質(zhì)合成仍未停頓，菌體重量有所增加但根本不繁殖。這個(gè)階段的代謝變化是利用碳源和氮源來(lái)合成產(chǎn)物，基質(zhì)濃度的變化很容易影響這個(gè)階段的代謝，碳源和氮源的濃度必須控制在一個(gè)最正確的范圍內(nèi)，才能促進(jìn)產(chǎn)物不斷的被合成。假如這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)過(guò)多，菌體就會(huì)進(jìn)展生長(zhǎng)代謝從而抑制產(chǎn)物合成。假如較少，菌體就會(huì)過(guò)早衰老從而合成才能下降。所以假如補(bǔ)料開(kāi)場(chǎng)時(shí)間過(guò)早發(fā)酵前期總糖和復(fù)原糖較高，菌濃生長(zhǎng)較為緩慢，生長(zhǎng)期就會(huì)延長(zhǎng)，補(bǔ)料速度大于菌絲體的糖耗速度，總糖偏高，菌絲革蘭氏染色較重

9、，菌絲生長(zhǎng)較為旺盛，延緩產(chǎn)物合成。通過(guò)圖表可以看出48小時(shí)開(kāi)場(chǎng)補(bǔ)料使得發(fā)酵代謝發(fā)生了明顯的變化,在菌體生長(zhǎng)期完成后，補(bǔ)料使菌體酶體系處于最利于產(chǎn)物合成的狀態(tài)。雖然發(fā)酵周期延長(zhǎng)了20小時(shí)，由于補(bǔ)充了碳源和氮源，總糖和復(fù)原糖并沒(méi)有發(fā)生太大的變化，最終碳氮比例沒(méi)有失調(diào)。鏡檢未見(jiàn)大量斷裂菌絲及菌絲體自溶現(xiàn)象，同時(shí)p反彈及氨氮上升也沒(méi)有正常工藝明顯。從發(fā)酵產(chǎn)物6積累上來(lái)看，非補(bǔ)料工藝和補(bǔ)料工藝小時(shí)效價(jià)根本相當(dāng)，但采用流加補(bǔ)料在極少增加原料及動(dòng)力消耗的情況下效價(jià)到達(dá)了穩(wěn)步增長(zhǎng)，效價(jià)20小時(shí)增長(zhǎng)了412ug/ml.進(jìn)步了9.1%，可見(jiàn)采用補(bǔ)料工藝均比正常工藝進(jìn)步了放罐效價(jià)，到達(dá)了延長(zhǎng)周期進(jìn)步發(fā)酵程度的目的。 / 參考文獻(xiàn)：1曲音波.微生物技術(shù)開(kāi)發(fā)原理.北京化學(xué)工業(yè)出版社，20222張延榮，宋玉芹，宋春陽(yáng)，等.海南霉素在飼料中的毒性研究.萊陽(yáng)農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2022,21:18-193陳志萍，劉學(xué)武，等。復(fù)方海南霉素的藥效實(shí)驗(yàn)。中國(guó)獸醫(yī)寄生蟲(chóng)病，2002,10:494黃幸纖，陳星假設(shè).環(huán)境化學(xué)物致突變、致癌實(shí)驗(yàn)方法。浙江科技出版社，19855王菊凝。當(dāng)前對(duì)化學(xué)物的致癌性、誘變性挑選性短測(cè)的組合。國(guó)外醫(yī)學(xué)衛(wèi)生學(xué)分冊(cè)，1990,1:1